取材方法不同对男性患者阴道毛滴虫检测结果的影响

阴道毛滴虫主要寄生于女性或男性的泌尿生殖道 ,是引起人体泌尿生殖道感染的常见病原体之一 ,一般女性阴道毛滴虫检测报道多于男性[1] 。本文采用 3种不同的标本采集方法对男性病人进行检测 ,结果报告如下。1　材料与方法1.1　临床资料　门诊男性不育症、前列腺炎及淋病患者 2 2 8例 ,年龄 2 3～ 4 8岁。临床表现一般无全身症状 ,少数有尿道刺激症状 ,排尿微痛或排尿不尽感 ,个别有尿道口分泌物。1.2　取材和方法　将 2 2 8例病人随机分为 3组 ,分别用 1、2、3方法检测。方法 1:病人排尿后 ,取胸膝卧位 ,按常规方法行前列腺按摩 ,收集按摩出…     

致白内障基因Hsf4b K65R位点突变对下游热休克蛋白表达的影响

目的:探讨致白内障基因热休克因子4b(Hsf4b)K65R位点突变对其调控下游热休克蛋白(HSP)表达的影响。方法:采用KOD-Plus-Mutagenesis-Kit试剂盒构建pWZL-blast-HA-Hsf4b/K65R赖氨酸突变质粒;通过慢病毒感染小鼠晶状体上皮细胞mLEC构建稳定表达Hsf4b/K65R突变质粒的细胞株;Western blotting检测Hsf4b在mLEC K65R点突变细胞株和野生株中的表达;Western blotting及real-time PCR检测K65R点突变后下游蛋白Hsp70、Hsp90、Hsp27和CryAB表达的变化。结果:阳性克隆PCR及基因测序证明慢病毒载体pWZL-blast-HAHsf4b/K65R构建成功。K65R点突变后不影响Hsf4b在小鼠晶状体上皮细胞mLEC中的表达,但能影响下游蛋白CryAB、Hsp27、Hsp70i和Hsp90a的表达。结论:pWZL-blast-HA-Hsf4b/K65R载体可用于慢病毒感染稳定细胞株构建。Hsf4b K65R位点突变能显著影响其对热休克蛋白的调控功能。     

固相配体文库降低血清高低丰度蛋白浓度差异

目的 探讨固相配体文库技术富集血清低丰度蛋白及提高质谱鉴定低丰度蛋白敏感性.方法 3组混合血清标本采用蛋白富集珠(ProteoMiner)处理,一维或二维电泳图谱分析比较处理前后血清图谱中的差异条带或蛋白质斑点,并于处理后血清的二维电泳图谱中显著增加的蛋白质斑点进行高效液相色谱法电喷雾串联质谱鉴定.结果 一维及二维电...     

人骨髓间充质干细胞源性多巴胺神经元的结构和功能特征

背景：研究人骨髓间充质干细胞定向分化为多巴胺神经元及分化后细胞的功能特征，对细胞移植治疗包括帕金森病在内的神经精神性疾病具有重要临床意义。 目的：采用脑源性神经营养因子、forskolin及多巴胺联合诱导人骨髓间充质干细胞向多巴胺神经元定向分化，观察诱导产生的多巴胺神经元的结构和功能。 设计：随机对照观察。 单位：郑州大学及河南大学。 材料：实验于2005-03／2006-09在郑州大学和河南大学实验室完成。实验用骨髓取自15名健康志愿者。脑源性神经营养因子、多巴胺、forskolin及单克隆抗体酪氨酸羟化酶为美国Sigma公司产品。 方法：①通过密度梯度离心获取人骨髓中的单个核细胞，贴壁培养纯化骨髓间充质干细胞。采用50μmol／L脑源性神经营养因子，10μmol／L forskolin和10μmol／L多巴胺联合对骨髓间充质干细胞进行诱导。②诱导2周后应用电子显微镜观察细胞超微结构；免疫细胞化学染色检测神经元烯醇化酶（NSE）和酪氨酸羟化酶（TH）的表达；采用RT-PCR检测多巴胺神经元分化过程中转录因子Nurrl，Ptx3，Lmx1b及酪氨酸羟化酶mRNA表达；同时以未诱导的细胞为对照，应用高效液相色谱检测细胞多巴胺的释放水平。 主要观察指标：①细胞超微结构。②NSE和TH的表达变化。③细胞内关键转录因子及酪氨酸羟化酶mRNA变化。④细胞释放多巴胺情况。结果：①细胞超微结构：诱导2周后细胞胞浆中有大量密集的呈扁平囊状的粗面内质网及其间的一些游离核糖体以及神经微丝的形成。②NSE和TH表达的变化：免疫细胞化学染色结果表明诱导分化后NSE和TH阳性细胞的表达随诱导时间的延长逐渐增高（P〈0．001）。③细胞内酪氨酸羟化酶及关键转录因子变化：RT-PCR结果显示细胞均可表达Nurrl，Ptx3，Lmx1b和酪氨酸羟化酶的mRNA。④细胞释放多巴胺情况：诱导2周后的细胞多巴胺释放水平高于未经诱导的细胞，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：脑源性神经营养因子、forskolin及多巴胺可在体外诱导人骨髓间充质干细胞向多巴胺神经元分化，并具有多巴胺神经元的结构和功能特征。     

乙酰肝素酶信号肽对其活性功能的影响研究

目的:乙酰肝素酶在肿瘤转移过程中起关键作用,其信号肽在该酶翻译后处理过程中起重要作用.本研究旨在探索乙酰肝素酶在哺乳动物细胞中的表达特性及其信号肽对此酶功能活性的影响.方法:从人胎盘cDNA文库中扩增乙酰肝素酶全长编码基因,克隆入pGEM-T载体中,测序鉴定序列完全正确后,将此基因的全长和不含信号肽基因序列分别克隆入真核表达载体pcDNA4.1/Myc-His中构建pcDNA4.1/Myc-His full HPA和pcDNA4.1/Myc-His part HPA,转化COS-7细胞进行瞬时表达,分析这两种乙酰肝素酶蛋白的表达特性及功能活性.结果:在转染了乙酰肝素酶全基因的COS-7细胞裂解液中检测到该酶的功能活性及大小约53×103(Mr)的目的蛋白免疫印迹表达带,为切割激活后乙酰肝素酶羧基端大亚基与标签蛋白的融合体.在转染了敲除信号肽的乙酰肝素酶基因的COS-7细胞裂解液中测到未被切割激活的大小约65×103(Mr)的目的蛋白免疫印迹表达带,未能检测到该酶的功能活性.结论:在COS-7细胞中表达的完整的乙酰肝素酶蛋白和不含信号肽的乙酰肝素酶蛋白均位于细胞内,没有或很少被分泌到细胞外,提示该酶在正常状态下主要分布在细胞内.含信号肽的酶蛋白在翻译后处理过程中被细胞内的蛋白酶切割成2个亚基而被激活,具有功能活性.而不含信号肽的酶蛋白没有被切割而成为有活性的酶,提示乙酰肝素酶的信号肽对其翻译后加工、激活过程有重要的影响.     

解脲支原体感染引起的性功能障碍心理特点及治疗分析

解豚支原体引起的非淋菌性尿道炎是临床上常见的性传播疾病之一。我们通过临床观察发现，患者在解腺支原体转阴、非淋菌性尿道炎治愈后，多继发有不同程度。不同类型的性功能障碍，且具有不同的心理特点，通过心理和药物治疗，均取得一定的疗效，现报告如下：l材料与方法1．l临床资料来自开封医专男性病不育症专科门诊154例男性患者，年龄在25岁一54岁之间，平均35岁，以尿道口刺痛、痒、烧灼感及有粘性分泌物初诊，取尿道口分泌物进行解肥支原体培养鉴定，确诊为解豚支原体感染，经强力霉素、炎灵丸等抗解豚支原体治疗后，非林菌性尿道炎症…     

食管癌高发区严重污染主要产毒霉菌的诱变性研究

链格孢的诱变性检测:19菌株的粗提物在细菌回复突变试验和枯草杆菌DNA重组试验中阳性率分别为85.0％和84.2％,其中10株的SCE试验结果8株阳性,8株中2株同时发生染色体断裂。7个菌株的UDS和DSI试验结果6株阳性。在细胞诱变和转化试验中,D_(10)-a_2粗提粉末诱发了V_(79)细胞的突变和NIH/3T3细胞的转化。链格孢酊产毒素AME和AOH的细菌诱变试验和UDS,DSI试验结果与不同菌株粗提物的试验结果相似。 园弧青霉的诱变性检测:24株园弧青霉中4株用大米培养提取物的细菌诱变试验均阴性,但在SCE、UDS和DSI试验中均阳性。19株用Ranlin-Thom培养基培养,菌液和菌膜分别提取检测,菌液的细菌回复突变试验2株阳性,DNA重组试验13株阳性,菌膜的细菌回复突变试验15株阳性,DNA重组试验5株阳性。4株菌液与菌膜提取物的UDS与DSI试验结果与DNA重组试验结果完全一致。     

新型免疫抑制剂芬戈莫德的研究进展

芬戈莫德(fingolimod,FTY720)是冬虫夏草中提取的有效成分多球壳菌素(myriocin,ISP-1)通过结构改造而合成的一种新型免疫抑制剂。与传统的免疫抑制剂不同,它不影响淋巴细胞的活化和增殖,主要作用于细胞表面的鞘氨醇-1-磷酸受体(S1PR)来发挥免疫抑制和免疫调控作用。本文介绍FTY720对T、B淋巴细胞和天然免疫细胞(树突状细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞、自然杀伤性T细胞)的分布和细胞因子产生的影响,探讨FTY720对炎症的免疫抑制和免疫调控作用;对FTY720在自身免疫病、移植物抗宿主病和肿瘤治疗等方面的研究进展,FTY720的副作用及可能的解决方案做了简要总结。