褪黑素保护大鼠肝纤维化的机制初步研究

目的研究褪黑素保护大鼠肝纤维化的机制。方法用四氯化碳(CCl4)制造大鼠肝纤维化模型,同时予10mg/(kg.d)褪黑素腹腔注射;在造模的第3月末处死大鼠,用α-SMA单抗标记活化的肝脏星状细胞(HSC),并计算其数量,同时进行肝脏纤维化评分。结果褪黑素可以显著降低CCl4诱导大鼠肝脏纤维化评分,减少活化的HSC数量。结论褪黑素是通过抑制HSC的活化达到保护CCl4诱导的大鼠肝纤维化作用。     

N-乙酰半胱氨酸保护大鼠肝纤维化的机制初步研究

目的研究N-乙酰半胱氨酸保护大鼠肝纤维化的机制。方法用四氯化碳（CC!。）制造大鼠肝纤维化模型,同时予100mg·kg^-1·d^-1N-乙酰半胱氨酸腹腔注射。在造模的第3个月末处死大鼠,用α-SMA单抗标记活化的肝脏星状细胞,并计算其数量,同时进行肝脏纤维化评分。结果N-乙酰半胱氨酸可以显著减少活化的HSC数量,降低CCl4诱导大鼠肝脏纤维化评分。结论N-乙酰半胱氨酸是通过抑制HSC的活化达到保护CCl4诱导的大鼠肝纤维化作用。     

一贯煎对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织胶原代谢的影响

目的:探讨一贯煎对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝脏胶原代谢的影响.方法:腹腔注射CCl4 9周制备大鼠肝纤维化模型,于造模第3周、第6周末各处死6只大鼠作动态观察,自第7周起将模型大鼠随机分为模型对照组和干预组.干预组于继续造模的同时给予一贯煎灌胃3周,正常组与模型对照组大鼠给予同体积蒸馏水灌胃.第9周末处死全部大鼠,采集肝组织标本,检测肝组织组织金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhmitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)、-2,基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)、-14,α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA),I型胶原(collagen type I,Col I)等的蛋白表达以及MMP-2、-9的活性.结果:与正常大鼠比较,造模第3、6和9周时肝纤维化大鼠肝组织胶原纤维增生程度增加,肝组织α-SMA、ColI、TIMP-1、TIMP-2、MMP-13、MMP-14蛋白表达和MMP-2、MMP-9活性逐渐升高(P<0.05或P<0.01);与9周模型组比较,一贯煎组大鼠胶原纤维增生程度显著减轻(P<0.05),肝组织α-SMA、Col I、TIMP-1、TIMP-2、MMP-13和MMP-14蛋白表达及MMP-2、MMP-9活性显著降低(P<0.01).结论:一贯煎可以抑制肝星状细胞活化,抑制胶原的合成,促进过度增生的胶原纤维的降解,从而抑制CCl4诱导大鼠肝硬化的形成.     

大鼠酒精性肝纤维化复合模型的建立

目的:采用复合因素制备大鼠酒精性肝纤维化模型。方法:Wistar雄性大鼠随机分为空白对照组、酒精性肝纤维化模型组和微量CCl4处理组。酒精性肝纤维化模型组大鼠予以喂食酒精、玉米油、吡唑,结合微量CCl4腹腔注射造模。微量CCl4处理组仅予以微量CCl4腹腔注射。观察各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、γ谷氨酰转肽酶(gamma-glutamyltransferase,γ-GT)水平和肝组织病理学的变化。结果:造模第12周,成功建立大鼠酒精性肝纤维化模型。在造模期间,肝脏组织病理学依次表现为酒精性脂肪肝、肝炎、肝纤维化。酒精性肝纤维化模型组大鼠肝/体比值,血清ALT、AST及γ-GT水平与正常对照组比较,差异均有统计学意义。结论:酒精灌胃结合微量CCl4腹腔注射制备酒精性肝纤维化动物模型,具有模型稳定、成功率高的特点,并可提供不同阶段酒精性肝病的实验模型。     

一贯煎对CCl_4诱导的肝纤维化大鼠肝组织胶原代谢的影响

目的：探讨一贯煎对四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）诱导的肝纤维化大鼠肝脏胶原代谢的影响。方法：腹腔注射CCl49周制备大鼠肝纤维化模型,于造模第3周、第6周末各处死6只大鼠作动态观察,自第7周起将模型大鼠随机分为模型对照组和干预组。干预组于继续造模的同时给予一贯煎灌胃3周,正常组与模型对照组大鼠给予同体积蒸馏水灌胃。第9周末处死全部大鼠,采集肝组织标本,检测肝组织组织金属蛋白酶抑制剂1（tissue inhibitor ofmetalloproteinase-1,TI MP-1）、-2,基质金属蛋白酶13（matrix metalloproteinase-13,MMP-13）、-14,α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）,Ⅰ型胶原（collagen typeⅠ,ColⅠ）等的蛋白表达以及MMP-2、-9的活性。结果：与正常大鼠比较,造模第3、6和9周时肝纤维化大鼠肝组织胶原纤维增生程度增加,肝组织α-SMA、ColⅠ、TI MP-1、TI MP-2、MMP-13、MMP-14蛋白表达和MMP-2、MMP-9活性逐渐升高（P〈0.05或P〈0.01）;与9周模型组比较,一贯煎组大鼠胶原纤维增生程度显著减轻（P〈0.05）,肝组织α-SMA、ColⅠ、TI MP-1、TI MP-2、MMP-13和MMP-14蛋白表达及MMP-2、MMP-9活性显著降低（P〈0.01）。结论：一贯煎可以抑制肝星状细胞活化,抑制胶原的合成,促进过度增生的胶原纤维的降解,从而抑制CCl4诱导大鼠肝硬化的形成。     

大鼠肝纤维化过程星形细胞MMP-2的表达及白细胞介素10的影响

目的　探讨基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )表达在实验性大鼠肝纤维化发病中的意义及外源性白细胞介素 10 (IL 10 )抗肝纤维化作用的机制。　方法　 6 0只SD雄性大鼠随机分为生理盐水对照组 (N组 ) 8只、四氯化碳(CCl4)组 2 8只和IL 10干预组 2 4只 ,建立正常对照、CCl4诱导肝纤维化模型及IL 10干预模型。造模第 7周和第11周 ,采用链霉蛋白酶E、Ⅳ型胶原酶经门静脉体外灌流消化 ,11%Nycodenz密度梯度离心分离肝星形细胞(HSC)。半定量RT PCR法检测各组HSC的MMP 2mRNA表达水平 ;免疫细胞化学法检测培养 72h时HSC的MMP 2蛋白表达情况。　结果　各组均检出MMP 2的mRNA表达 ;造模第 7周 ,CCl4组与IL 10组的MMP 2mRNA表达均高于N组 (P <0 0 1) ,IL 10组低于CCl4组 (P <0 0 1) ;造模第 11周 ,CCl4组与IL 10组的表达水平较第 7周均有下降 (P <0 0 1) ,IL 10组低于CCl4组 (P <0 0 1)。SP免疫细胞化学法检测各组MMP 2的蛋白表达情况与mRNA一致。　结论　MMP 2在实验性大鼠肝纤维化早期表达升高 ,后期下降是肝纤维化发生发展的重要机制之一 ;外源性IL 10可能通过抑制早期MMP 2的表达发挥抗肝纤维化作用。     

"益肝浓缩煎剂"与强肝胶囊对肝纤维化形成的预防作用

目的　研究“益肝浓缩煎剂”、强肝胶囊对肝纤维化形成的预防作用。方法　将 6 0只SD雄性大鼠随机分成 4组 :正常组、模型组、“益肝浓缩煎剂”组、强肝胶囊组 ,每组 15只 ,以CCl4 诱导大鼠肝纤维化模型 ,造模前2周给予相应药物进行预防 ,持续 10周 ,测定肝组织羟脯氨酸 (Hyp)、丙二醛 (MDA)含量 ,用光镜、电镜观察肝脏病理形态变化。结果　 4组小鼠肝组织Hyp、MDA含量间差别均有显著性意义 (P <0 0 1) ;电镜显示“益肝浓缩煎剂”组、强肝胶囊组的胶原纤维增生均明显受到抑制 ,“益肝浓缩煎剂”组肝细胞及细胞器接近正常。此外 ,两组α-平滑肌肌动蛋白表达明显减少。结论　“益肝浓缩煎剂”、强肝胶囊对肝纤维化具有预防作用 ,在保护肝细胞方面 ,“益肝浓缩煎剂”作用较为明显。     

四氯化碳诱导犬早期肝损害所致门静脉高压的形态学观察

目的　探讨实验性犬肝脏早期损害所致的门静脉高压形成的形态学基础。方法　以小剂量四氯化碳 (CCl4)腹腔内注射诱导犬早期肝损害 ,制备门静脉高压犬模型。通过光镜、电镜观察肝脏形态学的改变。结果　腹腔内注射CCl47周后 ,共有 15头犬形成门静脉高压 (门静脉压力 2 2 7cmH2 O± 1 5cmH2 O ,1cmH2 O =0 0 98kPa,与给药前相比 ,P <0 0 5 )。HE染色示肝脏损害轻微。Masson染色、电镜 ,示肝窦毛细血管化。α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)免疫组化染色示肝星形细胞(HSC)大量活化。结论　肝脏受损早期 ,门静脉高压形成的可能原因是肝窦毛细血管化和HSC活化所致的肝窦血流阻力增加。     

肝纤维化大鼠星状细胞Smad3、Smad7基因表达差异的研究

通过检测肝纤维化大鼠原代肝星状细胞 (HSC)的 Sm ad3和 Smad7编码基因的表达 ,探讨 HSC活化及转化机制。皮下注射四氯化碳 (CCl4)制备大鼠肝纤维化模型 ,于注射 CCl4后 1、 4、 8周分批分离 HSC并计算 HSC平均得率 ;RT- PCR检测其 Sm ad3、Smad7m RNA的表达变化。结果显示 :1CCl4注射后第 1、 4、 8周大鼠 HSC平均得率分别为 :(3.34± 0 .36 )× 10 7/只、 (4 .2 1± 0 .6 4)× 10 7/只、 (5 .88± 0 .79)× 10 7/只 ,均高于正常大鼠 HSC平均得率(2 .2 3± 0 .19)× 10 7/只 ,组间比较有显著性差异 ,P<0 .0 5。 2与正常对照组相比 ,注射 CCl4后 1、 4、 8周大鼠 HSC中 Sm ad3m RNA表达增加 ,P<0 .0 5。注射 CCl4后 1周 Sm ad7m RNA较正常明显升高 ,P<0 .0 5 ,到第 4周和第 8周表达水平则持续下降 ,P<0 .0 1。提示 Sm ad3和 Smad7在肝纤维化发生、发展中对 HSC的活化及转化起不同的介导作用。     

羟基红花黄色素A对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1表达的影响

目的观察羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HYSA)对四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)大鼠肝组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法清洁级雄性SD大鼠60只,体质量(180±30)g,采用CCl4灌胃,制作大鼠肝纤维化模型。将大鼠随机分为A组(正常对照组)、B组(HF模型组)、C组(红花组)、D组(HYSA组)、E(秋水仙碱组),各组从CCl4造模第2周起,腹腔注射给药,8周后取材,HE染色,镜下观察肝组织形态学改变,免疫组化SP法检测TGF-β1在大鼠肝脏中的表达。结果大鼠肝组织HE染色C、D组可见肝细胞水肿较小、体积增加不明显,胞浆疏松化轻,肝纤维化程度明显低于B组,和E组比较无明显差异;免疫组化染色显示C、D组大鼠肝脏中TGF-β1阳性细胞数与E组相近,明显低于B组。结论 HYSA能够保护肝组织,减轻肝细胞水肿程度,抑制其纤维化程度,促进损伤肝组织的修复。     

保肝复功水煎剂对大鼠肝纤维化TGFβ1、TIMP1、MMP1表达的影响

目的:为了探讨保肝复功水煎剂抗肝纤维化的作用机理。方法:通过四氯化碳致小鼠肝损伤模型,利用基因芯片技术研究TGFβ1、MMP1及TIMP1在肝组织中的表达情况。结果:保肝复功水煎剂干预性治疗使实验组大鼠肝组织MMP1表达上调,TIMP1、TGFβ表达下调。结论:保肝复功水煎剂在肝组织中具有明显使MMP1表达上调,TIMP1、TGFβ表达下调的作用,从而促进了胞外基质的降解,抑制发挥肝纤维化的作用。     

维生素A对实验性大鼠肝纤维化的影响

目的；观察中等剂量维生素Ａ对四氯化碳（ＣＣｌ４）诱导的实验性大鼠肝纤维化的影响。方法；在四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的同时，给以１００ｍｇ／ｋｇ体重维生素Ａ皮下注射。检测在早（３周）、中（６周）、晚（１２周）期大鼠肝组织羟脯氨酸含量及血清中透明质酸及谷丙转氨酸水平，并观察肝脏的组织病理改变。结果；治疗组早期血清透明质酸及病理学的炎症程度均显著低于ＣＣｌ４对照组（Ｐ〈０．０５），中、晚期肝组织羟脯氨酸含     

The expression of AT1 receptor on hepatic stellate cells in rat fibrosis induced by CCl4

Objectives To assess the effect of an ACE inhibitor and an Ang Ⅱ type 1 (AT1) receptor an tagonist on preventing hepatic fibrosis induced by CCl(4) in rats and to investi gate whether there is the expression of AT1 receptors on hepatic stellate cell s. Methods Studies were conducted in male Sprague-Dawley rats. Except for model group and control group, in three treated groups, either enalapril (5 mg/kg), or losarta n (10 mg/kg), or enalapril+losartan were given to the fibrotic rats (daily gava ge). Saline vehicle was given to the control group. After 6 weeks, liver fibro sis was assessed directly by hepatic morphometric analysis. The expression of A T1 receptors and α-smooth muscle actin (α-SMA) in liver tissue and isolated hepatic stellate cells (HSC) were detected by immunohistochemical techniques. Results Compared with the fibrosis in rats of the model group, rats treated with either enalapril or losartan, or a combination of two drugs, showed a limited expansion of the interstitium (P&lt;0.05), but no significant difference was observed a mong the three treated groups (P&gt;0.05). The expression of AT1 receptors w as found in abundance in the fibrotic interstitium of the fibrotic rats, whereas in the normal control rats they were limited to the vascular wall. AT1 recept ors were also expressed on activated HSC in culture plates. Conclusions Angiotensin-converting enzyme inhibitors and AT1 blockers might slow the progr ession of hepatic fibrosis. Activated HSCs expressed AT1 receptors. Activatio n of RAS might be related to hepatic fibrogenesis induced by CCl(4).     

维生素D联合葛根素对四氯化碳致大鼠肝纤维化的作用及机制

目的 探究维生素D联合葛根素对肝纤维化的保护作用及机制.方法 将大鼠分为正常对照组(C组)、四氯化碳组(CCl4组)及CCl4外加维生素D组(V组)、葛根素组(P组)及维生素D联合葛根素组(V+P组)治疗组,8周后处死,检测透明质酸(HA);测量羟脯氨酸(Hyp);制作肝脏石蜡切片并行天狼星红染色检查;反转录PCR检测肝组织中胶原蛋白(Collagen)I、ⅢmRNA水平;Western blot检测肝脏NF-κB和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平.结果 CCl4组出现明显肝脏纤维化,V组、P组及V+P组均明显改善了纤维化程度,降低了血中HA水平及肝脏中的Hyp水平,肝脏Collagen Ⅰ、ⅢmRNA及NF-κB和TNF-α蛋白水平明显降低.其中V+P组肝纤维化程度改善最为明显(P＜0.05).结论 维生素D联合葛根素可以保护CCl4引起的大鼠肝脏纤维化,其机制可能与降低肝脏星状细胞活化、减少胶原纤维分泌有关.     

肝细胞生长因子对肝纤维化的保护作用及其机制研究

目的 观察肝细胞生长因子(HGF)对实验性肝纤维化大鼠的保护作用及其可能的作用机制.方法 采用CCl4复合因素造模,HE染色观察肝组织形态学变化,赖氏法检测ALT、AST,TUNEL标记法检测肝细胞凋亡百分率,免疫组化方法观察增殖细胞核抗原(PCNA)、bcl-2、bax、Cyt C、caspase-3表达.结果 造模5～8周时,模型组可见肝小叶结构紊乱,纤维组织明显增生,并向肝小叶内延伸分割肝小叶,造模8周可形成假小叶.与模型组比较,HGF治疗组肝细胞变性坏死、炎性细胞浸润及纤维组织增生较轻(P<0.01),ALT、AST水平下降(P<0.05),肝细胞凋亡明显减少(P<0.05),PCNA阳性表达明显增高(P<0.05),bcl-2表达明显增多(P<0.01),同时bax、Cyt C、caspase-3表达显著减少(P<0.05).结论 HGF通过调节线粒体途径抑制肝细胞凋亡、促进肝细胞增殖而发挥对实验性肝纤维化大鼠的保护作用.     

肝纤维化大鼠肝表面温度与肝组织形态学变化的相关性研究

目的 :探讨肝纤维化发生、发展过程中肝脏温度的变化规律。方法 :采用红外热像和组织芯片技术 ,研究四氯化碳所致大鼠肝纤维化模型肝脏表面温度与肝组织病理变化的关系。结果 :2w模型组大鼠肝组织病理变化以炎症、肝细胞脂肪变性为主 ,肝表面平均温度较对照组明显升高 (P <0 0 5 ) ;4w模型组在肝细胞变性、坏死的同时 ,ECM增生 ,肝纤维化逐渐形成 ,模型组与对照组肝表面温度无明显差异 ;6w模型组肝细胞大量坏死 ,中央静脉及汇管区纤维化隔形成 ,肝表面温度较对照组明显降低 (P <0 0 5 ) ;8w模型组肝组织形成完整的假小叶 ,肝表面温度较对照组明显降低 (P <0 0 1)。结论 :肝纤维化发生、发展过程中肝表面温度随肝纤维化病程的进展呈规律性变化     

Effect of splenectomy on CCl4-induced liver fibrosis in rats

Ｔｈｅｓｐｌｅｅｎｉｓｌｏｃａｔｅｄｈｅｍｏｄｙｎａｍｉｃａｌｙｐｒｉｏｒｔｏｔｈｅｌｉｖｅｒａｎｄｔｈｅｌｉｖｅｒｒｅｃｅｉｖｅｓａｌｏｆｔｈｅｂｌｏｏｄｆｌｏｗｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｓｐｌｅｎｉｃｖｅｉｎ．Ｂｏｔｈｔｈｅｓｐｌｅｎａｎｄｌｉｖｅｒａ...     

褪黑素保护大鼠慢性肝损伤的动态观察

目的 观察褪黑素抗大鼠慢性肝损伤作用。方法 用四氯化碳(CCl4)制造大鼠慢性肝损伤模型，同时予褪黑素腹腔注射；在造模的第1、2、3月末处死大鼠。分别测定大鼠体重、肝脏湿重和血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)及白蛋白和总蛋白水平，并作肝脏病理学检查。结果 褪黑素可以显著降低CCl4诱导大鼠慢性肝损伤早期的ALT、AST，在大鼠慢性肝损伤的中期，MT可提高血清白蛋白水平和白球比值，改善肝脏病理损伤。结论 褪黑素在CCl4诱导的大鼠慢性肝损伤早期可以减轻肝脏炎症，而在中晚期，MT主要起着抑制肝纤维化的作用。     

干扰素-α对CCl4诱导的大鼠肝纤维化疗效研究

目的:观察干扰素-α (interferon α,IFN-α)对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的治疗效果,并探讨其可能的机制.方法:45只Wistar大鼠随机分为正常组(n=15)、模型组(n=15)、IFN-α治疗组(n=15).正常组大鼠予以橄榄油2 mL/kg腹腔注射,每周注射2次,共8周;模型组及IFN...     

外源性硫化氢对大鼠肝纤维化的影响

目的探讨外源性硫化氢对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的预防作用。方法将24只Wistar雄性大鼠随机分为3组,每组8只,即正常对照组、模型组、硫化氢(H2S)预防组。H2S预防组除腹腔注射40%CCl4外,还给予NaHS腹腔注射,1次/d,至第8周,所有大鼠均被处死,收集大鼠血液,检测肝纤维化指标;取肝组织检测脂质过氧化指标及观察肝脏病理变化;应用RT-PCR和Western blot方法检测肝组织NF-κB的表达。结果外源性H2S能降低血清HA、LN、PCⅢ及肝组织MDA含量(P<0.01或P<0.05),增加肝组织SOD、GSH-Px活性(P<0.01),减轻肝纤维化程度(P<0.05),而且能使NF-κB表达明显减少。结论外源性硫化氢对CCl4诱导的大鼠肝纤维化具有保护作用,其机制可能与硫化氢抑制NF-κB表达有关。