敲低MANF对利福平诱导HepG2细胞损伤的影响及机制

目的 探讨敲低中脑星型胶质细胞源性神经生长因子(MANF)对利福平(RFP)诱导HepG2细胞损伤的影响及机制.方法 慢病毒转染技术构建MANF敲低稳转细胞株(MANF Y25)及其对照细胞株(MANF Y07).实验分为4组:MANF Y07+ DMSO组、MANF Y07+ RFP组、MANF Y25+ DMSO组、MANF Y25+RFP组.给予HepG2细胞100μmol/L RFP 24 h后,Western blot和qRT-PCR检测各组细胞MANF及未折叠蛋白反应(UPR)相关基因葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、蛋白酶R样内质网激酶(PERK)、真核翻译启动因子2α(eIF2α)、活化转录因子4(ATF4)、CCAAT/增强子结合蛋白(CHOP)、Tribbles同源蛋白3(TRIB3)、肌醇需求激酶1(IRE1)、剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1-S)、非剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1-U)、活化转录因子6(ATF6)的蛋白及基因表达水平;Annexin V-PE/7-AAD双染法检测各组细胞凋亡率;CCK-8法检测各组细胞增殖变化;试剂盒检测各组细胞培养上清液中细胞损伤标志物谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)、总胆红素(TBIL)、间接胆红素(IBIL)相对含量变化.结果 在蛋白水平,RFP激活MANF、GRP78、p-eIF2α、ATF4、ATF6的蛋白表达;在基因水平,RFP诱导HepG2细胞MANF、GRP78、PERK、eIF2α、ATF4、CHOP、TRIB3的基因表达,并且MANF敲低后GRP78、p-PERK、p-eIF2α、ATF4、ATF6蛋白表达水平及上述UPR相关基因的基因表达水平进一步上调(P＜0.05),MANF敲低后细胞凋亡率升高(P＜0.01),细胞增殖能力降低(P＜0.01),细胞培养上清液中ALT、AST、AKP、TBIL、IBIL水平升高(P＜0.05),说明细胞损伤加重.结论 RFP可激活UPR,敲低MANF后这种效应进一步加强,同时细胞损伤加重,表明MANF可能通过调节URP而在RFP诱导HepG2细胞损伤中发挥保护作用.     

主穿支皮神经营养血管皮瓣一期修复小腿及足踝部高能损伤创面

目的 探讨主穿支供血型小腿皮神经营养血管皮瓣一期修复小腿及足踝部创面的方法及效果.方法 回顾性分析2003年7月至2011年2月,对收治的39例高能损伤导致的小腿及足踝部损伤,单独或组合选择腓动脉主穿支供血游离或穿支蒂腓肠神经营养血管皮瓣、外踝上穿支蒂腓浅神经营养血管皮瓣、胫后动脉主穿支供血游离或穿支蒂隐神经营养血管皮瓣进行一期修复.结果 39例44处创面,采用腓动脉主穿支供血腓肠神经营养血管皮瓣32块(穿支蒂27块、游离5块),胫后动脉主穿支供血隐神经营养血管皮瓣6块(穿支蒂5块、游离1块),外踝上穿支蒂腓浅神经营养血管皮瓣6块,最大切取面积22 cm×10 cm.术后皮瓣均全部成活,平均住院23 d(12～36 d).术后随访6～15个月,皮瓣质地优良,外形与足踝功能恢复满意,吻合神经者两点辨距觉2.5～5 cm,未吻合神经者术后1年以上均存在保护性感觉.结论 上述3种主穿支皮神经营养血管皮瓣血供确切,合理个体化选择应用可修复不同类型小腿及足踝部创面;一期修复解剖清晰、血管条件好、手术设计灵活,可减少感染机会及肉芽瘢痕,利于功能恢复并缩短治疗周期.     

腹水多形核细胞数量与自发性腹膜炎预后关系的研究

目的：评价腹水多形核细胞（PMN）数量与自发性腹膜炎（SBP）的预后关系。方法连续收集近2年间收治的291例 SBP 患者的临床资料。排除继发性、结核性腹膜炎,恶性腹水,并剔除未行腹穿或穿刺失败者40例,纳入研究的患者251例。以腹水 PMN 计数是否﹥250×106/ L 分为两组。比较两组间的一般情况、实验室检查、临床症状体征、合并症、治疗效果和生存率。结果在251例 SBP 患者中,PMN ﹥250×106/ L 者63例（25%）,PMN ﹤250×106/ L 者188例（75%）。腹水细菌培养阳性的9例患者中,PMN ﹥250×106/ L 者占77.8%（7/9）,PMN ﹤250×106/ L 者占22.2%（2/9）。两组患者在 SBP 主要症状体征方面无明显差别,均表现为有不同程度的发热、腹痛、腹胀,腹部张力增高,程度不等的压痛、反跳痛。抗菌药物治疗总有效率为67.3%（169/251）,其中,PMN ﹤250×106/ L 组抗菌药物治疗有效率为70.7%（133/188）,PMN ﹥250×106/ L 组为57.1%（36/63）,两组比较差异有统计学意义（P ﹤0.05）。在合并症方面,与 PMN ﹤250×106/ L 组比较,PMN ﹥250×106/ L 组合并消化道出血、MODS、感染性休克较高（P均﹤0.05）,其住院病死率及其1年内病死率均较高,差异均有统计学意义（P ﹤0.05）。结论以 PMN ﹥250×106/ L 作为 SBP 的诊断标准,在 SBP 患者预后评估中具有重要意义。与 PMN ﹤250×106/ L 的 SBP 患者比较,PMN ﹥250×106/ L 的 SBP 患者抗菌药物治疗有效率低,合并症较高,预后较差。     

克罗恩病患者血浆中细胞间黏附分子-1和血管细胞黏附分子-1水平检测的临床意义

检测96例克罗恩病( CD)患者和48例正常对照者血浆细胞黏附分子-1 ( ICAM-1 )和血管细胞黏附分子( VCAM-1)水平,与对照组比较,CD组血浆中ICAM-1和VCAM-1水平均明显增高(P<0. 01). 按疾病严重程度分组,各组血浆中ICAM-1和VCAM-1水平比较差异均有统计学意义( P<0. 01);按临床特征分组,各组内血浆中ICAM-1 和VCAM-1水平比较差异均无统计学意义. CD患者血浆中ICAM-1和VCAM-1水平明显增高,与疾病严重程度有一定关联,与临床特征无明显关联.     

经口内镜下肌切开术治疗贲门失迟缓的疗效分析

目的：了解经口内镜下肌切开术治疗贲门失迟缓术中及术后并发症、术后疗效及操作经验。方法收集2014年1月到2014年9月期间行胃镜及上消化道钡餐检查诊断为贲门失迟缓的14例患者资料。了解手术并发症,术前和术后症状缓解及胃镜下缓解情况,术后复发情况,并总结分析经验。结果所有病例均未出现严重并发症,术中1例病人出现渗血,电凝后止血。所有病例术后吞咽困难症状缓解明显,术前及术后Eckardt评分有显著差异。随访6～13月,均无复发及胃食管反流。结论作为一种微创治疗方法,POEM治疗贲门失迟缓安全性及短期疗效肯定,术后患者症状改善明显,但其长期疗效及远期并发症仍有待随访和观察。     

肝胆胰多学科诊疗模式在消化内科临床教学中的作用

正确掌握和运用肝胆胰疾病诊疗措施一直是消化病学临床教学的难点,传统教学方法难以取得理想教学效果。同时,多学科综合诊治逐渐成为复杂疾病诊疗的重要模式。通过结合肝胆胰多学科诊疗模式和教学经验,多学科诊治针对具体病例,相关学科专家互相合作共同制定最合适的诊疗方案。参加肝胆胰多学科诊疗工作,能帮助医学研究生和培训医师掌握肝胆胰疾病的诊疗具体流程,同时各学科专家可以与研究生、培训医师深入沟通,积累更多的教学经验,达到教学相长的效果,有利于开展肝胆胰疾病的规范化诊疗和保证教学质量,提高住院医师的综合素质。     

胃癌HME表达的临床病理学意义

目的:探讨人类巨噬细胞金属弹力酶(human macrophage metalloelastase,HME)在人胃癌中的表达对肿瘤进展及预后的影响.方法:选取完整随访资料的胃癌存档蜡块65例(男57例,女8例,患者年龄30-74岁,分期T1-T4)进行免疫组化和原位杂交分析,评价HME表达与人胃癌临床病理学因素的相关性及其对疾病预后的意义.结果: HME蛋白及mRNA高表达率在分化类型较高的胃癌组织中较高(67.74% vs 41.18%,77.42% vs 52.94%,均P<0.05),血管浸润的胃癌组织低于无血管浸润者(31.25% vs 75.76%,40.63% vs 87.88%,均P<0.01),术后复发者低于无术后复发者(37.50% vs 63.41%,P<0.05;41.67% vs 78.05%,P<0.01).HME蛋白及mRNA高表达率与性别、年龄、肿瘤位置、大小、组织浸润深度及远处转移均无明显相关性,胃癌术后5年内复发死亡患者HME蛋白及mRNA高表达率明显低于术后生存5年以上者(37.04% vs 74.29%,P<0.01;48.15% vs 77.14%,P<0.05).HME表达为胃癌预后的独立影响因素,HME蛋白及mRNA高表达者预后较好(OR=0.323,OR=0.377;均P<0.05).结论:HME高表达与预后较好的密切相关,可能成为反映胃癌生物学行为及预测预后的有效指标.