大鼠脊髓损伤前后外周血CD3+ CD8+ CD28-和CD3+ CD8+ CD28+细胞亚群的变化

目的：：探讨SD大鼠脊髓损伤( spinal cord injury,SCI)前后外周血抑制性T细胞( suppress T lymphocytes,Ts)和细胞毒性T细胞( cytotoxic T lymphocytes,Tc)亚群的变化规律。方法：取10只健康雌性SD大鼠,采用纽约大学脊髓损伤撞击仪制作重物坠落SCI模型。于SCI前及后1、3、5、7、14、21、28和56 d收集外周血,流式细胞术检测外周血淋巴细胞CD3+CD8+CD28-Ts 和CD3+CD8+CD28+Tc亚群的变化规律。结果：SCI前,正常大鼠外周血中Ts和Tc亚群占CD3+总T细胞的百分比分别为(30.27±12.09)%和(14.75±4.29)%。损伤后1 d,Ts的比例为(22.58±12.12)%。术后5 d时其百分比下降至最低,为(20.86±10.41)%。术后7~21 d,其比例恢复至术前水平,28 d时显著升高,其比例为(37.90±12.98)%。56 d时其比例为(33.79±11.44)%,恢复至损伤前水平(P>0.05)。 Tc和Ts亚群的变化趋势相反,在损伤后1、5、21和28 d时其比例分别为(17.29±7.10)%、(20.02±6.24)%、(23.89±6.78)%和(13.81±11.21)%。但56 d时其比例没有恢复至术前水平,而是进一步下降至(8.71±6.44)%(P<0.01)。结论：在SCI后的早期阶段,SD大鼠外周血Tc占明显优势,提示Ts功能抑制、Tc功能增强是SCI免疫损伤机制之一。 SCI后5~21 d是进行免疫调节治疗的关键时间窗。     

肿瘤相关成纤维细胞与CD4+、CD8+T淋巴细胞在乳腺癌发生发展及淋巴结转移中的相关性研究

目的：研究肿瘤相关性成纤维细胞（cancer?associated fibroblast,CAF）与CD4+、CD8+T淋巴细胞在乳腺癌发生发展及淋巴结转移中的相关性。方法：检测乳腺浸润性导管癌组织及癌旁组织中CAF相关蛋白α?平滑肌肌动蛋白（α?SMA）的表达和间质淋巴细胞CD4、CD8的表达,并结合临床病理特征进行统计学分析,从而探寻CAF诱导的免疫抑制与乳腺癌发生发展及淋巴结转移程度之间的相关性。结果：α?SMA蛋白在乳腺癌组织中呈高表达,并与肿瘤大小、临床分期及淋巴结转移呈正相关（P＜0.05）;CD4的阳性表达与年龄、肿瘤大小及临床分期无相关性（P＞0.05）,而与组织学分级及淋巴结转移呈负相关（P＜0.05）。CD8的阳性表达与年龄、肿瘤大小及临床分期无相关性（P＞0.05）,而与组织学分级及淋巴结转移呈正相关（P＜0.05）。经配对计数资料的相关分析,α?SMA蛋白的阳性表达与CD8阳性表达存在正相关（P＜0.01）,与CD4阳性表达存在负相关（P＜0.01）。结论：CAF及上述免疫细胞的异常促进了乳腺癌发生发展及淋巴结转移,可为评估乳腺癌患者的生存及预后提供可靠的实验室依据。     

肺癌和乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞及foxp3 mRNA的变化特点及临床意义

目的：探讨肺癌、乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平的变化及临床意义。方法：应用流式细胞术检测9例肺癌、9例乳腺癌患者及10例非肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例,应用RT-PCR技术检测人外周血PBMC foxp3基因的表达。结果：流式细胞术检测显示,肺癌及乳腺癌患者外周血PBMC中CD4+CD25+T细胞占CD4⁺T细胞的比例［（21.30±11.26）%］高于非肿瘤患者［(14.19±8.56）%］（P<0.05）,肺癌及乳腺癌患者外周血PBMC中foxp3 mRNA的表达水平高于非肿瘤患者表达水平（P<0.05）,肺癌和乳腺癌患者外周血CD4⁺CD25⁺调节性T细胞比例增加。结论：CD4+CD25+调节性T细胞在维持自身免疫稳定的同时对肿瘤免 疫具有抑制作用,该细胞群比例的增加可能参与肿瘤的发生。     

乳腺癌SLN中CD8+T细胞及DC的动态分析

目的:分析乳腺癌SLN中CD8 T细胞及DC的变化规律. 方法:自2001-04/2003-06所进行的乳腺癌SLN活检病例中,选择应用CK19 mAb检测到SLN具有微转移的患者12例,并随机选择无转移的9例,HE有转移的10例共82个SLN. 将82个SLN分为无转移、微转移及转移组;选择CD8单抗及S-100多抗,采用免疫组化SABC,计数5个高倍视野下阳性染色细胞数和淋巴细胞总数的比值,取其平均值,得出阳性细胞百分比率. 结果:82个SLN中未转移35个,微转移20个,转移27个;三组淋巴结中CD8 T细胞和S-100 DC占总淋巴细胞的比率有统计学差异(P＜0.01). 结论:乳腺癌SLN中一旦出现肿瘤转移,即使是微转移,也能使CD8 T细胞的数量明显减少;SLN出现微转移对DC数量无明显影响,而一旦出现明显转移,则可使DC的数量显著减少.     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血CD2+、CD3+、CD4+、CD8+、CD95+表达及临床意义

T淋巴细胞亚群在调节机体免疫机能中发挥着重要作用,也在某些疾病的发生与发展中具有重要意义.本研究采用流式细胞术检测30例慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血CD2+、CD3+、CD4+、CD8+及CD95+水平,探讨其在COPD发生、发展中的作用.     

CD+4,CD+8及CD+4CD+8对于骨转移瘤治疗效果的监控作用

目的判断骨转移瘤患者经过放射性核素89SrCl2治疗后免疫学指标CD4 ,CD8 及CD4 /CD8 的变化及该指标对治疗效果的监控作用。方法选择经临床确诊的应用89SrCl2治疗的患者及正常对照组各24例。用流式细胞仪分别测定各患者治疗前、后及正常对照组CD4 ,CD8 及CD4 /CD8 值。每例患者均于治疗后第2,4和6个月行全身骨显像,记录骨转移病灶数及计算平均值。结果正常对照组CD4 ,CD4 /CD8 值高于骨转移瘤患者,而CD8 值低于骨转移瘤患者(P<0.05)。89SrCl2治疗后病灶数随CD4 增加、CD8 降低、CD4 /CD8 增加而相应减少。第4个月89SrCl2作用达峰值,各指标也达到极限值。结论CD4 ,CD8 ,CD4 /CD8 可以灵敏反映89SrCl2治疗效果,客观反映骨转移瘤病灶的变化。     

rAAV/CEA转染树突状细胞诱导特异性CTL杀伤MCF-7细胞系CD44+ CD24-/low乳腺癌干细胞

目的:携带癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)基因的重组人腺相关病毒(reconstructive human ade-no-association virus,rh-AAV)感染树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导获得抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(cyto-toxic lymphocyte,CTL),体外检测其对CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞的杀伤效果。方法:分离供者外周血单个核细胞,以细胞因子白介素-4(interleukin-4,IL-4)、粒细胞-巨噬细胞克隆刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimu-lating factor,GM-CSF)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)诱导培养获得DC,细胞因子白介素-2(interleukin-2,IL-2),刺激培养获得T淋巴细胞。含CEA基因的rh-AAV感染培养DC,诱导成熟后将DC和T细胞混合培养获得CTL细胞。流式分选MCF-7和MA-MDB-231细胞系中CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞,MTT法检测CTL细胞对CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞的杀伤效果。结果:MCF-7和MDA-MB-231中CD44+/CD24-/low亚群比例分别为5.1%和76.3%。CEA基因转染DC诱导的CTL细胞对表达CEA抗原的MCF-7杀伤率为46.5%±15.0%,与未转染组相比,差异有统计学意义(P=0.009);对MCF-7细胞中分选的CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞的杀伤率为44.7%±28.2%,明显高于未转染组。对非乳腺癌干细胞杀伤率为50.6%±22.2%,与未转染组相比,差异有统计学意义(P=0.05)。在不表达CEA基因的MDA-MB-231乳腺癌细胞,CEA转染诱导的CTL细胞对未分选细胞、分选的CD44+/CD24-/low亚群和非干细胞亚群的杀伤率与未转染的对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:携带CEA基因rh-AAV转染DC诱导产生的抗原特异性CTL细胞可杀伤表达CEA的乳腺癌细胞,对CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞也具有一定的杀伤活性,提示免疫治疗可能是治疗乳腺癌干细胞潜在有效的手段。     

外周血CD4+CD8+T细胞研究进展

T细胞在免疫应答过程中发挥中枢的作用.CD4 T细胞具有辅助细胞免疫和体液免疫应答的作用,CD8 T细胞则是重要的效应细胞.外周血中95%以上为CD4或CD8单阳性T细胞,CD4 CD8 T细胞(DP)＜5%[1].有关DP T细胞的研究近年来发展较快,研究显示,在某些病毒感染中,DP T细胞比例增加,这群细胞参与抗感染适应性免疫应答,具有独特的功能特点.我们就这方面的研究综述如下.     

CD4+CD8+和CD4+/CD8+比值在乙型肝炎发病机制中的意义

目的 探讨T细胞亚群在乙型病毒性肝炎发病中的作用。方法选择不同类型的肝炎病人，比较分析其外周血CD4^ 、CD^ 和CD4^ ／CD^ 比值。结果 各型乙型病毒性肝炎患者血清中CD4^ 细胞及CD4^ ／CD^ 比值均低于正常对照组，而且急性肝炎大于慢性肝炎(轻中度)大于慢性肝炎(重度)；CD^ 细胞则相反(P＜0．05)。结论 人体外周血CD4^ 、CD8^ 绝对数和CD4^ ／CD^ 比值影响着HBV感染后的患者的临床表现。     

CD4+CD25+调节性T细胞的研究进展

CD4⁺CD25⁺调节性T细胞（CD4⁺CD25⁺Tr）是一类最近才被人们认识的免疫调节细胞,起源于胸腺,发挥抑制性免疫调节作用,持续性表达IL-2Rα链（CD25）,具有免疫抑制性和免疫无能性两大特征,在自身免疫性疾病的治疗、肿瘤的免疫治疗以及移植耐受的诱导等方面具有潜在的应用价值。本文作者拟对CD4⁺CD25⁺Tr细胞的生物学特性及应用前景作一综述。     

原发性肝癌患者CD8+CD28-和CD8+CD28+细胞亚群的分析

目的研究原发性肝癌(HCC)病人外周血CD8+细胞亚群及CD8+T细胞上CD28分子的表达.方法用流式细胞仪对20例原发性肝癌病人的CD8+细胞亚群及CD8+T细胞上CD28分子(即CD8+CD28+和CD8+CD28)的表达进行检测.结果HCC病人CD8+细胞百分率升高,CD8+CD28+细胞百分率降低,CD8+CD28细胞百分率升高,与对照组相比具有显著性差异.CD8+CD28+、CD8+CD28-细胞百分率与CD8+T细胞百分率的相关性研究表明,CD8+CD28-细胞数与CD8+T细胞数之间呈正相关.结论HCC病人CD8+细胞升高,CD8+细胞上CD28分子的表达是异常的,即CD8+CD28-细胞数升高,CD8+CD28+细胞数降低;CD8+T细胞的升高是CD8+CD28-细胞亚群升高的结果.     

乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+与CD8+CD122+调节性T细胞的水平变化及临床意义

目的 探讨乳腺癌（Mammary cancer）患者外周血中CD4+CD25+与CD8+CD122+调节性T细胞(Tregs )的分布情况及临床意义。方法 采用流式细胞仪测定65例乳腺癌患者外周血中的CD4+CD25+与CD8+CD122+调节性T细胞水平,结果与18例正常健康人对比。结果 乳腺癌患者外周血中的CD4+CD25+与CD8+CD122+调节性T细胞均显著高于对照组（P <0.01）;且与乳腺癌的分期呈正相关。 结论 乳腺癌患者外周血中具有免疫负调控功能的CD4+CD25+与CD8+CD122+调节性T细胞水平较高, 可能与乳腺癌的病情及预后相关。     

重症颅脑损伤急性期T细胞亚群CD+3、CD+4、CD+8和CD+4/CD+8的变化及其临床意义

随着对创伤性脑损伤（Traumatic brain in jury,TBI）发生发展机制认识的日益深入以及临床救治水平的逐渐提高,重症颅脑损伤的病死率有了明显下降,但创伤后各种并发症（如感染）所致的病死率相对有所提高,约占治疗后期病死率的70%～80%。为了进一步探索创伤性情损害后细胞免疫功能的变化及其临床意义,本研究拟评价创伤性脑损伤急性期T细胞亚群是否存在变化;如有变化,观察其在伤后2周内的演变规律;评价T细胞亚群变化与临床伤情的关系及与临床预后的关系。     

冠心病患者外周血CD4+CD28-T细胞和CD4+CD25+T细胞亚群变化

目的 探讨冠心病患者外周血CD4 CD28-T细胞和CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)亚组的变化及意义.方法 入选病例为我院从2005年6月到2005年12月共28例行冠状动脉支架术治疗的冠心病患者(不稳定性心绞痛16例、稳定性心绞痛12例),以同时冠脉造影正常11例胸痛综合症患者为对照.借助三色荧光标记技术对外周血CD4 CD28-T细胞和CD4 CD25 Treg占CD4 T细胞比例进行流式细胞术测定.结果 不稳定性心绞痛患者外周血Treg/CD4 T细胞比例[(6.55±2.45)%]显著低于稳定性心绞痛组[(14.01±4.92)%]和胸痛综合征组[(13.55±3.87)%](P＜0.05),而CD4 CD28-/CD4 T细胞比例[(10.55±4.76)%]则明显高于稳定性心绞痛组[(2.64±1.33)%]和胸痛综合征组[(2.75±1.55)%](P＜0.05).结论 不稳定性心绞痛患者外周血Treg比例减少而CD4 CD28-T细胞比例升高,Treg比例降低可能使外周免疫耐受失去平衡,参与了动脉粥样硬化的发生发展.     

晚期恶性肿瘤患者化疗前后CD8~+、CD8~+CD28~+、CD8~+CD28~-T细胞的变化观察

目的 :分析 6 4例晚期恶性肿瘤患者化疗前后CD8+ 、CD8+ CD2 8+ 、CD8+ CD2 8- 的变化 ,并探讨其与病情的关系。方法 :采用流式细胞术检测 6 4例晚期恶性肿瘤患者治疗前后T淋巴细胞亚群 ,并与健康体检者作比较。结果 :实验组晚期恶性肿瘤患者化疗前CD4 + 低于对照组 (P <0 0 5 ) ,而化疗前后CD4 + CD8+ 明显低于对照组 (P <0 0 1) ,CD8+ 、CD8+ CD2 8- 明显高于对照组 (P <0 0 1)。治疗后 ,化疗有效者CD4 + 、CD4 + CD8+ 、CD8+ CD2 8+ 升高 (P <0 0 5、P <0 0 1) ,而CD8+ CD2 8- 降低 (P <0 0 5 ) ;化疗无效者CD4 + CD8+ 、CD8+ CD2 8+ 降低 (P <0 0 5、P <0 0 1) ,CD8+ CD2 8- 升高 (P <0 0 1)。结论 :晚期恶性肿瘤患者T淋巴细胞免疫功能低下 ,有效的治疗能提高患者的T淋巴细胞免疫功能 ,临床上检测CD8+ 、CD8+ CD2 8+ 、CD8+ CD2 8- 对恶性肿瘤的治疗和预后有一定的监测作用。     

大鼠肝移植自发免疫耐受模型CD4+CD25+和CD8+CD28-调节性T细胞的变化

目的:比较CD8 CD28-,CD4 CD25 调节性T细胞(T regulatory cells,Treg)及其亚群表型在大鼠自发免疫耐受形成中的变化,并探讨其在肝移植免疫耐受形成中的作用.方法:(1)建立雄性Brown Norway近交系大鼠(简称BN)到Lewis近交系大鼠(简称LEW)原位肝移植免疫耐受模型(存活＞120 d),取同周龄LEW大鼠作为对照组,应用梯度离心法分离外周血及脾单个核细胞,应用流式细胞仪检测CD8 CD28-,CD4 CD25 T细胞亚群比例;(2)应用免疫磁珠分离方法,通过间接法阴性分选和直接法阳性分选两步分离纯化CD8 CD28-,CD4 CD25 T细胞,并对其亚型表型进行检测,比较它们在移植耐受前后的差别.结果:(1)耐受组大鼠外周血及脾单个核细胞中CD8 CD28-,CD4 CD25 调节性T细胞的比例同对照组比较:CD8 CD28-T细胞增高,外周血为(30.2±5.8)%比(16.4±6.1)%,脾为(23.7±7.2)%比(13.4±5.5)%,P＜0.01;CD4 CD25 T细胞无明显差别,外周血为(9.9±3.5)%比(10.4±4.2)%,脾为(15.1±3.7)%比(14.7±4.6)%,P＞0.05.(2)CD8 CD28-,CD4 CD25 T细胞的亚型表型检测,①CD8 CD28-T细胞:耐受组为CD152(CTL-4)-,CD11b ,CD25-,CD45RO ;对照组为CD152(CTL-4)-,CD11b ,CD25-,CD45RO部分表达(76%);②CD4 CD25 T细胞:耐受组为CD152(CTL-4) ,CD11b ,CD28 ,CD45 RO ;对照组为CD152(CTL-4) ,CD11b ,CD28 ,CD45 RO .结论:CD8 CD28-Treg细胞在耐受组大鼠外周血及脾单个核细胞中的比例明显增高,而CD4 CD25 Treg细胞则无明显改变,提示CD8 CD28-Treg细胞在大鼠肝移植自发耐受的形成中的作用可能更为重要;CD152(CTL-4)在两种Treg细胞表达差别可能是引起它们作用及表现不同的重要原因;黏附分子CD11b可能同两种Treg细胞的功能均密切相关;CD8 CD28-Treg细胞包含着不同亚群,而CD45RO表达的增加可能同CD8 CD28-Treg细胞发挥抑制功能密切相关.     

EB病毒感染儿童CD4+CD25+变化及意义

目的 探讨EB病毒感染儿童CD4+CD25+变化及其临床意义.方法 用流式细胞仪(FCM)分别对50例EB病毒感染患儿急性期、治疗两周后恢复期外周血淋巴细胞CD3+,CD3+CD4+,CD3+CD8+,CD4+/CD8+,CD3-CD19+,CD3-CD(16+56)+,CD19+CD23+,CD4+CD25+抗原进行检测,并与19例同龄健康对照组儿童比较.结果 急性期CD4+CD25+比健康组均明显下降,恢复期CD4+CD25+比初期升高,有肝功能损害者比肝功能正常组CD4+CD25+低(P<0.05).结论 CD4+CD25+可能参与EB病毒感染过程,EB病毒感染患儿存在细胞免疫功能紊乱,测定其功能对疾病的诊治与预后都有积极意义.     

人CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞蛋白质组的双向电泳分析

目的 用双向电泳技术分析人CD4^ CD25^ T细胞和CD4^ CD25^-T细胞表达的蛋白质组，建立二者之间的差异表达谱。方法 从人脾脏分选CD4^ CD25^ T细胞和CD4^ CD25^-T细胞，用双向电泳技术分析两种细胞蛋白质组的表达差异。结果 分选细胞纯度分别为CD4^ CD25^ T细胞82.3%,CD4^ CD25^-T细胞96.5%，双向电泳分析发现有4个蛋白点明显仅于CD4^ CD25^ T细胞检测到表达，有9个蛋白点明显仅于CD4^ CD25^-T细胞检测到表达。结论 CD4^ CD25^-T细胞和CD4^ CD25^-T细胞表达蛋白质组有明显差异。