食管鳞状细胞癌组织中FAK和paxillin的表达

目的探讨FAK和桩蛋白(paxillin)在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及其意义。方法应用免疫组化SP法检测59例ESCC、27例癌旁不典型增生组织及36例正常食管黏膜组织中FAK和paxillin的表达。结果ESCC、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中FAK的阳性表达率依次降低,分别为79.7%(47/59)、59.2%(16/27)和19.4%(7/36),组间比较差异有统计学意义(P0.05);ESCC、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中paxillin的阳性表达率亦依次降低,分别为71.2%(42/59)、55.6%(15/27)和36.1%(13/36),组间比较差异有统计学意义(P0.05);FAK和paxillin表达均与ESCC的分化程度、浸润深度和淋巴结转移密切相关(P0.05)。ESCC组织中FAK与paxillin呈正相关关系(r=0.442,P0.05)。结论FAK和paxillin表达与ESCC的发生、发展和转移密切相关,联合检测FAK及paxillin可望成为ESCC早期诊断和预后判断的生物学标记之一,同时也将为治疗提供了新的靶点。     

食管鳞癌组织中桩蛋白和PTEN的表达及其意义

目的:探讨桩蛋白(paxillin)和PTEN在食管鳞癌组织中的表达及其病理生物学意义。方法:应用免疫组织化学Envision二步法检测85例食管鳞癌组织和22例癌旁正常组织中paxillin和PTEN的表达情况,并分析二者与食管鳞癌不同临床病理特征间的关系。结果:(1)85例食管鳞癌组织和22例癌旁正常食管组织中paxillin阳性表达率分别为65.9%、41.2%,差异无统计学意义(P>0.05),而PTEN在食管鳞癌组织中的阳性表达率(54.5%),低于癌旁正常组织(90.9%)(P<0.01)。在食管鳞癌组织中两者的表达无相关性(P>0.05)。(2)不同性别、年龄、组织分化程度、有无淋巴结转移、浸润深度和TNM分期的食管鳞癌组织paxillin和PTEN的阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。不同民族间paxillin的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)paxilinn和PTEN的异常表达是食管鳞癌细胞浸润转移的促进因素之一,此外paxillin的异常表达可能存在民族基因背景差异。细胞核PTEN表达可以作为食管鳞癌患者理想的生物学标志和有用的预后预测指标。(2)不同性别、年龄、肿瘤分化程度等临床病理特征患者食管鳞癌组织中paxillin和PTEN的表达可能无明显差别。     

大肠癌组织paxillin mRNA表达及其临床病理意义

目的 检测桩蛋白(paxillin)mRNA在大肠癌及癌旁正常组织中的表达,并探讨其在大肠癌发生发展中的临床病理意义.方法 采用荧光定量逆转录PCR(FQ-RT-PCR)检测41例大肠癌及癌旁正常组织中paxillin mRNA的表达.结果 paxiln mRNA在大肠癌组织中表达较高,而在癌旁正常组织中表达较低(P=0.000);有淋巴结转移者较无转移者paxillin mRNA表达高(P=0.000);癌组织浸润程度越深paxillin mRNA表达越高(P=0.007).结论 paxillin与大肠癌的浸润转移有关,可作为大肠癌发生、发展的预测指标之一.     

paxillin蛋白及mRNA在胃癌组织中的表达及生物信息学分析

目的探讨paxillin蛋白及mRNA在胃癌组织中的表达及意义,并分析表达失调的原因。方法选取2009年1月—2014年12月武汉大学人民医院37例正常胃黏膜组织与199例胃癌组织,采用组织芯片及免疫组化检测paxillin蛋白的表达情况,并分析该蛋白与临床病理参数间的关系。通过生物信息学方法筛选出负性调控paxillin蛋白表达的miRNA。结果 paxillin蛋白在正常胃黏膜组织中阳性表达率为70.27%(26/37),显著高于胃癌组织43.72%(87/199),差异有统计学意义(x~2=8.814,P<0.05)。随着胃癌细胞分化程度的下降,paxillin蛋白表达逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05);弥漫型胃癌中的阳性表达率为31.25%(40/128),显著低于肠型胃癌63.33%(38/60),差异有统计学意义(x2=17.322,P<0.05)。胃癌组织中paxillin与泛素特异性蛋白酶10(USP10)表达未发现明显相关性(r=0.187,P>0.05)。paxillin mRNA表达谱数据比值为正常黏膜:胃癌组织=1.04:1,肠型:弥漫型胃癌组织=0.88:1,均未见明显差异(P>0.05),表明paxillin蛋白表达下调发生在转录后水平。miR-199a-5p与paxillin mRNA的3'UTR端具有高度保守的结合位点,且相较正常组织在胃癌组织中高水平表达。结论 paxillin蛋白表达与胃癌发生及肿瘤细胞分化密切相关,该蛋白在胃癌中的表达下调主要发生在转录后水平,miR-199a-5p可能是负性调控该过程的因素之一。     

应用组织芯片研究焦点黏附激酶在肝细胞肝癌中的表达

目的: 检测焦点黏附激酶(focal adhesion kinase,FAK)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达。方法: 将148例HCC、137例癌旁正常肝组织及其10例正常肝组织制成组织芯片,直径为0.6 mm;采用免疫组织化学SP法,研究FAK表达情况。结果: HCC组织中FAK的阳性表达率为60.14%,癌旁正常组织FAK的阳性表达率为20.44%,正常肝组织中FAK阳性表达率为0%。在HCC组织中FAK阳性表达率均高于癌旁正常肝组织和正常肝组织(P<0.005);有门静脉分支癌栓组和包膜有侵犯组FAK阳性表达率均高于无门静脉分支癌栓组和包膜无侵犯组(P<0.005和P<0.01)。结论: FAK在HCC癌组织中表达明显增高,参与肿瘤的浸润和转移,可作为HCC的治疗和判断预后的一个生物学指标。     

低氧状态下黏着斑激酶对人肺动脉平滑肌细胞增殖的影响机制

目的 探讨低氧状态下黏着斑激酶(FAK)对人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)增殖的影响机制.方法 采用FAK寡核苷酸转染法对HPASMC进行低氧处理,免疫沉淀法测定胞质蛋白FAK、生长因子受体结合蛋白2(Grb2)及吻蛋白的活性,Western印迹法测定胞质蛋白FAK、Grb2及吻蛋白的蛋白表达,免疫组织化学法测定胞质FAK、Grb2及吻蛋白表达.结果 低氧处理后胞质FAK、Grb2及吻蛋白的活性增加.胞质FAK、Grb2及吻蛋白的蛋白表达值在低氧处理1.5 h时分别为43.4±1.4、69.7±1.9、59.3±1.6,在低氧处理24 h时分别为41.3±1.3、71.3±1.5、59.4±1.8,较常氧处理1.5 h(35.7±1.2、48.7±1.3、33.2±1.8)和24 h时(41.3±1.3、50.2±1.7、38.9±1.9)明显增加,差异均有统计学意义(均P＜0.05).免疫组织化学结果也显示低氧情况下胞质FAK、Grb2及吻蛋白的表达增强.结论 低氧状态下HPASMC增殖与胞质FAK、Grb2及吻蛋白有关.这些胞质蛋白在低氧情况下对细胞生长和分化具有调控作用.

Abstract：

Objective To explore the mechanisms of focal adhesion kinase (FAK) in the proliferation of human pulmonary artery smooth muscle cells (HPASMCs) under hypoxia.Methods Cultured HPASMCs were passively transfected with FAK oligonucleotides (ODNS) and under normoxia or hypoxia condition.They were divided into four groups:normoxia without fibronectin ( FN), normoxia with FN, hypoxia without FN, hypoxia with FN in vitro respectively.Cytoplasmic FAK, Grb2 and paxillin were observed simultaneously by immunoprecipitation and Western blot.In addition, the expressions of cytoplasmic FAK, Grb2 and paxillin were detected by immunocytochemical staining.Results Immunoprecipitation and Western blot demonstrated that cytoplasmic expressions of FAK, Grb2 and paxillin in HPASMCs increased in hypoxia with FN from 43.4 ± 1.4, 69.7 ± 1.9, 59.3 ± 1.6 to 35.7 ± 1.2, 48.7±1.3, 33.2±1.8 at 1.5 h (all P＜0.05), from41.3±1.3, 71.3 ±1.5, 59.4 ±1.8 to41.3±1.3, 50.2 ± 1.7, 38.9 ± 1.9 at 24 h respectively ( P ＜ 0.01, P ＜ 0.05, P ＜ 0.05).Immunocytochemistry staining showed that the cytoplasmic expressions of FAK, Grb2 and paxillin were enhanced in hypoxia with FN versus normoxia with FN.There were significant differences.Conclusion Hypoxia can induce the activation of cytoplasmic FAK, Grb2 and paxillin so as to regulate the migration, survival and proliferation of HPASMCs.     

粘着斑激酶在人良性前列腺增生组织中的表达及其意义

目的:研究粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)在人良性前列腺增生(BPH)组织中的表达及其意义.方法:采用免疫组织化学方法,分别测定48例BPH和10例正常前列腺组织基质和上皮中FAK的表达水平.结果:①FAK在BPH组织基质和上皮中的表达水平均显著高于正常前列腺组(P＜0.05).②FAK在不同年龄组和不同体积组BPH组织基质和上皮中的表达水平差异均无显著性(P＞0.05).结论:FAK在BPH发生过程中发挥一定作用,FAK不但在基质增生中发挥作用,同时也参与了上皮增生过程.FAK的高表达可能在BPH早期就已发生,并在BPH发展过程中持续高表达.     

粘着斑激酶基因表达与结肠癌的相关性研究

目的　研究粘着斑激酶 (focaladhesionkinase ,FAK)的mRNA在结肠癌组织和对应癌旁正常组织中的表达水平 ,探讨FAK参与结肠癌发病的可能机制。方法　采用半定量RT -PCR法检测 30例新鲜结肠癌及相对应的癌旁正常组织FAK的表达水平。结果　 30例结肠癌组织FAK阳性表达率为 86 7% ,其表达平均值为 0 794±0 2 5 0 ,对应癌旁组织FAK阳性表达率为 33 3% ,其表达平均值为 0 12 1± 0 115 ,FAK在结肠癌组织的表达水平明显高于正常癌旁组 (P =0 0 0 0 )。结论　FAK在结肠癌组织中的表达水平较正常组织明显增高 ,提示FAK在结肠癌的发病中起重要作用。     

FAK和MMP-9蛋白在胃癌组织中的表达及相关性研究

目的 检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)和黏着斑激酶(FAK)在胃癌中的表达,并探讨其相关性.方法 采用免疫组织化学方法,观察60例胃癌及肿瘤与正常组织交界处FAK和MMP-9的表达情况.结果 60例胃癌组织中FAK阳性及强阳性表达率为73.3%(44/60)、56.7%(34/60),MMP-9的阳性表达率为85%(51/60);60例相应交界组织中,FAK阳性及强阳性表达率为56.7%(34/60)、26.7%(16/60),MMP-9阳性表达率为56.7%(34/60).MMP-9和FAK阳性表达率和阳性强度均以胃癌中为高.在癌组织中,MMP-9和FAK在低分化组中的表达高于高、中分化组,在淋巴结转移组中较无淋巴转移组表达高,浸润程度越深表达越高.MMP-9阳性表达强度与FAK的阳性表达强度之间呈显著正相关(P＜0.05).结论 胃癌中FAK与MMP-9的表达密切相关,可作为胃癌生物学行为预测的辅助指标.     

粘着斑激酶在乳腺癌的表达及其与血管生成的关系

目的 研究乳腺癌组织中粘着斑激酶(FAK)的表达及其与微血管密度(MVD)的关系,探讨FAK介导的细胞信号转导系统对乳腺癌血管生成的作用和意义.方法 应用SP法对88例乳腺癌组织和30例乳腺良性病变组织进行FAK和CD34免疫组化染色,分析FAK蛋白表达和CD34标记的MVD值之间,及其与乳腺癌临床病理参数之间的关系.结果 在88例乳腺癌中FAK的阳性表达率为68.2%(60/88),MVD为(34.52±13.11)/HPE,与良性对照组比较均有显著差异(P＜01);FAK表达和MVD与乳腺癌肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、临床分期呈正相关(P＜0.05),与患者年龄、组织病理学分级未见显著相关(P＞0.05);乳腺癌FAK表达与MVD呈正相关(P＜0.01).结论 FAK蛋白表达和微血管形成与乳腺癌的侵袭转移密切相关,FAK表达对乳腺癌血管生成具有促进作用.     

食管鳞状细胞癌组织中FAK和Paxillin蛋白的表达

目的 探讨FAK和桩蛋白（Paxillin）在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的表达及其意义。方法 应用免疫组化SP法检测59例ESCC、27例癌旁不典型增生组织及36例正常食管黏膜组织中FAK和Paxillin蛋白的表达。结果 ESCC、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中FAK蛋白的阳性表达率依次降低,分别为79.7%（47/59）、59.3%（16/27）和19.4%（7/36）,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）;ESCC、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中Paxillin蛋白的阳性表达率亦依次降低,分别为71.2%（42/59）、55.6%（15/27）和36.1%（13/36）,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）;FAK和Paxillin蛋白表达均与ESCC的分化程度、浸润深度和淋巴结转移密切相关（P<0.05）。ESCC组织中FAK蛋白与Paxillin呈正相关关系（γ＝0.442,P<0.05）。结论 FAK和Paxillin蛋白表达与ESCC的发生、发展和转移密切相关,联合检测FAK及Paxillin蛋白可望成为ESCC早期诊断和预后判断的生物学标记之一,并且也将为治疗提供了新的靶点。     

食管鳞癌组织中Syndecan-1蛋白及mRNA表达

目的:检测食管鳞癌组织中Syndecan-1蛋白及mRNA的表达.方法:应用免疫组化SP法和原位杂交方法检测49例食管鳞癌组织及其相应的30例癌旁不典型增生组织和49例正常食管黏膜组织中Syndecan-1蛋白及其mRNA的表达.结果:①正常食管黏膜组织中Syndecan-1蛋白和mRNA均为阳性表达.食管鳞癌组织中Syndecan-1蛋白及mRNA阳性表达率均低于癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织(P均＜0.05).②淋巴结转移者食管鳞癌组织与不典型增生组织中Syndecan-1蛋白和mRNA阳性表达率均低于无淋巴结转移组(P均＜0.05).③浸润至外膜的食管鳞癌组织及不典型增生组织中Syndecan-1蛋白和mRNA的阳性表达率分别低于深肌层及浅肌层(P均＜0.05).结论:人食管鳞癌组织中Syndecan-1蛋白及mRNA均呈低表达,Syndecan-1与食管鳞癌的发生发展及浸润转移有关.     

E26转录因子-1和信号转导与转录激活因子6在食管病变组织中的表达及临床意义

目的探讨E26转录因子-1(Ets-1)和信号转导与转录激活因子6(STAT6)在食管病变组织中的表达,并分析其相关性与临床意义。方法应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法和反转录聚合酶链反应法检测36例食管鳞癌、36例癌旁非典型增生及18例正常食管黏膜组织中Ets-1、STAT6的表达。结果 Ets-1、STAT6蛋白在正常食管黏膜、癌旁非典型增生及食管鳞癌组织中阳性表达率均依次升高,组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05),且二者呈正相关关系(r=0.447,P<0.05)。Ets-1、STAT6 mRNA在正常食管黏膜、癌旁非典型增生及食管鳞癌组织中相对含量依次升高,组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。Ets-1及STAT6异常表达与食管癌的分级、浸润深度及淋巴结转移均密切相关(P<0.05)。结论 Ets-1和STAT6异常表达与食管上皮癌变有关,二者可能具有协同作用,并可作为判断患者预后的分子指标。     

MDM2与P53在宫颈鳞癌中的表达及相关性研究

目的探讨MDM2与P53蛋白在宫颈鳞癌中的表达及相关性，进一步探讨宫颈鳞癌的发生和发展机制。方法选取2003年3月至2006年3月郑州大学第三附属医院50例宫颈鳞癌手术切除标本，50例正常宫颈黏膜组织，30例癌旁非典型增生组织。采用免疫组化SP法检测MDM2与P53蛋白的表达情况。结果宫颈鳞癌组织、癌旁非典型增生组织与正常宫颈黏膜组织中MDM2蚤白阳性表达率依次降低，且癌组织、癌旁非典型增生组织及正常宫颈黏膜组织中MDM2蛋白表达间相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。宫颈鳞癌组织、癌旁非典型增生组织与正常宫颈黏膜组织中P53蛋白阳性表达率依次降低，癌组织、癌旁非典型增生组织及正常宫颈黏膜组织中P53蛋白表达间相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论MDM2和P53在宫颈黏膜从良性病变到癌前病变到癌的进展过程中发挥重要作用。     

食管鳞癌组织中磷脂酶A2mRNA检测与分析

目的 探讨分泌型磷脂酶A2-Ⅱa(secretory phospholipase A2-Ⅱa,sPLA2-Ⅱa)及胞浆型磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A2,cPLA2)mRNA表达与食管癌发生、发展及浸润、转移的关系.方法 应用原位杂交法检测45例食管鳞癌组织、22例癌旁不典型增生组织及45例正常食管黏膜组织中sPLA2-Ⅱa及cPLA2 mRNA表达.结果 食管鳞癌组织中sPLA2-Ⅱa mRNA表达与癌的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期密切相关(P＜0.05);在食管鳞癌癌变过程中sPLA2-Ⅱa mRNA表达在正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及癌组织中的表达率依次增高,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).cPLA2 mRNA表达与癌的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均密切相关(P＜0.05);cPLA2 mRNA在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及癌组织中的表达率依次增高,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05),sPLA2-Ⅱa及cPLA2的表达呈正相关(rp=0.429,P=0.003).结论 sPLA2-Ⅱa及cPLA2 mRNA在食管鳞癌组织中表达显著升高,并与食管鳞癌生物学行为关系密切,提示sPLA2-Ⅱa及cPLA2低表达与食管鳞癌的发生、发展有关,sPLA2-Ⅱa及cPLA2可作为食管鳞癌早期诊断和判断预后的辅助指标.     

食管鳞癌组织中Galectin-3蛋白及mRNA的表达及意义

目的：探讨Galectin-3蛋白及mRNA在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的表达及其意义。方法：应用免疫组化及原位杂交方法检测50例ESCC、19例癌旁不典型增生组织及50例正常食管黏膜组织中Galectin-3蛋白及mRNA的表达。结果：ESCC、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中Galectin-3蛋白的阳性表达率依次降低,分别为72.0%（36/50）、47.4%（9/19）和24.0%（12/50）,组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）; ESCC、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中Galectin-3 mRNA的阳性表达率依次降低,分别为66.0%（33/50）、31.6%（6/19）和20.0%（10/50）,组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）;Galectin-3蛋白及mRNA的表达均与ESCC的组织分级、淋巴结转移密切相关（P＜0.05）。结论：Galectin-3蛋白及mRNA表达与ESCC的发生、发展和转移密切相关,联合检测Galectin-3蛋白及mRNA表达可望成为ESCC早期诊断和预后判断的分子指标之一。     

食管鳞癌nm23-H1及基质金属蛋白酶-7蛋白表达的临床病理意义

目的探讨nm23-H1及基质金属蛋白酶-7(MMP-7)的表达与食管癌发生、发展及浸润、转移的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测60例食管鳞癌组织、30例癌旁不典型增生组织及60例正常食管黏膜组织中nm23-H1及MMP-7蛋白表达。结果食管鳞癌组织中nm23-H1蛋白表达与癌的浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05);MMP-7蛋白表达与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05);在食管上皮癌变过程中nm23-H1蛋白表达在正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及癌组织中的表达率依次降低,分别为95.0%(57/60)、56.7%(17/30)、21.7%(13/60),组间比较有明显差异(P<0.05);而MMP-7蛋白在癌组织及癌旁不典型增生组织表达率显著高于正常黏膜组织,分别为73.3%(43/60)、80.0%(24/30)、36.7%(22/60),组间比较有明显差异(P<0.05);nm23-H1与MMP-7的表达呈负相关关系(P<0.05)。结论nm23-H1和MMP-7在食管癌的浸润、转移及黏膜上皮癌变过程中起重要作用,nm23-H1及MMP-7的联合检测有望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一。     

PTEN基因mRNA和蛋白表达与胃癌病理生物学行为的关系

目的 :观察PTEN基因在胃癌发展不同阶段中的表达 ,探讨其作用机制。方法 :采用RT PCR方法和SABC免疫组化方法 ,对 4 9例胃癌及其相应的癌旁非癌胃粘膜中PTENmRNA和PTEN蛋白表达进行检测。结果 :PTENmRNA在非癌粘膜、早期胃癌、进展期胃癌的阳性表达率分别为 76 .3% ,4 5 .5 % ,34.2 % ;PTEN蛋白的阳性表达率为 10 0 % ,6 3.6 % ,4 7.4 %。进展期胃癌与非癌粘膜比较差别均十分显著 (P <0 .0 1)。两种检测方法具有相关性 (P <0 .0 5 )。PTEN表达下调与胃癌淋巴结转移和临床分期相关 (P <0 .0 5 )。胃癌组织学恶性行为与PTEN表达相关 (P <0 .0 5 )。结论 :PTEN基因可能参与胃癌的侵袭和转移过程。