外泌体在多发性骨髓瘤中的作用及其临床应用

外泌体是由细胞分泌的内含蛋白或核酸等活性物质、直径为35~120 nm的脂质双分子层囊泡。外泌体通过调控细胞间通讯，不仅参与调控细胞的正常生理过程，同时参与包括肿瘤在内的多种疾病的病理过程。肿瘤来源的外泌体参与肿瘤细胞与微环境的相互作用，并通过与转移、免疫抑制等相关信号通路刺激肿瘤的发生与发展。多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是最为常见的血液系恶性肿瘤之一，其具体发病机制尚未完全清楚，且缺乏安全、高效的诊疗手段。而外泌体因携带丰富的生物学信息，为肿瘤的治疗提供了一个新的靶点。因此，本文就外泌体在MM发生和发展中的作用及其以外泌体为基础的诊疗新方向作一综述。     

Celebrex对卵巢癌细胞的抑制作用研究

目的目的探讨选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂Celebrex对人卵巢癌细胞HO-8910的抑制作用及其机制。方法选用HO-8910体外培养,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、逆转录聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验检测Celebrex对HO-8910细胞生长以及COX-2 mRNA、前列腺素E2(PGE2)和白介素-6(IL-6)蛋白表达的影响。结果 Celebrex对HO-8910细胞的生长具有抑制作用,其效应具有时间-剂量依赖性,在达到一定作用时间和剂量时能明显降低PGE2和IL-6蛋白的表达,但不影响COX-2 mRNA的表达。结论 Celebrex可能主要是通过抑制COX-2活性及PGE2和IL-6等的表达而对卵巢癌发挥抑制效应。     

SLIPA喉罩应用于腹腔镜妇科手术的临床研究

目的观察SLIPA喉罩应用于全麻妇科腹腔镜手术的安全性和有效性。方法选取腹腔镜妇科手术患者120例,随机数表分组,奇数为SLIPA喉罩组(S组),偶数为气管插管组(T组),观察麻醉诱导前(T1)、管(罩)插入成功时(T2)、管罩插入后5min(T3)、管(罩)拔出前即刻(T4)、管(罩)拔出后即刻(T5)的平均动脉压(MAP)、心率(HR)变化。统计管(罩)一次插入成功率、术后躁动、恶心呕吐、咽痛、腹胀的发生率。结果在T2、T3、T4、T5时刻S组MAP值明显低于T组,HR慢于T组,差异有统计学意义;S组在一次性插管成功率、咽痛发生率高于T组,术后躁动、恶心呕吐发生率均低于T组,差异有统计学意义(P<0.05);两组腹胀发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SLIPA喉罩应用于妇科腹腔镜全麻手术操作简单、血流动力学稳定,不过因气囊压迫引发的咽痛值得关注。     

VEGF-C siRNA载体构建及其对转染食管癌细胞中VEGF-C表达的影响

目的 观察小分子干扰RNA(siRNA)对人食管癌细胞EC9706中血管内皮生长因子C(VEGF-C)表达的抑制作用.方法 根据siRNA设计原则,针对人VEGF-C cDNA序列设计并合成编码siRNA的寡核苷酸序列,并将其克隆入siRNA表达载体,构建重组质粒.将重组质粒转染入EC9706细胞株,通过免疫组织化学、RT-PCR和原位杂交法检测转染细胞中VEGF-C蛋白和mRNA的表达.结果 正常未转染(对照组)和无关序列转染(无关序列组)EC9706中,均有大量VEGF-c蛋白阳性棕色颗粒、mRNA阳性条带和紫蓝色阳性颗粒,而在siRNA转染EC9706(siRNA1-3组)中,仅有少量弱表达颗粒和较弱的阳性条带,与对照组和无关序列组相比,P均<0.01.结论 成功构建了VEGF-C siRNA载体.此载体能有效抑制人食管癌细胞EC9706中VEGF-C的表达,其可能成为抗食管癌淋巴管生成的一种新方法 .     

罗格列酮对肺纤维化大鼠TGF-β1 表达的影响

将45只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,模型组和治疗组大鼠气管内一次性滴注博莱霉素-A5(BLM-A5),对照组大鼠滴注等体积生理盐水.注药后治疗组灌服罗格列酮8 mg/(kg·d),对照组、模型组给予等体积生理盐水.各组动物于7、14、28 d随机处死5只,取肺组织进行HE和Masson染色,免疫组化法检测肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)的表达水平.HE染色示治疗组各时期肺泡炎和肺纤维化程度均较模型组轻;Masson 染色示治疗组胶原沉积明显少于模型组.治疗组与模型组各时期TGF-β1表达水平均有统计学差异.提示罗格列酮能减轻BLM-A5诱导的肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化,其机制可能与抑制肺组织TGF-β1表达有关.     

榄香烯对人肺腺癌SPC-A-1细胞VEGF-C及VEGFR-3表达的影响

目的探讨榄香烯对体外培养的人肺腺癌SPC-A-1细胞株血管内皮生长因子（VEGF-C）及其受体VEGFR-3表达水平的影响。方法采用免疫细胞化学方法对药物作用后的SPC-A-1细胞VEGF-C、VEGFR-3的表达水平进行检测。结果榄香烯能明显抑制肺腺癌SPC-A-1细胞的生长并降低VEGF-C、VEGFR-3的表达水平,而且有时间和浓度依赖性。结论榄香烯通过降低肺腺癌细胞VEGF-C、VEGFR-3的表达水平,从而遏制了肿瘤血管、淋巴管转移。     

HPA反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞中HPA蛋白表达的影响

目的　探讨乙酰肝素酶 (HPA)反义寡核苷酸 (ASODN)对人食管癌 EC970 6细胞中 HPA蛋白表达的影响。方法　将食管癌 EC970 6细胞体外分组贴壁培养 ,实验组分别用设计合成的 10、2 0、30 μm ol/ L 三种浓度的 4条封闭肝素酶不同基因位点的 ASODN(ASODN- t1 、ASODN- t2 、ASODN- t3、ASODN- t4 )。对照 组为 1条无关寡核苷酸 (N - ODN)转染 EC970 6细胞 ,对照 组为无转染。采用免疫组化 (SP)法检测各组 EC970 6细胞中HPA蛋白表达情况。结果　实验组中 3种浓度的 4条 HPA- t2 效应最强。不同浓度的 4条 HPA ASODN对EC970 6细胞中 HPA蛋白表达的影响无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ,但均低于对照 组及对照 组 (无转染 )(P<0 .0 5 )。结论　HPA ASODN可抑制食管癌 EC970 6细胞中 HPA蛋白表达。     

巨细胞病毒肝炎患儿血清IL-6、IL-8水平检测的意义

目的探讨巨细胞病毒肝炎(CMV-IgM抗体阳性)患儿血清中白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)水平的变化以及在巨细胞病毒肝炎发病机制中的作用。方法应用ELISA法分别检测了69例巨细胞病毒肝炎患儿血清IL-6、IL-8水平,同时测定血清胆红素、谷丙转氨酶(ALT)水平,然后分析它们之间的关系,并与68例健康小儿比较。结果 69例巨细胞病毒肝炎组血清IL-6、IL-8水平明显高于正常对照组(P<0.01);其中31例重症患儿血清IL-6、IL-8水平明显高于38例轻症患儿(P<0.01)。结论巨细胞病毒肝炎患儿血清IL-6、IL-8水平较正常明显增高,并且与肝脏的损伤程度呈正相关。     

Livin及Caspase-3在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的探讨凋亡抑制蛋白Livin和Caspase-3在上皮性卵巢癌组织中的表达及其临床意义。方法利用免疫组化技术SP法检测76例上皮性卵巢癌、24例良性卵巢瘤(对照组)中Livin和Caspase-3的表达情况。结果卵巢癌组Livin蛋白表达率81.58%显著高于对照组33.33%(P<0.05)。Caspase在卵巢癌组的阳性率47.37%显著低于对照组83.33%(P<0.05)。Livin蛋白在卵巢癌Ⅲ～Ⅳ期的表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ期(P<0.05),且肿瘤分化程度越低,Livin蛋白表达越强(P<0.05),伴淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者(P<0.05);但与卵巢癌的组织学类型无关(P>0.05)。卵巢癌组织中Livin与Caspase-3蛋白表达的负相关(χ2=3.981,P<0.05,r=-0.223)。结论 Livin表达升高和Caspase-3表达降低在上皮性卵巢癌的发生、发展过程中起重要作用,可能是影响卵巢癌预后的重要分子指标。     

基质金属蛋白酶抑制因子-1 小干扰RNA载体构建及对肝星状细胞沉默效应的研究

目的构建TIMP-1小干扰RNA(siRNA)真核表达载体并观察其对肝星状细胞株TIMP-1 mRNA表达的作用。方法根据siRNA设计原则,在TIMP-1 mRNA序列中选择2个特异性靶序列(447～465 nt、552～540 nt)及1条无关对照序列,体外合成对应发卡样DNA片段,将其克隆入pGEM-T连接载体,BamH I和Xho I分别双酶切pGEM-T及表达载体pRNAT-U6.2,胶回收粘末端将特异序列定向亚克隆构建TIMP-1 pRNAT-U6.2/siRNA载体,用脂质体包裹转染入T6细胞,采用RT-PCR检测TIMP-1 mRNA表达水平的变化。结果所构建的TIMP-1 pRNAT- U6.2/siRNA载体,经酶切鉴定与测序,结果显示特定位点靶序列与设计序列完全一致;转染T6细胞后,TIMP-1 mRNA表达明显降低。结论成功构建TIMP-1 siRNA载体TIMP-1 pRNAT U6.2/siRNA,转染T6细胞可以有效抑制TIMP-1 mRNA的表达。