稳定表达磷酸化Stat3蛋白的EC-1细胞株的获取

目的:建立稳定表达磷酸化Stat3(p-Stat3)蛋白的EC-1细胞株。方法:应用脂质体Lipofectamine2000将pXJ40-Stat3质粒转染入EC-1细胞中,G418筛选得稳定转染pXJ40-Stat3的EC-1细胞株,IL-6处理20min以获得稳定表达p-Stat3蛋白的EC-1细胞株(转染pXJ40-Stat3+IL-6处理组)。同时以稳定转染pXJ40-Stat3(转染pXJ40-Stat3组)、IL-6处理组(不转染)、空载体组和空白组细胞作为对照。分别用RT-PCR和Western blot法检测各组细胞中Stat3 mRNA和p-Stat3蛋白的表达。结果:5组细胞中Stat3 mRNA和p-Stat3表达差异有统计学意义(FStat3 mRNA=5.971,P=0.010;Fp-Stat3=7.334,P=0.005)。转染pXJ40-Stat3+IL-6处理组EC-1细胞中Stat3 mRNA表达最高(0.72±0.01),其次是转染pXJ40-Stat3组(0.65±0.01),均高于其他3组。转染pXJ40-Stat3+IL-6处理组EC-1细胞中p-Stat3蛋白表达最高(0.72±0.03),其次为IL-6处理组(0.65±0.01),均高于其他3组。结论:成功建立稳定表达p-Stat3蛋白的EC-1细胞株。     

ADC联合DWI鉴别中枢神经细胞瘤与室管膜瘤的诊断价值

【摘要】目的：利用磁共振成像ADC值的测定,联合DWI磁共振成像探讨中枢神经细胞瘤与室管膜瘤的鉴别诊断。方法：回顾性分析本院经手术及病理检查证实的发生于侧脑室内,15例中枢神经细胞瘤和15例室管膜瘤患者常规MRI平扫、增强、DWI信号强度,并测量肿瘤实质病变的平均ADC值,观察比较两组肿瘤的DWI信号强度和ADC值,运用ROC曲线评价ADC值的诊断价值,统计学分析采用两样本t检验。结果：15例中枢神经细胞瘤DWI上均呈高或稍高信号,ADC 均值( 0．69±0.11)×10-3mm2/s;15例室管膜瘤DWI上12例呈等或稍高信号,3例呈低信号,ADC均值(1.10±0.24)×10-3mm2/s,两组肿瘤的平均ADC值比较具有统计学意义(P＜0.01)。ADC值诊断中枢神经细胞瘤的灵敏度为100%,特异度为92.9%。结论：磁共振成像ADC值的测定辅助DWI信号强度有利于提高中枢神经细胞瘤和室管膜瘤的术前诊断及鉴别诊断。     

VEGF-C siRNA载体构建及其对转染食管癌细胞中VEGF-C表达的影响

目的 观察小分子干扰RNA(siRNA)对人食管癌细胞EC9706中血管内皮生长因子C(VEGF-C)表达的抑制作用.方法 根据siRNA设计原则,针对人VEGF-C cDNA序列设计并合成编码siRNA的寡核苷酸序列,并将其克隆入siRNA表达载体,构建重组质粒.将重组质粒转染入EC9706细胞株,通过免疫组织化学、RT-PCR和原位杂交法检测转染细胞中VEGF-C蛋白和mRNA的表达.结果 正常未转染(对照组)和无关序列转染(无关序列组)EC9706中,均有大量VEGF-c蛋白阳性棕色颗粒、mRNA阳性条带和紫蓝色阳性颗粒,而在siRNA转染EC9706(siRNA1-3组)中,仅有少量弱表达颗粒和较弱的阳性条带,与对照组和无关序列组相比,P均<0.01.结论 成功构建了VEGF-C siRNA载体.此载体能有效抑制人食管癌细胞EC9706中VEGF-C的表达,其可能成为抗食管癌淋巴管生成的一种新方法 .     

门脉高压断流术后远期并发下消化道出血

本文通过采集我院近 8年来的离断术后出现下消化道出血的病例 ,对其原因、发生率、临床表现及处理原则进行综合分析 ,以期提供良好的预防和治疗措施。1　临床资料本文收集我院 1992年 1月～ 1997年 12月因门脉高压症上消化道出血而行贲门周围血管离断术的患者 30 2例 ,其中13例又出现下消化道出血 (发生率 4 3% ,13/30 2 ) ,其中男 4例 ,女 9例 ,年龄 35～ 6 2岁 ,平均 44 6 2± 31 18岁。术后出现下消化道出血最短 2ａ ,最长达 12ａ ,平均 7ａ。13例中急性大出血 1例 ,活动性出血 (间歇反复血便或黑便 ) 6例 ,隐性出血 (间歇反复大便隐血…     

食管鳞癌微血管密度与病理特征关系探讨

目的 探讨食管鳞癌组织中微血管密度与食管癌临床病理特征之间的关系。方法 应用抗CD34抗体检测食管鳞癌组织中MVD。结果 不同大小肿瘤组间MVD比较无明显差异（P〉0．05）；不同分化程度食管鳞癌MVD比较差异有显著性（P〈0．05）；不同浸润深度食管鳞癌MVD比较差异有显著性（P〈0．05）；有淋巴结转移组MVD与无淋巴结转移组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 MVD与食管鳞癌的分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关。     

食管鳞癌组织中淋巴管生成2种检测方法比较

目的:探讨人食管鳞癌组织中淋巴管生成灵敏的检测方法.方法:分别采用免疫组化SP法(以血管内皮生长因子受体-3为淋巴管特异性标记物)和酶组织化学法检测49例食管鳞癌组织和癌旁组织中淋巴管密度(分别记为LVDi与LVDe).结果:癌组织中LVDe的表达和癌旁组织中LVDi、LVDe的表达在有、无淋巴结转移时差异均有统计学意义(P＜0.01).有淋巴结转移癌组织中LVDi与LVDe之间差异有统计学意义(P＜0.01).结论:酶组织化学法可较好地显示食管鳞癌组织中的淋巴管.     

食管鳞癌组织中淋巴管表达的定量分析及其临床病理意义

目的探讨人食管鳞癌组织中的淋巴管生成及其与淋巴结转移的临床意义。方法采用酶组织化学法,检测49例食管鳞癌、癌旁及切端正常食管上皮组织中淋巴管的生成及定位特征,并应用图像分析方法测定淋巴管数量和阳性单位、及其与淋巴结癌转移的关系。结果肿瘤组织中淋巴管生成和阳性单位均与淋巴结转移密切相关(P<0.01),癌旁组织中淋巴管密度高于癌组织(P<0.01),酶组织化学法可较好地显示食管鳞癌组织中的淋巴管。结论食管鳞癌的淋巴管形成与淋巴结转移相关,为肿瘤细胞淋巴道转移提供了条件。     

转录调节因子Ets-1在结直肠癌组织中的表达

目的:研究Ets-1在结直肠组织中的表达,探讨其与结直肠癌发生和发展的关系。方法:采用免疫组织化学S-P法,检测Ets-1在80例病理活检和手术切除结直肠癌标本中的表达。结果:Ets-1蛋白在结直肠癌组织中的表达明显高于其正常黏膜组织(P<0.05),在癌深度浸润组的表达明显高于浅度浸润组(P<0.05),而与肿瘤的分化程度和淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:Ets-1蛋白的高表达可能与结直肠癌的癌变及浸润的发生有关。     

人胚甲状旁腺细胞移植供体胎龄的选择

目的研究人胚甲状旁腺细胞移植治疗甲状旁腺功能低下(HPI)中供体最佳胎龄段.方法将12周～32周龄水囊引产的死胎(死亡时间＜2h)的甲状旁腺切取后进行体外培养,定期测量培养液中甲状旁腺激素(PIH)水平,同时对甲状旁腺细胞进行光镜电镜检查,以确定最适合甲状旁腺细胞移植的供体胎龄段.结果16周～24周龄供体的甲状旁腺细胞经体外培养后,其分泌Pm功能良好,其细胞形态及其超微结构保持良好.结论16用～24周龄的供体最适合作甲状旁腺细胞移植.     

逆转录法制备地高辛标记的食管癌cDNA探针

目的 :制备食管癌cDNA探针用于ReverseNorthernBlot筛选差异基因片段。方法 :提取食管癌组织总RNA ,通过逆转录反应 ,用地高辛标记为cDNA探针。结果 :所制备的探针灵敏度高达 0 .0 1ng/L。结论 :用该方法制备cDNA探针快速、经济 ,所需模板RNA量少 ,可用于大规模初筛差异基因片段的研究。