系统性红斑狼疮患者外周血T细胞TCRβ链CDR3谱系漂移和序列鉴定

目的 探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血T细胞TCRβ链CDR3谱系漂移，为SLE的免疫应答机制和个性化治疗研究提供基础。方法 采用免疫扫描谱型分析技术，分析5例正常献血员的CDR3分布特征及5例SLE患者PBMC中T细胞TCRβ链CDR3的优势利用情况，对克隆性增生T细胞的CDR3区进行序列分析。结果 5例正常献血员PBMC TCR BV CDR3谱型均呈高斯分布，5例活动型SLE患者24TCR BV CDR3家族均出现不同的优势表达。对单／寡克隆性增生T细胞B链CDR3区基因进行测序，证实存在不同的CDR3序列。结论 SLE活动期外周血T细胞TCRβ链CDR3谱系出现明显漂移，提示CDR3的选择性表达可能与SLE的免疫发病机理有关。特异应答的T细胞TCRCDR3序列的确定，将为SLE的发病机制研究和个性化治疗提供新的方法与手段。     

肺结核患者外周血alpha/betaT细胞CDR3谱系研究

[摘要] 目的 探讨活动性肺结核患者外周血T细胞TCR α、 链CDR3 谱系漂移，为肺结核患者特异性T细胞免疫应答机制和免疫治疗研究提供基础。方法 采用基因扫描谱型分析技术，分析6例正常献血员及6例活动性肺结核患者PBMC中T细胞TCR CDR3谱型分布特征及患者TCR Vα和Vβ基因家族的优势取用情况，对克隆性增生T 细胞CDR3区进行序列分析。结果 6例正常献血员外周血中TCR 32 Vα、24 Vβ家族CDR3谱型均呈高斯分布（gaussian distribution），6例活动性肺结核患者出现不同Vα和Vβ家族优势取用，对部分单/寡克隆增生T细胞α、 链CDR3区基因进行测序，证实存在不同的CDR3序列。结论 肺结核患者活动期外周血T细胞TCR α、 链CDR3谱系出现明显漂移，提示CDR3的选择性表达与结核患者细胞免疫应答机制有关，优势取用Vα、Vβ家族T细胞TCR CDR3序列的确定，为肺结核患者特异性T细胞免疫治疗研究提供基础。     

外周造血干细胞移植后及出现GVHD时T细胞β链CDR3谱型分析

目的 初步探讨外周造血干细胞(PBSC)移植后以及出现移植物抗宿主疾病(GVHD)时,外周血T细胞a链的CDR3谱型变化和特征.方法 采用免疫扫描谱型分析技术,监测1例重型β-地中海贫血移植前、移植后23 d、GVHD时(移植后28 d)患者外周血单核细胞(PBMC)及供者PBSC标本T细胞a链的CDR3谱型变化,基因扫描(GeneScan)和测序分析克隆性增生T细胞TCR分子特征.结果 患者移植前PBMC的24个TCR BV家族CDR3谱型均呈高斯分布,部分家族在移植后23 d、和GVHD时呈现为寡峰和单峰,同时部分家族消失,单克隆增生T细胞TCR beta链的测序结果 显示不同的CDR3区组成,设计特异的CDR3引物进一步分析提示其可能来源于干细胞移植后的分化.结论 PBSC移植后23 d,PBMC中的多数24TCRBV家族CDR3谱型表现为多克隆,GVHD时,部分家族出现明显的单、寡克隆增生,这些特异T细胞可能在GVHD中发挥重要作用.对移植前后TCRCDR3谱型和特异TCR分子特征的分析将有助于PBSC移植后免疫重建的评估和出现排斥反应时的特异性治疗.     

肺结核患者外周血αβT细胞CDR3谱系研究

目的探讨活动性肺结核患者外周血T细胞TCRα,β链CDR3谱系漂移,为肺结核患者特异性T细胞免疫应答机制和免疫治疗研究提供基础。方法采用基因扫描谱型分析技术,分析6例正常献血员及6例活动性肺结核患者PBMC中T细胞TCR CDR3谱型分布特征及患者TCRVα和Vβ基因家族的优势取用情况,对克隆性增生T细胞CDR3区进行序列分析。结果6例正常献血员外周血中TCR 32 Vα,24Vβ家族CDR3谱型均呈高斯分布(gaussian distribution),6例活动性肺结核患者出现不同Vα和Vβ家族优势取用,对部分单/寡克隆增生T细胞α,β链CDR3区基因进行测序,证实存在不同的CDR3序列。结论肺结核患者活动期外周血T细胞TCRα,β链CDR3谱系出现明显漂移,提示CDR3的选择性表达与结核患者细胞免疫应答机制有关,优势取用Vα,Vβ家族T细胞TCR CDR3序列的确定,为肺结核患者特异性T细胞免疫治疗研究提供基础。     

难治性天疱疮自体外周血干细胞移植后T细胞受体克隆性的分析

目的探讨难治性天疱疮患者自体外周血干细胞移植（APBSCT）前、后T细胞抗原受体B链（TCRl3）互补决定区3（CDR3）基因表达谱型变化,深入了解天疱疮发病机制以及患者造血干细胞移植后T细胞克隆的免疫重建特点。方法应用RT—PCR方法扩增天疱疮患者移植前、后外周血单个核细胞24个TCRl3CDR3区段基因序列,分析其基因表达情况。采用免疫扫描谱型分析技术,分析正常人外周血单核细胞TCRl3链CDR3谱型分布特征,以及难治性天疱疮患者干细胞移植前、后CDR3谱型变化情况。结果动员前天疱疮患者TCRl3CDR3谱型均出现异常,表现为一定程度的T细胞单（寡）克隆增生性表达;移植后12个月内仍出现部分表达缺失及寡克隆表达;而后T细胞克隆分布渐趋于正常,CDR3恢复多态性。结论难治性天疱疮患者外周血T细胞表现单（寡）克隆增生,CDR3多态性降低,可能与其发病机制有关。APBSCT后的免疫功能重建恢复了CDR3的多态性,提示造血干细胞移植是治疗难治性天疱疮的有效手段。     

多系统萎缩患者TCR α链CDR3谱系的荧光定量PCR溶解曲线

目的：利用荧光定量PCR溶解曲线分析技术检测1例多系统萎缩患者TCR α链CDR3谱系。方法：提取1例多系统萎缩患者和1例正常人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）中的总RNA,逆转录成cDNA,以32个人TCR α链胚系可变区基因家族（TRAV）设计上游引物,共同的TCR α链恒定区基因家族（TRAC）设计下游引物,荧光定量PCR（FQ—PCR）扩增32个TRAV基因各家族CDR3谱系,溶解曲线法分析各家族CDR3谱系的单、寡、多克隆增生,挑选单克隆进行PCR扩增,扩增产物行普通琼脂糖凝胶回收后测序分析。结果：多系统萎缩患者和正常人PBMC的32个TCR α链TRAV家族CDR3谱型的FQ—PCR产物的各家族相对定量表达不一;正常人的32个TCR α链TRAV家族CDR3谱型的溶解曲线图表现为多个峰型的高斯分布,多系统萎缩患者的TRAV10、TRAV15、TRAV29家族CDR3谱型的溶解曲线表现为单峰的克隆性增生,其他家族为多峰、寡峰的多克隆及寡克隆增生,未出现缺失的家族,对单峰的TRAV15家族的测序得到的CDR3区的氨基酸组成为：SAIYFCAEDRDSTLTFG。结论：该多系统萎缩患者的PMBC中,存在TCR α链CDR3谱系漂移。     

乳腺癌转移淋巴结T细胞克隆性分析

目的分析乳腺癌患者转移淋巴结中TCR BV亚家族T细胞的克隆性分布特点。方法选取2例反应性增生淋巴结及10例乳腺癌转移淋巴结标本,应用RT-PCR方法扩增T细胞24个TCRβ链可变区(BV)亚家族的互补决定区3(CDR3)基因,经基因扫描确定T细胞克隆性。结果乳腺癌转移淋巴结中T细胞存在克隆性增生,增生形式包括单、寡克隆及多克隆。不同患者增生T细胞克隆中均存在TCR谱型偏移,仅表达2~5个BV亚家族。结论乳腺癌转移淋巴结内克隆性T细胞TCR BV亚家族存在选择性取用特点,可能与机体对乳腺癌相关抗原的特异性免疫反应有关。     

系统性红斑狼疮自体外周血干细胞移植T细胞克隆基因谱型变化

目的 通过系统性红斑狼疮(SLE)自体外周血干细胞移植(APBSCT)前后T细胞受体B(TCRβ)CDR3基因表达谱型的变化,探讨SLE发病机理以及患者干细胞移植后T淋巴细胞克隆的免疫重建特征。方法 应用RT-PCR扩增APBSCT的SLE患者外周血的TCRβ可变区(V)25个家族的基因序列,在长泳道测序胶上电泳,形成TCRβCDR3基因表达谱型图。通过谱型图上电泳条带分析SLE移植前T细胞克隆增生的特征以及移植后T细胞克隆群的变化,做增生T细胞克隆的TCRβ基因序列分析,了解TCRβ基因与自身免疫病的相关性。结果 正常HCRβV25个家族的基因序列电泳后分别出现呈高斯分布的10余条电泳条带,组成CDR3基因表达谱型图。8例SLE患者谱型图均出现异常,4例TCRβ在β3V13．1基因家族T细胞出现寡克隆增生,3例在βV8,βV9,βVl5家族中出现寡克隆性增生。APBSCT后T细胞克隆分布趋于正常,CDR3恢复多态性,部分恢复到正常TCRβ基因分布。测序结果显示谱型图上单一条带过度浓集往往是单克隆或者寡克隆T细胞增殖;发现SLE一个异常T细胞克隆的TCRβV8 CDR3氨基酸序列与已报道强直性脊椎炎疾病相关克隆完全一致。结论 SLE患者出现T细胞寡克隆增生,增生的T细胞克隆可能与自身免疫病发病有关。APBSCT后免疫重建,抑制了致病的T细胞寡克隆,可能是移植后SLE治疗缓解的主要因素。     

慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞受体谱型特征及其与干扰素抗病毒近期疗效的关系

目的了解慢性乙型肝炎(CHB)患者细胞免疫功能,并探讨与干扰素-α抗病毒治疗早期病毒学应答的关系。方法入选19例接受干扰素-α治疗的CHB患者,治疗前收集外周血5 mL,分离并提取单个核细胞(PBMC)中的总RNA,利用反转录-荧光定量聚合酶链反应扩增T细胞受体(TCR)各β链可变区(BV)家族互补决定区3(CDR3)基因,溶解曲线分析各BV家族CDR3谱系的克隆性增生情况,同时观察治疗前及治疗3个月乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)、肝功能水平变化。结果 19例CHB患者治疗前外周血TCR BV家族CDR3谱型均发生不同程度的单、寡及偏峰性克隆增生;治疗3个月时谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平及HBV-DNA载量较治疗前均显著下降(P<0.01);病毒学应答组较无应答组TRBV CDR3克隆增生异常率、HBV-DNA载量及ALT水平差异均无统计学意义(P>0.05),应答组AST水平显著高于无应答组(P<0.05)。结论 CHB患者外周血T淋巴细胞存在不同程度的克隆性增生,且细胞免疫功能与干扰素-α抗病毒治疗的早期病毒学应答效果间无相关性,采用细胞免疫功能状态来评估干扰素抗病毒近期疗效存在局限性。     

结直肠癌患者外周血呈现T细胞寡克隆增殖

目的:通过结直肠癌患者术前外周血T淋巴细胞的T细胞受体(TCRβ)基因谱型,了解肿瘤患者外周血中T细胞克隆特征以及机体抗肿瘤免疫状况.方法: 采用RT-PCR方法扩增结直肠癌患者术前外周血、肿瘤组织和术后外周血TCRβ基因的24个V基因片段,经过特殊的测序凝胶分离和银染色后,确定它们的TCRβV基因表达谱型.通过PCR产物直接测序的方法,分析克隆性增殖的特征和CDR3区氨基酸序列.结果: 结直肠癌患者术前外周血的TCRβ基因谱型中具有克隆性表达条带,其中有些克隆的CDR3区与肿瘤组织肿瘤浸润性淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)中克隆性表达的TCRβ基因的CDR3区具有相同的氨基酸基序;临床特征表现为肿瘤局部有淋巴结转移,但是术后10个月没有复发.结论: 结直肠癌患者外周血具有与肿瘤负荷相关的T淋巴细胞克隆性增生,可能是肿瘤相关抗原特异性的抗肿瘤T淋巴细胞克隆.     

佛山地区妊娠图的研究

目的 重新绘制佛山地区正常孕妇宫高、腹围和体重妊娠图.方法 回顾性分析了该院分娩的3 098名新生儿体重分布,前瞻性地测量6 866例次正常孕妇20～42周宫高、腹围和体重,确立各孕周三者的正常数值范围及宫高警戒线.结果 经临床验证,运用所绘制的妊娠图可发现87％的小于胎龄儿、76％的大于胎龄儿,孕期应用妊娠图监测能较早地发现胎儿宫内发育异常.结论 妊娠图具有方法简单、对比性强、实用价值高等优点,可供佛山地区产前诊断参考.     

急性心肌梗死梗死区与非梗死区导联的ST段改变

目的　探讨急性心肌梗死梗死区与非梗死区导联ST段变化及临床意义。　方法　 36例急性前壁心肌梗死 (AAMI)和 2 8例急性下壁心肌梗死 (AIMI)患者 ,对梗死区与非梗死区导联ST段变化及其与冠状动脉造影结果作相关分析。　结果　AAMI有下壁导联ST段压低中Ⅰ、avL导联ST段抬高占70 .5 9% (P <0 .0 1) ,左前降支近段病变占 76 .4 7% ,而冠脉多支病变与ST段压低差异无显著性。AIMI组Ⅰ、avL导联ST段压低占 71.4 2 % ,冠脉多支病变中Ⅴ4～Ⅴ6导联ST段压低占 5 2 .17% (P <0 .0 1)。　结论　AAMI或AIMI时Ⅰ、avL与Ⅱ、Ⅲ、avF导联ST段抬高与压低呈对应“镜像”改变 ;AAMI时下壁导联ST段压低 ,病变多位于左前降支近段 ,梗死面积大 ;AIMI时Ⅴ4～Ⅴ6的ST段压低则反映冠脉多支病变。AMI的ECG早期鉴别诊断有助于识别高危患者。     

河北省HIV-1 RNA基因gag区和env区亚型分析

目的分析河北省新确认艾滋病感染者HIV-1 RNA基因gag区和env区亚型分布情况。方法采用巢式PCR的方法扩增gag和env基因,测定其序列,并与国际标准亚型毒株进行对比。结果河北省内HIV-1主要流行毒株为CRF01-AE,占41.5%(56/135);其次是B亚型毒株和BC重组亚型毒株,各占40.7%(55/135)和16.3%(22/135);C亚型占1.5%(2/135)。结论河北省HIV-1流行亚型日益多样化,应加强防控,特别是性传播的防控成为当务之急。     

一夜丹田手自摩

苏东坡是北宋一代文豪,他擅长养生之道,除了慎饮食起居,节声色之欲,能劳能逸和安分养福外,还经常以手摩腹,并为此吟出了一夜丹田手自摩的诗句。自摩养生术简单易学,对健康的功效却神奇持久。     

颅颈交界区的显微解剖研究

目的：提供颅颈交界区翔实的显微解剖学资料,以提高该区手术的安全性。方法：对10例成人尸头标本进行显微解剖,对颅颈交界区相关的重要解剖结构进行观察、测量和拍照;在10例干性颅骨标本上,对颅颈交界区相关的骨性结构进行观察、测量和拍照。结果：颅颈交界区包括众多的肌肉、血管、神经结构,它们的关系复杂;椎动脉在该区行程曲折。结论：观察和测量的结果有助于术中重要结构的识别和保护。     

成人腹股沟区多排螺旋CT解剖

目的:探讨多层螺旋CT对显示正常成人腹股沟区解剖结构的价值.方法:对20例正常成人腹股沟区进行MDCT扫描,从轴位、冠状位、矢状位及MPR上观察腹股沟重要解剖结构,并对双侧结构进行比较.结果:腹壁下动脉、内环、腹股沟韧带、腹股沟管、精索及子宫圆韧带100％显示,其中腹股沟韧带、腹股沟管和股三角、腹股沟三角在多平面重组显示最好.腹股沟管浅环在男性中显示率约60％(6/10).右侧内环位置较左侧低[右侧(46.4±7.6)mm,左侧(45.3±8.6)mm,P=0.049],差异有统计学意义.其他双侧结构(包括腹直肌宽度P=0.774、腹直肌厚度P=0.385、腹股沟韧带长度P=0.400、内环到髂棘垂直线距离P=0.186、腹股沟管与腹股沟韧带夹角P=0.837、腹股沟管长度P=0.337、内环到中线距离P=0.599、腹股沟管与前壁夹角P=0.279)对比,差异无统计学意义.结论:MDCT可满意地显示正常成人腹股沟区解剖结构,为临床及基础解剖研究提供一种新的途径.     

松果体区肿瘤围手术期护理

目的：总结松果体区肿瘤围手术期护理的经验。方法：对26例松果体区肿瘤显微手术切除患者进行了统计和分析。结果：26例患者术后无死亡和重残,3例后期复发。结论：加强松果体区肿瘤围手术期护理,尤其是脑积水的护理是手术成功与康复的关键。     

Necrotising fasciitis of the submandibular region

SummaryTwo cases of necrotizing fasciitis (NF) complicating different conditions of the maxillofacial region, treated at the Korle Bu Teaching Hospital are reported. These were managed by an early diagnosis, aggressive surgical exploration, fasciotomies and debridement of necrotic tissue. In addition, frequent irrigation within the fascial planes with eusol and saline solutions plus the administration of broad spectrum antibiotics ensured early containment of the spread of the infection. Our early recognition of the signs and symptoms of NF led to an early intervention resulting in minimal residual skin defects which even though were not skin-grafted healed satisfactorily.