HPA反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞中HPA蛋白表达的影响

目的　探讨乙酰肝素酶 (HPA)反义寡核苷酸 (ASODN)对人食管癌 EC970 6细胞中 HPA蛋白表达的影响。方法　将食管癌 EC970 6细胞体外分组贴壁培养 ,实验组分别用设计合成的 10、2 0、30 μm ol/ L 三种浓度的 4条封闭肝素酶不同基因位点的 ASODN(ASODN- t1 、ASODN- t2 、ASODN- t3、ASODN- t4 )。对照 组为 1条无关寡核苷酸 (N - ODN)转染 EC970 6细胞 ,对照 组为无转染。采用免疫组化 (SP)法检测各组 EC970 6细胞中HPA蛋白表达情况。结果　实验组中 3种浓度的 4条 HPA- t2 效应最强。不同浓度的 4条 HPA ASODN对EC970 6细胞中 HPA蛋白表达的影响无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ,但均低于对照 组及对照 组 (无转染 )(P<0 .0 5 )。结论　HPA ASODN可抑制食管癌 EC970 6细胞中 HPA蛋白表达。     

沉默mGluR5对卵巢癌SKOV3细胞生物学特性的影响及其机制研究

目的 探讨小干扰RNA（siRNA）靶向代谢型谷氨酸受体5（mGluR5）对卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响及可能的机制。方法 采用靶向mGluR5表达的特异siRNA 转染卵巢癌SKOV3细胞（转染组）,同时设置转染无义序列的阴性对照组。转染48 h,采用实时荧光定量PCR（QPCR）检测siRNA对mGluR5的沉默效果;采用CCK-8法、EdU细胞荧光染色实验、Hoechst 33342细胞染色实验、划痕实验检测沉默mGluR5表达后SKOV3细胞的活性、增殖、凋亡和迁移情况;采用Western blotting检测PTEN／Akt信号通路相关蛋白的表达情况。结果 QPCR检测显示,转染组中mGluR5 mRNA的表达水平降至（18.3±2.3）％,显著低于阴性对照组（P＜0.05）。CCK-8法检测显示,转染72 h阴性对照组的吸光值为4.1±0.2,高于转染组的2.4±0.3（P＜0.05）。EdU免疫荧光染色实验显示,转染48 h阴性对照组的细胞增殖率为（22.4±2.3）％,高于转染组的（9.2±1.2）％（P＜0.05）。Hoechst 33342细胞染色实验显示,转染48 h阴性对照组的细胞凋亡率为（6.2±1.3）％,低于转染组的（28.2±2.2）％（P＜0.05）。划痕实验显示,阴性对照组的相对划痕愈合比例为（100.0±2.1）％,显著高于转染组的（48.6±4.3）％（P＜0.05）。Western blotting检测显示,转染组PTEN蛋白的表达增加,p-Akt蛋白的表达降低（P＜0.05）;而Akt蛋白无明显变化（P＞0.05）。结论 沉默mGluR5表达能显著抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,促进凋亡,降低细胞迁移能力,该过程可能与激活PTEN／Akt信号通路有关。     

超声波快速石蜡切片的制备

传统的石蜡包埋方法仍是目前病理诊断中最可靠、准确的诊断方法之一 ,但由于操作时间长 (2— 3天 ) ,所以不适应现代临床医学快速诊断的要求。用冷冻切片法虽然较快 ,但易出现细胞肿胀等人为假象 ,且与传统石蜡切片方法相比形态学差别很大。为此我们将超声和电子温控技术应用于快速石蜡切片中 ,只需 1— 2ｈ左右 ,大大地提高了工作效率 ,且制片质量和效果近似于常规石蜡切片技术 ,完全符合病理诊断的要求。1　材料与方法1 1　材料　随机提取本院手术切除的各类标本 175例 ,取组织 2 43块 ,标本涉及皮肤、淋巴结、肌肉及各器官的正常组织、肿…     

Caveolin-1蛋白及mRNA在食管鳞状细胞癌组织中的表达

目的 探讨窖蛋白1(Caveolin-1)蛋白及mRNA在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及其意义.方法 应用免疫组织化学及原位杂交方法检测57例ESCC组织、34例癌旁不典型增生组织及57例正常食管黏膜组织中Caveolin-1蛋白及mRNA的表达.结果 ESCC组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中Caveolin-1蛋白的阳性表达率依次降低,分别为54.4%(31/57)、38.2%(13/34)和19.3%(11/57),组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);ESCC组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中Caveolin-1 mRNA的阳性表达率依次降低,分别为64.9%(37/57)、47.1%(16/34)和22.8%(13/57),组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);Caveolin-1蛋白及mRNA的表达均与ESCC的分化程度、浸润深度和淋巴结转移密切相关(P<0.05).结论 Caveolin-1蛋白及mRNA表达与ESCC的发生、发展和转移密切相关,可作为ESCC的一种标记物,联合检测Caveolin-1蛋白及mRNA在评估ESCC预后方面具有一定的临床价值.     

SISH检测乳腺癌HER2基因及17号染色体倍体分析

目的:评价银增强原位杂交(SISH)用于乳腺癌患者人表皮生长因子受体2(HER2)基因扩增状态检测的可行性和17号染色体多体的发生情况及其意义。方法:对90例手术后乳腺浸润性导管癌患者标本行全自动免疫组织化学(IHC)染色检测HER2蛋白表达,荧光原位杂交(FISH)和SISH检测HER2基因状态及17号染色体多体的发生率。结果:在IHC(3+)、(2+)、(1+/0)3组中,SISH检测与FISH检测在检测HER2基因扩增方面的总体符合率为96%。17号染色体多体的发生率在IHC(3+)、(2+)、(1+/0)3组中分别为44%,26%和0.02%,其总的发生率为18%。结论:SISH技术用于乳腺癌HER2基因状态检测结果与FISH相当,具有可行性和实际使用价值;17号染色体可能与乳腺癌患者的预后有关。     

肺鳞癌组织中缝隙连接蛋白43的表达

目的:检测肺鳞癌组织及癌旁正常肺组织中缝隙连接蛋白43(Connexin43)蛋白及mRNA的表达.方法:应用免疫组织化学SP法和原位杂交方法检测52例肺鳞癌组织及28例正常肺组织中Connexin43蛋白及mRNA的表达情况,并分析其表达与肺鳞癌转移的关系.结果:①正常肺组织和肺鳞癌组织中Connexin43蛋白阳性表达率分别为93%(26/28)和48%(25/52);mRNA的阳性表达率分别为96%(27/28)和54%(28/52).肺鳞癌组织中Connexin43蛋白及mRNA阳性表达率均低于正常肺组织(P均<0.05).②有淋巴结转移组肺鳞癌组织中Connex-in43蛋白及mRNA阳性表达率均为28%(7/25);无淋巴结转移组Connexin43蛋白及mRNA阳性表达率均为35%(16/27)和67%(18/27).2组比较差异均有统计学意义(P均<0.05).结论:Connexin43蛋白和mRNA低表达与肺鳞癌发生、发展及浸润、转移有关.     

显微分光光度计测量细胞DNA对肿瘤诊断和预后价值的研究

目的 :研究显微分光光度计测量细胞DNA对肿瘤诊断和预后的价值。方法 :应用OPTON 0 3型扫描分光光度计和改良的DNA Feulgen染色方法对 15例涎腺发生的肿瘤、17例恶性淋巴瘤、2 3例早期胃癌和 2 0例食管及贲门早期浅表癌的癌细胞DNA含量进行了测量。测量结果与病理组织学诊断及随访结果进行了对比分析。结果 :癌细胞DNA含量增高 ,胞核DNA含量分布广泛 ,出现非整倍体细胞核。非整倍体型早期食管癌的复发率较二倍体型早期食管癌高 (P <0 0 5 )。结论 :细胞光度术测量细胞DNA含量对鉴别良、恶性肿瘤可以提供客观依据。DNA倍体数对食管癌预后判断有一定价值。本研究建立的DNA Feulgen染色方法效果极佳。     

肺腺癌患者外周血及肿瘤浸润性淋巴细胞中Fas分子的表达及意义

目的 检测Fas分子在肺腺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)和外周血淋巴细胞(PBLs)中的表达,探讨Fas/FasL在肿瘤局部与全身免疫反应中的作用及临床意义.方法 用流式细胞术(FCM)对50例肺腺癌患者PBLs及TILs中Fas的表达进行定性定量分析,以48例正常人的PBLs为对照组.结果 Fas分子在肺腺癌患者TILs和PBLs中的表达率分别为16.8%和8.0%,对照组PBLs为12.6%,前者表达率明显高于后两者(P<0.05);而肺腺癌患者PBLs的Fas分子表达率明显低于对照组PBLs(P<0.05).结论 Fas分子在肺腺癌患者PBLs与TILs及其亚群中的表达不同,Fas/FasL在机体肿瘤局部及全身水平的免疫反应中起着重要作用. Abstract： Objective To study the Fas expression in tumor infiltrating lymphocytes (TILs)and peripheral blood lymphocytes(PBLs) from patients with pulmonary adenocarcinoma, and to investigate the clinical significance and the role of the Fas/FasL in local and systemic immune responses. Methods By flow cytometery(FCM),the expression of Fas molecule were detected on TILs and PBLs in 50 cases of lung adenocarcinoma and in 48 cases of normal healthy PBLs. Results Expression rate of Fas molecule on TILs and PBLs of lung adenocarcinoma patients was 16.8% and 8.0% respectively,and on PBL of normal controls was 12.6%. The former was significantly higher than the two latters(P<0.05). Expression rate of Fas molecule on PBLs of lung adenocarcinoma patients was significantly lower than the control group (P<0.05). Conclusions Expression of the Fas molecul on TILs and PBLs of lung adenocarcinoma patients is different. Fas/FasL pathway plays a major role in the fighting between immune system and tumor not only at local tumor site but also at systemic level.     

原发性输卵管恶性肿瘤46例临床病理分析

目的:探讨原发性输卵管恶性肿瘤的病理组织类型及临床特征.方法:回顾性分析46例原发性输卵管恶性肿瘤的临床资料及病理特点.结果:原发性输卵管恶性肿瘤患者大部分为绝经后妇女(80.43%),阴道异常排液或流血是最常见的症状,盆腔包块是最常见的体征;病理类型主要为输卵管浆液性腺癌(93.47%),单侧发病居多(69.57%)...     

心脏黏液瘤的免疫组织化学观察

目的 观察几种标记物在心脏黏液瘤（CM）组织中的表达。方法 应用免疫组化技术，检测12例CM组织中的FⅧAg、（calretinin)、S-100、NSE、vimentin、desmin、CK及CD117的表达特点。结果 12例Calretinin呈强阳性，4例CK阳性，6例S-100阳性，7例NSE、vimentin、desmin阳性。9例FⅧAg阳性，其中2例强阳性。12例CD117均阴性。结论 CM是一种呈多向分化的肿瘤。