黄芪建中汤抑制脾气虚证肺癌小鼠肿瘤转移的实验研究

目的:探讨黄芪建中汤对脾气虚证肺癌小鼠抑制肿瘤转移的作用机制。方法:苦寒泻下法建立小鼠脾气虚证Lewis肺癌模型,模型成功建立后,按实验设计方案处理各组小鼠,同时观察小鼠的整体情况。14 d后,眼球取血,检测血清木糖水平,28 d后,取胸腺、肺及肿瘤组织。分别称取每只小鼠胸腺重量、体重,计数肺转移结节数,计算胸腺指数,采用RT-PCR方法检测nm23、CD44的表达。结果:脾气虚小鼠的整体状况及免疫功能降低,高剂量黄芪建中汤可明显改善脾气虚证Lewis小鼠的整体情况,升高小鼠胸腺指数,结节数少于模型组;黄芪建中汤各剂量组均可下调CD44-mRNA的表达、上调nm23-mRNA的表达。结论:高剂量黄芪建中汤对脾气虚证肺癌小鼠肿瘤的转移具有一定的抑制作用能够,其机制可能与提高胸腺指数,下调CD44-mRNA及上调nm23的表达有关。     

仙鱼汤对小鼠Lewis肺癌的作用研究

[目的]探讨具有健脾清肺、化痰祛瘀作用的中药复方仙鱼汤对小鼠Lewis肺癌生长的抑制作用及其相关的分子机制.[方法]将50只Lewis肺癌荷瘤小鼠分为仙鱼汤高、中、低剂量组(剂量分别为1.747、0.874、0.437 g·kg-1·d-1),环磷酰胺(CTX)组(剂量为20 mg·kg-1·d-1),荷瘤模型组;计算各组小鼠平均瘤体质量及抑瘤率;制备单细胞悬液,采用流式细胞仪检测各组小鼠Lewis肺癌细胞周期、细胞凋亡率;采用免疫组化法检测各组Lewis肺癌小鼠的bcl-2基因的表达.[结果]仙鱼汤高、中、低剂量组及CTX组瘤体质量均低于模型组,肿瘤细胞凋亡率均高于模型组(P＜0.05或P＜0.01),仙鱼汤各组随着药物剂量的增大,抑瘤率和肿瘤细胞凋亡率逐渐增加.仙鱼汤高、中、低剂量组及CTX组处于S期的细胞比例均低于模型组(P＜0.05或P＜0.01),呈现明显的G0/G1期阻滞现象.仙鱼汤各剂量组bcl-2染色强度指数显著低于模型组(P＜0.01).[结论]仙鱼汤具有抑制小鼠Lewis肺癌生长的作用,其机理可能与通过降低bcl-2表达从而促进肿瘤细胞凋亡有关.     

黄芪针穴位注射对Lewis肺癌化疗小鼠nm23-H_1蛋白表达的影响

[目的]探讨黄芪针穴位注射对Lewis肺癌化疗小鼠nm23-H_1蛋白表达的影响。[方法]采用Lewis肺癌瘤株传代培养后移植法造模,将60只C57BL/6J近交系小鼠随机分为:正常组、模型组、化疗组、黄芪针穴位注射加化疗组、迈普新加化疗组,运用免疫组化法分析小鼠nm23-H_1的蛋白表达,观察各组小鼠的肿瘤抑制率和肺表面的转移结节数以及饮食和体重情况。[结果]黄芪针穴位注射加化疗对Lewis肺癌小鼠nm23-H_1的蛋白表达有明显促进作用;对肿瘤生长的抑制率最大,达到28.1%;肺脏表面的转移结节最少;能减轻化疗引起的体重减轻和饮食量减少等副作用。[结论]黄芪针穴位注射加化疗能明显抑制小鼠Lewis肺癌,其机制可能与促进小鼠nm23-H_1的蛋白表达有关。还具有减轻化疗引起的体重减轻、食欲下降等副作用的优点。     

固本抑瘤Ⅱ号对小鼠Lewis肺癌抑制作用及与化疗药联合应用的实验研究

目的探讨益气活血中药复方固本抑瘤Ⅱ号对小鼠Lewis肺癌的作用及与化疗药物环磷酰胺(CTX)合用的效果。方法60只C57BL/6小鼠随机分为:对照组,CTX化疗组(CTX)(30mg/kgCTX腹腔注射),固本抑瘤Ⅱ号中剂量组(M)35g/(kg.d)灌胃、高剂量组(H)70g/(kg.d)灌胃,固本抑瘤Ⅱ号中剂量加CTX组(M CTX)、高剂量加CTX组(H CTX),每组10只。观察固本抑瘤Ⅱ号对Lewis肺癌移植瘤与转移瘤的作用,及与CTX合用的效果。结果固本抑瘤Ⅱ号M组、H组的抑瘤率(IR)分别为23.35%、36.82%,瘤重分别为(2.82±1.56)g、(2.32±1.06)g,与对照组(3.68±1.10)g相比明显缩小,P均<0.05;M CTX组、H CTX组抑瘤率分别为71.49%、67.13%,与CTX组的63.35%抑瘤率相比未表现出明显差异;但联合用药效应为0.85相似文献   

克瘤丸对Lewis肺癌生长转移及VEGF、MVD表达的影响

目的 研究中药复方克瘤丸对Lewis肺癌生长转移及VEGF、MVD表达的影响,进一步探讨克瘤丸的抑瘤、抗转移作用及部分机理.方法 建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,观察克瘤丸对Lewis肺癌生长、转移及VEGF、MVD表达的影响.结果 克瘤丸大、中、小剂量组及联合用药组抑瘤率和NS组相比差异有统计学意义(P<0.01);克瘤丸大剂量、中剂量组能抑制Lewis肺转移灶数,与NS组相比差异有统计学意义(P<0.01);克瘤丸大、中、小剂量组及联合组的MVD表达与NS组相比明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05);克瘤丸大剂量组、联合组对VEGF表达较NS组显著下调,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 克瘤丸能抑制Lewis肺癌小鼠的肿瘤生长及肺转移;下调Lewis肺癌小鼠瘤体MVD、VEGF的表达.     

益肺清化膏对荷瘤小鼠瘤组织CD44、CD44v6、E-cad等mRNA表达水平的影响

目的:观察益肺清化膏对肺癌侵袭转移过程中粘附分子E-cad、CD44、CD44v6等mRNA表达水平的影响,以深入探讨该药的作用机制。方法:以RT-PCR检测用药后荷瘤小鼠体内移植的Lewis肿瘤细胞表达E-cad、CD44、CD44v6的情况。实验动物为C57BL/6j小鼠,随机分为高、低剂量中药两组、CTX组对照及空白对照组4组。每只小鼠均右侧腋窝皮下接种Lewis肺癌细胞匀浆液0.2ml/鼠。第2天开始灌胃给药,连续15d,CTX腹腔注射给药。每2d测小鼠体重,第21天颈椎脱臼处死动物,结束实验。留取瘤组织处理后行RT-PCR检查,以观察益肺清化膏对肺癌侵袭转移过程中粘附分子E-cad、CD44、CD44V6相应基因mRNA表达的影响。结果:E-cad的表达水平以高剂量中药组为首,其表达与对照组的表达水平存在非常显著的差异(P<0.01),与CTX组比较存在显著的差异(P<0.05)。CD44的表达水平高、低剂量中药组均呈低表达状态,其表达与对照组的表达水平存在显著的差异(P<0.05),与CTX组比较也存在着显著的差异(P<0.05)。CD44v6的表达水平与CD44的表达类似,高、低剂量中药组均呈低...     

三叶青乙酸乙酯提取物对小鼠Lewis肺癌的抑制作用

目的探讨三叶青乙酸乙酯提取物对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑瘤效应及其作用机制。方法采用动物移植性肿瘤实验法腋下接种Lewis肺癌细胞制备小鼠荷瘤模型。观察三叶青乙酸乙酯提取物对瘤重、抑瘤率的影响;并用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡,免疫组化法和real time RT-PCR法检测瘤组织中Bcl-2、Bax、caspase-3的表达。结果三叶青各剂量组抑瘤率和肿瘤细胞凋亡率均高于模型对照组(P<0.05或P<0.01),其效应呈浓度依赖性;各剂量组Bcl-2的蛋白和mRNA表达下降(P<0.05或P<0.01)、Bax的蛋白和mRNA表达上升(P<0.05或P<0.01)、高剂量组caspase-3的蛋白表达上升(P<0.05)。结论中药三叶青乙酸乙酯提取物能抑制小鼠Lewis肺癌细胞的生长,可能与其促进肿瘤细胞坏死及下调Bcl-2、上调Bax和caspase-3从而促进肿瘤细胞凋亡有关。     

苦参碱对小鼠Lewis肺癌的影响

目的 研究苦参碱对小鼠 Lewis 肺癌的作用,并初步探讨其作用机制。方法 建立小鼠 Lewis 肺癌模型,实验分为模型组、不同剂量苦参碱组、环磷酰胺组,计算原发瘤抑制率及肺转移灶数;采用 Western blotting 检测原发瘤组织基质金属蛋白酶 (MMP-2、MMP-9) 蛋白表达。结果 苦参碱各剂量组小鼠原发瘤抑制率、肺转移灶数与模型组比较差异显著 (P＜0.05、0.01);与模型组比较,苦参碱各剂量组 MMP-2、MMP-9 蛋白表达水平显著降低 (P＜0.01)。结论 苦参碱明显抑制小鼠 Lewis 肺癌原发瘤的生长和转移,可能与其抑制肿瘤组织 MMP-2 和 MMP-9 蛋白表达有关。     

健脾补肾方对小鼠Lewis肺癌抑制作用及对VEGF、CD44V6表达的影响

目的观察健脾补肾方对小鼠Lewis肺癌抗肿瘤作用,并探索其抗肿瘤的相关机制。方法采用Lewis肺癌移植瘤C57BL/6小鼠模型观察健脾补肾方抗肿瘤作用,并采用免疫组化法检测肿瘤组织血管内皮细胞生长因子(VEGF)和细胞黏附因子第6变异株(CD44V6)蛋白的表达情况。结果①环磷酰胺组(CTX)、健脾补肾方低剂量组、健脾补肾方低剂量加环磷酰胺组、健脾补肾方高剂量加环磷酰胺组对移植性Lewis肺癌小鼠瘤体的抑制率为44%、17.7%、53.9%和72.4%,以健脾补肾方高剂量加环磷酰胺组抑制作用最佳;②与对照组相比,健脾补肾方低剂量组能增加荷瘤小鼠脾指数,有统计学意义(P<0.05)。低、高剂量健脾补肾方与CTX合用,能对CTX所致荷瘤小鼠脾脏萎缩有一定的拮抗作用;③健脾补肾方与环磷酰胺联合用药表现为两药作用相加;④健脾补肾方能下调Lewis肺癌小鼠肿瘤组织VEGF、CD44V6蛋白的表达水平。结论健脾补肾方对小鼠Lewis肺癌具有显著的抗肿瘤作用,以健脾补肾方高剂量加环磷酰胺组最佳,两药合用有相加作用,其作用机制可能与该药能降低肿瘤组织VEGF、CD44V6蛋白的表达水平有关。     

人参瓜蒌莪术汤对小鼠Lewis肺癌端粒酶活性的影响

目的:研究人参瓜蒌莪术汤(RGE)对Lewis肺癌模型小鼠的治疗作用及机制.方法:建立小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,分为模型对照组(NS组),环磷酰胺对照组(CP组),RGE高、中、低剂量组.在计算抑瘤率的基础上,运用PCR-ELISA法检测瘤组织端粒酶活性.结果:RGE低、中、高剂量组均能明显降低小鼠Lewis肺癌瘤重(P<0.01),中剂量组抑瘤率达47.88%;RGE低、中、高剂量组均能明显降低瘤组织细胞端粒酶的活性(P<0.01),中剂量组对端粒酶活性的抑制作用显著强于CP组(P<0.01).结论:RGE具有抑制小鼠Lewis肺癌生长的作用,其作用机制可能与降低肿瘤组织端粒酶活性有关.     

固本抑癌方对Lewis肺癌kiss-1、nm-23基因表达的影响

目的研究中药固本抑癌方对荷Lewis肺癌的C57小鼠瘤组织kiss-1、nm23基因表达的影响。方法以荷Lewis肺癌的近交系C57小鼠为模型,分为生理盐水组,固本抑癌方低、中、高剂量组,阿霉素组,阿霉素＋固本抑癌方组,测定并比较各组肿瘤细胞kiss-1、nm23基因的表达水平。结果与生理盐水组比较,阿霉素＋固本抑癌方组,阿霉素组,以及固本抑癌方中剂量组、高剂量组肿瘤细胞kiss-1、nm23基因的表达水平显著升高（P〈0.05）;且阿霉素＋固本抑癌方组与阿霉素组,固本抑癌方中剂量组、高剂量组kiss-1、nm23基因的表达水平相比,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论固本抑癌方能提高瘤组织kiss-1、nm23基因的表达水平,对肺癌转移具有一定的抑制作用。     

抗肺癌合剂对Lewis肺癌的抑制作用及VEGF表达的影响

[目的]观察抗肺癌合剂对C57BL／6小鼠Lewis肺癌的抑制作用,并从分子水平观察其对肿瘤组织VEGF表达的影响。[方法]C57BL／6近交系小鼠50只,造模后,抗肺癌合剂（低、中、高3个剂量）、生理盐水、CTX分别作用于动物模型。15d后处死所有动物,剥取瘤组织称重,并计算抑瘤率;应用免疫组化法及图像分析技术检测瘤组织VEGF表达的积分光密度。[结果]在平均瘤重上,中药高剂量组与模型组有显著性差异（P〈0.05）;在肿瘤组织VEGF表达上,中药高剂量组与模型组有显著性差异（P〈0.05）。Ee论]抗肺癌合剂能抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤生长,并能降低Lewis肺癌小鼠肿瘤组织VEGF表达。     

肺岩宁方及其拆方对Lewis小鼠肿瘤肺转移与VEGF/KDR表达关系的影响

目的:观察肺岩宁方及其拆方对C57小鼠Lewis肺癌肿瘤组织中血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)及其激酶功能区受体(kinase-domain insert containing receptor,KDR)mRNA与蛋白表达的影响。方法:建立C57小鼠Lewis肺癌模型,随机分为模型组、肺岩宁组、益气组、补肾组和抗癌组,每组10只。分别给予相应药物干预,均灌胃21 d,第22天处死。观察肺转移情况,取肿瘤组织,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组化SP法分别检测C57小鼠Lewis肺癌中VEGF和KDR mRNA及蛋白表达水平。结果:肺岩宁组与补肾组、抗癌组小鼠的肺转移率明显低于模型组与益气组(P<0.05)。C57小鼠Lewis肺癌组织中表达VEGF和KDR,但肺岩宁组与补肾组、抗癌组小鼠肿瘤组织中VEGF mRNA及蛋白的表达水平均明显低于模型组和益气组(P<0.05),肺岩宁方组和抗癌组小鼠肿瘤组织中KDR mR-NA及蛋白的表达水平均明显低于模型组和益气组(P<0.05)。结论:肺岩宁抑制C57小鼠Lewis肿瘤转移的机制可能与下调VEGF及其受体KDR mRNA和蛋白表达有关。     

加味黄芪建中汤对脾虚证肺癌小鼠肿瘤转移及HIF-1α、V-ATPase c mRNA表达的影响

目的:探讨加味黄芪建中汤对脾虚证肺癌小鼠肿瘤转移及HIF-1α、V-ATPase c mRNA表达的影响。方法:复因素法建立脾虚证小鼠模型,进行分组并接种Lewis肺癌瘤株后的第10天,取肺及肿瘤组织,压片法计肺转移结节数,RTPCR法检测V-ATPase c mRNA的表达,Power Vision法检测HIF-1α的表达。结果:与肺癌对照组比较,肺癌脾虚组小鼠肺转移结节数增多(P<0.05),与脾虚肺癌组比较,脾虚肺癌治疗组肺转移结节数减少,HIF-1α表达下调(P<0.01)。结论:加味黄芪建中汤对小鼠肿瘤转移有抑制作用,其机制可能与肿瘤微环境的HIF-1α表达下调有关。     

肺癌nm23基因表达及其临床意义

为探讨nm23基因在评估肺癌生物学行为及预后中的作用,应用免疫组化方法检测了41例肺癌和30例癌旁肺组织中nm23/NDPK的表达。结果显示nm23表达率癌组织显著高于癌旁组织(P<0.001),且与其病理分级、TNM分期及肺门和(或)纵膈淋巴结转移均呈正相关(P<0.01),与分型无关(P>0.05);nm23在肺癌胞浆、胞核及核膜中均可表达,其表达部位的差异可能和病理分级、分期有关(P<0.05),与分型及转移无关(P>0.05)。提示:nm23基因可作为肺癌诊断、生物学行为及预后评估的指标。     

益气养阴方影响Lewis肺癌移植小鼠肿瘤生长的实验研究

目的 通过对Lewis肺癌移植鼠肿瘤生长及肿瘤组织中Notch信号表达、CD4+CD25+ Treg细胞变化的观察,探讨益气养阴方干预肺癌的量效关系及机制。 方法 将肺癌移植小鼠随机分为4组,模型组只行造模;中药组按小鼠体重按不同剂量灌胃给药分为等效剂量组、大剂量组;化疗组以CTX腹腔注射化疗。记录各组小鼠瘤体大小,观察期满后留取标本行Notch信号表达检测。 结果 ①肿瘤相对体积(RTV)及肿瘤相对抑制率:大剂量组RTV低于其他3组(P＜0.01),化疗组RTV低于等效剂量组(P＜0.05);大剂量组肿瘤抑制率较其他3组高(P＜0.05)。②肿瘤组织中Notch信号通路表达及CD4+CD25+ Treg细胞:等效剂量组Notch1 mRNA表达及CD4+CD25+ Treg细胞高于化疗组(P＜0.05);高剂量组较等效剂量组及化疗组低(P＜0.05);等效剂量组Notch3 mRNA表达与化疗组比较差异无统计学意义(P＞0.05);高剂量组较等效剂量组及化疗组Notch3 mRNA表达量降低(P＜0.05);等效剂量组、高剂量组、化疗组Jagged1 mRNA及Hesl mRNA表达均较模型组降低(P＜0.05),等效剂量组与化疗组Jagged1 mRNA及Hesl mRNA表达量降低(P＞0.05);高剂量组较等效剂量组及化疗组Jagged1 mRNA及Hesl mRNA表达量降低(P＜0.05)。 结论 益气养阴方剂有抑制Lewis肺癌移植小鼠肿瘤生长的作用,此种作用与益气养阴方剂的药物用量之间存在量效关系,且此种关系提示较大剂量的益气养阴方用量可能更有利于抑制Lewis肺癌细胞生长,而这种抑制作用与益气养阴方剂调控肿瘤组织中Notch1信号通路及CD4+CD25+ Treg细胞有关。      

内皮抑素对小鼠体内Lewis肺癌生长及淋巴管生成的影响

目的 研究内皮抑素对小鼠Lewis肺癌生长、淋巴管生成和淋巴结转移的影响.方法 用40只小鼠建立Lewis肺癌模型,然后分为两组,分别注射生理盐水(对照组)和重组内皮抑素endostar(治疗组).记录并比较两组肺表面肿瘤数、肿瘤大小及淋巴结转移率,免疫组化法检测肿瘤微淋巴管密度和血管内皮生长因子-C(VEGF-C)表达,分析内皮抑素对肿瘤微淋巴管密度(MLVD)和VEGF-C表达的影响.结果 治疗组肺表面肿瘤数、肿瘤平均长径均低于治疗组,差异有统计学意义(P＜0.05).对照组和治疗组MLVD分别为7.8±1.6、5.7±1. 6,两组分别有8例和2例见淋巴结转移,差异均有统计学意义(P＜0.05).对照组VEGF-C表达阳性率为66.7%(12/18),治疗组为27.8%(5/18),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 内皮抑素对小鼠肺癌生长、淋巴管生成和淋巴结转移有抑制作用,这种抑制作用可能与内皮抑素对VEGF-C表达的调控有关.     

肺岩宁颗粒对Lewis肺癌细胞周期G1/S检测点信号通路中MDM2-P53生物轴的影响

目的:观察肺岩宁颗粒对Lewis肺癌小鼠细胞周期G1/S检测点信号通路中MDM2-P53生物轴的影响。方法:采用C57BL/6小鼠,造模并随机分为6组:模型组、顺铂组、肺岩宁煎剂组、肺岩宁颗粒低剂量组、肺岩宁颗粒中剂量组、肺岩宁颗粒高剂量组,进行相应药物干预。观察各组抑瘤率、瘤重、体质量、去瘤体质量,流式细胞术检测细胞周期时相分布,RT-PCR测定肿瘤组织MDM2、P53的mRNA表达。结果:肺岩宁颗粒中剂量组瘤重显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01),与顺铂组比较差异无统计学意义。肺岩宁颗粒中剂量组体质量与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与顺铂组比较,体质量明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);肺岩宁颗粒中剂量组去瘤后体质量显著高于煎剂组、模型组、顺铂组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。流式细胞术发现肺岩宁颗粒中剂量组的G0/G1比例较模型组和顺铂组显著增多,癌细胞增殖指数也明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR显示肺岩宁颗粒中剂组MDM2 mRNA水平明显低于模型组、顺铂组、煎剂组,差异有统计学意义(P<0.01);肺岩宁颗粒中剂组P53 mRNA表达明显高于模型组、顺铂组和煎剂组,差异有统计学意义(P<0.01)。肺岩宁颗粒高剂量组无小鼠存活,考虑与颗粒剂溶解度有关。结论:在Lewis肺癌模型中,调节细胞周期G1/S检测点信号通路MDM2-P53生物轴可能是肺岩宁颗粒抗肺癌增殖的重要途径之一。     

魟鱼软骨多糖的分离纯化及生物活性的研究

目的研究魟鱼软骨多糖(raycartila geglycosam inoglycans,RCG)的提取、分离与纯化方法,并初步探讨其生物活性。方法采用盐酸胍提取、丙酮分级沉淀、膜超滤、Sephadex凝胶柱色谱分离、纯化获得魟鱼软骨多糖,由HPLC确定其相对分子质量和质量分数;建立Lewis肺癌小鼠模型,将实验分为生理盐水(Saline)组、不同剂量(500、250、125mg/kg)鱼软骨多糖组、环磷酰胺(CTX,60mg/kg)组,观察小鼠肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算原发瘤与肺转移灶数抑瘤率,免疫组织化学染色计数肿瘤组织微血管密度(MVD),采用RT-PCR检测瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)基因表达。结果经HPLC检测,该组分为单一多糖,其质量分数达99%以上。生物活性检测结果表明,与生理盐水组比较,该多糖各剂量组小鼠的肿瘤生长曲线平缓,原发瘤抑瘤率、肺转移灶数与生理盐水组比较差异显著(P<0.05、0.01);与生理盐水组比较,鱼软骨多糖各剂量组MVD显著减少、VEGFmRNA表达水平显著降低(P<0.01)。结论鱼软骨多糖明显抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长和转移,并可抑制肿瘤的血管形成。