膀胱移行细胞癌PCNA表达及其临床意义和预后价值

应用免疫组化（ＡＢＣ）法检测５１例膀胱移行细胞癌增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达，并探讨其与病理分级、临床分期和预后的关系。结果显示，ＰＣＮＡ表达与分级、分期关系非常显著（Ｐ均〈０．０１）；复发组和死亡组之间ＰＣＮＡ表达明显高于无复发组（Ｐ均〈０．０１）。提示，ＰＣＮＡ的高表达在判断膀胱移行细胞癌病人复发和恶化方面是一项重要的指标。     

增殖细胞核抗原在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的，为探讨膀胱移行细胞中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达及意义，方法 采用免疫组化ＬＳＡＢ法，对４４例膀胱移行细胞癌细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达进行研究，结果膀胱移行细胞癌Ⅲ级ＰＣＮＡ增殖指数明显高于Ｉ＋Ⅱ级（Ｐ〈０．０５）膀胱移行细胞癌临床分期Ｔ３＋Ｔ４中ＰＣＮＡ增殖指数明显高于Ｔ１＋Ｔ２期（Ｐ〈０．０５）。结论 ＰＣＮＡ表达与膀胱移行细胞癌分化程度，临床分期有关，可能是判断膀胱癌预后的重要指     

增殖细胞核抗原在膀胱移行细胞癌中的表达及其预后评价

目的：探讨增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ,ＰＣＮＡ）在膀胱移行细胞癌中的表达及其与预后的关系。方法：用抗ＰＣＮＡ的单克隆抗体ＰＣ１０免疫组化染色常规石蜡包埋的膀胱癌组织。结果：全部４８例膀胱癌标本中４６例ＰＣＮＡ显示阳性（９５８％）,正常膀胱组织均为阴性。ＰＣＮＡ指数在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级肿瘤中分别为（８２８±８６８）％,（２３８２±１６０２）％,（４４６８±２４６５）％。在Ｔａ～Ｔ１和Ｔ２～Ｔ４期肿瘤中分别为（１２５８±１２３３）％和（３４５５±２１８９）％。ＰＣＮＡ指数在各病理分级和分期间均有统计意义（Ｐ＜０．０１）。为了比较ＰＣＮＡ指数与生存率,根据ＰＣＮＡ染色平均水平,将患者分为两组即高ＰＣＮＡ组,其ＰＣＮＡ指数＞２１％和低ＰＣＮＡ组,其ＰＣＮＡ指数＜２１％。我们用Ｌｏｇｒａｎｋ方法对生存率统计发现高ＰＣＮＡ组的预后明显比低ＰＣＮＡ组的预后差（Ｐ＜０．０１）。结论：ＰＣＮＡ表达与膀胱癌病理分级、临床分期和预后均有密切关系,可作为膀胱癌一个有效的预后指标。     

胃癌组织中增殖细胞核抗原的表达

目的：探讨增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）与胃癌组织的浸润性及转移能力的关系，证明ＰＣＮＡ可作用胃癌预后指标。方法：应用Ｓ－Ｐ免疫组化技术检测了４２例胃癌ＰＣＮＡ的表达。结果：显示ＰＣＮＡ的阳性表达率为９０．０４％（３８／４２）。癌细胞浸润达肌层、浆膜层者ＰＣＮＡ指数显著高于浸润至粘膜下层组（Ｐ〈０．０５）；淋巴结癌转移阳性组ＰＣＮＡ指数显著高于无淋巴结转移组（Ｐ〈０．０１）；胃癌不同分化程度各组中ＰＣ     

大肠癌旁粘膜细胞的PCNA和AgNORs表达观察

用增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）和核仁组成区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲｓ）对３５例大肠癌旁粘膜进行细胞增殖表达与观察。结果表明：癌旁粘膜的ＰＣＮＡ标记指数增多，标记增强，排列紊乱。ＡｇＮＯＲｓ在癌旁粘膜中，颗粒增多、增大，形态多样，０￣１ｃｍ和２￣３ｃｍ组的标记指数与４￣５ｃｍ组的标记指数相比较，有显著或非常显著差异（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）。在ＤｕｋｅＡ、Ｂ期中，细胞标记指数增高增强，与癌的发生和患者     

膀胱癌PCNA的表达及意义

用免疫组化方法检测６０例膀胱移行细胞癌增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）,在肿瘤Ｇ１．Ｇ２,Ｇ３级细胞中的指数分别为：２． ４±３． ９％;９． ５±１３． ０％;５４． ８±２９． ３％。 Ｇ３级显著高于 Ｇ１与 Ｇ３级（ Ｐ＜０． ０１）。浸润性肿瘤（Ｔ２—Ｔ４）５２． １±３５．１％显著高于表浅性肿瘤（Ｔａ—Ｔ１）１８±２３．４％（Ｐ＜０．０１）。将所有肿瘤平均指数３０．４±３２．３％分为ＰＣＮＡ＜３０．４和＞ ３０． ４两组,通过生存分析表明： ＰＣＮＡ指数较高组与较低组相比有不良的预后,提示 ＰＣＮＡ指数为 ＴＣＣ侵袭性生物学行为和预后提供了量化的参数。     

膀胱移行细胞癌P53基因蛋白异常表达与预后关系

应用免疫组化法对９３例膀胱移行细胞癌组织中抑癌基因Ｐ５３的表达产物进行检测。结果显示Ｐ５３异常率达４８％，Ｐ５３表达异常与肿瘤的病理分级（Ｐ〈０．０５），临床分期（Ｐ〈０．０５），及复发（Ｐ〈０．０１）的关系极为密切，提示Ｐ５３基因表达异常是判断膀胱移行细胞癌预后的一个可靠指标。     

增殖细胞核抗原在膀胱癌中的表达

采用免疫组化中ＳＡＢＣ方法对５５例膀胱癌ＰＣＮＩＡ单克隆抗体标记，结果显示，ＰＣＮＡ的表达与膀胱癌分化程度、生物学活性及临床分期相关（Ｐ〈０．０５），认为ＰＣＮＡ的表达能客观反映膀胱肿瘤生物学活性，可作为膀胱肿瘤预后的参数之一。     

膀胱移行细胞癌P-糖蛋白的表达及其在肿瘤复发中的意义

目的 研究Ｐ－糖蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及其在肿瘤复发中的意义。方法 应用Ｓ－ＡＢＣ免疫组织化学方法检测８０例膀胱移行细胞癌组织和２０例正常膀胱粘膜组织中Ｐ－糖蛋白的表达。结果 膀胱移行细胞癌组织Ｐ－糖蛋白阳性率明显高于正常膀胱粘膜组织（Ｐ〈０．０１），灌注化疗后复发肿瘤Ｐ－糖蛋白的阳性表达率明显高于初发肿瘤（Ｐ〈０．０１）。结论 Ｐ－糖蛋白介导的多药耐药是膀胱癌腔内灌注化疗失败、肿瘤复发的重要原因。     

PCNA和nm23在乳腺浸润性导管癌中的表达

目的 探讨ＰＣＮＡ和ｎｍ２３在乳腺浸润性导管癌中的表达水平与乳腺癌组织分级和淋巴结转移的关系及意义。方法 应用免疫组化方法检测４５例乳腺浸润性导管癌中ＰＣＮＡ和ｎｍ２３的表达。结果 Ⅱ、Ⅲ级ＰＣＮＡ阳性表达率高于Ⅰ级（Ｐ〈０．０１）,Ⅱ、Ⅲ级ｎｍ２３阳性表达率低于Ⅰ级（Ｐ〈０．０５）;腋窝淋巴结转移组ＰＣＮＡ阳性表达率高于非转移组（Ｐ〈０．０１）。但ｎｍ２３阳性表达率低于非转移组（Ｐ〈０．０５）。     

造血干细胞移植后免疫重建及其意义的研究进展

本文对造血干细胞移植后的免疫重建及其意义的研究进展作一综述,着重介绍移植后宿主体内T细胞、自然杀伤(NK)细胞及树突细胞(DC)数量和功能的变化。     

细胞培养技术的研究进展

随着现代科学的发展,体外细胞培养技术已成为多个领域必不可少的研究工具,并且其新技术和方法也在不断涌现。本文就细胞培养技术的发展、支架材料以及细胞培养的影响因素作一综述。     

大鼠胃壁细胞的分离及培养

目的　完成胃壁细胞分离及纯化 ,建立原代培养胃壁细胞的方法 .方法　制备大鼠翻转的胃囊用含链霉蛋白酶E的消化液注入胃囊内孵育 ,并用磁力搅拌器轻轻搅拌而制备单个的胃底腺细胞 ,Percoll梯度离心富集胃壁细胞 ,用含10 0 m L· L- 1 血清的 PBS或培养液 ,时差贴壁去除成纤维细胞 ,然后 ,将壁细胞接种于培养板中 ,培养液用无血清的 1∶ 1Harm's F- 12 / DMEM培养 ,内含胰岛素 5 mg· L- 1 ,氢化可地松 4μg· L- 1 ,转铁蛋白 5 mg· L- 1 ,硒酸钠 5μg· L- 1 ,牛血清白蛋白 2 g· L- 1 ,表皮生长因子 2 5 μg· L- 1 ,葡萄糖 1.98g· L- 1持续培养可达 1wk以上 .结果　获得的壁细胞经吖啶橙 (acridine orange,AO)鉴定纯度达 80 %以上 ,原代培养经HE染色可见壁细胞呈分散小组式生长 ,且生长状态良好 .结论　此方法适宜于大鼠胃壁细胞的分离及体外培养 ,为体外进一步研究壁细胞的功能打下基础 .     

内毒素对睾丸功能影响的研究进展

众所周知生殖道感染、炎症和其他疾病可抑制雄性生殖功能,但对系统性炎症和疾病引起男性不育的具体机制却所知甚少。内毒素是一种高效炎症激活物,可诱导炎症感染、内毒素血症、败血症休克及多组织器官损伤等,虽然内毒素广泛用于其他系统的炎症研究,但对其在生殖系统炎症的研究较少,因而深入了解内毒素对睾丸功能的影响,有助于进一步理解内毒素所致疾病对雄性生殖功能的影响。本文就内毒素的结构和生物学功能及其对睾丸生精细胞、Sertoli细胞和Leydig细胞功能的影响进行了相关研究。     

EPCs在MSCs向肝样细胞转化中作用的初步探讨

目的：探讨内皮前体细胞(endothelial precursor cells, EPCs)在间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)向肝样细胞转化中的作用。方法：分离培养SD大鼠MSCs和EPCs,取第3代MSCs向肝样细胞转化培养,培养过EPCs的无血清及因子的培养基(endothelial progenitor cell-conditioned medium, EPCs-CM)、无血清的α-最低必需培养基(alpha minimal essential medium, α-MEM)分别与肝细胞转化培养基按1∶1比例配置,作为实验组和模型对照组,正常α-MEM培养基为空白对照组,分别观察细胞形态及数量变化;在培养3、5、7、9 d时应用免疫荧光检测甲胎蛋白(alpha fetoprotein, AFP)、清蛋白(albumin, ALB)的表达。结果：空白对照组MSCs形态无明显变化;实验组与模型对照组细胞均出现肝样细胞形态。空白对照组未见AFP、ALB表达,模型对照组和实验组在3、5、7、9 d AFP、ALB表达水平均增高,其中实验组比模型对照组AFP、ALB水平增高明显。结论：EPCs在MSCs向肝样细胞转化中可能起一定的促进作用。     

Culture and Identification of Human Amniotic Mesenchymal Stem Cells

Objective To establish the method of isolation, purification, and identification of human amniotic mesenchymal stem cells （hAMSCs）. Methods hAMSCs were isolated from human amniotic membrane by trypsin-collagenase digestion, and cultured in Dulbecco＇s modified Eagle＇s medinm/F12 medium supplemented with 10% fetal bovine serum. Phenotypic characteristics of these cells were analyzed by means of immunocytochemistry and flow cytometry. Results The cells successfully isolated from human amniotic membrane expressed representative mesenchymal cell surface markers CD44, CD90, and vimentin, but not CD45. Conclusions This study establishes a potential method for isolation of hAMSCs from human amnion, in vitro culture, and identification. The isolated cells show phenotypic characteristics of mesenchymal stem cells.     

莪术注射液抑制K562细胞增殖及诱导其凋亡的研究

目的：探寻新的抗白血病药物。方法：采用ＭＴＴ法,以柔红霉素（ＤＮＲ）、阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）和羟基脲作对照,了解莪术注射液对Ｋ５６２细胞增殖抑制作用;通过流式细胞仪检测和ＤＮＡ凝胶电泳,观察莪术注射液诱导Ｋ５６２细胞凋亡的情况。结果：莪术注射液对Ｋ５６２细胞不仅具有强大的增殖抑制作用,功效明显强于对照ＤＮＲ、Ａｒａ－Ｃ和羟基脲;而它更主要的作用是诱导Ｋ５６２细胞不仅具有强大的增殖抑制作用,功效明显     

大鼠胚胎神经干细胞的分离培养及鉴定

利用无血清培养和细胞克隆技术从孕鼠(14d)胚胎中分离出神经干细胞，并进行传代培养，采用免疫细胞化学技术检测神经巢蛋白和成熟脑细胞特异性抗原神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase，NSE)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)的表达，同时采用H-E染色法鉴定神经细胞类型。证实从大鼠胚胎大脑皮质分离出的细胞具有连续的克隆能力，并表达神经巢蛋白，分化的细胞表达神经元和神经胶质细胞的特异性抗原，为中枢神经系统的干细胞。     

成人血源性间充质干细胞的分离和鉴定

目的建立一种分离、培养扩增成人血源性间充质干细胞(MSCs)的方法进行鉴定,并与骨髓源性MSCs比较生物学特性。方法30名成年志愿者随机平分为二组,一组直接抽静脉血,并细分为全血细胞法组和外周血密度梯度离心法组,同时抽骨髓为骨髓密度梯度离心法组;另一组为血细胞分离机法组。各组进行细胞存活率、集落形成率、形态学、流式表型分析、胶原染色等研究。结果外周血密度梯度离心法分离成人静脉血后培养,贴壁细胞呈梭形,集落形成率为(0.12±0.08)/106单个核细胞,传代扩增到第5代时每份平均细胞数达51.4674×106,表达CD44、CD54、CD105和CD166,不表达CD14、CD34、CD45和CD31,细胞分泌Ⅰ、Ⅲ型胶原。全血细胞法和血细胞分离机法获得的细胞不能连续多次传代。结论外周血密度梯度离心法比全血细胞法和血细胞分离机法简单,贴壁细胞培养扩增容易,获得的血源性MSCs与骨髓源性MSCs的生物学特性相似。     

莪术醇对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响

目的研究莪术醇对人胃癌SGC-7901细胞生物学特性的影响。方法用MTT法测定莪术醇对SGC-7901细胞增殖的影响,流式细胞仪检测莪术醇对SGC7—901细胞周期和细胞凋亡的影响。结果10、30、100μg／mL莪术醇均能够抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖;莪术醇能使S和G2／M期肿瘤细胞比例减少,G0／G1期肿瘤细胞比例增加,其中100μg／mL浓度的莪术醇作用最强（F=88．14,P〈0．01）;莪术醇诱导肿瘤细胞凋亡,其中100μg/mL浓度的莪术醇凋亡作用最强（F=34．14,P〈0．01）。结论莪术醇诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的增殖,