胰腺癌基质金属蛋白酶及其组织抑制物的基因表达意义

目的：观察胰腺组织及其癌变标本中基质金属蛋白酶（MMPs)及其金属蛋白酶的组织抑制物（TIMPs)基因表达的变化与胰腺癌临床特征、生物学行为的关系。方法：采用Northern-blot、原位分子杂交ISH的方法,对15例胰腺癌中MMP2、MMP9和TIMP1基因的mRNA水平进行了检测,并就其临床意义进行分析。结果：胰腺癌组织MMP2、MMP9和TIMP1的基因表达水平明显高于正常胰腺组织。它们在胰腺癌组织和同质细胞中均有分布;其表达与肿瘤的大小、CA19－9无关,与包膜侵犯、腹腔淋巴结转移和病理分型等胰腺癌侵袭转移的特征有密切的联系。结论：在胰腺癌组织中MMPs和TIMPs的异常表达,有助于临床医师对患者预后判断。     

层粘连蛋白,MMP 2、MMP 9及TIMP 1在人脑原发性胶质瘤的表达及临床意义

目的探讨层粘连蛋白(LN)和基质金属蛋白酶(MMP)-MMP 2、MMP 9与其组织抑制因子(TIMP)TIMP 1在原发性人脑胶质瘤侵袭行为中的作用。方法利用免疫组织化学技术SP法检测LN和MMP 2、MMP 9以及TIMP 1在正常脑组织、高低度恶性胶质瘤和脑内转移瘤中的表达情况;通过电镜观察胶质瘤中血管基底膜变化特征,并与免疫组织化学表达结果作对照比较。结果 (1)正常脑组织和胶质瘤血管基底膜及血管内皮细胞上均有LN的表达,而瘤细胞未见染色。LN的表达强度与胶质瘤恶性度呈正相关(P＜0.05),在高度恶性胶质瘤侵袭边缘的细胞间可见LN的弱阳性表达;而脑内转移瘤则表现散在的瘤细胞浆膜阳性表达,基底膜及内皮细胞未见表达。(2)正常脑组织中,MMP 2阳性表达在血管基底膜及血管内皮细胞上,其他部位未见表达,而MMP 9均无表达。在胶质瘤中MMP 2和MMP 9阳性染色不仅见于血管基膜及血管内皮细胞,而且也见于侵袭边缘的瘤细胞。70例人脑胶质瘤标本中,MMP 2、MMP 9的阳性表达率分别为40％(28/70),67.1％(47/70),差别具有显著性(P＜0.05);MMP 2、MMP 9在低度恶性胶质瘤中阳性率分别为14.3％(4/28),32.1％(9/28),差别无显著性(P＞0.05);MMP 2、MMP 9在高度恶性胶质瘤标本中阳性率分别为57.1％(24/42),90.5％(38/42),差别具有显著性(P＜0.01).(3)MMP 2表达强度与CT表现的瘤周水肿程度无关(P＞0.05),但表达与否与CT影像上表现的瘤周水肿程度明显相关(P＜0.01).MMP 9阳性表达与否及强度与瘤周水肿程度明显相关(P＜0.05)。(4)MMP 2,MMP 9在转移瘤中表达率无明显差别(P＞0.05);在转移瘤与高度恶性胶质瘤之间表达亦无明显差别(P＞0.05).(5)TIMP 1在低、高度恶性胶质瘤中表达率分别为7.14％(2/28),50.0％(21/42),与相应级别中的MMP 9的表达存在差别(P＜0.05).(6)电镜下可见基膜完整呈不同程度的局限性或广泛性增厚,与LN免疫组织化学结果相一致。胶质膜侧见大小不一的虫蚀样空洞。结论 (1)BM上的LN可能来源于血管内皮细胞。在BM上的过度表达可能参与构成阻止胶质瘤细胞向颅外转移的屏障。(2)MMP 2、MMP 9在人脑胶质瘤中作为恶性表型及侵袭指标之一,其中MMP 9比MMP 2更重要.(3)MMP 2在正常脑组织血管基膜上表达,提示可能与血管的发生有关;而肿瘤血管BM上的MMP 9表达一方面参与了肿瘤新血管的形成,有利于肿瘤生长;另一方面可能有利于胶质瘤细胞沿着血管侵袭.(4)胶质瘤中MMP 9与TIMP 1之间失衡是促进其侵袭的重要因素之一。     

肝癌中基质金属蛋白酶及其抑制因子的研究进展

基质金属蛋白酶(MMP)家族是降解细胞外基质的重要酶类,组织金属蛋白酶抑制因子(TIMP)是MMP的天然抑制物.在细胞外基质中MMPs和TIMPs的失衡已证实与多种病理状态,尤其是与肿瘤的侵袭和转移密切相关.作者就MMP和TIMP的结构、功能及其与肝癌(HCC)侵袭、转移的研究进展进行综述.     

基质金属蛋白酶-9及其组织金属蛋白酶抑制剂-1表达与大肠癌侵袭转移的研究

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP鄄9)及其相应组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP鄄1)在大肠癌组织中的表达与大肠癌侵袭转移的关系。方法:应用免疫组织化学SP法检测了48例大肠癌组织标本及23例正常大肠标本MMP鄄9、TIMP鄄1的表达。结果:48例大肠癌组织MMP鄄9阳性率为87.5%,显著高于正常大肠标本(P<0.05),伴有淋巴结转移或肝转移者MMP鄄9的阳性率明显高于无淋巴结转移或肝转移者(P<0.05)。大肠癌组织TIMP鄄1的阳性率为54.2%,明显高于正常大肠标本(P<0.05);MMP鄄9表达超过TIMP鄄1者,发生淋巴结转移和肝转移的比例明显高于TIMP鄄1表达超过MMP鄄9者。结论:MMP鄄9和TIMP鄄1表达失衡和大肠癌的浸润、淋巴结转移、肝转移密切相关,MMP鄄9有促进肿瘤侵袭转移的作用,TIMP鄄1和大肠癌的侵袭转移呈负相关;MMP鄄9表达超过TIMP鄄1者预后不良。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂在风湿性二尖瓣狭窄合并心房纤颤中的作用

心房纤颤是临床上较为普遍的一种心律失常,心房纤颤时可加重风湿性二尖瓣瓣膜狭窄的程度。房颤对心脏瓣膜的破坏主要表现为细胞外基质正常结构被破坏,胶原沉积增多,各型胶原比例失调和排列紊乱。影响细胞外基质代谢的最主要的酶类是基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs） 和金属蛋白酶内源性组织抑制剂（tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs）。心房纤颤时MMPs、TIMPs 平衡失调使心脏瓣膜破坏,Ⅰ型和Ⅲ型胶原沉积增多,排列紊乱。MMP 9 和TIMP 2 是心房纤颤发生后MMPs 和TIMPs 中表达最具有意义的指标。本文通过对心房纤颤后心脏瓣膜组织中MMP 9 和TIMP 2 异常表达的研究进行综述,以了解心房纤颤对风湿性二尖瓣瓣膜影响的程度。     

胃肠道间质瘤组织MMP3、MMP7及TIMP1表达

目的 探讨MMP3、MMP7及TIMP1的表达与胃肠道间质瘤(GIST) 生物学行为的关系,为预测该肿瘤的侵袭潜能提供理论依据和可能的预测指标.方法 对68例GIST组织进行免疫组织化学染色,并结合病理形态学及生物学行为评价进行分析.结果 MMP3、MMP7及TIMP1的阳性表达率均随FLETCHER风险度分级危险程度的增加而升高(r=0.299～0.354,P<0.01),三者的阳性表达在肿瘤直径≤5 cm和＞5 cm组差异均有显著性(χ2=4.73～5.82,P<0.05).MMP3及TIMP1阳性表达率在有远处转移和无远处转移组差异均有显著性(χ2=4.57、4.61,P<0.05).MMP3阳性表达率在浸润性和膨胀性生长组以及细胞核分裂数≤10/50HPF和＞10/50HPF 组差异均有显著性(χ2=4.69、5.81,P<0.05).结论 MMP3、MMP7及TIMP-1表达与GIST细胞的侵袭转移能力有关;而MMP3、MMP7及TIMP1之间平衡失调也是GIST恶性进展、侵袭转移的重要因素.因此,检测MMP3、MMP7及TIMP1的表达可以作为GIST的生物学行为评价的有效指标.     

基质金属蛋白酶—2，9及其抑制剂在骨肉瘤中表达的意义

目的 探讨基质金属蛋白酶－2，9（MMP－2，9）及其特异性抑制剂TIMP－2，1在骨肉瘤中的表达情况及其与骨肉瘤侵袭，转移，复发的关系。方法 采用免疫组织化学链酶菌抗生素一过氧化酶（SP）法检测了62例骨肉瘤（初发性骨肉瘤51例，复发性骨肉瘤11例，确诊时即伴有肺转移者9例，不伴有肺转移者53例）和正常对照组织中MMP－9，MMP－2，TIMP－1，TIMP－2的表达，并根据阳性瘤细胞占肿瘤细胞总数的比率进行半定量量化分析和非参数检验。结果 MMP－9，TIMP－1在骨肉瘤中的阳性表达率分别为76％，18％，与二者在正常对照组织中的阳性率相比，MMP－9表达明显升高，TIMP－1表达明显降低（P均＜0．01）。MMP－2，TIMP－2在骨肉瘤中的阳性表达率分别为69％，52％，与二者在正常对照组织中的阳性率相比差异无显著性（P均＞0．05）。MMP－9在肿瘤细胞的胞浆及胞膜中均有表达，且在肿瘤的侵袭边缘阳性细胞数目较多，染色强度较高。MMP－2，9及TIMP－1，2在初发性和复发性骨肉瘤之间以及在伴有肺转移和不伴有肺转移的骨肉瘤之间的表达差异无生。Spearman相关分析表明骨肉瘤中MMP－2与MMP－2，MMP－2与TIMP－2以及TIMP－1与TIMP－2之间的表达均显著性相关。结论 骨肉瘤组织中MMP－9表达升高，TIMP－1表达降低，二者协同促进肿瘤细胞的生长和局部的侵袭破坏。骨肉瘤术后是否复发与是否出现早期转移与MMP－2，9和TIMP－1，2无前。     

压力性尿失禁患者宫骶韧带中MMPs/TIMPs表达量、细胞外基质成分含量与细胞凋亡的关系

目的:研究压力性尿失禁(SUI)患者宫骶韧带中MMPs/TIMPs表达量、细胞外基质成分含量与细胞凋亡的关系。方法:选择在本院诊断为压力性尿失禁并接受手术治疗的48例患者作为SUI组、同期因良性肿瘤接受阴式子宫全切除术的30例患者作为对照组。术中收集宫骶韧带并检测MMPs/TIMPs、凋亡基因的mRNA表达量以及细胞外基质成分的含量。结果:SUI组患者宫骶韧带中MMP1、MMP2、MMP9、MMP14、Bax、Caspase-3、Caspase-9、LC3-II的mRNA表达量显著高于对照组,TIMP1、TIMP2、TIMP3的mRNA表达量以及Col-I、Col-III、Elastin、PYD、Fibulin-5的含量显著低于对照组;宫骶韧带中Bax、Caspase-3、Caspase-9、LC3-II的mRNA表达量与MMP1、MMP2、MMP9、MMP14的mRNA表达量呈正相关,与TIMP1、TIMP2、TIMP3的mRNA表达量以及Col-I、Col-III、Elastin、PYD、Fibulin-5的含量呈负相关。结论:压力性尿失禁患者宫骶韧带中细胞过度凋亡与MMPs/TIMPs失衡、细胞外基质成分过度降解有关。     

PPARγ配体对人血单核细胞MMPs和TIMPs表达及活性的影响

目的：探讨过氧化物酶体增生物激活受体－γ（PPARγ）配体15d-PGJ2对人血单核细胞基质金属蛋白酶及其内源性抑制物（MJMPs和TIMPs)表达及活性的影响。方法：应用RT－PCR和Western blotting测定MMPs、TIMPs的基因和蛋白表达，Zymography测定MMPs活性。结果：PPARγ配体15d-PGJ2可明显抑制人血单核细胞MMP－9的表达及其活性，但不影响MMP－2、TIMP－1、TIMP－2的表达。结论：PPARγ配对15d-PGJ2可抑制人血单核细胞MMP－9的表达及其活性，对减少动脉粥样硬化斑块局部细胞外基质降解、增强斑块稳定性可能起到有益作用。γγ     

基质金属蛋白酶及其抑制物在口腔鳞状细胞癌中的表达和意义

目的　探讨口腔鳞状细胞癌 (oralsquamouscellcarcinoma ,OSCC)组织中基质金属蛋白酶 9(matrixmetallo proteinase 9,MMP 9) ,基质金属蛋白酶组织抑制因子 1(tissueinhibitorofmetalloproteinase 1,TIMP 1)的表达及其与肿瘤分化、转移的关系。方法　采用免疫组织化学SP法检测 4 5例口腔鳞癌标本 ,9例正常口腔粘膜标本中MMP 9TIMP 1的表达情况。结果　①口腔鳞癌中MMP 9、TIMP 1的阳性表达率分别为 6 4 .4 %和 4 2 .2 % ,与对照组比较有显著性差异。②口腔鳞癌低分化组中MMP 9、TIMP 1的阳性表达率高于高分化组 (P <0 .0 5 )。③颈淋巴结转移组中MMP 9、TIMP 1的阳性表达率高于无淋巴结转移组 (P <0 .0 5 )。结论　口腔鳞癌组织中MMP 9、TIMP 1的表达与肿瘤分化程度及颈淋巴结转移有关 ,与肿瘤发生部位无关。     

肿瘤侵袭转移过程中基质金属蛋白酶作用机制系列研究

针对肿瘤侵袭转移过程中基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物的作用和调节机制进行了较深入的系列研究。在包括肺癌、前列腺癌和黑色素瘤的几组具有不同转移潜能的人肿瘤细胞系中，癌细胞产生MMP-2和MMP-9的能力与其侵袭转移能力密切相关。进一步通过反义基因转染技术证实，抑制MMP-9基因表达可以明显降低高转移癌细胞的体外侵袭及裸鼠体内自发转移能力。将金属蛋白酶组织抑制因子TIMP-1，TIMP-2和TIMP-3基因分别导入高转移癌细胞，可以观察到转染细胞的侵袭转移能力受到明显抑制。说明通过选择性抑制MMPs基因表达或增强TIMPs基因表达均可在一定程度上达到抑制肿瘤侵袭转移的目的。与此同时，我们应用定时控制表达技术分别将正义或反义MMP-9基因导入MMP-9不表达或高表达的黑色素瘤细胞，通过四环素控制的分子开关成功实现了MMP-9基因的定时控制表达，为提高临床基因治疗的效果提供了初步实验依据。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂在乳腺癌中的表达及意义

目的 :探讨乳腺癌组织中基质金属蛋白酶 2 ( MMP- 2 )、基质金属蛋白酶 9( MMP- 9)及金属蛋白酶 1组织抑制剂 ( TIMP- 1 )、金属蛋白酶 2组织抑制剂 ( TIMP- 2 )的表达及它们与乳腺癌生物学行为的关系。方法 :应用免疫组织化学 SP法 ,检测 49例乳腺癌、1 0例癌旁正常组织中MMP- 2、MMP- 9、TIMP- 1及 TIMP- 2的表达及分布。结果 :乳腺癌组织中 MMP- 2、MMP- 9、TIMP- 1及 TIMP- 2的表达明显高于癌旁正常组织 ,二者之间差异具有显著性 ( P<0 .0 1 ) ;乳腺癌组织中 MMP- 2、MMP- 9及 TIMP- 1主要在肿瘤细胞胞质内表达 ,而 TIMP- 2表达于瘤细胞和间质细胞胞质 ;乳腺癌组织中 MMP- 2、MMP- 9的表达与组织学分级、淋巴结转移密切相关( P<0 .0 5 ) ,能促进乳腺癌的侵袭和转移 ,而 TIMP- 1、TIMP- 2的表达与肿瘤生物学行为无相关性( P>0 .0 5 )。结论 :基质金属蛋白酶可成为判定乳腺癌生物学行为和指导临床治疗的可靠指标     

TIMP—2基因转染对高转移性人巨细胞肺癌细胞系生物学行为的影响

探讨金属蛋白酶组织抑制因子ＴＩＭＰ－２对肿瘤恶性表型的逆转作用及其在肿瘤基因治疗上的意义。方法利用基因重组技术构建了含全长ＴＩＭＰ－２ｃＤＮＡ的真核表达载体，用脂质体法转染高转移性人肺癌细胞（ＰＧ），检测转染后ＰＧ细胞的金属蛋白酶（ＭＭＰｓ）活性、体外侵袭、裸鼠体内成瘤性及转移能力等多项生物学行为的变化。并以ＴＩＭＰ－２基因转染前后ＰＧ细胞的裸鼠皮下移植瘤为研究对象，利用免疫组织化学和原位杂交方法，研究在整体环境下ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－９和ＴＩＭＰ－１、ＴＩＭＰ－２的ｍＲＮＡ及蛋白表达情况。结果转染细胞较母系细胞ＴＩＭＰ－２ｍＲＮＡ表达增强，ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－９的产生及活性无明显变化，体外增殖能力增强，但体外侵袭和软琼脂集落形成能力以及裸鼠体内成瘤性及自发转移能力下降。此外，ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－９和ＴＩＭＰ－１、ＴＩＭＰ－２在ＰＧ细胞之裸鼠皮下移植瘤的间质细胞及肿瘤细胞均有表达，阳性的肿瘤细胞主要位于肿瘤和间质交界处。结论特异性上调ＴＩＭＰ－２基因的表达可在一定程度上逆转ＰＧ细胞的恶性表型。     

低氧微环境对MDA-435细胞株MMP2、9及其抑制剂TIMP21表达的影响

目的：探讨低氧微环境对人乳腺癌细胞株MDA 435中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及其抑制剂(tissue inhibitors of matrix metalloproteinases，TIMPs)表达的影响。方法：分别置人乳腺癌细胞株MDA 435于常氧（21% O2、5% CO2）和低氧（1% O2、5% CO2和94% N2）环境中培养6?h，RT PCR技术mRNA水平检测MMP2、9及TIMP2、1的表达。结果：MDA 435细胞株表达MMP9和TIMP1 mRNA，未检测到MMP2和TIMP2 mRNA；低氧环境下MDA 435细胞株中MMP9 mRNA 水平显著上升(P＜0.05)，TIMP1基因的表达在低氧环境与常氧环境下差异无统计学意义(P＞0.05)。结论：与常氧环境相比，低氧环境下乳腺癌细胞株MDA 435中MMP9及其抑制剂TIMP1的表达平衡发生了改变，提示，进行肿瘤转移分子机制的体外研究应充分考虑氧环境的影响。     

卵巢浆液性肿瘤MMP-9和TIMP-1的表达意义

目的: 探讨基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)及其金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases-1, TIMP-1)在卵巢浆液性肿瘤中的表达特点及意义. 方法: 采用免疫组化法,观察6例正常卵巢组织,12例卵巢浆液性囊腺瘤,12例交界性囊腺瘤,22例卵巢浆液性囊腺癌组织中MMP-9及TIMP-1表达特点及规律. 结果: 正常卵巢上皮细胞只有1例表达MMP-9,但有5例表达TIMP-1. 大部分卵巢浆液性肿瘤细胞都有MMP-9及TIMP-1的表达,但其表达强度在恶性程度不同的肿瘤中有明显差异. 结论: TIMP-1可能参与卵巢的正常生理功能. MMP-9及TIMP-1在卵巢浆液性囊腺癌的浸润、转移中起了重要作用.     

EFFECTS OF GENISTEIN ON INVASION AND MATRIX METALLOPROTEINASE ACTIVITIES OF HT1080 HUMAN FIBROSARCOMA CELLS

Effects of genistein on invasion and matrix metalloproteinase activities were investigated in HT1080 human sarcoma cells, lnvasion of HTI080 cells through reconstituted basement membnme was inhibited when the cells were treated with 100μmol/L and 200μmol/L genistein; At the same concentrations,genistein not only suppressed latent forms of matrix metalloprotinese-2 and-9 (MMP-2 mad MMP-9) to convert into active forms, but also increase dramatically the tissue inhibitor of metalloproteinase (TIMP-1 ) mRNA contents and reverse the imbalance of MMPs and TIMPs. However, expressions of MMP-2 and MMP-9 were not sigrdficantly affected. Suppression of MMP activation and increase of TMP-1 expression will decrease matrix degradation by MMPs, and consequently inhibit invasions of the cells. These results emphasized the existence of the imbalance between MMPs and TIMPs in tumor invasion mad metastasis formation, The value of genistein as a drug for antiinvasion and anti-metastasis chemotherapy was suggested.     

门静脉高压症脾大部切除后残脾基质金属蛋白酶及其抑制剂的变化

目的检测门静脉高压症脾大部切除后残脾组织和血清基质金属蛋白酶及其抑制剂的表达和水平,探讨脾纤维化的分子机制及保脾术的临床价值。方法选取门静脉高压脾肿大患者13 例。术中切取脾组织为巨脾组,术后8 年穿刺获取脾组织为残脾组,设外伤性脾破裂患者13 例为对照组。采用免疫组织化学法、实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）及酶联免疫吸附测定（ELISA）检测脾脏组织和血清基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9、组织金属蛋白酶抑制物TIMP-1、TIMP-2 的表达和水平。结果3 组脾组织中,MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 蛋白阳性表达主要分布在巨噬细胞内。残脾组和巨脾组脾组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1 和TIMP-2 蛋白阳性表达率和基因表达与对照组比较,均差异有统计学意义（P <0.05）,残脾组和巨脾组升高;残脾组和巨脾组之间比较则差异无统计学意义（P >0.05）。残脾组和巨脾组血清MMP-2、MMP-9、TIMP-1 和TIMP-2 水平与对照组比较,均差异有统计学意义（P <0.05）,残脾组和巨脾组升高;残脾组和巨脾组之间比较差异无统计学意义（P >0.05）。结论门静脉高压症脾肿大患者脾大部切除术后残脾组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1 及TIMP-2 蛋白和基因表达增加,血清蛋白水平升高,提示残脾组织基质金属蛋白酶和组织金属蛋白酶抑制物代谢失调。     

反义Smad4对大鼠纤维化肝脏金属蛋白酶及其抑制剂的调节

目的探讨反义Smad4基因对纤维化肝金属蛋白酶及其抑制剂表达的调节作用.方法通过门静脉灌注将高滴度的反义Smad4的重组腺病毒载体导入大鼠纤维化肝脏.结果RT-PCR证实肝脏内有反义Smad4的转录和表达.同时采用免疫组化检测发现,转基因组肝脏内源性Smad4表达降低,TIMP1、TIMP2的表达减少,MMP2和MMP9的表达下调.结论反义Smad4能调节纤维化肝脏内源性TIMPs和MMPs的表达,反义Smad4可能成为潜在的慢性肝病的抗纤维化工具.     

基质金属蛋白酶及金属蛋白酶组织抑制剂在肺纤维化中的变化

观察基质金属蛋白酶（MMPs）及金属蛋白酶组织抑制剂（TIMPs，MMPs特异性抑制剂）在鼠肺纤维化中的变化，以探讨MMPs与肺纤维之间的关系。采用气管内灌小博莱霉方法复制鼠肺纤维化模型，并进行以下研究；①HE染色、Masson染色，②羟脯氨酸含量测定，③MMP-2，TIMPs免疫组织化学分析，④MMPs蛋白电泳，⑤肺组织溶胶原活性测定。结果显示：实验组大鼠在肺泡炎阶段MMP-2的蛋白表达增强、活性增加，TIMPs的蛋白表达相对减弱，肺组织溶胶原活性升高；在肺纤维化阶段，MMP-2较炎症时减弱，而TIMPs增强，肺组织溶胶原活性下降。提示MMPs/TIMPs失衡影响肺纤维化的形成与发展。