MMPs在宫颈癌中的表达及其临床意义

目的：揭示基质金属蛋白酶在人宫颈鳞癌中的表迭并探讨若与淋巴结转移、预后的关系。方法：采用免疫组织化学S-P法，检测53例石蜡标本中基质金属蛋白酶在宫颈鳞状上皮细胞癌的不同分级以及临床不同分期中的表达情况。结果：宫颈癌组织中淋巴结转移组基质金属蛋白酶的阳性率（78，3％）显著高于无淋巴结转移组（63．3％），P〈0.01；基质金属蛋白酶的表达与病理分级、临床分期没有显著相关性。结论：基质金属蛋白酶的高表迭有助于判断宫颈癌的转移潜能并指导临床治疗。     

面向成人教育的病理学教学设计与实施

针对成人教育发展的需要,从确定教学设计的思路和目标出发,在改革教学内容和课程体系、教学方法和手段、病理学教材、教学组织形式、课程考核方式以及规范教学管理等方面对成人教育病理学教学进行教学设计,并探讨了实施策略和体会。     

正义MMP-9可调控型表达与人黑色素瘤细胞系转移表型相关性的研究

目的：探讨金属蛋白酶MMP-9与肿瘤恶性表型的相关性。方法：利用基因重组技术构建正义MMP-9cDNA四环素可调控型表达载体，用脂质体法转染正义MMP-9至早期人黑色素瘤细胞株WM35(不表达MMP-9)。检测转染后细胞MMP-9表达水平的改变以及体外生长、侵袭能力的变化。结果：转染正义基因后，上调了WM35细胞MMP-9的表达及活性，细胞生长速度加快、锚着非依赖性生长能力增加、体外侵袭能力增强。而运用四环素可以抑制四环素负调控逆转录病毒载体上的外源基因的表达，结果与对照细胞相似。结论：正义MMP-9基因能促进人黑色素瘤细胞的生长和侵袭，说明MMP-9在人黑色素瘤细胞转移过程中起重要作用。同时，四环素负调控逆转录病毒载体可以调控外源基因的表达。     

肿瘤侵袭转移过程中基质金属蛋白酶作用机制系列研究

针对肿瘤侵袭转移过程中基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物的作用和调节机制进行了较深入的系列研究。在包括肺癌、前列腺癌和黑色素瘤的几组具有不同转移潜能的人肿瘤细胞系中，癌细胞产生MMP-2和MMP-9的能力与其侵袭转移能力密切相关。进一步通过反义基因转染技术证实，抑制MMP-9基因表达可以明显降低高转移癌细胞的体外侵袭及裸鼠体内自发转移能力。将金属蛋白酶组织抑制因子TIMP-1，TIMP-2和TIMP-3基因分别导入高转移癌细胞，可以观察到转染细胞的侵袭转移能力受到明显抑制。说明通过选择性抑制MMPs基因表达或增强TIMPs基因表达均可在一定程度上达到抑制肿瘤侵袭转移的目的。与此同时，我们应用定时控制表达技术分别将正义或反义MMP-9基因导入MMP-9不表达或高表达的黑色素瘤细胞，通过四环素控制的分子开关成功实现了MMP-9基因的定时控制表达，为提高临床基因治疗的效果提供了初步实验依据。     

Matrigel穿膜侵袭实验技术改进

侵袭和转移是恶性肿瘤最显的特征，Matrigel穿膜侵袭实验是研究肿瘤细胞在体外侵袭能力的常用实验之一，经常使用Boyden小室体外侵袭实验检测肿瘤细胞的侵袭潜能。但是在实验中常常并不能获得理想的结果，其原因是没有掌握实验的具体操作细节。我们经过反复的实践，通过技术改进，取得了较好的效果。     

低密度脂蛋白对体外培养的肾小球系膜细胞表型转化的影响

目的通过低密度脂蛋白(LDL)的刺激,观察LDL对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞表型转化的诱导作用。方法采用不同浓度的LDL(0,25,50,100,150μg/ml)刺激体外培养的大鼠肾小球系膜细胞的水平,以台盼蓝染色检测LDL对系膜细胞的毒性作用,MTT比色法检测细胞增殖,透射电镜观察系膜细胞的形态学变化,免疫细胞化学染色及Western blot检测α-SMA、CTGF、Ⅳ型胶原及FN的表达。结果在LDL作用下,倒置显微镜下细胞变为长梭形,透射电镜下细胞表面微绒毛减少。免疫细胞化学染色及Western blot显示α-SMA、CTGF、Ⅳ型胶原及FN表达增强。结论在LDL刺激下,系膜细胞可以发生表型转化。     

35例甲状腺肿瘤PTC癌基因表达的观察

越来越多的事实证明，肿瘤的发生、演进是一系列基因的改变所致，这些基因的改变影响和破坏了细胞增生的正常调控机制。对于甲状腺癌分子发生机制的研究文献报道较少，最近国外研究表明，甲状腺乳头状癌中经常出现ret癌基因，一种新的活化形式－PTC癌基因，PTC癌基因表达阳性证明肿瘤中存在ret癌基因的活化，目前国内尚未见有关文献报道。为此，我们采用逆转录－多聚酶链反应（RT－PCR）技术，对甲状腺癌中ret癌基因的活化形式，PTC癌基因的表达进行研究，以期检测PTC癌基因可作为甲状腺乳头状癌鉴别诊断和判断肿瘤生物学行为的有效…     

散发性乳腺癌BRCA1蛋白失表达的研究

目的探讨在散发性乳腺癌中影响易感基因（BRCA1）蛋白表达的因素及其与临床指征的关系。方法运用免疫组织化学SP法检测10例乳腺导管内乳头状瘤和48例乳腺癌组织中BRCA1的表达。结果在10例乳腺导管内乳头状瘤病例中,BRCA1蛋白阳性位于细胞核,阳性表达率为100％（10／10）;48例乳腺癌组织中BRCA1蛋白阳性表达位于细胞浆／细胞核和细胞浆,阳性率为56．3％（27／48）,二者差异有统计学意义（P〈0．01）;BRCA1的失表达率在〉40岁的发病年龄组高于≤40岁的发病年龄组（P〈0．05）。结论在散发性乳腺癌中,BRCA1的失表达高于良性肿瘤,并与高发病年龄相关,BRCA1基因表型的改变为乳腺癌的预后判断提供了新依据。     

上调EGR-1表达对乳腺癌多柔比星耐药细胞的化疗增敏作用

目的:探讨转录因子EGR-1对人乳腺癌多柔比星耐药细胞MCF-7/Adr的化疗增敏作用.方法:采用脂质体转染EGR-1质粒进入细胞,Annexin V-FITC/PI双标流式细胞术、MTT法、RT-PCR和蛋白质印迹分别检测MCF-7/Adr细胞早晚期凋亡、细胞增殖活性、EGR-1 mRNA和Caspase-3及P-gp蛋白表达.结果:稳定转染后,MCF-7/Adr细胞早期凋亡率显著增加达(41.43±2.34)%,与阴性对照组和空载体组比较差异有统计学意义,P＝0.011;细胞存活率明显下降,多柔比星100 μg/mL浓度作用下,转染组MCF-7/Adr细胞存活率仅为35%,P=0.037;MCF-7/Adr细胞中EGR-1 mRNA增加了(79.4±1.8)%,P=0.008;Caspase-3蛋白表达增加达(58.7±2.1)%,而P-gp蛋白质水平下调仅为(34.2±2.1)%,差异均有统计学意义,P<0.05.结论:上调EGR-1表达能有效逆转乳腺癌细胞多柔比星耐药,其可能与EGR-1上调耐药细胞中Caspase-3蛋白水平,诱导细胞发生凋亡相关.