睡眠剥夺及睡眠恢复后大鼠视交叉上核星形胶质细胞反应及其与神经元的关系

目的：探索睡眠剥夺及睡眠恢复后大鼠视交叉上核（SCN）星形胶质细胞的反应及其与神经元的关系。方法：采用水环境小平台法建立大鼠睡眠剥夺模型，12只大鼠随机分为睡眠剥夺（SD）24h组，睡眠剥夺24h后恢复睡眠（SR）3h组，大平台对照组（TC）和正常饲养组（NC），每组3只。用免疫组化方法检测胶原纤维酸性蛋白（GFAP）和Fos神经元在SCN的表达变化。结果：睡眠剥夺后GFAP和Fos在SCN表达明显增强，睡眠恢复后两者表达都降低．变化趋势基本一致。结论：星形胶质细胞可能与神经元共同参与睡眠的调节。     

五味子提取物对小鼠睡眠剥夺后脑组织自由基和一氧化氮的影响

目的：研究五味子提取物对小鼠完全睡眠剥夺氧化应激的保护作用。方法：采用改良的多平台水环境法（MMPM）制作小鼠完全睡眠剥夺模型，观察睡眠剥夺后小鼠脑组织的一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性变化，并考察五味子提取物对这些指标的影响。结果：与正常对照组比较，模型组睡眠剥夺48h后，脑组织NO、MDA含量和SOD、GSH-Px活性均升高；经五味子提取物干预后小鼠脑内各指标明显下降（P〈0．01-0．05），并趋于正常范围。结论：五味子提取物对小鼠全睡眠剥夺模型具有显著的保护作用。     

睡眠剥夺对缺血再灌注后心肌Caveolin-3表达与细胞凋亡的影响

目的：探究睡眠剥夺对缺血再灌注（I/R）后心肌Caveolin-3(Cav-3)表达与细胞凋亡的影响。方法：采用改良多平台水环境法建立小鼠急性睡眠剥夺模型，睡眠剥夺4 d后通过结扎小鼠冠状动脉左前降支45 min，随后再灌注120 min建立心肌I/R模型。采用苏木精-伊红染色法观察小鼠心肌病理改变，TTC染色测定I/R后小鼠心肌梗死面积，ELASA法测量血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）含量，脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL法）检测细胞凋亡，Western Blot法检测Cleaved caspase-3和Cav-3的表达水平。结果：与对照组比较，睡眠剥夺4 d后小鼠变得易怒、激惹，病理学观察提示睡眠剥夺后心肌组织纤维排列紊乱，进一步研究发现小鼠睡眠剥夺后血浆CK-MB含量及心肌细胞凋亡水平明显增加（TUNEL染色阳性细胞与Cleaved caspase-3水平均显著增加），而心肌Cav-3表达水平明显降低。在睡眠剥夺小鼠进一步遭受心肌I/R后，其心肌梗死面积、CK-MB含量及细胞凋亡水平进一步增加，而Cav-3表达进一步下调（P<0.05）。结论：睡...     

快速眼动睡眠剥夺后大鼠海马CB1受体表达及病理变化

目的：探讨不同时间的快速眼动（REM）睡眠剥夺对大鼠海马大麻素CB1受体表达的影响及其意义，并观察海马的结构改变。方法：42只Sprague—Dawley大鼠随机分为睡眠剥夺组、环境对照组和空白对照组。其中睡眠剥夺组和环境对照组又分为1d、3d和5d3个时点，用改良多平台睡眠剥夺法建立REM睡眠剥夺模型。应用RT—PCR方法检测大麻素CB1受体mRNA表达，并观察海马的病理变化。结果：睡眠剥夺1d组CB1受体mRNA表达较空白对照组、环境对照组、睡眠剥夺3d及5d组显著升高（P〈0．05），而睡眠剥夺3d组较睡眠剥夺1d及5d组显著降低（P〈0．05），睡眠剥夺5d组较睡眠剥夺3d组显著升高（P〈0．05）。光镜与电镜观察显示睡眠剥夺1d组神经元轻度固缩，染色质轻度边聚，睡眠剥夺3d及5d组有神经元凋亡。结论：REM睡眠剥夺可导致海马神经元凋亡；睡眠剥夺早期CB1受体表达反应性增高而后降低，至晚期出现一定程度恢复。     

Caspase-3、bax、bcl-2在睡眠剥夺大鼠心肌细胞中的表达及意义

目的：研究睡眠剥夺（SleepDeprivation,SD）对大鼠心肌细胞的影响及可能机制。方法：健康Wistar大鼠,随机分为大平台对照组、正常对照组、SD2日、4日、6日、8日组共6组,利用“小平台水环境法”（flowerpot）建立大鼠睡眠剥夺模型,用免疫组织化学方法观察SD后心肌细胞Caspase～3、bax、bcl-2基因表达的变化,进一步研究睡眠剥夺对大鼠心肌细胞损伤的作用机制。结果：睡眠剥夺各组Caspase-3、bcl～2、bax活性均高于大平台对照组及正常对照组（P〈0．05）,睡眠剥夺5日组细胞凋亡数量达到最高值。睡眠剥夺7目组细胞凋亡数量有降低趋势。大平台对照组与正常对照组比,细胞凋亡数量有增高趋势,但不如睡眠剥夺1日组高。结论：①睡眠剥夺可以导致心肌细胞调亡,并主要通过此途径引起心肌细胞死亡。②睡眠剥夺引起的心肌细胞调亡机制与bax大量表达,bcl-2／bax比值降低有关。⑧Caspase-3的高表达可以促进心肌细胞凋亡。     

慢性睡眠限制对幼鼠空间学习记忆能力的影响

目的 探讨慢性睡眠限制对幼鼠空间学习记忆能力的影响.方法 将24只1月龄SD雄性鼠随机分为慢性睡眠限制组、睡眠剥夺组和对照组,每组8只.对慢性睡眠限制组幼鼠进行连续5d每天6h的睡眠限制,采用“温和处理法”;对睡眠剥夺组幼鼠进行连续5d每天6h的睡眠剥夺,采用“多平台水环境法”.分别在睡眠干预前和干预第1、3、5天应用Morris水迷宫方法检测幼鼠的空间学习记忆能力.结果 水迷宫实验显示睡眠限制组、睡眠剥夺组幼鼠在睡眠干预的第3天、第5天,到达平台的平均潜伏期、探索路程较对照组延长（P＜0.05）,其中睡眠剥夺组在第5天的影响最显著（P＜0.01）;在睡眠干预的第5天,睡眠限制组、睡眠剥夺组幼鼠之间出现了差别,睡眠剥夺组幼鼠的潜伏期、探索路程较睡眠限制组延长（P＜0.05）;而在空间探测实验中,3组幼鼠在平台所在象限时间的百分比、穿环次数有显著差异：睡眠剥夺组较睡眠限制组减少（P＜0.05）,较对照组显著减少（P＜0.01）;睡眠限制组较对照组减少（P＜ 0.05）.结论 连续5d、每天6h的慢性睡眠限制可减弱幼鼠的空间学习记忆能力,但其影响程度小于同等时间的睡眠剥夺.     

睡眠剥夺减弱幼鼠空间学习记忆能力及海马信号转导

目的对pERK在幼鼠睡眠剥夺所致的学习记忆障碍中的作用进行初步探讨,以明确睡眠剥夺对儿童学习记忆的影响及其信号机制。方法 1月龄幼鼠分为正常对照组、大平台对照组、睡眠剥夺组,使用睡眠剥夺箱建立睡眠剥夺模型,使用Morris水迷宫训练检测幼鼠学习与记忆能力,使用免疫组织化学染色方法检测水迷宫测试后幼鼠海马CA1、CA2区pERK1/2表达水平。结果睡眠剥夺组幼鼠CA1、CA2脑区pERK1/2表达则明显少于两对照组（P值均小于0.01）,且着色浅淡。训练第1天,各组平均潜伏期无明显差异,但从第2天开始,睡眠剥夺组幼鼠的平台潜伏期较其它两个对照组出现延长（P〈0.05）,而且在最后1天进行的空间探索试验中,睡眠剥夺组幼鼠穿环数与正常及大平台对照组相比均明显减少（P〈0.01）。结论 幼鼠海马容易受到睡眠剥夺的影响,从而导致空间记忆的破坏和海马ERK磷酸化的减弱。同时也说明海马ERK激活的下降参与了睡眠剥夺导致的空间记忆的破坏。     

连续不同时间睡眠剥夺后大鼠脑干中c—fos蛋白的表达

目的 探索睡眠剥夺的脑机制。方法 该研究采用小平台水环境法建立大鼠睡眠剥夺模型，用fos蛋白免疫组化的方法分别测量睡眠剥夺12h、24h、48h、72h、96h组、大平台对照组、正常单独饲养组脑中fos蛋白的表达。结果 睡眠剥夺使fos蛋白在脑干中不同区域的表达不同，主要区域有孤束核、臂旁核、脑桥被盖核、脑桥网状结构、蓝斑下核及被盖背外侧核。结论 这些脑结构同异相睡眠有关，但不存在着明显地随睡眠剥夺时间延长表达增多的现象。     

睡眠剥夺对海马区单胺类神经递质、氨基酸代谢及小鼠行为的影响

目的 研究短期睡眠剥夺对小鼠海马脑区代谢的影响。方法 采用改良多平台水环境法建立睡眠剥夺模型。小鼠随机分为3组,每组10只,分别为正常对照组、睡眠剥夺24 h组和睡眠剥夺48 h组。采用旷场实验评价小鼠焦虑样行为,采用糖水偏好实验、强迫游泳和悬尾实验评价小鼠的抑郁样行为;应用高效液相色谱法（high performance liquid chromatography, HPLC）对小鼠海马脑区5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）、γ-氨基丁酸（GABA）、二羟基苯乙酸（5-DOPAC）、高香草酸（HVA）6种单胺类神经递质及谷氨酸（Glu）、天冬氨酸（Asp）、丝氨酸（Ser）、牛磺酸（Tau）4种氨基酸的含量进行测定;采用免疫荧光染色技术检测每组小鼠海马脑区胶质细胞表达量。主要指标为单胺类神经递质与氨基酸含量的测定。结果 行为学结果表明与对照组相比,睡眠剥夺24 h组糖水偏好率上升,强迫游泳不动时间、悬尾不动时间显著缩短,旷场总运动距离增加;睡眠剥夺48 h组糖水偏好率下降、强迫游泳及悬尾不动时间延长,旷场总运动距离降低。单胺类递质HPLC检测结果表明,与对照...     

睡眠剥夺后大鼠大脑5—HT1A和5—HT2A受体的表达

目的 观察大鼠睡眠剥夺后相关脑区5－HT受体亚型的表达情况，探讨大鼠睡眠的5－HT机制。方法 以大平台作为对照组，采用小平台水环境法对大鼠进行睡眠剥夺，根据5－HT1A和5－HT2A受体互补DNA序列合成相应的特异性引物，用PCR法观察大鼠睡眠剥夺后海马、下丘脑和中脑5－HT1A和5－HT2A受体表达。结果 大鼠睡眠剥夺后海马和中脑5－HT1A受体表达增强，与对照组比较有显著性差异（P＜0．01－0．05），下丘脑无明显变化。实验组和对照组各脑区5－HT2A受体无明显变化。结论 5－HT1A与大鼠的睡眠调节有关。     

睡眠剥夺对大鼠心肌细胞bcl-2、bax表达的影响及相关机制的研究

目的:探讨睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)对大鼠心肌细胞bcl-2、bax表达的影响.方法:利用"小平台水环境法"(flower pot)建立大鼠睡眠剥夺模型,将实验大鼠随机分为睡眠剥夺1、3、5、7日组及大平台对照组、正常对照组共6组,用免疫组织化学方法观察睡眠剥夺后心肌细胞bcl-2、 bax基因表达的变化.结果:睡眠剥夺各组 bcl-2、bax活性均高于大平台对照组及正常对照组(P<0.05),睡眠剥夺5日组心肌细胞bax表达达到最高值,睡眠剥夺7日组心肌细胞bax表达有降低趋势. 睡眠剥夺各组心肌细胞bcl-2表达随睡眠剥夺时间的延长而逐渐降低.大平台对照组与正常对照组比较无差异(P>0.05).结论:睡眠剥夺可引起心肌细胞凋亡,并通过此途径导致心肌细胞死亡.睡眠剥夺引起的心肌细胞凋亡机制与bax大量表达、bcl-2/bax比值降低有关.     

睡眠剥夺对大鼠肝脏铁代谢的影响

目的 探讨睡眠剥夺对大鼠肝脏铁代谢的影响及相关分子机理.方法 20只雄性SD大鼠（180±10 g）随机分为对照组（CG）和睡眠剥夺组（SDG）.CG大鼠正常饲养,SDG大鼠采用改良多平台睡眠剥夺法建立模型.睡眠剥夺5d后,采用比色法检测血清、肝组织铁离子浓度,实时荧光定量PCR检测肝组织铁调素基因HAMP及IL-6、IL-1 mRNA表达水平,Western-Blot检测肝组织铁蛋白、磷酸化STAT3蛋白表达.结果 与CG组相比,SDG大鼠血清铁离子降低（P＜0.05）,而肝脏内的铁离子浓度升高（P＜0.01）;SDG大鼠肝组织HAMP、IL-6和IL-1 mRNA表达量分别升高1.1、3.2和1.7倍（P值均小于0.01）;SDG大鼠肝脏组织铁蛋白和pSTAT3蛋白表达显著高于对照组（P＜0.01）.结论 睡眠剥夺可能通过IL-6-hepcidin轴导致大鼠机体铁代谢紊乱.     

快速眼动期睡眠剥夺诱导大鼠焦虑相关自我修饰行为及血清5-HT浓度的研究

目的观察快速眼动期（REM）睡眠剥夺诱导大鼠焦虑相关自我修饰行为指标以及与血清5-羟色胺（5-HT）浓度的相关性。方法将24只大鼠随机分为睡眠剥夺组和对照组,每组12只。对照组大鼠常规饲养,不予干扰睡眠;睡眠剥夺组采用改良的多平台水环境法,通过72hREM睡眠剥夺诱导大鼠焦虑样行为。造模前后两组均进行旷场（OF）试验,造模后两组通过高架O迷宫（EOM）试验和自我修饰行为分析进行焦虑的量化评定,并检测血清5-HT浓度。结果造模前,睡眠剥夺组水平和垂直分数与对照组比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）;造模后睡眠剥夺组水平和垂直分数均明显低于对照组（均P＜0.01）;睡眠剥夺组进入闭合臂次数多于对照组,进入开放臂次数的百分比低于对照组（均P＜0.05）;睡眠剥夺组错误的转换次数（IT）、中断修饰的次数、错误的转换百分比（IT%）和中断梳理的百分比均较对照组为高（均P＜0.01）;对照组血清5-HT浓度高于睡眠剥夺组,睡眠剥夺组IT％与5-HT浓度之间存在负向相关性（P＜0.05）。结论REM睡眠剥夺诱导了焦虑样行为,且其中自我修饰行为参数与血清5-HT浓度存在一定相关性。     

剥夺睡眠对人体免疫功能的影响

目的探讨睡眠与免疫功能的关系。方法采用流式细胞仪和单向琼脂扩散法对20例军校学员进行了剥夺睡眠48h后细胞免疫和体液免疫功能的测定。结果剥夺睡眠48h后，T细胞亚群CD4、CD8以及免疫球蛋白lgG、IgA、IgM和补体C3、C4的含量与剥夺睡眠前相比无显著性差异（P>0.05），NK细胞值则显著降低（P＜0．01）。结论剥夺睡眠48h对人体免疫功能有影响，睡眠与免疫功能有关。     

睡眠剥夺合并术后疼痛对小鼠记忆力的影响

目的 研究睡眠剥夺合并术后疼痛对小鼠学习记忆能力的影响.方法 昆明种小鼠30只,随机分为正常组、假手术组、睡眠剥夺合并术后疼痛组.采用小平台法建立小鼠睡眠剥夺模型后行坐骨神经结扎术建立睡眠剥夺合并术后疼痛小鼠模型,用跳台法和避暗法实验分别于术后4 h、28 h观察各组小鼠的潜伏期和错误次数,以评估睡眠剥夺合并术后疼痛对小鼠学习记忆能力的影响.结果 与正常组、假手术组比较,睡眠剥夺合并术后疼痛组在跳台法和避暗法实验中的潜伏期均缩短、错误次数均增加(P＜0.05).结论 睡眠剥夺合并术后疼痛可导致小鼠学习记忆能力下降.     

睡眠剥夺及恢复睡眠1小时后大鼠脑干中c-Fos蛋白的表达

目的探索睡眠剥夺和睡眠剥夺后恢复睡眠1小时后脑干中c-Fos蛋白的表达.方法采用小平台水环境法建立大鼠睡眠剥夺模型,用Fos蛋白免疫组化的方法分别测量睡眠剥夺24小时组、睡眠剥夺24小时后恢复睡眠1小时组、大平台对照组、正常单独饲养组脑中Fos蛋白的表达,每组4只.结果睡眠剥夺使Fos蛋白在脑干中不同区域的表达不同,主要区域有孤束核、臂旁核、脑桥被盖核、脑桥网状结构、蓝斑下核及被盖背外侧核;睡眠剥夺后1小时大鼠大部分时间在睡眠,并且上述区域Fos蛋白表达阳性程度减轻,为中低密度.结论睡眠剥夺后1小时的恢复性睡眠可以使脑中c-Fos蛋白表达减轻.     

睡眠剥夺对大鼠脑5—羟色胺代谢及行为的影响

目的 探讨长时间睡眠剥夺对大鼠下脑脑和脑干５－羟色胺（５－ＨＴ）代谢及行为的影响。方法 用水上转盘睡眠剥夺模型对大鼠分别进行２４ｈ，４８ｈ，７２ｈ睡眠剥夺，观察睡眠剥夺后下丘脑，脑干两脑区５－ＨＴ代谢的变化，同时利用矿场实验观察大鼠主动行为的改变。结果 睡眠剥夺大鼠的矿场得分较非剥夺大鼠高（Ｐ〈０．０５），但随着时间的延长出现下降趋势，５－ＨＴ向５－羟吲哚乙酸（５－ＨＩＡＡ）转化在经过２４ｈ睡眠剥     

睡眠剥夺及恢复睡眠1小时后大鼠脑干中c—Fos蛋白的表达

目的：探讨睡眠剥夺和睡眠剥夺后恢复睡眠1小时后脑干中c-Fos蛋白的表达。方法：采用小平台水环境法建立大鼠睡眠剥夺模型,用Fos蛋白免疫组化的方法分别测量睡眠剥夺24小时组、睡眠剥夺24小时后恢复睡眠1小时组、大平台对照组、正常单独饲养组脑中Fos蛋白的表达,每组4只。结果：睡眠剥夺使Fos蛋白在脑干中不同区域的表达不同,主要区域有孤束核、臂旁核、脑桥被盖核、脑桥网状结构、蓝斑下核及被盖背外侧核;睡眠剥夺后1小时大鼠大部分时间在睡眠,并且上述区域Fos蛋白表达阳性程度减轻,为中低密度。结论：睡眠剥夺后1小时的恢复性睡眠可以使脑中c-Fos蛋白表达减轻。     

睡眠剥夺条件下大鼠中枢神经系统c-fos和nestin的表达特点

目的:分析睡眠剥夺条件下大鼠中枢神经系统c-fos和nestin在不同部位的表达特点,为进一步研究睡眠剥夺所造成生理影响的分子机制提供线索.方法:采用小平台水环境法建立大鼠睡眠剥夺24,48,72 h模型,设立大平台对照组和正常饲养对照组,RT-PCR方法分别检测各组大鼠海马、皮质和小脑中c-fos和nestin的表达水平.结果:与对照组相比,睡眠剥夺组c-fos表达升高,nestin表达降低.结论:睡眠剥夺影响大鼠中枢神经系统c-fos和nestin基因的表达.     

连续不同时间睡眠剥夺后大鼠脑干中c-fos蛋白的表达

目的探索睡眠剥夺的脑机制.方法该研究采用小平台水环境法建立大鼠睡眠剥夺模型,用fos蛋白免疫组化的方法分别测量睡眠剥夺12h、24h、48h、72h、96h组、大平台对照组、正常单独饲养组脑中fos蛋白的表达.结果睡眠剥夺使fos蛋白在脑干中不同区域的表达不同,主要区域有孤束核、臂旁核、脑桥被盖核、脑桥网状结构、蓝斑下核及被盖背外侧核.结论这些脑结构同异相睡眠有关,但不存在着明显地随睡眠剥夺时间延长表达增多的现象.