生脉散对失血性休克大鼠肝脏细胞液糖皮质激素受体的调节

目的：观察生脉散对失血性休克大鼠肝脏细胞液糖皮质激素受体的调节作用。方法：实验于2005—06／10在佳木斯大学基础医学院病理学教研室完成。选择成年雄性Wistar大鼠36只，按随机数字表法分为失血性休克模型组、生脉散加失血性休克组和假手术组3组，每组12只。制备失血性休克模型。生脉散加失血性休克组于放血前1d灌胃给予生脉散1mL，放血前1h加服一次，于放血后4，8h及处死前1h再分别灌胃给予生脉散1mL（生脉散由佳木斯大学附属医院中药局提供，人参、麦冬、五味子按2：3：2的比例组成，煎制为含生药1kg／L）。假手术组颈动脉插管后不放血。失血性休克模型组及假手术组灌胃生理盐水，注入量、次数、时间均与生脉散加失血性休克组给药相同。3组动物均于放血12h后快速断头处死，每组中6只参照谭金兴等方法制备肝细胞液，以^3H-地塞米松为放射配体，采用放射配体结合法进行检测。制图求解离常数值和糖皮质激素受体的结合容量，同时测定血浆皮质酮浓度。另每组6只采用一点分析法测定肝细胞糖皮质激素受体，结果用受体特异结合量和受体特异结合位点表示。结果：在实验过程中无动物死亡，全部进入结果分析。①失血性休克模型组和生脉散加失血性休克组大鼠血浆中皮质酮含量比假手术组均明显升高[（29．6&;#177;4．7），（12．3&;#177;4．5）μg/L，t=6．51，P〈0．01]；[（34．4&;#177;3．8），（12．3&;#177;4．5）μg/L，t=9．19，P〈0．01]；失血性休克模型组与生脉散加失血性休克组皮质酮含量差异无显著性（t=1．95；P〉0．05）。②失血性休克模型组和生脉散加失血性休克组大鼠肝细胞液糖皮质激素受体解离常数较假手术组均明显增高[（1．21&;#177;0．46），（0．59&;#177;0．23）nmol／L；t=2．95，P〈0．011；[（1．30&;#177;0．53），（0．59&;#177;0．23）nmol／L；t=3．01，P〈0．01]；失血性休克模型组与生脉散加失血性休克组差异无显著性（t=0．31，P〉0．05）。③失血性休克模型组大鼠肝细胞液糖皮质激素受体结合容量较假手术组明显降低[（352．2&;#177;20．1），（519．7&;#177;27．1）pmol／g；t=12．16，P〈0．011，生脉散加失血性休克组肝细胞液糖皮质激素受体结合容量明显高于失血性休克模型组[（516．9&;#177;31．5），（352．2&;#177;20．1）pmol／g，t=10．79，P〈0．01]，与假手术组差异无显著性（t=0．16，P〉0．05）。④失血性休克模型组大鼠肝细胞液糖皮质激素受体特异结合量和受体特异结合位点较假手术组明显降低[（526．1&;#177;46．7），（978．5&;#177;53．3）pmol／g；t=15．64，P〈0．01]；生脉散加失血性休克组明显高于失血性休克组[（672．6&;#177;47．1），（526．1&;#177;46．7）pmol／g；t=5．41，P〈0．011，但低于假手术组（t=10．57，P〈0．01）。结论：生脉散可升高失血性休克大鼠血浆糖皮质激素含量，提高失血性休克大鼠肝细胞糖皮质激素受体结合容量和受体特异结合位点，并增加糖皮质激素受体解离常数。生脉散的抗休克作用与其减轻休克时糖皮质激素受体且不影响血浆糖皮质激素水平，增强糖皮质激素受体功能有关。     

宫颈癌组织中PTEN和COX-2的表达与侵袭转移的关系

目的探讨宫颈癌组织中PTEN和COX-2的表达与侵袭转移的关系。方法采用免疫组化SP法检测68例宫颈癌组织中PTEN和COX-2的表达情况。结果 PTEN在宫颈癌组织中阳性表达率明显低于正常宫颈组织,差异有统计学意义（P〈0.01）,且与淋巴结转移显著相关（P〈0.05）;而COX-2阳性表达率显著高于正常宫颈组织（P〈0.01）,与淋巴结转移显著相关（P〈0.05）;在癌组织中PTEN和COX-2表达呈负相关。结论PTEN和COX-2的异常表达与宫颈癌的发生、发展及淋巴结转移密切相关,两者共同参与了宫颈癌发生和侵袭转移。     

红景天对大鼠肝纤维化肝脏组织中TIMP-1、Smad4表达的影响

目的探讨红景天对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化肝组织基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)、Smad4基因表达的影响。方法健康雄性SD大鼠60只随机分为①正常对照组、②肝纤维化模型组、③红景天干预组,每组20只。以CCl4腹腔注射法诱导大鼠肝纤维化,红景天干预组大鼠在造模的同时给予红景天灌胃,正常对照组给予橄榄油和生理盐水灌胃,8 w实验结束时处死动物,留取的肝脏组织做HE染色,按0～4期标准判定肝纤维化程度,应用半定量RT-PCR检测肝组织中TIMP-1 mRNA、Smad4 mRNA的表达情况,用免疫组化检测肝组织中TIMP-1、Smad4的表达。结果模型组大鼠肝纤维化程度处于2～4期,其中大部分达3期以上,红景天干预组大鼠肝纤维化程度明显减轻,只有少部分达3期。红景天干预组大鼠肝组织中TIMP-1 mRNA阳性表达水平及蛋白阳性表达均低于模型组(P<0.05);红景天干预性治疗组肝脏Smad4 mRNA及蛋白表达阳性率明显低于模型组(P<0.05);肝组织TIMP-1,Smad4蛋白表达与TIMP-1,Smad4 mRNA水平变化呈正相关。结论中药红景天能有效抑制CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝脏中TIMP-1、Smad4表达。     

生脉散对失血性休克大鼠肝脏细胞液糖皮质激素受体的调节

目的:观察生脉散对失血性休克大鼠肝脏细胞液糖皮质激素受体的调节作用。方法:实验于2005-06/10在佳木斯大学基础医学院病理学教研室完成。选择成年雄性Wistar大鼠36只,按随机数字表法分为失血性休克模型组、生脉散加失血性休克组和假手术组3组,每组12只。制备失血性休克模型。生脉散加失血性休克组于放血前1d灌胃给予生脉散1mL,放血前1h加服一次,于放血后4,8h及处死前1h再分别灌胃给予生脉散1mL(生脉散由佳木斯大学附属医院中药局提供,人参、麦冬、五味子按2∶3∶2的比例组成,煎制为含生药1kg/L)。假手术组颈动脉插管后不放血。失血性休克模型组及假手术组灌胃生理盐水,注入量、次数、时间均与生脉散加失血性休克组给药相同。3组动物均于放血12h后快速断头处死,每组中6只参照谭金兴等方法制备肝细胞液,以3H-地塞米松为放射配体,采用放射配体结合法进行检测。制图求解离常数值和糖皮质激素受体的结合容量,同时测定血浆皮质酮浓度。另每组6只采用一点分析法测定肝细胞糖皮质激素受体,结果用受体特异结合量和受体特异结合位点表示。结果:在实验过程中无动物死亡,全部进入结果分析。①失血性休克模型组和生脉散加失血性休克组大鼠血浆中皮质酮含量比假手术组均明显升高[(29.6±4.7),(12.3±4.5)μg/L,t=6.51,P<0.01];[(34.4±3.8),(12.3±4.5)μg/L,t=9.19,P<0.01];失血性休克模型组与生脉散加失血性休克组皮质酮含量差异无显著性(t=1.95;P>0.05)。②失血性休克模型组和生脉散加失血性休克组大鼠肝细胞液糖皮质激素受体解离常数较假手术组均明显增高[(1.21±0.46),(0.59±0.23)nmol/L;t=2.95,P<0.01];[(1.30±0.53),(0.59±0.23)nmol/L;t=3.01,P<0.01];失血性休克模型组与生脉散加失血性休克组差异无显著性(t=0.31,P>0.05)。③失血性休克模型组大鼠肝细胞液糖皮质激素受体结合容量较假手术组明显降低[(352.2±20.1),(519.7±27.1)pmol/g;t=12.16,P<0.01],生脉散加失血性休克组肝细胞液糖皮质激素受体结合容量明显高于失血性休克模型组[(516.9±31.5),(352.2±20.1)pmol/g,t=10.79,P<0.01],与假手术组差异无显著性(t=0.16,P>0.05)。④失血性休克模型组大鼠肝细胞液糖皮质激素受体特异结合量和受体特异结合位点较假手术组明显降低[(526.1±46.7),(978.5±53.3)pmol/g;t=15.64,P<0.01];生脉散加失血性休克组明显高于失血性休克组[(672.6±47.1),(526.1±46.7)pmol/g;t=5.41,P<0.01],但低于假手术组(t=10.57,P<0.01)。结论:生脉散可升高失血性休克大鼠血浆糖皮质激素含量,提高失血性休克大鼠肝细胞糖皮质激素受体结合容量和受体特异结合位点,并增加糖皮质激素受体解离常数。生脉散的抗休克作用与其减轻休克时糖皮质激素受体且不影响血浆糖皮质激素水平,增强糖皮质激素受体功能有关。     

醋酸氨银染色法网状纤维染色与免疫组织化学双重染色技术

病理诊断中癌组织的早期侵润在良恶性肿瘤鉴别中有极重要的诊断意义,但一般的组化染色无法确定上皮细胞是否真正破坏并侵犯基底膜。我们采用醋酸氨银网状纤维染色法和免疫组织化学SABC双重染色法[1],在石蜡切片中同时显示基底膜和癌变腺体成分,使癌的早期侵犯很容易诊断,由于该     

PCNA、HSP70在星形胶质细胞瘤中的表达及其临床意义

目的:研究增殖细胞核抗原(PCNA)、热休克蛋白70(HSP70)在星形胶质细胞瘤中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法对43例人脑胶质瘤石蜡标本中PCNA、HSP70进行检测。标本均为星形胶质细胞瘤,病理级别为Ⅰ~Ⅳ级。观察其与胶质瘤临床病理分级的关系及其相关性。结果:PCNA和HSP70在脑星形细胞瘤中的表达程度明显增高,并且发现二者表达的阳性率随着胶质瘤病理级别的升高而升高,不同级别之间存在显著性差异,二者呈正相关。结论:检测脑胶质瘤组织中PCNA、HSP70表达能够快速、准确地反映肿瘤细胞的增殖状态及评价预后,对判定胶质瘤的恶性程度及指导治疗有一定意义。     

山茱萸多糖对阿尔茨海默病模型大鼠GSK-3β和磷酸化GSK-3β的影响

目的 研究山茱萸多糖对阿尔茨海默病(AD)大鼠GSK-3β和磷酸化GSK-3β的影响,探讨其对AD大鼠的保护作用机制.方法 清洁级Wistar大鼠120只,随机分为青年组、假手术组、模型组、多奈哌嗪对照组、山茱萸多糖水提液组、山茱萸水煎剂组,每组20只.采用海马注射Aβ-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)制作AD大鼠模型,免疫组化(SABC)法和免疫蛋白印迹法检测GSK-3β蛋白和GSK-3β(Ser9)蛋白的表达水平.结果 与青年组、假手术组比较,模型组大鼠海马组织GSK-3β蛋白表达增加(P＜0.05),GSK-3β(Ser9)蛋白表达降低(P＜0.05);与模型组比较,多奈哌嗪对照组,山茱萸多糖水提液组,山茱萸水煎剂组大鼠的GSK-3β蛋白表达显著减少(P＜0.05),GSK-3β(Ser9)蛋白表达增加(P＜0.05).结论 山茱萸多糖通过抑制GSK-3β蛋白过度激活,促进GSK-3β(Ser9)蛋白表达途径防治AD的发生发展.     

人胃癌中P~(16),P~(53),C-erbB-2基因表达与癌转移关系的研究

胃癌是人类最常见的恶性肿瘤之一 ,发生机理尚不十分清楚。研究表明 ,癌基因的激活和抑癌基因的失活在胃癌的发生发展及癌细胞转移过程中起着重要作用 [1 ] 。本研究运用免疫组化 SP法 ,对 92例手术切除胃癌组织及所属淋巴结和2 8例癌旁正常粘膜组织石蜡标本进行了抑癌基因 P1 6 、P53突变型、原癌基因 C- erb B- 2蛋白进行了检测 ,就三个基因对胃癌淋巴转移的作用进行了分析。1　材料和方法1.1　癌组织采集和标本制备92例胃癌标本及所属淋巴结 ,取自 1997～ 2 0 0 2年佳木斯大学附属第一医院行胃癌根治术的癌标本 ,另取癌旁正常胃粘膜组…     

有机铬对实验性糖尿病大鼠胰腺保护作用的观察

目的：观察有机铬对实验性糖尿病大鼠胰腺的保护作用。方法：用灌胃的方式增加糖尿病大鼠体内的有机铬含量，观察灌胃12周后糖尿病大鼠的血糖浓度、血清胰岛素浓度及胰腺的病理改变。并与正常大鼠及未治疗组大鼠加以比较。结果：治疗组大鼠血糖浓度及血清胰岛素浓度与未治疗组相比具有明显差异。胰腺组织结构改善明显。结论：有机铬能保护糖尿病鼠胰腺组织．增加血清胰岛素，降低血糖。