过敏性紫癜患儿尿转铁蛋白、微量白蛋白和β2-微球蛋白测定及临床意义

目的通过检测尿转铁蛋白（TRF）、微量白蛋白（MA）和β2-微球蛋白（β2-MG）的水平变化,了解它们在过敏性紫癜（HSP）患儿早期肾损伤中的临床意义。方法采用免疫散射比浊法分别测定58例HSP患儿TRF、MA和β2-MA含量。结果HSP患儿尿3项蛋白含量与对照组比较,差异无显著意义（P〉0．05）;过敏性紫癜性肾炎组（HSPN）尿三项蛋白明显高于HSP组,差异有极显著性意义（P〈0．01）。结论尿转铁蛋白、微量白蛋白和β2-微球蛋白的检测是诊断早期HSP肾损伤的灵敏指标,可作为判断HSP肾损害严重程度的指标。     

短期应用糖皮质激素对过敏性紫癜患儿尿微量白蛋白和β2-微球蛋白的影响

目的探讨短期应用糖皮质激素对过敏性紫癜（HSP）患儿尿微量白蛋白（MA）和尿β2-微球蛋白（β2-MG）的影响。方法将临床确诊为过敏性紫癜患儿65例随机分成治疗组33例及对照组32例。治疗组在常规治疗基础上给予短期糖皮质激素治疗,对照组给予常规治疗,比较两组患儿尿中MA及β2-MG的水平。结果治疗组HSP患儿尿中MA及β2-MG均较对照组明显降低（P〈0.05）。结论短期应用糖皮质激素能降低过敏性紫癜患儿尿微量白蛋白和β2-微球蛋白的含量。     

儿童过敏性紫癜尿微量蛋白测定及临床意义

目的：了解尿微量蛋白检测在过敏性紫癜（HSP）患儿早期肾损伤的临床意义。方法：采用免疫散射比浊法测定56例HSP患儿尿微量白蛋白（MA）、转铁蛋白（TRF）、β2-微球蛋白（β2-MG）的含量。结果：HSP患儿尿三项蛋白含量高于对照组，但差异无显著意义，P〉0．05。过敏性紫癜性肾炎（HSPN）组尿微量蛋白明显高于HSP组。差异有显著性意义，P〈0．01。结论：尿微量蛋白的检测是诊断HSP早期肾损伤的灵敏指标。可作为判断HSP肾损害严重程度的指标之一。     

尿微量蛋白在早期诊断儿童过敏性紫癜肾脏损害中的应用

目的:探讨尿微量蛋白中的尿微量白蛋白(UAlb)和β2-微球蛋白(β2-MG)的检测对早期诊断儿童过敏性紫癜肾脏损害的临床意义。方法:选取本院儿科住院的患有过敏性紫癜的患儿共72例作为观察组(分为HSP组HSPN组)。对照组选取体检健康的儿童50例。观察组晨起用尿干化学试带法测定尿常规,用免疫比浊法测定β2-微球蛋白含量和尿微量白蛋白含量,再取24h尿液用甲苯防腐,取10ml离心,之后用终点法测24h尿总蛋白定量的值。对照组标本的留取和检测项目、方法与观察组相同,记录实验结果,对数据进行统计学分析。结果:对照组与HSP组和HSPN组的尿微量蛋白测定的比较有统计学意义(P<0.01),而尿蛋白定量HSP组对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),同时尿常规和尿蛋白定量在异常检出率方面明显低于尿微量白蛋白和β2-微球蛋白。结论:尿微量蛋白(UAlb和β2-MG)的检测可作为早期检测儿童过敏性紫癜肾脏损伤的灵敏性指标。     

过敏性紫癜患儿检测尿微量蛋白的临床意义

目的探讨尿微量蛋白检测对判断过敏性紫癜患儿肾损害程度的临床意义。方法收集急性期过敏性紫癜患儿82例,按尿常规检查结果分为过敏性紫癜（HSP）组（53例）和紫癜性肾炎（HSPN）组（29例）。采用免疫散射比浊法检测两组患儿尿IgG、微量白蛋白（MA）、1-微球蛋白（1-MG）和2-微球蛋白（2-MG）的水平,并与40例健康儿童（对照组）的检测结果进行比较。结果 HSP组尿IgG与对照组差异无统计学意义（P〉0.05）,尿MA、尿1-MG、尿2-MG与对照组差异均有统计学意义（均P〈0.01）;HSPN组尿IgG、尿MA、尿1-MG、尿2-MG水平均高于HSP组,差异均有统计学意义（均P〈0.01）。结论尿微量蛋白水平是判断过敏性紫癜患儿肾损害的有效指标,定期检测以便及早干预,改善预后。     

B7特异性RNA干扰对皮肤移植的影响

目的探讨RNA干扰技术阻断B7／CD28共刺激信号对小鼠异体皮肤移植排斥反应的影响。方法设计并合成B7特异性siRNA,在脂质体的介导下转染树突状细胞,转染后72h收集细胞,用蛋白印迹法检测B7-1、B7-2蛋白的表达。在小鼠异体皮肤移植前7d,经静脉将转染B7特异性siRNA的DC输入小鼠体内（DC转染组）,同时设立同种异体移植对照组、同系移植对照组、环孢素A（CsA）治疗组（术后每日皮下注射CsA5mg／kg）和未转染DC组（移植前输注未转染DC）,观察各组移植皮瓣的存活时间和排斥反应情况,并用MTT法检测混合淋巴细胞增殖反应,术后1个月观察迟发性超敏反应情况。结果Western Blot结果显示转染72h后,siRNA1对B7-1蛋白表达的抑制率为（77.2±6.26）％;siRNA2对B7-2蛋白表达的抑制率为（73.3±5.42）％。与同种异体移植对照组和未转染DC组比较,DC转染组移植皮瓣成活时间明显延长（P〈0.01）,组织排斥反应程度较轻,混合淋巴细胞反应和DTH反应显著降低（P〈0.01）。结论聊特异性siRNA可明显抑制树突细胞B7基因的表达,以阻断B7／CD28共刺激通路,抑制小鼠皮肤移植排斥反应,为进一步研究siRNA诱导免疫耐受提供了新方法。     

慢性肾小球肾炎患者外周血CD28/B7水平表达及其临床意义

目的 观察慢性肾小球肾炎患者外周血共刺激分子CD28／B7的表达特点，以期探讨其在肾小球肾炎发病机制中的作用。方法 采用流式细胞仪，对25例慢性肾小球肾炎患者和15例正常对照组外周血CD3，CD4，CD8，CD28，CD4CD28，CD8CD28，B7的表达进行了研究。结果 25例慢性肾小球肾炎患者CD3水平与正常对照组相比无明显差异（P＞0．05），而CD4，CD28，CD4CD28，CD8CD28表达水平显著低于正常对照组，CD8，B7表达水平显著高于正常对照组。结论 慢性肾小球肾炎中，细胞免疫功能异常，尤其是共刺激分子CD28／B7异常在其发病过程中起着重要作用。     

B7家族负性共刺激分子在肺区域免疫构建过程中的表达变化

目的 了解B7家族负性共刺激分子在肺发育过程中表达的时空特异性,探索B7家族负性共刺激分子在肺区域免疫构建中的作用。方法 利用已获得的恒河猴不同发育时期肺组织RNA测序（RNA-seq）数据,采用每千碱基长度在每百万读值中的匹配数(RPKM)分析法,分析B7家族负性共刺激分子（B7-1、B7-2、B7-H1、B7-DC）基因的相对表达变化。收集小鼠肺发育过程中不同时间点（小管期、囊状期、肺泡期）的肺组织标本,利用免疫组化的方法,检测B7家族负性共刺激分子在小鼠肺发育过程中的时空特异性表达及定位。结果 恒河猴RNA测序数据显示,B7家族负性共刺激分子的mRNA在围产期（囊状期、肺泡期）表达上升,其中B7-2、B7H1基因的表达在肺泡期较前2期上升（P<0.05）。小鼠肺组织的免疫组化结果显示,B7家族负性共刺激分子蛋白表达水平在围产期也呈现上升趋势,其中B7-2、B7-H1、B7-DC表达在围产期较小管期上升（P<0.05）,且主要表达于气道上皮细胞中。进一步分析蛋白在不同分级气道中的表达,发现B7-2蛋白在主气道上皮细胞中的表达量高于终末气道上皮细胞（P<0.05）。结论 B7家族负性共刺激分子在肺发育过程中主要表达于气道上皮细胞中,且在围产期表达水平有显著增加,提示B7家族负性共刺激分子可能参与肺区域免疫调控。     

急性白血病细胞B7-1及MHC分子的表达

目的：探讨共刺激分子B7-1(CD80)及MHC分子在急性白血病(acute leukemia，AL)中的表达，方法：应用一组mAb，采用免疫荧光法对AL52例瘤细胞及34例正常人骨髓单个核细胞（BMMC)表面B7-1及主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex，MHC)分子的表达进行了检测．结果：所有患瘤细胞及正常人BMMC上MHCI类分子表达强阳性，MHCⅡ类分子表达920k，阳性，而B7-1表达差异较大，急性单核细胞白血病(M5)表达阳性率最高(8／11)，而急性粒细胞白血病(M1，M2，M3)均无表达．结论：B7-1缺陷是白血病细胞逃避宿主免疫监视的重要原因，转染B7-1基因的瘤苗可能是免疫基因治疗的有效途径。     

过敏性紫癜肾炎患儿尿微量蛋白与MMP-9的关系

目的:检测过敏性紫癜肾炎(HSPN)患儿尿微量蛋白和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平的变化,以评价二者之间的相关性。方法:47例过敏性紫癜(HSP)患儿按尿白蛋白排泄率(UAER)分成HSP组和HSPN组,免疫散射速率比浊法检测各组尿微量蛋白(微量白蛋白mAlb、免疫球蛋白IgG和转铁蛋白TRF)含量,ELISA法检测尿MMP-9水平,并与20例健康儿童进行比较。结果:HSP组和HSPN组尿微量蛋白和MMP-9均显著高于对照组(P<0.05),各组间存在显著性差异(P<0.05),MMP-9水平随微量蛋白的增加而升高;MMP-9与mAlb、IgG、TRF均呈显著正相关(r=0.641、0.572、0.835,P<0.01)。结论:过敏性紫癜肾炎患儿尿MMP-9表达与尿微量蛋白水平高低密切相关,二者在HSPN的发生发展中起重要作用。     

小鼠B7-1和B7-2基因转染EL4细胞瘤苗抗肿瘤免疫作用的比较研究

目的：研究冠状动脉分流（CABG）术后冠状动脉竞争血流对左乳房内动脉（LIMA）桥血流中内皮素（ET）、一氧化氮（NO）含量的影响，探讨动脉桥血管早期衰坏的分子机制。方法：建立猪CABG术后桥血管竞争血流动物模型，利用血流闭塞器造成冠状动脉不同程度狭窄，测量桥血管血流量及方向变化，并采用放射免疫分析法及硝酸还原酶法分别检测LIMA桥血流中ET、NO含量并进行对比分析。结果：冠状动脉左前降支（LAD）近端狭窄程度越轻，LIMA桥血流量越少；LAD近端未完全闭塞时，LIMA桥均出现双向血流。CABG术后LIMA桥血流ET含量明显高于移植前(P＜0.05)，NO含量明显低于移植前(P＜0.05)。LAD近端冠脉竞争血流越大，LIMA桥血流NO含量越低。LIMA桥血流NO含量与LIMA桥血流量呈正相关（r=0.957,P＜0.05）。LAD近端30％狭窄时，NO含量明显低于LAD近端90％狭窄及全部闭塞时(P＜0.05)，LAD近端50％狭窄时，NO含量明显低于LAD近端全部闭塞时(P＜0.05)。LIMA桥血流ET含量有随LAD近端冠脉竞争血流增加而升高的趋势，但差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：来自未完全闭塞冠状动脉的竞争血流可引起LIMA桥血流量下降，产生双向血流，并导致桥血流中NO含量显著下降。     

人B7-1基因的cDNA克隆及其重组腺病毒载体制备

目的：构建并制备含人B7-1基因的重组腺病毒（Ad-B7-1)载体,为后续的肿瘤基因治疗研究提供实验基础。方法：应用逆转录-套式PCR方法从人骨髓细胞中克隆B7-1的cDNA后,将其克隆至小片段腺病毒载体pCI′中,后与pHBG10在293细胞内重组包装产生腺病毒,感染SGC7901细胞。结果：成功克隆了人B7-1的cDNA并构建Ad-B7-1载体,且经过酶切鉴定和测序验证,感染Ad-B7-1的细胞经PCR鉴定,表明B7-1基因已整合入细胞基因组。结论：本实验构建的腺病毒载体可有效地转B7-1基因进入肿瘤细胞,该结果为下一步应用于体内肿瘤基因治疗研究提供了实验基础。     

Induction of anti-hepatoma immunity by recombinant retrovirus expressing B7-1 /B7-2 costimulatory molecules

The effechve activation of ttllnor-specific T cellsPlays a pivotal mle in anti-tUInor inUnwhty. As we haVeknown, T cell elevation ~ires 2 distinct signalingevents. The fial signal is derived from the binding of Tcell receptor (TCR) tO itS antigen-MHC complex, whichspeCified foe inteedon between T cells and talget cells.The seCOnd signal is delivend by accessory or costilnulatory moleCules such as CD28, LFA-l, ICAM-l, and so.Llj. The moSt ~rtant among them is CD28, whichhas been d…     

X射线对小鼠腹腔巨噬细胞表达B7-1和B7-2的影响

目的 :观察 X射线全身照射对小鼠腹腔巨噬细胞表达 B7- 1和 B7- 2的影响。方法 :采用免疫组织化学法 ( ABC法 )。结果 :小鼠腹腔巨噬细胞表达 B7- 2达到高峰的时间早于 B7- 1,而且 B7- 2表达幅度也高于 B7- 1。剂量 -效应关系的研究表明 ,B7- 1和 B7- 2的表达均在 0 .0 75Gy剂量点出现峰值 ,而在较大剂量照射时也出现一个峰值。但在不同分度分析结果中发现 ,低剂量 X射线照射组的高密度细胞百分数比较大剂量组多。结论 :B7分子的表达上调可能是参与低剂量电离辐射免疫增强效应的重要因素。     

双表达B7-1、B7-2基因肿瘤疫苗治疗小鼠肝癌优于单表达疫苗的研究

目的:研究B7-1、B7-2基因对肿瘤的免疫治疗作用。方法:应用转染有B7-1、B7-2基因的肝癌细胞株H22/B7-1、H22/B7-2,建立小鼠肝癌模型,观察小鼠成瘤期、荷瘤小鼠存活期及肿瘤结节大小。结果:各实验组动物都发生肿瘤,接种H22/B7-1 H22/B7-2组成瘤率低,对照组动物肿瘤呈进行性生长;组间成瘤潜伏期不同,与对照组相比,凡接种有H22/B7-2的小鼠肿瘤形成有迟发性;接种转B7基因细胞的小鼠肿瘤生长都较对照组慢;同时接种H22/B7-1和H22/B7-的小鼠能负载大于107的肿瘤细胞。转基因细胞在体外刺激淋巴细胞增殖和诱导CTLs的能力明显增强。结论:B7-1、B7-2都能增强肝癌细胞的免疫原性。B7-2在抗肿瘤早期发挥作用,B7-1随后起放大和调节作用。B7-1与B7-2联用效果优于单一应用。     

人B7-1 cDNA的克隆及鉴定

目的:克隆人B7-1全长cDNA以构建相应腺病毒表达载体。方法:根据B7-1基因序列设计并合成可扩增B7-1 cDNA的特异性引物,用RT-PCR法从骨髓细胞总RNA中扩增B7-1 cDNA,并克隆至pGEM-T载体中,经酶切鉴定后再行序列分析。结果:逆转录多聚酶链反应扩增产物长度与预期的889 bp一致;用M13正、反向引物行序列测定,证实克隆出的序列与GenBank的B7-1 cDNA序列完全一致;人B7-1全长cDNA被成功地插入到质粒pGEM-T中。结论:克隆人B7-1全长cDNA为构建相应腺病毒表达载体及应用B7-1行肿瘤免疫基因治疗提供了可能性。     

B7—1阳性细胞的选择与鉴定

目的选择和鉴定共刺激分子Ｂ７—１阳性的细胞。方法应用Ｇ４１８进行选择培养，然后用荧光激活的流式细胞计数仪（ＦＡＣＳ）进行鉴定，结果Ｇ４１８选择前，阳性细胞率为３７．２５％，应用２００μｇ／ｍｌ４００μｇ／ｍｌ的Ｇ４１８选择后，阳性细胞率分别为５２％和８８．８８％。结论Ｇ４１８浓度高时，选择效果较好；ＦＡＣＳ是一种快速而且敏感的鉴定方法。     

非特异性角膜炎症反应中B7-1mRNA的表达

目的：探讨小鼠角膜缝线及联合结膜下药物注射动物模型B7-1 mRNA表达与非特异性角膜炎症反应的相关性及核因子NF-kB抑制剂对B7-1 mRNA表达的阻断作用。方法：建立BALB/C鼠角膜缝线及联合结膜下药物注射的动物模型,通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）对各组术后1、3、7和14 d不同时相点角膜B7- mRNA的转录水平进行检测。结果：缝线联合细菌脂多糖（LPS）1、3和7 d角膜处理组与单纯缝线组比较B7-1 mRNA表达增加（P<0.05),而术后14 d两组比较差异无显著性（P>0.05）;缝线联合LPS和吡咯啉烷二硫代氨基甲酸酯（PDTC）角膜处理组1、7和14 d与缝线联合LPS组比较B7-1 mRNA表达降低,3 d组B7-1 mRNA表达增加（P<0.05)。结论：缝线联合结膜下LPS注射可在术后诱导B7-1 mRNA的高水平表达,使炎症反应程度加重;而核因子NF-kB抑制剂PDTC可抑制角膜B7-1 mRNA的表达。核因子NF-kB对B7-1 mRNA表达具有重要的调控作用。     

吸烟对大鼠肺组织B7-1/B7-2及其相关配体表达的影响

目的 通过研究吸烟对大鼠肺组织B7-1/B7-2及其相关配体表达的影响,探讨专职抗原提呈细胞(APC)在吸烟所致肺部慢性炎症发生发展中的作用.方法 将30只健康雄性Wistar大鼠随机分为不吸烟组、吸烟6周组和吸烟12周组,每组10只.采用免疫组化半定量法测定大鼠气道周围肺间质中慢性炎症细胞胞膜B7-1B7-2、CD28和CTLA-4的表达水平.结果 吸烟6周组与吸烟12周组大鼠肺组织B7-1、B7-2、CD28和CTLA-4表达量较不吸烟组均显著增高(P＜0.01),吸烟12周组较吸烟6周组表达量也均增高(P＜0.01),随吸烟时间的延长各指标表达量均呈上升趋势.结论 吸烟可引起大鼠肺组织B7/CD28/CTLA-4表达水平的增高,提示APC可能在吸烟所致肺部慢性炎症发生发展中起重要作用.