乙肝肝硬化并发皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤伴噬血细胞综合征的治疗分析

目的 探讨乙肝肝硬化并发皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤(SPTCL)伴噬血细胞综合征(HPS)的临床特征和治疗方法。 方法 回顾性分析2014年8月第二军医大学附属东方肝胆外科医院1例乙肝肝硬化并发SPTCL伴HPS病例的临床资料。 结果 T细胞受体(TCR)表型不同则该病的侵袭性、治疗反应性及预后明显不同,伴HPS者治疗效果不佳,生存期短。 结论 乙肝肝硬化并发SPTCL伴HPS罕见,早期骨髓形态学、病理学、免疫组化及基因重排检测对确诊有重要意义,及早有效控制乙肝病毒尤为重要。早期诊断及治疗对延长患者生存期有重要意义。     

慢性乙型肝炎的抗病毒研究进展

慢性乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)引起的全球性传染病,HBV感染是我国肝硬化、原发性肝癌的重要原因。目前,干扰素类与核苷(酸)类似物抗病毒药物已广泛应用于临床,在一定程度上抑制了病毒的复制并控制了疾病的发展,但仍未从根本上清除病毒;各种治疗性疫苗在抗HBV方面也取得了一定疗效,但临床效果不佳。目前不少研究结果表明,生物免疫治疗可以成功清除体内的HBV,从而为乙肝的治疗带来新的希望。     

肿瘤精准细胞免疫治疗：梦想照进现实

精准医疗(precision medicine)作为一种全新的医学概念与医疗模式,已日益在恶性肿瘤临床治疗中显示其价值。精准细胞免疫治疗(precision cell immunotherapy,PCIT)是基于肿瘤患者基因检测,筛选可引起强烈免疫反应的新抗原(neoantigen),进而寻找并富集针对新抗原的精准T细胞(precision T cell for neo-antigen,PNA-T),扩增后回输患者的治疗新策略。相对于其他精准医学治疗方式,精准细胞免疫治疗具有比较独特的优势,有望成为中国肿瘤精准医学治疗的重要突破口。本文围绕肿瘤精准细胞免疫治疗面临的机遇与挑战,从概念、特点、流程、技术难点等方面进行了详细阐述,并对比了其与转基因嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen recepor T cell,CAR-T)的异同,勾勒出肿瘤精准细胞免疫治疗的美好前景。     

DC-CIK细胞免疫治疗肺癌脑转移病例报告一例

1病例资料患者王某,女,67岁,无吸烟史,2008年10月因发现左颈部肿块就诊于当地医院,同时伴咳少量白色泡沫痰、无痰中带血,全身无发热、胸闷、胸痛等不适症状。行胸部CT检查提示左下肺背段占位,伴纵膈、左肺门及左锁骨上窝多发淋巴结肿大。左锁骨上淋巴结穿刺活检病理诊断为转移性低分化腺癌,免疫组化结果考虑来源于肺。EGFR(epidermal     

含奥沙利铂化疗方案联合DC-CIK细胞治疗中晚期原发性肝癌的临床疗效

目的：探讨含奥沙利铂（oxaliplatin,OXA）化疗方案联合树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤（dendritic cells-cytokine-induced killer,DC-CIK）细胞治疗中晚期原发性肝癌的临床疗效和安全性。方法： 回顾性分析2013年1月至2015年6月上海东方肝胆外科医院肿瘤生物治疗科收治的11例中晚期原发性肝癌患者的临床资料,患者均接受以OXA为主的方案化疗,包括FOLFOX 4方案,即OXA＋亚叶酸钙（calcium folinatc,CF)＋5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU),或GEMOX方案化疗,即吉西他滨（gemcitabine,GEM)+OXA,化疗结束后2~3 d回输DC-CIK细胞。观察指标包括疾病控制率(disease control rate,DCR)、中位肿瘤进展时间(median time to tumor progression,mTTP)、中位生存期(median overall survival,mOS)和不良反应。结果：11例患者中,获得完全缓解（CR）0例,部分缓解（PR）2例,疾病稳定（SD）5例,疾病进展（PD）4例,总有效2/11例,DCR 7/11例;mTTP为4.1个月;mOS为11.3月;主要的不良反应为轻、中度消化道反应、骨髓抑制和轻度周围神经毒性等化疗毒性反应,经对症治疗后均恢复正常。结论：含奥沙利铂化疗方案联合DC-CIK细胞治疗中晚期原发性肝癌具有较好的临床疗效,不良反应较轻,患者耐受性较好,值得进一步研究。     

化疗对CD133+结肠癌细胞的作用效果

目的 观察化疗前后结肠癌细胞株HT29、SW620中CD133+结肠癌细胞的数量变化,探讨化疗对CD133+结肠癌细胞的作用效果.方法 取对数生长的结肠癌细胞株HT29、SW620,采用80 mg/L 5-氟尿嘧啶(5-Fu)和25 mg/L奥沙利铂(Oxaliplatin)分别作用8 h,并设对照组,利用CD133抗体进行标记后再用流式细胞仪进行检测,观察化疗前后CD133+细胞的比例.结果 流式细胞仪检测结肠癌细胞株HT29,80 mg/L 5-Fu处理8 h组中CD133+肿瘤细胞为45.00%,与未处理组(32.80%)比较结果差异有统计学意义(P＜0.01);25 mg/L奥沙利铂处理8 h组中CD133+肿瘤细胞为55.30%,与未处理组和80 mg/L 5-Fu处理8 h组比较结果差异有统计学意义(P＜0.01).流式细胞仪检测结肠癌细胞株SW620,80 mg/L 5-Fu处理8 h组中CD133+肿瘤细胞为47.10%,与未处理组(33.90%)比较结果差异有统计学意义(P＜0.01);25 mg/L奥沙利铂处理8 h组中CD133+肿瘤细胞为56.50%,与未处理组和80 mg/L 5-Fu处理8 h组比较结果差异有统计学意义(P＜0.01).结论 CD133+结肠癌细胞能明显抵抗化疗.

Abstract：

Objective To observe the changes of quantity of CD133 + cells in HT29 and SW620 cell lines before and after chemotherapy, and detect the effect of chemotherapy on CD133 + cells. Methods HT29 and SW620 cells in logarithmic growth phase were separately treated with 80 mg/L 5-fluorouracil(5-Fu) and 25 mg/L oxaliplatin for 8 h, and analyzed by flow cytometry after being marked by CD133 antibody. The proportion of CD133 + cells before and after chemotherapy was measured. Results For HT29 cells, the proportion of CD133 + cancer cells in the group treated with 80 mg/L 5-Fu for 8 h was 45.00% with the difference being remarkable ( P ＜ 0. 01 ) compared to the non-treatment group ( 32. 80% ). The proportion of CD133 + cancer cells in the group treated with 25 mg/L oxaliplatin for 8 h was 55.30% with the difference being remarkable ( P ＜ 0. 01 ) compared with both the non-treatment group and the group treated with 80 mg/L 5-Fu for 8 h. For SW620 cells, the proportion of CD133 + cancer cells in the group treated with 80 mg/L 5-Fu for 8 h was 47. 10% with the difference being remarkable ( P ＜0. 01 ) compared with the non-treatment group (33.90%). The proportion of CD133 + cancer cells in the group treated with 25 mg/L oxaliplatin for 8 h was 56. 50% with the difference being remarkable ( P ＜ 0. 01 ) compared with both the non-treatment group and the group treated with 80 mg/L 5-Fu for 8 h. Conclusion CD133 positive colon cancer cells have anti-chemotherapy activity obviously.     

应用杆状病毒系统制备8型腺相关病毒

目的建立应用杆状病毒系统制备8型腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)的技术体系,并初步检测所制备病毒的感染活力。方法采用杆状病毒生产系统包装rAAV8-EGFP,经高效液相色谱法提取并纯化病毒,实时荧光定量PCR测定病毒滴度,通过观察绿色荧光蛋白的表达强度来检测rAAV8-EGFP对HEK-293细胞的感染活力。结果实时荧光定量PCR显示成功制备高滴度rAAV8-EGFP,滴度可达1.5×1012vg/ml,100ml摇瓶共得到1.5×1013vg rAAV8-EGFP病毒颗粒;感染后的HEK-293细胞具有较强的绿色荧光蛋白表达。结论应用杆状病毒系统成功制备高滴度、高活力的重组腺相关病毒,为后续研究奠定了基础。     

多重调控病毒.基因载体的构建及其体外抗肿瘤活性

目的 构建一种新型的病毒.基因治疗载体.方法 通过克隆技术将人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因插入质粒载体pBHGE3的E3区,得到由主要晚期启动子(MLP)调控的腺病毒质粒pPE3-hTRAIL,再通过与质粒pSGS00在293细胞中进行位点特异性重组得到E1A、E1B基因分别受hTERT启动子与HRE启动子双重调控的重组增殖型腺病毒,用TCID50方法测定病毒滴度.通过增殖实验观察重组病毒的选择性增殖能力.利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测人TRAIL基因的表达.并进行噻唑蓝(MTT)比色法实验检测其杀伤肿瘤细胞的能力.结果 CNHK500-hTRAIL的病毒滴度为2.39×1010pfu/ml,增殖实验结果证实CNHK500-hTRAIL可以选择性地在端粒酶阳性的人肺癌细胞A549中增殖,其所携带的人TRAIL基因在A549中的表达量(183.12μg/L)明显高于携带该基因的非增殖型腺病毒载体Ad-hTRAIL(24.53μg/L,P<0.01).MTr显示CNHK500-hTRAIL对A549的杀伤能力明显高于携带该基因的非增殖型腺病毒载体Ad-hTRAIL,其半数抑制MOI值分别为17.825、0.197(P<0.01).结论 CNHKS00一hTRAIL是一种具备治疗肺癌潜力的新型病毒-基因治疗系统.     

增殖性腺病毒CNHK600-p53的构建及对胰腺癌细胞抑制的体外实验研究

目的 探讨携带p53基因的新型增殖性腺病毒CNHK600-p53的导入能否增加胰腺癌细胞株PANC1对化疗药物的敏感性.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法,观察化疗药物5-FU、丝裂霉素(MMC) 和表阿霉素(epirubicin, EPI)单独应用及与CNHK600-p53联合应用对胰腺癌细胞株PANC1的杀伤效应.结果 PANC1在5-FU浓度为400 μg/ml时细胞抑制率为(65±4.2)%,MMC浓度为1 μg/ml时细胞抑制率为(41±1.9)%,EPI浓度为10 μg/ml时细胞抑制率为(65±1.8)%.转入CNHK600-p53(MOI = 0.625)后再使用上述浓度的化疗药物,PANC1的细胞抑制率分别为(89±5.3)%、(60±2.3)%和(75±1.5)%.当MOI值为0.3125、0.625、1.25时,CNHK600-p53组和Ad-p53组的细胞抑制率分别为(27±2.5)%、(30±3.7)%、(61±4.3)%和(4±2.7)%、(5±3.5)%、(16±4.5)%.结论 单用CNHK600-p53效果优于Ad-p53,携带p53基因的CNHK600-p53能提高胰腺癌细胞株PANC1对化疗药物的敏感性.     

K562／H20和K562／Mel细胞株对高三尖杉酯碱与马法兰耐药机制的比较研究

为比较高三尖杉酯碱和马法兰的耐药机制，对天然来源抗肿瘤药物高三尖杉酯碱耐药株Ｋ５６２／Ｈ２０与烷化剂马法兰耐药株Ｋ５６２／Ｍｅｌ耐药机制进行研究，发现前者对长春新碱、柔红霉素、阿霉素具有广泛交叉耐药，对马法兰耐药水平较低；后者对氮芥、噻替派有明显交叉耐药。在耐药机制上，前者主要由于多药耐药基因过度表达所致，谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）π、α基因也参与部分耐药机制；后者主要由于ＧＳＴα基因及ＧＳＴ总活性所致。两者似乎均通过ＧＳＴα基因表达升高起作用。