益肾达络饮对EAE小鼠PKAC-a、RhoA表达的影响

目的研究PKA-RhoA信号传导通路在EAE发病中的作用,观察中药复方益肾达络饮干预实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的疗效,探讨益肾达络饮治疗EAE的作用机制,以及对EAE小鼠中枢神经损伤后神经再生的作用。方法采用Western blot方法测定各组小鼠脑和脊髓组织中PKAC-a、RhoA的含量,旨在了解PKAC-a、RhoA在EAE发生后的作用以及益肾达络饮对神经再生的作用情况。结果检测脑组织中PKAC-a表达显示,正常组和模型组、中药组、激素组均有差异(P值均0.05);模型组和抑制剂组、中药组、激素组均有显著性差异(P值均0.05);中药组和激素组有极显著性差异(P值0.01)。RhoA根据多项比较组间P值可知:脊髓组织中,正常组和模型组、激素组、中药+激素组、抑制剂组均有差异(P值均0.05);模型组和抑制剂组有显著性差异(P值0.05),和中药组、激素组、中药+激素组有极显著性差异(P值0.01);脑组织中,模型组和中药+激素组有显著性差异(P0.05),和中药组有极显著性差异(P值0.01)。结论 cAMP-PKA-RhoA信号通路与p38MAPK的表达有关,多发性硬化(MS)在中枢神经系统中存在发病部位的区别,中药益肾达络饮和激素醋酸泼尼松在促进中枢神经再生时均有疗效,作用大小不同。     

血管内皮生长因子基因对大鼠动脉性阴茎勃起功能障碍的治疗作用

目的探讨阴茎海绵体内注射血管内皮生长因子(VEGF)基因对大鼠动脉性阴茎勃起功能障碍(ED)的治疗作用。方法通过超速离心纯化pcDNA-3.0和pcDNA-VEGF165质粒,选取雄性Wistar大鼠32只,分为4组,每组8只。Ⅰ组,双侧髂内动脉结扎组;Ⅱ组,双侧髂内动脉结扎后阴茎海绵体内注射pcDNA-3.0质粒组;Ⅲ组,双侧髂内动脉结扎后阴茎海绵体内注射注射pcDNA-VEGF165质粒组;Ⅳ组,假手术组。饲养4w后,对4组大鼠注射阿朴吗啡(APO)行电刺激海绵体神经实验(ICP),评价其勃起功能。结果在阿朴吗啡实验中Ⅰ组、Ⅱ组大鼠的勃起次数明显少于Ⅲ组、Ⅳ组(P0.05);大鼠打哈欠次数各组之间无变化(P0.05)。在电刺激海绵体神经实验中Ⅰ组、Ⅱ组ICP增幅明显低于Ⅲ组、Ⅳ组(P0.05)。结论阴茎海绵体内注射VEGF基因对大鼠动脉性ED有一定的治疗作用。     

VEGF基因治疗大鼠动脉性阴茎勃起功能障碍的机制

目的探讨阴茎海绵体内注射血管内皮生长因子(VEGF)基因对大鼠动脉性阴茎勃起功能障碍(ED)的治疗机制。方法通过超速离心纯化pcDNA-VEGF165质粒;通过双侧髂内动脉结扎建立动脉性ED大鼠模型;通过大鼠阴茎海绵体内注射质粒进行转基因治疗;通过阿朴吗啡实验和电刺激海绵体神经实验检测大鼠勃起功能;通过RT-PCR和VEGF免疫化学染色检测外源基因的表达;通过电镜检查和FⅧ因子免疫化学染色观察海绵体结构的变化;通过NADPHd染色观察NOS水平的变化。结果在阿扑吗啡实验和电刺激海绵体神经实验中,转基因治疗的ED大鼠的勃起功能得到了一定的恢复,但还没有达到正常水平。转基因治疗后1个月阴茎组织内仍存在外源基因并可表达;组织内血管增多。治疗组的NOS染色强度要强于对照组。结论阴茎海绵体内注射pcDNA-VEGF165质粒,对动脉性ED大鼠有一定的治疗作用,其机制是通过促进血管增生、改善血流灌注和上调NOS表达完成的。     

职业性噪声性聋与mtDNA缺失关系的探讨

目的 探讨线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)缺失在噪声性聋发病中的可能作用.方法 在265名从事噪声作业的青年工人中,根据纯音听阈测试结果,分为语频听力损失组和语频听力正常组,其中自愿进入研究的语频听力损失组(A组)25人,双耳言语频率(500、1 000、2 000 Hz)听阈均值≥26 dB HL;在语频听力正常人群中随机抽取27人作为语频听力正常组(B组),两组分别抽取外周血,提取白细胞DNA,应用PCR方法检测mtDNA4977缺失情况.结果 A组mtDNA4977缺失检出率20%(5/25),B组mtDNA4977缺失检出率为0(0/27),A组mtDNA4977缺失检出率明显高于B组(P＜0.05).结论 mtDNA4977缺失可能在噪声性聋的发病中起重要作用,     

膀胱癌中线粒体DNA的研究进展

膀胱癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发生发展是一个多步骤的过程，异常基因型的长期积累导致恶性表型的出现。膀胱镜检能在直视下进行可疑病变的检测，但它是一种创伤性诊断方法，又对设备技术要求较高，限制了它在早期诊断和普查中的应用。尿脱落细胞学检查是膀胱癌无创性诊断最常用的手段，但敏感性较低，容易漏诊。开发对患者特异、敏感无创伤的早期诊疗手段成为膀胱癌成功治疗的关键。目前认为肿瘤生物学特征不仅取决于核遗传物质，     

糖尿病雄性大鼠性腺5α-还原酶Ⅱ型活性变化

目的 :探讨大鼠青春期和成年期糖尿病时性腺 5α 还原酶Ⅱ型的活性变化。　方法 :取 4 0d和 90d龄雄性Wistar大鼠各 30只 ,分别分为对照组 (C)、糖尿病组 (D)和胰岛素治疗糖尿病组 (ID)。采用薄层层析法测定各组附睾头、附睾尾、前列腺和睾丸组织内 5α 还原酶 Ⅱ型的活性。　结果 :①青春期大鼠性腺的各部位内 ,5α 还原酶 Ⅱ 型的活性D组均明显低于C组 (P <0 .0 1) ,而ID组明显高于D组 (P <0 .0 1) ;②成年期大鼠性腺的各部位内 ,5α 还原酶 Ⅱ型的活性在C、D和ID组各组间差异无显著性 (P均 >0 .0 5 )。　结论 :青春期大鼠性腺内 5α 还原酶 Ⅱ型的活性更易受代谢环境、激素水平及局部特异性因素的影响 ,而成年期大鼠性腺内 5α 还原酶Ⅱ 型的活性相对稳定     

青春期糖尿病雄鼠血清和性腺血管紧张素转换酶活性变化

４０日龄雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠２１只，分为对照（Ｃ）组，腹腔内注射赋形剂和糖尿病（Ｄ）组，腹腔内注射链脲菌素（ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ，ＳＴＺ），５５ｍｇ／ｋｇ体重，观察６０天。结果表明，Ｄ组大鼠的睾丸、附睾、附睾尾重量显著低于Ｃ组（Ｐ＜０．０１）；Ｄ组附睾尾精子计数显著少于Ｃ组（Ｐ＜０．００１）。ＡＣＥ活性测定结果表明，Ｄ组睾丸和附睾尾组织ＡＣＥ活性显著低于Ｃ组（Ｐ＜０．０５），而血清ＡＣＥ显著高于Ｃ组（Ｐ＜０．０１），相关检验显示，附睾重量，附睾尾精子计数与附睾尾ＡＣＥ水平呈显著正相关（Ｐ＜０．０１），与血清ＡＣＥ呈显著负相关（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。     

微粒体制备技术的实验改进

本实验用改良密度梯度离心法对细胞各组份进行了逐级分离,成功地分离了微粒体并制备了较纯的粗面内质网和滑面内质网。在分级分离的各个阶段均进行了形态学观察及生化学检定,特别是最后得到了电镜证实。经分离纯化的滑面内质网杂蛋白显著减少而标志酶活性明显增高。在离心系统中,用KBr代替昂贵的CsCl,SDS代替去氧胆酸钠取得满意的分离效果。从而为滑面内质网及粗面内质网的分离和纯化建立了一种简单、经济、准确、可靠的方法。该技术的建立将为细胞的超微结构,生物工程,生物膜功能及酶促合成反应动力学等重要课题的深入研究提供了有效的手段。