河豚肝脏提取物多肽A的抗瘤活性实验

目的 :了解河豚肝脏提取物多肽A、B、C的抗瘤活性。方法 :体外细胞毒试验是用噻唑蓝 (MTT)法。体内抗瘤试验是用小鼠肿瘤模型S 180肉瘤。结果 :多肽A在 12 5～ 10 0 0mg·L-1浓度下 ,对人鼻咽癌细胞 (CNE2 )、人肝癌细胞 (Bel 74 0 2 )、人肺腺癌细胞 (GLC 82 )和人白血病细胞 (K 5 6 2 )的半数抑制浓度分别为 341.5 5、6 0 7.96、5 2 0 .82mg·L-1和 833.13mg·L-1;而对人胚肾上皮细胞 (HK 2 93)、人脐血管内皮细胞 (EVC 4 0 3)和人体肝细胞 (ChangLiver)的IC50 分别为 6 2 6 .2 2、5 74 13、4 93.4mg·L-1。而多肽B、C对上述细胞的生长均无作用。体内抗瘤试验表明 ,多肽A用 6 0～ 180mg·(kg·d) -1,ipqd× 10d ,对小鼠肿瘤S 180肉瘤的抑制率为 4 2 .0 %～ 4 5 .2 % ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :河豚肝脏提取物多肽A在体内、体外试验有一定的抗瘤活性 ,但其抗瘤作用与剂量无相关性 ,对人癌细胞和人体正常细胞无明显的选择性     

姜黄素对人QBC939细胞生长抑制与凋亡的影响

目的 :研究姜黄素 (Curcumin)对人胆管癌细胞系QBC939的生长抑制与促凋亡作用。方法 :采用MTT法检测姜黄素对胆管癌细胞的抑制作用 ;相差显微镜 ,电镜下观察细胞形态变化 ;琼脂糖凝胶电泳测定DNALadder ;流式细胞术分析DNA含量。结果 :1,2 ,4 ,8,和 16mg·L-1姜黄素均能抑制人胆管癌细胞QBC939的生长 ,且抑制率具有浓度和时间依赖性 ,IC50 为 5 6mg·L-1。 8mg·L-1姜黄素作用后 ,QBC939细胞出现典型的凋亡形态特征 ,DNALadder出现 ,并检测到亚二倍体凋亡峰。结论 :Curcumin能有效地抑制QBC939细胞生长并促进其凋亡。     

肝细胞生长因子体外抑制SMMC-7721人肝细胞癌细胞生长

目的 :观察肝细胞生长因子 (HGF)对体外培养的人肝细胞癌细胞的生长效应。方法 :将处于指数生长期的SMMC 772 1细胞经过 (HGF处理组 )或不经 (对照组 )HGF处理培养 1～ 4d ,采用四甲基偶氮唑盐 (MTT)法检测细胞数 ,并进行细胞周期分析。结果 :HGF对SMMC 772 1细胞增殖具有剂量依赖性抑制作用。在实验浓度内 ,使用最高浓度的HGF(rhHGF为 2 0 μg·L-1、cHGF为 10 0mg·L-1)对细胞增殖抑制作用最强。使用不同浓度 (5、10、2 0 μg·L-1)rhHGF处理 3d的培养细胞均有一半以上停留在G0 /G1期。结论 :HGF对SMMC 772 1人肝细胞癌细胞的体外生长有强烈的抑制作用 ,这与细胞生长阻滞在G0 /G1期有关。     

三氧化二砷对肝癌HepG2细胞增殖的影响

目的　研究三氧化二砷 (As2 O3)对肝癌细胞的增殖抑制作用 .方法　应用台盼蓝拒染法、MTT比色法及细胞克隆形成试验 ,研究 As2 O3对肝癌 Hep G2细胞的增殖抑制和细胞毒作用 .结果　 As2 O3 能显著抑制肝癌细胞的生长 ,5μmol· L- 1 As2 O3 抑制程度明显强于 1μmol· L- 1 . 5和 1μmol· L- 1 As2 O3 作用后细胞克隆形成率分别为 (1.5±1.2 ) %和 (12 .3± 2 .2 ) % ,明显低于对照组的 (30 .0± 4.2 ) %(P<0 .0 1) .As2 O3对肝癌细胞有较强的细胞毒作用 ,且呈明显剂量和时间依赖性 ,其对肝癌细胞的杀伤率高于 5 -氟脲嘧啶 (5 - FU )和丝裂霉素 (MMC) ,但无显著性差异 ,As2 O3与 5 -FU及 MMC存在协同效应 ,联合应用杀伤率明显升高 .结论　 As2 O3具有明显的抑制肝癌细胞增殖作用 ,有必要进一步探讨其对肝癌的治疗价值     

牛坐骨神经内源性抑制物对体外培养DRG细胞分化的影响

目的　在新生牛坐骨神经提取对背根神经节 (dorsalrootganglia,DRG)细胞存活和突起生长有抑制活性的物质 .方法　原代培养 DRG细胞 ,实验组分别以不同浓度加入前一实验证实对 PC12细胞有抑制活性 ,Mr5 0 0 0～ 10 0 0 0之间的新生牛坐骨神经提取液 ,对照组中加入培养液 . 48h后进行MTT细胞活性测定、总蛋白含量测定以及观察细胞突起生长情况 .结果　实验组加入提取液蛋白浓度为 2 0 m g· L- 1 ,40mg· L- 1时 ,DRG细胞的活性、总蛋白含量以及突起的生长无明显变化 ;当提取液的浓度为 80 mg· L- 1 ,16 0 mg· L- 1时 ,DRG细胞胞体皱缩 ,突起生长缓慢、停滞 ,细胞活性和总蛋白含量明显减低 .对照组的 DRG细胞生长良好 .结论　新生牛坐骨神经内存在一种对体外培养的 DRG细胞存活及突起生长有抑制作用的物质 .     

HSV-tk/GCV系统对高转移性粘液表皮样癌细胞系M3SP2的抑制作用

目的 :探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (HSV tk) /丙氧鸟苷 (GCV)自杀基因系统对高转移性粘液表皮样癌细胞系M3SP2的作用 .方法 :采用阳离子脂质体介导法将含HSV tk基因复制缺陷型逆转录病毒载体 (pBabe/tk)导入M3SP2细胞 ,嘌呤霉素筛选抗性克隆 .用MTT比色法测定HSV tk/GCV对tk阳性M3SP2细胞 (M 3SP2 /tk)生长的影响及旁观者效应 ;用流式细胞术分析HSV -tk/GCV对M3SP2 /tk细胞周期的影响 .结果 :M3SP2 /tk细胞对GCV的敏感性显著增加 ,细胞生长受到抑制 ,在GCV(0 .1～ 10 0 0mg·L-1)作用 6d时 ,M3SP2 /tk细胞存活率为 6 2 .3%- 14 .5 %,IC50 值为 0 .6 8mg·L-1,而转空载体细胞和亲本细胞IC50 值大于 10 0 0mg·L-1.M3SP2 /tk细胞在GCV(1～ 10mg·L-1)作用 4 8h时 ,明显阻滞于S期 .10 %tk阳性的M 3SP2 /tk细胞与 90 %tk阴性的亲本细胞M3SP2混合培养 ,10mg·L-1的GCV仍可杀伤 5 4 .4 %的细胞 .M3SP2 /tk细胞含GCV (1,10mg·L-1)培养上清液仍能影响tk阴性的舌癌细胞系TbpTL的生长 .结论 :HSV tk/GCV具有显著抑制涎腺粘液表皮样癌细胞体外生长的作用 ,其作用机制与细胞周期进程停滞和旁观者效应有关     

HPV16 E6基因反义寡核苷酸诱导SiHa细胞凋亡的研究

目的　探讨 HPV16 E6反义寡核苷酸 (AE6 )对宫颈癌细胞 Si Ha细胞凋亡的诱导作用 .方法　应用细胞生长抑制实验 (MTT)、透射电子显微镜 (TEM)、DNA电泳及流式细胞术 (FCM)研究 AE6对 Si Ha细胞生长抑制、超微结构改变、核酸及细胞增殖周期的影响 .结果　 AE6 1～ 40μmol· L- 1对 Si Ha细胞抑制率为 9.9%～ 6 0 .3% ,相互间有显著性差异(P<0 .0 5 ) .AE6 2 0 μmol· L- 1作用 72 h,Si Ha出现凋亡形态学改变 ,DNA电泳呈梯状带型 .AE6 5 ,10 ,2 0和 40μmol· L- 1 作用 72 h后 ,Si Ha细胞凋亡率分别为 1.9% ,7.9% ,8.1%和 19.7% .结论　 HPV16 E6基因与 HPV16阳性宫颈癌细胞的增殖和细胞凋亡密切相关 ,AE6可通过诱导 Si Ha细胞凋亡而抑制其生长 ,它的分子克隆有助于阐明宫颈癌发生的分子机制     

二烯丙基二硫对人白血病细胞株增殖的影响

目的　研究二烯丙基二硫 (DADS)对人白血病细胞HL - 60的作用并探讨其作用机理。方法　采用MTT法、生长曲线绘制、流式细胞仪、免疫组化等方法 ,观察DADS对体外培养的HL - 60细胞的生长抑制、细胞周期分布以及PCNA表达的影响。结果　DADS对HL - 60细胞具有明显的生长抑制效应且呈剂量 -效应依赖关系 ,当 2 0mg·L- 1 DADS作用HL - 60细胞 72h ,增殖抑制率达 70 .5 %。流式细胞仪检测结果提示 :DADS处理后的HL - 60细胞主要停滞于S +G2 /M期 ,同时出现亚G1 峰 ;免疫组化结果显示 :DADS处理后的HL - 60细胞PCNA表达下降。结论　DADS对体外培养的HL - 60细胞具有明显的增殖抑制作用 ,DADS抑制HL - 60细胞增殖与细胞周期S +G2 /M期阻滞和促进凋亡有关     

三氧化二砷对人胆管癌细胞系QBC939生长与凋亡的影响

目的　研究三氧化二砷 (As2 O3 )对人胆管癌细胞系QBC939的生长抑制与促凋亡作用 .方法　采用 MTT法检测 As2 O3 对胆管癌细胞的抑制作用 ;相差显微镜、电镜下观察细胞形态变化 ;琼脂糖凝胶电泳测定 DNA L adder;流式细胞术分析 DNA含量 .结果　 0 .5 ,1,2 ,4,8μmol· L- 1 As2 O3均能抑制人胆管癌细胞 QBC939的生长 ,且抑制率具有浓度和时间依赖性 ,4μmol· L- 1 (IC50 )的 As2 O3 作用后 ,QBC939细胞出现典型的凋亡形态特征 ,DNA L adder出现 ,并检测到亚二倍体峰 .结论　 As2 O3 能有效地抑制 QBC939细胞生长并促进其凋亡 .     

L-精氨酸在人肝癌细胞生长增殖中的作用

目的 :探讨L 精氨酸在人肝癌细胞生长增殖中的作用。方法 :采用噻唑蓝 (MTT)比色法和流式细胞仪 ,检测和分析不同浓度L 精氨酸作用下体外培养人肝癌细胞株QGY 770 3的生长、增殖和凋亡情况。结果 :(1)浓度在4mmol/L以下的L 精氨酸 ,轻度促进肝癌细胞的生长 ;4mmol/L以上浓度的L 精氨酸 ,则抑制肝癌细胞的生长增殖 ,且具有浓度和时间依赖性。 (2 )高浓度L 精氨酸 (16mmol/L和 6 4mmol/L)可诱导肝癌细胞凋亡 ,凋亡率较对照组显著升高 (P <0 .0 5 ) ,并且使肝癌细胞增殖指数较对照组显著降低 (P <0 .0 5 )。结论 :低浓度L 精氨酸促进肝癌细胞的生长 ;高浓度抑制肝癌细胞的生长增殖 ,并可诱导肝癌细胞凋亡。     

全反式维甲酸和苯乙酸钠联合对人肝癌细胞的诱导分化作用

目的　探讨全反式维甲酸 (ATRA)和苯乙酸钠 (Na-PA)两者对人肝癌细胞联合作用 .方法　应用台盼蓝染色、MTT法、流式细胞仪、甲胎蛋白测定等方法检测 ATRA和Na PA两者联合对人肝癌细胞的诱导分化作用 .结果　 10μmol· L- 1 ATRA,2 .5 mmol· L- 1 Na PA及两者联合作用 ,可抑制人肝癌细胞株 SMMC- 772 1细胞的生长 ,使细胞恶性表型向正常转化 ,其联合作用组 7d抑制率达 6 6 .5 % ,并能明显降低甲胎蛋白的分泌量 4 9.2 % ,使细胞周期 G0 / G1 期延长5 8.7% ,S期下降 35 .8% (P<0 .0 5 ) ,影响 DNA合成 ,最终产生抑制增殖诱导细胞分化的作用 .结论　 ATRA,Na PA及两者联合应用均可抑制 SMMC- 772 1细胞生长 ,诱导细胞分化 ,ATRA和 Na PA联合对人肝癌细胞的诱导分化有协同作用 .     

氟伐他汀对大鼠气道平滑肌增生的影响

目的 :观察氟伐他汀 (Fluvastatin)对离体培养的大鼠气道平滑肌 (AirwaySmoothMuscleCell,ASMC)增生的影响 .方法 :MTT法及细胞计数检测体外培养的ASMC的增生 .结果 :氟伐他汀对于由血清和组织胺刺激引起的ASMC增生均具有抑制作用 (P <0 .0 1) ,1× 10 5mol·L-1浓度的氟伐他汀对ASMC的增生的抑制率达 2 0 %以上 ,而 1× 10 -4mol·L-1浓度的氟伐他汀则可完全抑制ASMC的增生 .结论 :氟伐他汀可抑制ASMC的增生 ,且这种作用与其浓度呈一定相关性     

碘化钾保健食盐驱铅及抗铅毒性肾损害的临床及实验研究

目的:研制一种能防治铅中毒的食用保健盐。方法:用含0-25 % 醋酸铅的饮料喂养SD 大鼠复制铅中毒模型,同时用不同浓度碘化钾(KI) 盐水( 分别为10 mg·kg·d - 1 ,20 mg·kg·d- 1 和30 mg·kg·d - 1) 分组喂养,探索预防铅中毒的KI日需量。然后制成含KI1 % 的食盐,供50 名铅作业工人烹饪菜肴后食用;在服用KI盐前后测定血ZPP,Hb 、血铅、尿δALA,并动态观察尿铅排泄情况。结果:动物日需KI10 mg·kg·d - 1则具有抗铅性损害作用;铅接触人员服KI盐后第3 d 尿排铅量增加,第9 d 达高峰,第4 周达正常,服用KI盐前后Hb ,ZPP,δALA,血Pb ,NAG,Rp 依次为(101-2 和128)g·L- 1( P = 0 .05) ,(33-5 和7-7)μg·g - 1 Hb( P< 0 .01) ,(123-12 和65-36)μmol·L-1( P < 0 .05) ,(2-123 和0-85)μmol·L-1( P < 0 .01) ,(20-9 和6-7)U·L- 1(P < 0 .01) ,(1-5 和0-34)mg·L- 1( P < 0 .05) 。结论:铅接触人员摄入1 % KI的食盐有驱铅及预防铅性损害作用     

苏拉明对体外培养视网膜色素上皮细胞增殖的影响

目的　研究苏拉明 (suramin)对培养人视网膜色素上皮细胞 (retinal pigm ent epithelium,RPE)增殖的影响 .方法　将不同质量浓度的苏拉明 (1.5 ,15和 15 0 mg· L- 1 )加入RPE细胞培养液 ,采用四甲基偶氮唑盐 (tetrazolium,MTT)比色法 ,细胞分裂指数计数和核仁组成区嗜银染色(Ag NORs)检测苏拉明对 RPE增殖活力的影响 .结果　含有10 0 m L· L- 1小牛血清的培养液可以显著刺激 RPE的增殖(P<0 .0 1) ,无血清组 A值为 0 .19± 0 .0 1、含血清组 A值为0 .30± 0 .0 1;苏拉明抑制了 10 0 m L· L- 1血清条件下 RPE的增殖 ,呈剂量依赖性 ,最大抑制率达 5 1% ,3种浓度组 A值分别为 0 .2 9± 0 .0 1,0 .2 4± 0 .0 1和 0 .14± 0 .0 1,对细胞的形态无明显影响 .结论　苏拉明对血清刺激 RPE增殖有显著非毒性抑制作用     

透明质酸刺激因子对增生性瘢痕成纤维细胞透明质酸合成的影响

目的　了解兔源性透明质酸刺激因子 (HASF)对体外单层及三维培养条件下增生性瘢痕成纤维细胞 (FB)透明质酸 (HA)合成的影响 .方法　从胎兔羊水及血清中提纯HASF分别作用于单层及三维培养的 FB细胞 ,用放免法测定上清液中 HA浓度 .结果　在单层培养条件下 ,随着 HASF剂量由 0 .1m g· L- 1增至 0 .1g· L- 1 ,HA浓度也由 (495±37) mg· L- 1 增至 (914± 75 ) mg· L- 1 ,在一定范围内呈剂量依赖性 (P<0 .0 1) .继续增加 HASF剂量 ,HA浓度并不成比例增加 ,呈显出饱和性 .随 HASF作用时间由 3d延长至 7d,HA浓度也呈时间依赖性的增加 (P<0 .0 1) .在三维培养条件下 ,随 HASF剂量的增加 ,HA浓度也由 (90± 2 5 ) mg· L- 1增至 (2 93± 6 3) mg· L- 1 ,也呈剂量依赖性 (P<0 .0 1) ,且明显低于单层培养条件下 HA的浓度 (P<0 .0 1) .结论　 HASF对单层及三维培养的 FB有明显的促 HA合成作用 ,并呈剂量和时间依赖性 .     

甘氨酸-钼磷酸盐体内外抗肿瘤作用的研究

目的 :观察甘氨酸 -钼磷酸盐 [( Gly H) 4 PMo12 O40 · 5 H2 O,GP]对肿瘤细胞生长的抑制作用及对荷瘤小鼠的抑瘤效应。方法 :采用 MTT法进行体外抑瘤效应测定 ,建立小鼠荷 S1 80腹水瘤模型 ,测定体重增长率、抑瘤率以及延命率。结果 :体外实验表明 ,实验浓度的 GP对正常组织细胞均无细胞毒性作用 ( P<0 .0 5 )。对宫颈癌 Hela细胞株、前列腺癌 PC- 3m细胞株、小鼠腹水瘤 S1 80细胞株、原代肺癌细胞等肿瘤细胞生长有明显抑制作用 ( P<0 .0 5 ) ,并呈一定的量效关系。其中对人前列腺癌 PC- 3m细胞株尤为明显。体内实验表明 ,给药组能够抑制 S1 80腹水瘤生长 ,明显延长小鼠生命期 ,延命率高于 CYT阳性对照组。急性毒性实验 LD50 为 2 735 .2 7mg·kg-1,LD50 95 %可信限为 :1 931 .97～ 3872 .5 8mg· kg-1。结论 :本研究表明 ,GP能抑制多种人癌细胞生长 ,延长荷瘤小鼠生存期 ;GP属低毒、高效抗癌药物     

胆汁酸对人胰腺癌细胞的毒性作用

目的 :通过研究人胆汁中胆汁酸对人胰腺癌PANC 1和MIAPaCa 2细胞株体外增殖和超微结构的影响 ,探讨胆汁酸对人胰腺癌细胞生长抑制作用 .方法 :选用人胰腺癌PANC 1和MIAPaCa 2细胞在不加或添加 1 0mL·L-1 、2 0mL·L-1 、4 0mL·L-1 胆汁的RPMI 1 6 4 0培养液中经过 2 ,4 ,6 ,8d培养后 ,用MTT方法测定胆汁对细胞增殖抑制率 .PANC 1细胞培养 2 4h和 4 8h以后用扫描电镜和透射电镜观察细胞表面和内部超微结构变化 .结果 :PANC 1和MIAPaCa 2细胞在添加胆汁的培养液中增殖受明显抑制 (P <0 .0 1 ) ,其对PANC 1的抑制率为 (2 4 .0 9± 5 .0 5 ) % -(89.6 1± 2 .2 8) % ,对MIAPaCa 2的抑制率为 (1 6 .71±1 0 .5 1 ) % - (78.5 5± 6 .5 9) % .PANC 1细胞在含胆汁培养液中培养后 ,细胞表面微绒毛变短变疏 ,细胞内线粒体、粗面内质网发生空泡变性 .结论 :胆汁中的胆酸对人胰腺癌细胞增殖有抑制作用 ,其抑制机制在于胆酸的细胞膜毒性作用     

三氧化二砷对肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2抑制作用的研究

目的 :研究三氧化二砷 (As2 O3)对肝癌细胞株的抑制作用。方法 :用不同浓度的 As2 O3处理人肝癌细胞株 SMMC- 772 1、Hep G2及正常人肝细胞株 L- 0 2 ,应用四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT法 )观察 As2 O3对细胞生长的影响 ,并与 3种常用抗癌药羟基喜树碱 (HCPT)、顺铂 (DDP)及 5 -氟脲嘧啶 (5 - Fu)的抑制率进行比较。结果 :低浓度的 As2 O3、HCPT、DDP及 5 - Fu对 SMMC- 772 1、Hep G2两种肝癌细胞株的抑制率分别是 86 .3% ,4 3.2 % ;4 .2 % ,4 2 .1%和 76 .7% ,4 5 .6 % ;19.8% ,18.6 % ,As2 O3的抑瘤作用最强 (P<0 .0 5 ) ,而对正常人肝细胞株的抑制较弱。浓度≥ 2 .0 μm ol/ L 的 As2 O3对 SMMC- 772 1和 Hep G2的抑制作用差异均无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :As2 O3体外试验能有效抑制肝癌细胞株的生长 ,且在一定浓度范围内 ,抑制率具有一定的浓度和时间依赖性     

维甲酸对肺鳞癌细胞株增殖分化的影响

用 5× 10 -6mol·L-1浓度的全反式维甲酸 (ATRA)作用于人肺鳞癌细胞株 (TUL细胞 ) ,检测细胞生长曲线 ;用MTT法检测细胞生长抑制率 ;用3H TdR掺入法测细胞DNA合成情况 ;透射电镜下观察细胞超微结构改变 ;并观察裸鼠成瘤情况。结果显示 :与对照组比较 ,经ATRA作用后 ,TUL细胞生长速度减慢 ,细胞生长曲线平坦 ,细胞生长抑制率为 42 3 % ,3H TdR掺入率明显减低 (P <0 .0 1) ,细胞DNA合成减少 ,透射电镜观察发现 ,TUL细胞呈良性分化 ,TUL细胞致瘤性明显降低。提示ATRA能抑制TUL细胞增殖 ,诱导分化 ,降低其致瘤性     

二贝母胶囊抑瘤作用

目的 :观察不同浓度的二贝母胶囊对S180 、EMT6瘤株的体内、体外抑瘤作用 .方法 :体外抑瘤试验采用MTT法 ;体内试验采用小鼠移植瘤法 ,瘤株为鼠源性S180 肉瘤及EMT6乳腺癌细胞株 ,治疗采用小鼠ig 12d并比较合并 5GY60 Co γ射线治疗的效果 .体外抑瘤试验观察指标为不同浓度的二贝母胶囊对MTT还原产物吸光度值的影响 ;体内抑瘤试验观察指标为肿瘤移植前后的小鼠体质量、瘤重、脾重 ,合并60 Co γ射线治疗时亦观察外周血WBC数量 .结果 :MTT试验显示对于EMT6细胞株 ,二贝母胶囊在 6 .2 5～ 10 0 g·L-1浓度范围内对MTT还原产物吸光度有降低作用 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ,最佳抑制浓度为 2 5 g·L-1.ig剂量为 2g·kg-1的二贝母胶囊 ,给药 12d后 ,对荷S180 及荷EMT6瘤株小鼠的肿瘤生长抑制明显 ,给药组瘤质量为 (0 .98± 0 .4 9) g及 (0 .6 2± 0 .38) g ;而生理盐水组瘤质量为 (1.6 2± 0 .4 5 ) g及 (1.2 2± 0 .5 2 )g ,瘤质量抑制率分别达到 39.5 %及 4 9.2 % ,合并放疗对S180 瘤株瘤质量抑制率达 5 3.2 % ,且使外周血WBC及脾质量维持在正常水平 .结论 :二贝母胶囊有抗肿瘤及免疫增强作用 .