己酮可可碱对兔蛛网膜下腔出血后脑脊液中TGF-β1及蛛网膜纤维化作用的实验研究

目的研究己酮可可碱对兔实验性蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后脑脊液中TGF-β1的影响及其与蛛网膜纤维化的关系。方法新西兰兔55只,随机分为空白组、模型组、己酮可可碱干预组,应用枕大池两次注血法建立兔SAH模型,在模型组基础上给予己酮可可碱干预,分别在第3、7、11、16、21天检测各组脑脊液中TGF-β1的浓度,第21天处死动物取脑,Masson法染色后,应用图像处理软件显示胶原纤维含量。结果模型组和干预组脑脊液中TGF-β1的浓度在第3天和16天出现两个高峰,但干预组较模型组显著降低(P<0.05),空白组无明显改变。Masson染色显示模型组蛛网膜下腔纤维含量明显增多,与干预组和空白组相比差异具有显著性,干预组蛛网膜下腔纤维含量较空白组增多,较模型组减少,差异均具有显著性(P<0.05)。结论己酮可可碱能降低兔实验性蛛网膜下腔出血后脑脊液中TGF-β1浓度,具有一定的抗蛛网膜纤维化作用。     

己酮可可碱对腹膜纤维化形成的干预作用

目的 探讨己酮可可碱(PTX)对SD大鼠腹膜纤维化病变的影响和可能的机制.方法 将大鼠随机分成3组:对照组,模型组和治疗组(PTX组).用4.25%含糖腹膜透析液 脂多糖腹腔注射制作腹膜纤维化模型,即模型组;PTX组同时每日给予PTX 6 mg/kg腹腔注射.5周后行2 h腹膜平衡试验测定腹膜功能,留取血液及腹膜透析液用ELISA法测定血管内皮生长因子(VEGF)浓度,并留取壁层腹膜组织做苏木精-伊红、Masson染色,RT-PCR检测肠系膜组织VEGF mRNA表达水平.结果 ①模型组及PTX组的壁层腹膜较对照组增厚,而PTX组较模型组明显减轻;②模型组及PTX组大鼠超滤量及2 h透析液葡萄糖浓度/0 h透析液葡萄糖浓度(D2/D0)比值均较对照组减少(均P<0.05),其中模型组较PTX组明显减少;与对照组比较,模型组及PTX组大鼠透析液尿素浓度/血浆尿素浓度(Durea/Purea)比值有明显增加(均P<0.05),其中模型组较PTX组增加明显;③PTX组腹透液及血清中VEGF浓度,肠系膜组织VEGF mRNA表达较模型组明显下降(均P<0.05).结论 己酮可可碱能有效地预防腹膜纤维化,其机制可能与调节VEGF的表达有关.     

己酮可可碱对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织MMP-9、TGFβ1表达的影响

目的研究己酮可可碱(PTX)对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)肝组织基质金属蛋白酶9(MMP-9)、转化生长因子β1(TGFβ1)表达的影响。方法高脂饮食法建立大鼠NASH模型,取SD大鼠40只,分为对照组、12周模型组、16周模型组和PTX治疗组,每组10只。采用改良Masson三色染色检测肝纤维化面积,免疫组织化学方法检测肝组织MMP-9、TGFβ1的表达以及分布。结果免疫组织化学方法检测结果显示,与对照组相比,12周、16周模型组和PTX治疗组肝组织MMP-9的表达量明显升高(P<0.05);16周模型组和PTX治疗组TGFβ1的表达量亦明显升高(P<0.05);与16周模型组相比,PTX治疗组TGFβ1表达量显著降低(P<0.05)。检测肝纤维化面积,12周、16周模型组和PTX治疗组的面积均大于对照组(P<0.05)。且16周模型组面积大于12周模型组(P<0.05)。PTX治疗组面积较16周模型组下降(P<0.05)。结论PTX可降低TGFβ1的表达,改善肝纤维化面积,提示PTX对实验性NASH具有治疗作用。PTX对MMP-9的表达无影响。     

MiR-29c 在大鼠蛛网膜下腔出血后抑制柔脑膜纤维化的实验研究

目的探讨miR-29c在蛛网膜下腔出血(SAH)后柔脑膜纤维化过程中的作用。方法选用健康雄性SD大鼠26只按随机数字表法分为假手术组(6只)、空白慢病毒组(8只)、LV-rno-miRNA-29c组(12只)。侧脑室分别注入5μL生理盐水、空白慢病毒、LV-rno-miRNA-29c,注射1周后,通过枕大池二次注血法建立蛛网膜下腔出血模型。造模21 d后处死大鼠,采用Realtime PCR法检测柔脑膜内转化生长因子β1(TGF-β1)及miR-29c表达量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测脑脊液(CSF)中Ⅰ型胶原前端肽(PICP)含量,柔脑膜Masson染色观察柔脑膜胶原纤维。结果 SAH后柔脑膜中TGF-β1表达升高,miR-29c表达下调;上调miR-29c能显著抑制脑脊液中PICP及柔脑膜中胶原表达。结论维持miR-29c高表达可抑制SAH后柔脑膜胶原合成,从而治疗柔脑膜纤维化。     

己酮可可碱在阿霉素心肌病大鼠中的抗炎症作用

【目的】探讨己酮可可碱在阿霉素心肌病大鼠模型中的作用及机制研究。【方法】6周龄雄性SD大鼠30只,随机分为3组:1生理盐水组;2阿霉素(ADR)组;3阿霉素(ADR)+己酮可可碱(PTX)组。动物药物处理3周后,取大鼠的心脏组织作病理学分析并提取RNA检测炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-10的表达情况;同时研磨心肌组织,提取蛋白,ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-10的表达情况。并且采用高频多普勒超声检测评价实验中各组心脏收缩功能。【结果】组织病理学表明PTX能缓解ADR引起的大鼠心肌损伤,ADR+PTX组的心肌炎症细胞浸润程度明显比ADR组减轻。RT-PCR、心肌ELISA检测显示与生理盐水组相比较,ADR组TNF-α、IL-1β表达量增加,而PTX处理组显著降低其炎症因子的表达;与ADR组相比,ADR+PTX组中IL-10表达量呈上升趋势。同样与ADR组相比较,ADR+PTX组的左心射血分数升高、左心室长轴缩短率增加。【结论】PTX对阿霉素引起的心肌纤维化的保护作用可能是通过对IL-10表达调控来实现的。PTX可能成为临床治疗阿霉素心肌病的有效的选择药物。     

己酮可可碱对肝纤维化大鼠抗纤维化作用的观察

目的探讨己酮可可碱在胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型中的抗纤维化作用。方法雄性SD大鼠60只,分为假手术组、肝纤维化模型组、己酮可可碱组。比较各组肝组织羟脯氨酸含量和组织学评分。结果己酮可可碱组组织评分为2.38分,较模型组（3.5分）显著下降（P﹤0.05）。羟脯氨酸含量模型组[（108.33±14.54）μg/ml]较假手术组[（15.58±4.25）μg/ml]显著升高（P﹤0.05）,己酮可可碱组为[（67.50±12.48）μg/ml],与模型组比较下降38%。结论己酮可可碱在大鼠胆管阻塞性肝纤维化模型中具有一定的抗纤维化作用。     

己酮可可碱对大鼠溃疡性结肠炎治疗作用及其机制

目的:观察己酮可可碱(PTX)对大鼠溃疡性结肠炎(UC)模型的治疗作用,探讨血栓及血栓前状态(PTS)在溃疡性结肠炎发病中的作用和己酮可可碱作用机制.方法:用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)造大鼠溃疡性结肠炎模型,将大鼠模型随机分为模型组,模型 生理盐水组,模型 己酮可可碱组,另设空白对照组,共4组.观察各组大鼠肠道大体形态和组织学改变;采用血小板黏附仪检测血小板黏附功能( PAdT),智能血液凝聚仪检测血小板的聚集功能(PAgT);ELISA法测定血清中的血栓烷B2( TXB2);单克隆酶联吸附法检测血管性假血友病因子相关抗原(vWF∶Ag);酶联免疫吸附法检测细胞内粘附因子1(ICAM-1).结果:与模型 生理盐水组比较,模型 己酮可可碱组损伤指数下降(6.02±0.74 vs 0.85±0.50,P＜0.01; 5.68±0.60 vs 1.08±0.45,P＜0.01);模型组血小板黏附率和聚集率与空白对照组无明显增加(P＞0.05); 模型组TXB2,vWF∶Ag,ICAM-1均较空白对照组的差异无统计学意义(P＜0.01),经己酮可可碱治疗后,均较模型 生理盐水组降低(P＜0.05).结论:TNBS所诱导大鼠溃疡性结肠炎模型与PTS有一定关系.PTX通过抗凝、抗炎症介质、抗细胞因子而发挥治疗UC作用.     

己酮可可碱对抗脑缺血再灌注损伤的实验研究

目的:研究己酮可可碱(Pentoxifylline,PTX)对家免脑缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用.方法:家免30只,随机分为假手术组、对照组、己酮可可碱组,后两组复制脑缺血再灌注损伤模型;24 h后检测脑组织匀浆的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、Na -K -ATP酶、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,并用电镜和光镜作病理观察.结果:PTX能部分减轻由于IRI所引起的神经元细胞的破坏性改变.再灌注24 h后PTX组比较对照组:SOD、Na -K -ATPase,活性明显升高(P＜0.01);MDA和TNF-α明显降低(P＜0.05).结论:己酮可可碱对家兔脑缺血再灌注损伤具有保护作用.     

己酮可可碱治疗非酒精性脂肪性肝炎的实验研究

目的通过高脂饮食制备大鼠非酒精性脂肪肝模型,观察肝组织胶原的合成及相关细胞因子的变化。进一步观察及探讨己酮可可碱(pentoxifylline,PTX)对非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)所致肝纤维化的治疗作用及机制。方法30只SD大鼠随机分为模型组(n=10)、治疗组(n=10)和正常对照组(n=10)3组。模型组和治疗组大鼠以高脂饲料喂养,治疗组大鼠高脂饮食12周后每d同时予以己酮可可碱16mg/kg,及治疗4周。对照组大鼠以普通饲料饲养。实验16周处死3组大鼠。应用荧光定量PCR方法分别测定肝组织Ⅰ、Ⅲ型前胶原(procollagenⅠ、Ⅲ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。结果大鼠肝组织中Ⅰ型前胶原mRNA的表达量模型组高于对照组,治疗组显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);大鼠肝组织中Ⅲ型前胶原mRNA的表达量,模型组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),治疗组与模型组表达量差异无统计学意义;大鼠肝组织中TGF-β1 mRNA的表达量模型组高于对照组,治疗组显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);大鼠肝组织中TNF-α mRNA的表达量模型组高于对照组,治疗组显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TGF-β及TNF-α可能参与非酒精性脂肪肝肝纤维化的发生、发展过程。己酮可可碱可能通过抑制细胞因子TGF-β1和TNF-α降低脂肪性肝炎肝脏细胞外基质Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成,对NASH引起的肝纤维化起到一定的治疗作用。     

己酮可可碱对高糖时人肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的 探讨高糖对人肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白1(nonocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)表达的影响及己酮可可碱(pentoxifylline,PTX)对其干预作用.方法 将培养的人肾小球系膜细胞分为6组:正常对照组、高糖组、甘露醇组、PTX甲组、PTX乙组、PTX丙组,分别在24、48和72 h采用RT-PCR法和ELISA法检测PTX对高糖条件下系膜细胞内MCP-1mRNA及蛋白、细胞外基质纤维连接蛋白(fi-bronectin,FN)表达的影响.结果 高糖组人肾小球系膜细胞MCP-1mRNA及蛋白、FN的表达较正常对照组明显增加(P<0.01);己酮可可碱各组比高糖组有明显下降(P<0.01);不同浓度的己酮可可碱对高糖诱导的系膜细胞MCP-1的表达抑制程度不同(P<0.05).结论 己酮可可碱可抑制高糖诱导的人肾小球系膜细胞MCP-1的表达以及FN的分泌,呈时间、剂量依赖关系,己酮可可碱可能对糖尿病肾病的防治起到有益的作用.     

P38信号转导通路对蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛的影响

目的:探讨促分裂原活化蛋白激酶P38(P38 MAPK)在兔蛛网膜下腔出血(SAH)后迟发性脑血管痉挛(CVS)中的作用。方法:35只新西兰白兔随机分为对照组(n=5),SAH组(n=10)、SAH+DMSO(n=10)、SAH+SB203580组(n=10),采用枕大池二次注血的方法建立SAH模型。分别在注血后第5天、第7天活体灌注处死,留取基底动脉标本。用免疫组织化学、测量基底动脉横截面积的方法检测P38 MAPK的表达和CVS程度的变化。结果:5 d处死的SAH组、SAH+DMSO组兔基底动脉横截面积与对照组相比有统计学意义(P<0.01),平滑肌细胞P38 MAPK的表达与对照组相比显著增强(P<0.01);5 d处死的SAH+SB203580组CVS明显缓解(P<0.01),平滑肌细胞P38 MAPK的表达减弱。结论:SAH后兔基底动脉平滑肌细胞内激活的P38 MAPK诱导了迟发性CVS的产生;SB203580能够有效的缓解基底动脉平滑肌持续性的收缩。     

氧化苦参碱对兔阿霉素心肌损伤保护作用及其机制研究

目的 通过建立兔在体阿霉素(ADR)心肌损伤模型,研究氧化苦参碱(OMT)注射液对兔ADR损伤心肌功能的保护作用.并探索其可能机制.方法 26只新西兰大白兔随机分为4组,均经耳缘静脉缓慢注药,每周1次,共8周.①ADR组(n=8):注射2 mg/kg ADR;②OMT组(n=5):10 mg/kg OMT.③ADR+OMT组(n=8):每次注射ADR前30 min,先注射10 mg/kgOMT;④生理盐水(NS)组:以相同方法注射等量生理盐水.TUNEL法原位定性检测心肌细胞凋亡情况.心肌组织匀浆测定超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果 ADR组用药后体质量明显低于其他组(P<0.05),SOD和GSH-Px活性明显降低(P<0.05),凋亡指数(AI)明显高于其他组(P<0.01).ADR+OMT组也有相似改变,但是程度较轻,且两组之间差异有统计学意义.OMT组动物未观察到任何不良反应.结论 苦参对ADR心肌损伤具有明显保护作用,机制可能与苦参抗氧自由基和减少心肌细胞凋亡有关.     

氧化苦参碱对兔阿霉素心肌损伤保护作用及其机制研究

目的通过建立兔在体阿霉素（ADR）心肌损伤模型,研究氧化苦参碱（OMT）注射液对兔ADR损伤心肌功能的保护作用,并探索其可能机制。方法26只新西兰大白兔随机分为4组,均经耳缘静脉缓慢注药,每周1次,共8周。①ADR组（n=8）：注射2mg／kg ADR;②OMT组（n=5）：10mg／kgOMT。③ADR＋OMT组（n=8）：每次注射ADR前30min,先注射10mg／kgOMT;④生理盐水（NS）组：以相同方法注射等量生理盐水。TUNEL法原位定性检测心肌细胞凋亡情况。心肌组织匀浆测定超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）活性。结果ADR组用药后体质量明显低于其他组（P〈0．05）,SOD和GSH—Px活性明显降低（P〈0．05）,凋亡指数（AI）明显高于其他组（P〈0．01）。ADR＋OMT组也有相似改变,但是程度较轻,且两组之间差异有统计学意义。OMT组动物未观察到任何不良反应。结论苦参对ADR心肌损伤具有明显保护作用,机制可能与苦参抗氧自由基和减少心肌细胞凋亡有关。     

Experimental Study on Gufusheng in Treatment of Steroid-Induced Ischemic Necrosis of Femoral Head in Rabbits

Objective： To explore.the mechanisim of compound Gufusheng in treatment of steroid-induced ischemic necrosis of femoral head （SINFH）. Thirty-two rabbits were randomly divided into a blank control group （n=12） and a model group （n=20）. The rabbits of the model group were established by intramuscular injection of prednisone acetate （0.32mg/kg/d） for 8 weeks, and 2 rabbits in each group were killed at the 6th and the 8th week respectively to investigate whether the model was successfully prepared. Then remainder in the model group was again randomly divided into group A （Gufusheng group, n=8） and group B （model group, n=8）, while the rest of rabbits in the blank group constituted group C （n=8）. The rabbits in group A were given Gufusheng Decoction （骨复生煎液） by intragastric perfusion, and the rabbits in group B and C were fed with normal saline. After treatment for 4 weeks, the serum insulin-like growth factor-1 （IGF-1） and tumor necrosis factor-~ （TNF-α） levels in the rabbits of the 3 groups were determined by radioimmunoassay （RIA）. The serum TNF-α decreased significantly and the IGF-1 level increased significantly in the Gufusheng group as compared with the model group （both P〈0.01）. Compound Gufusheng can prevent SINFH and promote repair of the tissue of necrosis of femoral head possibly via decreasing the TNF-α and increasing IGF-1 level.     

枸橼酸钠对家兔脊髓损伤的实验观察

分析枸橼权钠导致脊髓损伤的机理。选择健康家兔１４只，分为对照组和实验组；经蛛网膜下控分别注入１０％葡萄糖注射注和１０％ＧＳ稀释的枸橼酸钠各１ｍｌ。观察注药后家兔的症状，并于注药后３０ｍｉｎ，１２ｈ，２４ｈ和４８ｈ分批处死动物，取尾段脊髓及脊神经观察其病理形态学改变。     

Effect of Chinese Drugs for Promoting Blood Circulation and Eliminating Blood Stasis on Vascular Endothelial Growth Factor Expression in Rabbits with Glucocorticoid-induced Ischemic Necrosis of Femoral Head

Objective:To probe into the mechanism of Chinese drugs for promoting blood circulation and eliminating blood stasis in the prevention and treatment of glueocorticoid-induced ischemic necrosis of femoral head.Methods: Thirty New Zealand adult white rabbits were randomly divided into a normal control group (n=5)and a model group (n=25). Hydroxyprednisone acetate was intramuscularly administered to the rabbits in the model group in a dosage of 7.5 mg/kg, twice per week for 6 weeks, to induce ischemic necrosis of femoral head and normal saline of the equal volume was intramuscularly administered to the rabbits in the normal control group, twice per week for 6 weeks. Then, the 5 rabbits from the normal control group and 5 rabbits selected randomly from the model group were sacrificed and the changes in histopathology and the expression of Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) were observed. The other 20 rabbits in the model group were randomly divided into the treatment group 1 and the treatment group 2, and the control group 1 and the control group 2, 5 rabbits in every group. Taohong Siwu Tang (桃红四物汤 Decoction of Four Drugs with Addition of Peach Kernel and Safflower) was orally administered to the rabbits in the treatment group 1 and the treatment group 2 in a dosage of 7 ml/kg, once daily and normal saline of the equal volume was orally administered to the rabbits in the control groupl and the control group, 2 once daily. After 10 weeks the rabbits in the treatment group 1 and the control group 1 were sacrificed and after 13 weeks the rabbits in the treatment group 2 and the control group 2 were sacrificed, and the expression of VEGF was detected in these rabbits. Results: The expression of VEGF was significantly enhanced in rabbits of the model group as compared with the normal control group (P<0.01), and gradually reduced with the lapse of time. The expression of VEGF in the control groups was significantly reduced as compared with the treatment groups (P<0.001). Conclusion: Chinese drugs for promoting blood circulation and eliminating blood stasis can improve the microcirculation of femoral head in rabbits with glucocorticoid-induced ischemic necrosis of femoral head by promoting the expression of VEGF.     

白藜芦醇对兔动脉粥样硬化基质金属蛋白酶表达的影响

目的探讨白藜芦醇对实验性动脉粥样硬化兔基质金属蛋白酶（MMP）表达的影响。方法选择新西兰纯种雄性大白兔50只随机分为三组,正常对照组10只,模型组20只,白藜芦醇组20只。采用液氮冻伤术建立动脉硬化模型,造模2个月后采用液氮冻伤术激发动脉硬化斑块破裂,模后2个月及激发试验后48h后分别对三组动物测定MMP-1、9的浓度。结果模型组造模后2个月MMP-1、9的浓度分别为（50.74±5.49）ng/ml和（337.69±8.98）ng/ml,同期白藜芦醇组MMP-1、9的浓度分别为（41.33±9.58）ng/ml和（309.83±10.59）ng/ml（P〈0.01）,激发试验48h后模型组MMP-1、9的浓度分别为（100.35±6.58）ng/ml和（869.56±12.37）ng/ml,同期白藜芦醇组MMP-1、9的浓度分别为（61.68±11.69）ng/ml和（411.24±15.74）ng/ml（P〈0.01）。结论白藜芦醇能够降低MMP-1、9的浓度,从而预防和延缓动脉硬化的发生。     

复方倍他米松抑制兔耳瘢痕增生与氧自由基作用的初步研究

目的了解复方倍他米松局部注射对兔耳增生性瘢痕组织中丙二醛含量的影响,并探讨其与氧自由基的关系。方法新西兰兔14只制作兔耳增生性瘢痕模型,正常兔耳皮肤组织标本8例;兔耳增生性瘢痕组织标本28例,随机分为复方倍他米松组（10例）、生理盐水组（10例）、空白对照组（8例）。术后6周予复方倍他米松（40mg／mL）分点注射于瘢痕样组织内,每处2～3点,总量0．3～0．4mL,每周1次,3次为一疗程。术后9周取材,计数成纤维细胞,并测量瘢痕的相对增生厚度,测定丙二醛含量变化。结果①大体形态学变化：复方倍他米松部治疗3周后,瘢痕颜色接近兔耳的正常肤色,略高出皮面,表面工整,触之质软。②组织学变化：与其他三组比较,复方倍他米松组胶原纤维多为平行排列,数量减少。③成纤维细胞密度与瘢痕增生指数变化：与其他三组比较,复方倍他米松组成纤维细胞密度增高（P〈O．05）,④丙二醛含量变化：与其他三组比较,复方倍他米松组丙二醛含量明显增高（P〈0．05）;结论复方倍他米松局部注射兔耳创面引起兔耳增生性瘢痕组织中氧自由基水平升高。