转化生长因子β细胞内信号转导负调控蛋白Smad6，7在肾间质纤维化大鼠肾脏表达与益气活血法的影响

目的:观察肾间质纤维化大鼠肾组织中转化生长因子β细胞内信号转导负调控蛋白Smad6,7表达变化与益气活血法中药制剂的影响。方法:实验于2006-12/2007-06在首都医科大学解剖与组织胚胎学系实验室完成。①实验动物:Wistar雄性大鼠30只,采用随机数字法随机分为模型组、中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组、西药蒙诺组、假手术组,每组5只。益气活血法中药提取液(生黄芪15g,当归10g,赤白芍10g,丹参30g,黄芩10g,车前草15g,牛膝15g等)经水提醇沉得4.4kg/L生药提取液。实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求。②实验方法:其中前5组行单侧输尿管梗阻致肾小管间质纤维化模型手术。假手术组打开大鼠腹腔后分离左侧输尿管,并不结扎即关闭腹腔。中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组、西药蒙诺组,于手术前2d给予灌胃给药0.072mL/(kg·d),0.036mL/(kg·d),0.018mL/(kg·d),10mg/(kg·d),1次/d,连续2周。模型组及假手术组用相同体积的生理盐水灌胃。③实验评估:6组大鼠于术后14d麻醉后处死,观察梗阻肾组织病理改变,用免疫组化方法检测肾组织Smad6,7蛋白表达,通过医学病理图像分析系统对Smad6,7蛋白的积分光密度进行统计学分析。结果:30只大鼠全部进入结果分析。苏木精-伊红染色显示模型组肾小管上皮细胞萎缩,大部分肾小管管腔扩张,间质纤维组织增生,大量炎性细胞浸润,肾小球数目明显减少。中药大剂量组、中剂量组、西药蒙诺组较模型组肾间质炎性细胞浸润、纤维组织增生、肾小管扩张情况明显减轻。Smad6,7蛋白主要在肾皮质肾小管上皮细胞内表达,在模型组它们的表达较假手术组明显减弱且分布面积减少,两组间积分光密度差异具有统计学意义(P<0.05);中药中剂量组、大剂量组、西药蒙诺组Smad6,7蛋白的表达较模型组明显增强、面积增加,积分光密度差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:益气活血法可以通过诱导肾组织Smad6,7蛋白表达而抑制肾间质纤维化。     

大鼠脾气虚胃溃疡证病结合模型胃肠粘膜局部免疫-神经-内分泌网络的变化

目的 探讨脾气虚胃溃疡证病结合模型中胃肠粘膜局部神经内分泌免疫(INE)网络的变化及其作用。方法 免疫组织化学染色和图像分析技术。结果 脾气虚合并胃溃疡模型中胃粘膜D细胞分泌SST的活性显著增强；空、回肠分泌SP、VIP神经元的活性增强；胃粘膜免疫细胞分泌IL-2的活性增强。结论 大鼠脾气虚胃溃疡模型的SST、SP、VIP、IL-2的合成及分泌水平发生了改变，表明胃肠粘膜局部免疫、神经、内分泌网络均发生了一定程度的变化，是脾虚胃溃疡发生的重要因素。     

细胞色素氧化酶的DAB法与Nadi反应的比较

细胞色素氧化酶存在于细胞线粒体的内膜上 ,是电子传递链中的酶 ,它的活性往往作为细胞内氧化代谢的指标 ,也是线粒体的标志酶之一[1] 。早期常用经典的Ｎａｄｉ反应即吲哚酚蓝法显示细胞色素氧化酶 ,现在广泛使用ＤＡＢ法。这两种方法的特异性如何 ,有何优劣 ,未见有详细的报道 ,因此 ,我们进行了两种方法的比较研究。1　材料和方法选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠 1只 ,用乙醚麻醉后断头处死 ,取心、肝、肾组织用液氮骤冷 ,做恒冷箱切片 ,切片厚 7μｍ ,分别进行Ｎａｄｉ反应和ＤＡＢ法显示细胞色素氧化酶 ,并做对照切片 ,同时做ＨＥ染色以观察组织…     

单侧输尿管梗阻大鼠肾脏组织基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2的表达及益气活血法的影响

目的:肾间质纤维化是肾脏疾病进展到肾功能衰竭的共同通路。通过观察益气活血法中药制剂对肾间质纤维化大鼠肾组织基质金属蛋白酶3,基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶组织抑制因子2表达的影响,探讨其抗肾间质纤维化的作用机制。方法:实验于2006-12/2007-06在首都医科大学解剖与组织胚胎学系实验室完成。①实验动物:Wistar雄性大鼠30只,采用随机数字法分为模型组、西药蒙诺组、中药小剂量组、中药中剂量组、中药大剂量组和假手术组。实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求。②实验方法:其中前5组行单侧输尿管梗阻致肾小管间质纤维化模型手术,假手术组打开大鼠腹腔后,分离其左侧输尿管,不结扎即关闭腹腔。益气活血法中药制剂主要由生黄芪,当归,赤白芍,丹参,黄芩,车前草,牛膝等组成。西药组、中药小剂量组、中药中剂量组和中药大剂量组于手术前2d开始灌胃给药,1次/d,其药量分别为:西药组蒙诺10mg/(kg·d)、小剂量组0.018mL/(kg·d)、中剂量组0.036mL/(kg·d)、大剂量组0.072mL/(kg·d),连续给予2周。模型组及假手术组用相同体积的生理盐水灌胃。③实验评估:6组大鼠于术后14d麻醉后处死,观察梗阻肾脏病理改变,并用免疫组织化学方法检测肾组织对基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子2的表达,通过医学病理图像分析系统对基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子2的积分光密度进行统计学分析。结果:30只大鼠全部进入结果分析。肾组织切片免疫组织化学方法结果显示:基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶3和金属蛋白酶组织抑制因子2主要表达部位在肾小管上皮,少量表达在肾间质和肾小球。基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶3在模型组的表达较假手术组明显减弱,两组间积分光密度比较差异有显著性意义(P<0.05);中药大、中剂量组及西药蒙诺组的表达较模型组显著增强,积分光密度差异有显著性意义(P<0.05)。金属蛋白酶组织抑制因子2在模型组的表达较假手术组显著增强,两组间积分光密度比较差异有显著性意义(P<0.05);中药大、中剂量组及西药蒙诺组的表达较模型组有所减弱,两组间积分光密度比较差异有显著性意义(P<0.05);中药小剂量组无论基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶3还是金属蛋白酶组织抑制因子2的表达与模型组相比均较为相似,两组间积分光密度比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:大鼠输尿管梗阻后呈现出的病理损害可能和肾组织基质金属蛋白酶3,基质金属蛋白酶2与金属蛋白酶组织抑制因子2的表达失衡有关,益气活血法可以上调基质金属蛋白酶2,基质金属蛋白酶3的表达,下调金属蛋白酶组织抑制因子2的表达,显示在抑制或延缓肾间质纤维化的进程中具有一定的作用。     

精细化护理干预在新生儿高胆红素血症护理中的应用

目的 探究精细化护理干预在新生儿高胆红素血症护理中的效果.方法 选取本院2021年6月至2022年6月接收的60例新生儿高胆红素血症患儿作为本次研究对象.随机数字表法分为对照组和观察组,每组各30例.对照组实施常规护理,观察组实施精细化护理干预.对比分析两组的临床相关指标、并发症和护理满意度.结果 观察组的患儿胎粪首排、黄疸消退、胆红素恢复正常及胎粪转黄时间短于对照组(P＜0.05).观察组的黄疸指数、总胆红素水平短于对照组(P＜0.05).观察组和对照组的并发症发生率分别为6.67％和30.00％(P＜0.05).观察组护理满意度高于对照组(P＜0.05).结论 新生儿高胆红素血症实施精细化护理,能够加快患儿康复,减少并发症,提高护理满意度.     

实验性脾虚证大鼠胰岛细胞的免疫组织化学研究

目的 研究实验性脾虚证大鼠胰岛细胞胰岛素,胰岛淀粉样多肽,胰高血糖素和生长抑素分泌活动的变化,探讨中医学脾虚证发病与胰岛激素分泌活动的关系。方法 用Ｗｉｓｔａｒ雄性成年大鼠２４只,分为正常对照组,实验性脾虚组,自然恢复组和中药治疗组。４组动物同时麻醉处死,取胰尾固定Ｂｏｕｉｎ液,制成石蜡切片。用免疫组织化学法显示胰岛细胞胰岛素和胰岛淀粉样多肽,Ａ细胞肮血血糖素和Ｄ细胞生长抑素,并用显微分光光度计对     

大鼠实验性脾气虚胃溃疡证病结合模型回肠5-HT及其受体和IL-2、IL-6变化的研究

目的 研究大鼠脾气虚胃溃疡证病结合模型中回肠5-羟色胺 (5-HT)及其受体(5-HTR)、细胞因子IL-2、IL-6的变化,探讨脾虚胃溃疡的发病机制及加味四君子汤治疗脾虚证的机理.方法 采用免疫组织化学技术、图像分析、放射免疫和免疫印迹法.结果 大鼠脾气虚合并胃溃疡模型中5-HT阳性细胞主要分布于回肠黏膜上皮及肠腺细胞;5-HTR免疫反应阳性的细胞主要位于肠绒毛及腺体间结缔组织,在肠壁平滑肌、肌间神经丛也有表达;5-HT及其受体免疫反应阳性产物的含量均增加,免疫印迹法示回肠5-HTR含量增加,且随病程进展,而进一步升高;经过加味四君子汤治疗后,上述异常变化得到纠正.在造模初期,IL-2、IL-6的分泌活性增加,随着脾虚胃溃疡发病的进一步发展,IL-2、IL-6的分泌活性降低.结论 大鼠脾气虚胃溃疡模型中回肠组织5-HT及其受体含量的增高,是大鼠脾虚胃溃疡发病的机理之一,加味四君子汤能通过纠正这些变化而发挥治疗作用.IL-2、 IL-6分泌活性的改变可能与大鼠脾虚胃溃疡的病程发展相关.     

2种骨切片硫堇-苦味酸染色法的比较

骨切片的染色法有多种,其中硫堇苦味酸染色法是比较常用的染色方法,但书中及各实验室的染液配制及染色方法不尽相同^[1～4],因此我们对2种硫堇染液和2种脱水、透明方法做了一些比较和探讨,以便选择一种效果较好的染色方法。     

绝经期乳腺癌妇女服用他莫昔芬后Ki-67及Bcl-2在子宫内膜中的表达

目的:评估绝经期乳腺癌妇女服用他莫昔芬(tamoxifen,TAM)后Ki-67及Bcl-2在子宫内膜中的表达。方法:46例绝经后因乳腺癌服用TAM超过6个月妇女的子宫内膜为研究组,行宫腔镜检查及内膜活检。18例因子宫脱垂行子宫切除的绝经后妇女的萎缩型子宫内膜为对照组。用免疫组化法测定Ki-67及Bcl-2在子宫内膜中的表达。结果:与对照组比较,Ki-67在TAM相关内膜腺上皮细胞呈显著高表达(15.41±4.83vs9.05±5.52,P=0.009);Bcl-2在TAM相关内膜腺上皮细胞呈较高表达,但与对照组比较无统计学差异(0.50±0.17vs0.43±0.11,P=0.077)。结论:绝经后乳腺癌妇女服用TAM能引起子宫内膜细胞增殖,但并不代偿性促进细胞凋亡,诱导细胞增殖是TAM对绝经后子宫内膜作用机理的一部分。     

先天性食管闭锁并气管食管瘘的早期胚胎学研究

目的利用阿霉素诱导制作食管闭锁并气管食管瘘（esophageal atresia and tracheoesophageal fistula，EA-TEF）大鼠模型，探讨胚胎发育中气管、食管分化异常的发生机制及可能的影响因素。方法明确孕龄的SD雌性孕鼠9只，随机分为正常组2只及模型组7只，模型组于E6～E9d每日腹腔注射2mg／kg阿霉素，正常组不注射。正常组于E11．5、E12．5d，模型组于E11．5、E12．5、E13．5d取材。进行HE及PAS染色，成纤维细胞生长因子7、10（fibroblast growth factor7，FGF7，10）免疫组化染色。留1只模型组孕鼠于E21d处死，体式镜下解剖。结果①正常对照组：HE染色可见到11．5d肺芽萌出，12．5d时可见气管、食管分离，在气管、食管分离处的前肠壁内有大量的凋亡小体。PAS染色及FGF7、10免疫组化染色可见前肠背侧半及食管为阴性，前肠腹侧半及气管部分为阳性；②模型组：HE染色11．5d未见明显肺芽萌出，12．5d可见瘘管与两侧支气管类似三分叉结构，在几乎相同水平发出。PAS染色及FGF7、10免疫组化染色可见瘘管组织阳性染色，近段前肠可见喉气管憩室以远的腹侧半为阳性。结论对正常大鼠及阿霉素致畸动物模型早期胚胎学的观察得出以下结论：①正常气管、食管的分隔可能与局部细胞的凋亡有关；②气管、食管的正常分隔可能为前肠正常发育的必要条件；③FGF7、10在模型组TEF中表达，表明可能存在间充质细胞的异常，产生异常的信号因子导致TEF。