己酮可可碱对大鼠脓毒症急性肺损伤p38MAPK活性的影响

目的　探讨己酮可可碱(pentoxifylline,PTX)对腹腔感染致脓毒症急性肺损伤发挥肺保护作用与p38MAPK活化的关系。方法　采用盲肠结扎穿孔致脓毒症模型,将大鼠随机分为Ⅰ组(Sham组)、Ⅱ组(脓毒症CLP组)、Ⅲ组(脓毒症加西黄著胶CLP+V组)、Ⅳ组(脓毒症加生理盐水CLP+N组)、Ⅴ组(脓毒症加SB203580 CLP+SB组)、Ⅵ组(脓毒症加己酮可可碱CLP+PTX组),其中Ⅲ组、Ⅳ组为溶媒对照组。用Western Blot检测假手术组,脓毒症1,3,6,12,24 h后p38MAPK的磷酸化,然后选择1,6,24 h分别检测应用SB203580或PTX后p38MAPK的表达,同时检测血浆TNF-α、IL-6的含量并观察24 h内肺组织病理改变。结果　与假手术组比较,脓毒症组在各个时间点p38MAPK均有较强的表达,SB203580或PTX预处理后各组的p38MAPK的磷酸化明显受到抑制,且与血浆TNF-α、IL-6的含量以及肺的病理切片变化一致。结论　己酮可可碱可能是通过抑制p38MAPK的磷酸化抑制促炎因子的过度表达,发挥对脓毒症急性肺损伤的保护作用。     

己酮可可碱对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的保护作用

目的 观察己酮可可碱对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠相关肺损伤的保护作用,并探讨其可能的发病机制.方法 36只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组.采用5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射的方法,复制大鼠SAP相关肺损伤模型.治疗组在模型制作前30min给予己酮可可碱.12h后分别对胰腺损伤、肺损伤程度进行病理评分,测定肺系数、胰腺湿重、血清淀粉酶,用ELISA法检测血清和支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量,用半定量RT-PCR法检测肺组织中NF-κB p65 mRNA的表达.结果与模型组比较,治疗组胰腺及肺损伤程度明显减轻;其血清和支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量明显下降,肺组织中NF-κB p65 mRNA的表达亦明显减少.结论己酮可可碱对SAP相关急性肺损伤具有保护作用,其机制可能与抑制肺组织中NF-κB p65 mRNA的表达,从而抑制促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β的产生相关.     

己酮可可碱通过抑制肿瘤坏死因子α发挥抗炎作用

目的：探讨己酮可可碱（PTX）是否通过对血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）的调节而发挥对大鼠胶原诱导性关节炎（CIA）的保护作用。方法：建立大鼠CIA模型后随机分为正常对照组、生理盐水CIA模型组、PTX治疗组。分别观察各组大鼠的体重、后足容积,并对关节炎的肿胀程度进行评分;用ELISA检测不同时间点各组血清的TNF-α水平。结果：与CIA组相比,PTX治疗组大鼠的炎症得到了较好的控制。第48天时PTX组的TNF-α水平与正常对照组的TNF-α水平没有统计学差异（P〉0．05）,但与CIA组相比显著降低（P〈0．05）。结论：PTX对大鼠CIA关节炎具有缓解症状、抑制炎症肿胀的作用,PTX能够显著降低血清TNF-α水平。PTX可能是通过抑制血清TNF-α水平来发挥抗炎作用。     

卡维地洛对大鼠心肌TNF—α、TNF—αR1表达的影响

目的研究卡维地洛对大鼠心肌凋亡相关基因TNF-α、TNF-αR1表达的影响。方法SD大鼠随机分三组:对照组,阿霉素组,阿霉素 卡维地洛组;阿霉素腹腔注射(ADR 20 mg/kg)制备心肌毒性动物模型;卡维地洛组在注射阿霉素之后立即腹腔注射卡维地洛(Carv2 mg/kg);等量生理盐水用于对照组。于用药后第1、3、5、10、15天采用逆转录聚合酶链反应检测TNF-α,TNF-αR1在心肌细胞中的表达,HE染色检测心肌组织病理改变情况。结果GAPDH为内标,第1、3、5、10天阿霉素组TNF-α表达逐渐增强,TNF-αR1表达逐渐增强;阿霉素 卡维地洛组中TNF-α及TNF-αR1表达均逐渐增强;阿霉素 卡维地洛组与阿霉素组比较:TNF-α及TNF-αR1表达两组比较差异无显著性。HE染色结果:阿霉素组与卡维地洛组比较差异无显著性。结论(1)阿霉素的心肌毒性作用可增强心肌细胞凋亡相关基因TNF-α及TNF-αR1的表达;(2)卡维地洛对凋亡相关基因TNF-α及TNF-αR1的表达无影响;揭示卡维地洛对阿霉素心肌毒性的保护作用不能通过调节TNF-α、TNF-αR1的表达而实现。     

己酮可可碱预处理对单纯性失血性休克致小鼠急性肺损伤的影响及其机制

目的观察给予己酮可可碱(PTX)预处理对失血性休克致急性肺损伤(ALI)小鼠的影响,初步探讨PTX的作用机制。方法小鼠分为对照组、失血性休克组及PTX组。通过肺组织HE染色观察病理改变,同时检测肺干湿比(W/D)和髓过氧化物酶(MPO)活性。通过ELISA方法检测肺组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-1β变化,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织Toll样受体4(TLR4)mRNA的表达,通过Western blot检测肺组织TLR4蛋白的变化。结果失血性休克诱导小鼠产生ALI,肺W/D和MPO活性明显增加,TNF-α、IL-1β、TLR4 mRNA和TLR4蛋白表达也增高,与对照组有显著性差异(P0.01)。PTX预处理能减轻失血性休克所致ALI,降低肺W/D和MPO活性,同时导致TNF-α、IL-1β、TLR4 mRNA和TLR4蛋白表达下降。结论 PTX预处理对失血性休克所致ALI起保护作用,可能与通过下调TLR4抑制促炎症因子表达有关。     

己酮可可碱对缺血性心肌病心力衰竭T淋巴细胞免疫及炎症因子的影响

[摘要]　目的　探讨己酮可可碱(PTX)对缺血性心肌病心力衰竭患者外周血T淋巴细胞免疫CD3、CD4、CD8、CD4/CD8及炎症因子IL-6、TNF-α的影响及其机制。方法　82例缺血性心肌病心力衰竭[左心室射血分数(LVEF)<45％]患者,随机分为己酮可可碱组（n=42）及常规治疗组（n=40）,在心力衰竭常规治疗基础上加用己酮可可碱,200mg,每日3次,观察治疗6月;另选取36例健康体检者作为健康对照组。各组治疗前、后均采用流式细胞分析法检测全血T细胞亚群CD3、CD4、CD8、CD4/CD8水平;酶联免疫吸附法测定IL-6;顺序饱和液相竞争的弥散免疫分析法测定TNF-α。结果　缺血性心肌病心力衰竭患者治疗前T细胞亚群CD3、CD4、CD8、CD4/CD8及炎症因子IL-6、TNF-α水平均无显著差异,但与正常对照组对比,CD3、CD4、CD4/CD8降低(P<0.05),CD8无明显差异(P>0.05)。治疗后两组较治疗前CD3、CD4、CD4/CD8及炎症因子IL-6、TNF-α明显改善(P<0.05),而己酮可可碱组显著优于常规治疗组,有显著性差异(P<0.05)。结论 免疫系统T细胞亚群和炎症因子IL-6、TNF-α表达异常在心力衰竭发生发展中具有重要的作用,己酮可可碱调节细胞免疫功能治疗可能改善CHF患者的预后。     

己酮可可碱对内毒素血症大鼠心肌炎症的抑制作用

目的　观察己酮可可碱 (PTX)对内毒素血症 (ETM)大鼠心肌内重要炎性介质 (TNF -α和IL - 1β)的产生及组织学方面的影响 ,借以探讨PTX对ETM心肌的保护作用。方法　随机将大鼠分为正常对照组、ETM模型组和PTX干预组。采用放射免疫分析法检测不同时间点血循环及心肌内TNF -α和IL - 1β水平。再通过病理形态学技术 ,观察心肌组织形态学改变。结果　无论是在血循环还是心肌内 ,PTX都可显著抑制TNF -α和IL - 1β的生成。从病理形态学方面也观察到 ,经PTX干预后 ,ETM大鼠心肌炎症反应明显减轻。结论　PTX可通过抑制血循环和心肌局部炎性介质的生成 ,达到对ETM心肌的保护作用     

内热针治疗对第三腰椎横突综合征模型大鼠损伤组织炎症反应的影响

【目的】探讨内热针治疗对第三腰椎横突综合征模型大鼠损伤组织炎症反应的影响。【方法】将90只SD大鼠随机分成6组:正常组、模型组、药物组、内热针组、普通针刺组和温针灸组,每组15只。采用埋置明胶海绵的方法制作第三腰椎横突综合征模型,2周后对相应组别大鼠进行治疗。于治疗后第0、7、14、28天从大鼠颈静脉取血,采用酶联免疫吸附反应(ELISA)法检测血液中炎性细胞因子如肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6的含量;于治疗后第28天处死大鼠,取第三腰椎横突周围肌肉组织,采用HE染色观察肌肉组织病理学变化,采用实时定量逆转录—聚合酶链反应(RT-q PCR)检测肌肉组织中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达情况。【结果】造模后的大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6含量较正常组显著升高(P0.05);治疗后,各治疗组大鼠血清中上述炎性细胞因子含量较模型组显著降低(P0.05),且内热针组最为明显(P0.05)。治疗后,各治疗组大鼠损伤肌肉组织TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA水平较模型组显著降低(P0.05),且内热针组表达水平最低。内热针组大鼠肌肉组织苏木素—伊红(HE)染色结果与其他治疗组比较,炎症反应更轻,肌纤维结构更完整。【结论】内热针治疗可通过降低TNF-α、IL-1β和IL-6等炎性细胞因子的表达,改善局部炎症反应,促进组织损伤的修复。     

HSPTX通过抑制NF-κB蛋白表达减轻失血性休克复苏诱发的肺部炎症反应

目的:探讨HSPTX(7%、5%氯化钠+己酮可可碱)对失血性休克大鼠肺损伤的保护作用.方法:24只雄性SD大鼠随机分为3组:假失血性休克(Sham)组,仅接受动静脉插管操作,不放血及复苏、大容量等张乳酸钠林格氏液(RL)复苏组,接受32 ml/kg RL、小容量高张(7%、5%氯化钠)液+PTX复苏组,接受4 ml/kg 7.5%NaCl+25 mg/kg PTX,每组8只.测定各组动脉血氧分压(PaO2)、pH值、二氧化碳分压(PaCO2)、肺湿/干重比值、测定血清丙二醛(Malondialdehyde)含量以及超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase)活性;检测支气管肺泡灌洗液(Bronehoalveolor lavage fluid)中性粒细胞比例及肺通透性指数,采用ELISA法测定灌洗液上清中TNF-α、IL-1β含量;采用Western blot技术检测肺组织NF-κB蛋白表达.结果:与RL组相比,HSPTX组PaO2和pH值升高、PaCO2降低(P＜0.01),HSPTX组大鼠肺湿/干重(W/D)、支气管肺泡灌洗液中上清中TNF-α、IL-1β含量均低于RL组(P＜0.01),同时HSPTX组肺组织中核因子κB蛋白(NF-κB)表达显著低于RL组.结论:HSPTX复苏通过抑制核因子κB蛋白的表达减少失血性休克大鼠炎性细胞因子的表达,减轻由失血性休克诱发的急性肺损伤.     

蛇床子素预处理对大鼠心脏缺血再灌注损伤的作用

目的:探讨蛇床子素(osthole,Ost)预处理对大鼠心脏缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法:建立大鼠心脏缺血再灌注损伤模型。30只雄性SD大鼠随机平均分为Ost组、模型组和假手术组。假手术组和模型组手术前1 h给予生理盐水(50 mg·kg~(-1),腹腔注射),Ost组缺血前1 h给予Ost(50 mg·kg~(-1),腹腔注射),模型组和Ost组血管夹夹闭左冠状动脉前降支,置于32℃温箱30 min后松开血管夹,4 h后收集各组大鼠心脏和血清。HE染色后观察心脏病理学形态学变化,Western blotting检测P38,p-P38和p-NF-κB;RT-PCR检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的心脏表达和分泌;ELISA检测乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)、心肌型肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、IL-6、IL-1β和TNF-α的水平。结果:与假手术组比较,模型组病理改变,p-P38、p-NF-κB、LDH、CK-MB、CK、IL-6、IL-1β和TNF-α表达均明显增加(P0.05),但P38和NF-κB表达无明显差异。与模型组比较,Ost组病理改变,p-NF-κB、LDH、CK-MB、CK、IL-6、IL-1β和TNF-α表达明显减少(P0.05),但p-P38表达进一步增加,而P38和NF-κB表达仍无明显变化。结论:Ost预处理可通过抑制炎症反应发挥对大鼠心脏缺血再灌注损伤的保护作用,其作用机制与促进P38信号通路激活相关。     

己酮可可碱对神经病理性疼痛小鼠海马中p-p38,p-JNK蛋白的表达及抑郁行为的影响

[目的]观察己酮可可碱(PTX)对神经病理性疼痛小鼠海马中p-p38,p-JNK蛋白的表达及抑郁行为的影响.[方法]利用坐骨神经套扎术(Cuff)建立神经病理性疼痛小鼠模型,通过小鼠后肢回缩压力阈值测定(PWPT)、蔗糖偏好试验、旷场试验等行为学检测方法评估Cuff诱导的神经病理性疼痛小鼠神经病理性疼痛症状和抑郁样行为;采用ELISA法检测小鼠血清中TNF-α,IL-6水平,Western blot法检测海马组织中p-p38和p-JNK蛋白的表达情况.[结果]与Cuff组比较,Cuff+PTX组PWPT值、蔗糖消耗比值、水平得分及垂直得分均显著升高(P<0.05),TNF-α,IL-6水平均明显降低(P<0.05),p-JNK,p-p38表达均明显下调(P<0.05).[结论] PTX可能通过抑制p38和JNK活性及降低炎症因子而缓解Cuff所致的小鼠抑郁样行为.     

己酮可可碱对呼吸道合胞病毒所致的TNF-α基因表达水平的影响

观察己酮可可碱(PTX)对呼吸道合胞病毒(RSV)所诱导的巨噬细胞肿瘤坏死因子(TNF-α)含量及TNFαmRNA表达水平的影响。收集Balb／c小鼠腹腔巨噬细胞,随机分成三组①对照组(NOR组);②感染组(RSV组)培养基中含有106pfu的RSV;③已酮可可碱组(PTX组)用RSV(106pfu)感染后,培养基中加入PTX(1mg／ml);每组于RSV感染巨噬细胞20h后,用ELISA法测定培养细胞上清中TNF-α含量的变化,同时用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定各组巨噬细胞TNF-αmRNA表达水平。结果表明感染组中TNF-αmRNA表达水平与对照组相比明显增多。PTX组TNF-αmRNA的表达和感染组相比明显降低。TNF-α的含量也有相应的变化与对照组比较,感染组明显升高(P<0．01);而PTX组与感染组比较明显下降(P<0．01)。认为PTX能抑制RSV所诱导的巨噬细胞TNF-α的基因表达,并减少TNF-α的产生。     

扩张型心肌病大鼠心肌ErbB4蛋白表达和细胞凋亡及neuregulin-1β的干预作用

目的观察阿霉素所致心衰大鼠心肌ErbB4蛋白表达和细胞凋亡及NRG-1β的干预作用。方法用60只SD雄性大鼠随机分为4组:阿霉素心肌病8周组(ADR1,n=10),阿霉素2 mg/kg,尾静脉注射,每周1次,连续注射8周;阿霉素心肌病12周组(ADR2,n=20),阿霉素2 mg/kg,尾静脉注射,每周1次,连续注射8周,之后普通喂养到12周;阿霉素心肌病+NRG-1治疗组(NRG,n=20),在注射ADR后8周后即开始给予neuregulin-1β10μg/(kg.d)尾静脉注射,连续5 d,之后喂养到12周;正常对照组(CON,n=10)。免疫印迹法(Western blot)检测ErbB4受体蛋白的表达;HE染色病理观察评分;TUNEL法观察心肌细胞凋亡。结果心肌细胞凋亡指数:与模型组相比,NRG治疗组凋亡指数显著降低(P<0.05);ErbB4蛋白表达:模型组第8周时表达明显高于正常组,模型组12周时表达较正常组明显减少;与模型组比较,NRG干预组ErbB4蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论ErbB4蛋白表达在扩张型心肌病大鼠心肌中表达早期增强,随着病程延长明显下降;NRG-1β能够抑制扩张型心肌...     

川芎嗪对扩张型心肌病大鼠左心收缩功能的影响及机制

目的探讨川芎嗪(LTZ)对扩张型心肌病(DCM)大鼠左心收缩功能的影响及机制。方法通过腹腔注射阿霉素(2.5 mg/kg,2次/周,共4周)建立大鼠扩张型心肌病模型(DCM组);LTZ组在建立大鼠扩张型心肌病模型的同时经过腹腔注射LTZ(100 mg/(kg·d),连续4周);白藜芦醇(RES)组在建立大鼠扩张型心肌病模型的同时经过腹腔注射RES(20 mg/(kg·d),连续4周)。采用心脏超声检查舒张期室间隔厚度(IVSd)、舒张期左室内径(LVEDd)、舒张期左室后壁厚度(LVPWd)、左心室射血分数(LVEF);HE染色观察心肌组织形态;ELISA法检测血清氨基末端脑钠肽前体(NTproBNP)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;Real time PCR和蛋白印迹法检测心肌组织癌胚抗原相关细胞粘附分子1(CEACAM1)、p-p38蛋白(p-p38MAPK)、caspase 3表达情况。结果与正常组(Sham)大鼠相比,DCM组大鼠左心明显扩大,LVEF降低,血清NTproBNP、IL-1β、TNF-α水平增加,TGF-β1水平下降,心肌组织中CEACAM1、caspase 3、p-p38 MAPK的mRNA和蛋白表达水平增加,差异均有统计学意义(P0.05);与DCM组大鼠相比,LTZ组大鼠心脏扩大明显减轻,LVEF上升,血清NTproBNP、IL-1β、TNF-α水平下降,TGF-β1水平增加,心肌组织中CEACAM1、caspase3、p-p38 MAPK的mRNA和蛋白表达水平下降,差异均有统计学意义(P0.05);与DCM组大鼠相比,RES组大鼠心脏扩大更加明显,LVEF下降,血清NTproBNP、IL-1β、TNF-α水平上升,TGF-β1水平降低,心肌组织中CEACAM1、caspase3、p-p38 MAPK的mRNA和蛋白表达水平增加,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 CEACAM1参与了扩张型心肌病的发生。川芎嗪可能通过降低CEACAM1的表达改善扩张型心肌病大鼠的左心收缩功能。     

通心络对冠脉微栓塞兔心肌损伤的保护机制

目的:研究术前负荷量通心络对冠脉微栓塞心肌损伤的影响及其机制。方法:40只雄性大白兔随机分为假手术组、冠脉微栓塞组、常规药物组和常规药物+通心络组。观察术后6 h各组血清cTnI、炎症因子TNF-α和IL-1β及心肌病理学的变化;并采用免疫组化方法检测各组心肌TNF-α及IL-1β的表达。结果:冠脉微栓塞组兔血清cTnI水平明显升高,心肌内可见明显微梗死灶,炎性细胞浸润;血清TNF-α、IL-1β水平也明显升高,心肌组织TNF-α与IL-1β强表达;常规药物组显著降低冠脉微栓塞兔血清cTnI水平,缩小心肌微梗死灶,减轻炎症细胞浸润;降低血清炎症因子TNF-α、IL-1β水平及心肌组织TNF-α、IL-1β的表达。通心络组与常规药物组比较,血清炎症因子TNF-α、IL-1β及心肌组织TNF-α与IL-1β的表达进一步降低,减轻心肌损伤。结论:负荷量通心络对冠脉微栓塞心肌产生保护作用,其机制可能与通过抑制炎症因子TNF-α及IL-1β,降低心肌炎症反应有关。     

巴戟天醇提物对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤后白介素-1β、肿瘤坏死因子-α及心肌细胞凋亡的影响

目的探讨巴戟天醇提物对心肌缺血再灌注损伤（IRI）后白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平以及心肌细胞凋亡的影响。方法取健康雄性Wistar大鼠80只,随机分为空白对照组、IRI组、巴戟天高剂量组和巴戟天低剂量组四组,每组各20只。利用Langendorff灌流技术制备心肌IRI模型,两个巴戟天用药组分别在预灌时给予相应浓度的药物。灌流结束后,各组取10只大鼠左心室组织,采用ELISA法检测其IL-1β、TNF-α的表达;取另外10只大鼠左心室组织,采用TUNEL法检测其心肌细胞凋亡情况。结果与IRI组相比,巴戟天高剂量组和巴戟天低剂量组IL-1β、TNF-α表达降低（P〈0.05）,凋亡指数降低（P〈0.05）。结论巴戟天醇提物能够减轻心肌IRI后心肌细胞凋亡,这可能与其能够降低心肌组织中的IL-1β、TNF-α表达有关。     

加味猪苓汤治疗原发性系膜增殖性肾炎的实验研究

【目的】探讨猪苓汤治疗原发性系膜增殖性肾炎的作用机制。【方法】采用兔抗鼠胸腺细胞抗体(Thy-1)大鼠肾炎模型,检测各组大鼠血液生化指标和细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的活性以及白细胞介素6信使核糖核酸(IL-6 mRNA)的表达波。【结果】模型组的IL-1β、TNF-α和IL-6水平均升高,IL-6 mRNA表达增强,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01);猪苓汤组能降低IL-1β、TNF-α和IL-6的水平及减弱IL-6mRNA的表达,与模型组比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。【结论】加味猪苓汤可能是通过抑制细胞因子的基因表达、降低细胞因子的活性对原发性系膜增殖性肾炎产生治疗作用。     

己酮可可碱对严重烫伤后大鼠脑组织炎性细胞因子的影响与机制

目的 炎性反应烫伤后脑损伤过程中发挥重要作用,观察严重烫伤后大鼠不同时间的脑组织炎性细胞因子、核因子-kappa B(nuclear factor-kappa B, NF-κB)和胶质细胞原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)的变化,探讨已酮可可碱(pentoxifytlline, PTX)对严重烫伤后脑的保护作用.方法 成年雄性Wistar大鼠78只,随机分为对照组(n=6),烫伤组(n=36),烫伤+PTX治疗组(n=36).水烫法建立40%全身体表面积(total body surface area, TBSA)烫伤模型,烫伤组大鼠于烫伤15min后静脉输注等渗盐水10ml/kg,烫伤+PTX治疗组大鼠于烫伤15min后静脉输注给予PTX 50mg/kg,2组于烫伤0.5,1,2,4,8,16h后处死动物,每个时间点取6只大鼠测定脑肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha, TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6) 和白细胞介素-10(interleukin-10, IL-10)的水平,16h测定NF-κB和GFAP表达.对照组于37℃水假烫15min后静脉输注等渗盐水10ml/kg,16h处死,测定上述指标.凝胶电迁移法(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)测定脑组织NF-κB的活性,酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbance assay,ELISA)测定TNF-α、IL-6和IL-10的水平,Western blot测定脑GFAP水平.结果 与对照组相比,烫伤组大鼠脑组织的NF-κB和GFAP的表达显著增强(P<0.01),TNF-α、IL-6和IL-10水平显著增高(P<0.01).与烫伤组相比,烫伤+PTX治疗组脑组织NF-κB和GFAP的表达减弱(P<0.01)、 TNF-α和IL-6的水平降低(P<0.01),但仍高于对照组(P<0.01).烫伤+PTX治疗组IL-10水平没有降低,反而显著增高于烫伤组(P<0.01).结论 早期给予PTX对严重烫伤后大鼠继发性脑损伤有保护作用.     

己酮可可碱对染汞大鼠脊髓及背根神经节TNF-α表达的影响

目的 观察己酮可可碱对大鼠脊髓和背根神经节(DRG)肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响.方法 雄性SD大鼠40只,体重180-220g,分为7组.对照组(10只)经口灌胃生理盐水(NS)2mL/次,每天1次;A、B、c组(各5只)按17mg/kg;D、E、F组(各5只)按8.5mag/kg经口灌胃HgCl_2溶液,每天1次.7组均连续灌胃18～22d.染汞组动物出现汞中毒症状后,处死A、D组大鼠和对照组5只大鼠.随后B、E组用二巯丙磺钠注射液(DMPS)按28 mg/kg腹腔注射驱汞2个疗程(驱汞3 d,休息4 d为1个疗程):C组用DMPS+己酮可可碱(按29.22 mg/kg经口灌胃,每天1次,共14 d);F组腹腔注射Ns 1 mL/次,方法同DMPS.实验结束后处死全部动物,灌注固定取出脊髓L5-6节及L5、L6两侧DRG并制成病理切片.用免疫组织化学SABC法测定DRG和脊髓TNF-α表达水平.结果 染毒组大鼠DRG和脊髓TNF-α平均灰度均显著低于对照组;阳性反应物平均面积均显著高于对照组(P<0.05);B、E组用DMPS驱汞2个疗程及F组腹腔注射NS 2周期后,均未见TNF-α表达显著减弱,C组(DMPS+己酮可可碱)DRG和脊髓TNF-α平均灰度显著提高.平均面积减少(P<0.05).结论 亚急性HgC1_2中毒大鼠DRG和脊髓TNF-α表达显著增强,己酮可可碱联合αDMPS能够有效抑制TNF-α表达.     

己酮可可碱治疗非酒精性脂肪性肝炎的实验研究

目的通过高脂饮食制备大鼠非酒精性脂肪肝模型,观察肝组织胶原的合成及相关细胞因子的变化。进一步观察及探讨己酮可可碱(pentoxifylline,PTX)对非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)所致肝纤维化的治疗作用及机制。方法30只SD大鼠随机分为模型组(n=10)、治疗组(n=10)和正常对照组(n=10)3组。模型组和治疗组大鼠以高脂饲料喂养,治疗组大鼠高脂饮食12周后每d同时予以己酮可可碱16mg/kg,及治疗4周。对照组大鼠以普通饲料饲养。实验16周处死3组大鼠。应用荧光定量PCR方法分别测定肝组织Ⅰ、Ⅲ型前胶原(procollagenⅠ、Ⅲ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。结果大鼠肝组织中Ⅰ型前胶原mRNA的表达量模型组高于对照组,治疗组显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);大鼠肝组织中Ⅲ型前胶原mRNA的表达量,模型组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),治疗组与模型组表达量差异无统计学意义;大鼠肝组织中TGF-β1 mRNA的表达量模型组高于对照组,治疗组显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);大鼠肝组织中TNF-α mRNA的表达量模型组高于对照组,治疗组显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TGF-β及TNF-α可能参与非酒精性脂肪肝肝纤维化的发生、发展过程。己酮可可碱可能通过抑制细胞因子TGF-β1和TNF-α降低脂肪性肝炎肝脏细胞外基质Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成,对NASH引起的肝纤维化起到一定的治疗作用。