人脑恶性胶质瘤细胞裸小鼠脑内移植模型的建立及生物学特征

本实验选用人脑多形性胶质母细胞瘤细胞移植于30只裸小鼠脑内。每只裸鼠脑内均生长大小0.3～1.1cm~3实体性胶质瘤。荷瘤鼠生存15±3天。移植瘤很容易向周围脑内及软组织浸润。通过光镜和电镜进行形态学观察,同时进行GFAP、S—100、c-fos癌基因免疫组化染色。观察结果符合人脑恶性胶质瘤的特征。该方法简单可靠、重复性强。     

摘除松果体对大鼠学习记忆及基底前脑胆碱能系统的影响

目的　探讨松果体功能减退对大鼠学习记忆及基底前脑胆碱能系统的影响。方法　选用 3月龄SD大鼠 2 4只 ,随机分为对照组、去松果体组和褪黑素 (MT)组。手术摘除松果体。饲养 1个月后用Morris水迷宫测试学习记忆功能 ,同时用组织化学和免疫组化方法测定海马、前额叶皮质AchE纤维和内侧隔核、斜角带核的ChAT神经元的数量。结果　与对照组比较 ,去松果体组逃避潜伏期明显增加 ,海马、前额叶皮质AchE纤维数量明显减少 ,但内侧隔核、斜角带核的ChAT神经元数量变化不明显。结论　大鼠去松果体可引起大鼠学习记忆能力减弱 ,这可能与基底前脑胆碱能神经元的功能下降有关     

提高人体形态学教学效果方法探讨

<正>人体解剖学是研究人体正常结构的形态学科,是医学科学的一门重要基础课程,作为一名医学生要想成为合格的医务工作者,必须首先掌握人体的正常形态结构,学好人体解剖学。由于医学上三分之一的名词来自人体解剖学,学生初次接触,名词术语繁多,内容缺少逻辑推理性,加上人体组织器官在体内是立体分布,对其形态结构的理解需要一定的空间想象力。因此,学生普遍反映解剖知识难于记忆和掌握。笔者根据多年教学经     

成年大鼠基底前脑隔-斜角带复合体的巢蛋白免疫阳性神经元至海马的纤维投射

目的 观察大鼠基底前脑巢蛋白(nestin)免疫阳性神经元的纤维投射。方法 先用荧光素逆行追踪法显示基底前脑内投射至海马的荧光素标记神经元，观察摄片后再进行nestin免疫组织化学染色。对比荧光照片和免疫组织化学染色照片，辨认荧光素和nestin双标神经元。结果 在基底前脑注射侧的内侧隔核(MS)和斜角带核的垂直支(vDB)和水平支(hDB)均存在荧光素标记细胞，其中一部分为nestin免疫阳性。在MS、vDB和hDB，双标细胞占逆行标记细胞的比例分别为21．3％、25％和20．6％；占nestin阳性细胞的比例分别为26．6％、15．7％和16．3％。结论 大鼠基底前脑的nestin免疫阳性神经元发出神经纤维向海马投射。提示在基底前脑有一个平行于隔-海马胆碱能投射和GABA能投射的第3条通路。     

阿尔茨海默病患者血清中抗淀粉样蛋白抗体的免疫耐受

目的:研究阿尔茨海默病(AD)血清中抗Aβ抗体与淀粉样蛋白结合的特性。方法:以AD患者和健康老人的血清作一抗,①用组织淀粉样斑块免疫反应(TAPIR)观察与Tg2576鼠脑内老年斑结合能力;②Western blot检测与Aβ42-GST融合蛋白的结合能力;③将Aβ42与PC12细胞培养,加入健康老人和AD患者的血清后,MTT法观察PC12细胞存活率。结果:AD患者的血清中抗Aβ抗体与成熟老年斑和Aβ42-GST融合蛋白的结合能力较弱;加入AD血清后,PC12细胞的A值较健康老人血清相比下降明显(P<0.01)。结论:AD血清中抗Aβ抗体对淀粉样蛋白可能存在着免疫耐受。     

青、老年大鼠在Morris水迷宫中的学习记忆行为

本实验观察了22～24月龄老年大鼠和5～6月龄青年大鼠在Morris水迷宫中的学习记忆行为,并用定量分析方法比较两组动物在定位航行及空间搜索试验中的学习记忆,结果表明老年大鼠的寻找平台潜伏期明显延长,而其跨平台次数及在平台象限的游泳路线长度并未减少.提示24月龄老年大鼠获取学习记忆的能力受损伤而保持记忆的能力维持正常,这可能与二种功能衰老的不同速度及不同神经基础有关.     

环孢素A对实验大鼠脑缺血治疗作用的组织化学研究

【目的】进一步证实免疫因素在脑缺血病理变化中的作用。【方法】将 6 0只局部脑缺血模型SD大鼠分为缺血 3d ,1周和 2周 3个缺血时间组 ,每组分为生理盐水对照和环孢素A治疗两个部分 ,进行TTC和HE组化染色实验 ,并对结果进行统计处理 (t检验 )。【结果】脑缺血 1周 ,环孢素处理组的组织病理学变化较生理盐水对照组明显减轻 ,脑梗塞体积和死亡的神经元数量在环孢素A处理组分别为 3 2 %和 15 8/ 0 0 6 2 5mm2 ,而生理盐水组则为 5 9%和 2 2 1/ 0 0 6 2 5mm2 ,两组之间有显著差异 (P <0 0 5 )。但在脑缺血 3d和 2周组 ,上述变化两组之间无统计学差异。【结论】环孢素A对实验大鼠的缺血性神经元具有一定保护作用 ,结果提示免疫因素的介入 ,加重了脑缺血性损伤。     

EGb761促进臂丛根性撕脱伤运动神经元功能修复的多靶点机制

【目的】研究银杏叶标准提取物(EGb761)保护创伤脊髓运动神经元的细胞机制。【方法】成年Sprague-Dawley雄性大鼠行臂丛神经根撕脱术后,随机分为:撕脱组(生理盐水治疗)和EGb761组[EGb761100mg/(kg·d)治疗]。各组动物分别存活5d,2、4、6周后处死。硝酸还原酶法检测大鼠脊髓组织NO含量和cNOS酶活力,取C7节段切片行胆碱乙酰转化酶(ChAT)、神经元型一氧化氮合酶(nNOS)免疫组化、NADPH-d酶组化和中性红活细胞染色。【结果】EGb761组与撕脱组相比:不仅降低脊髓组织NO含量(μmol/g)(2周组0.24vs0.36、4周组0.22vs0.30、6周组0.19vs0.23;P均<0.05),也降低脊髓组织cNOS酶活力(U/mg)(5d组0.047vs0.057、2周组0.13vs0.20、4周组0.065vs0.14、6周组0.061vs0.083;P均<0.05)。EGb761恢复部分损伤运动神经元的ChAT活性、EGb761降低nNOS蛋白的异位表达,NADPH表达率(%)(2周组26.0vs40.7、4周组21.7vs36.9、6周组18.2vs26.7、8周组12.6vs20.9;P均<0.05);EGb761提高损伤运动神经元的生存率(%)(5d组92.2vs87.1、2周组77.1vs71.3、4周组56.8vs49.8、6周组48.0vs43.4、8周组31.3vs22.0;P均<0.05)。【结论】EGb761可能通过多靶点干扰损伤运动神经元的基因表达、蛋白酶活性以及代谢进程,减少臂丛撕脱伤诱导的运动神经元死亡。     

雄激素替代治疗后去势成年雄性大鼠基底前脑一氧化氮合酶及巢蛋白阳性神经元的变化

背景：基底前脑的内侧隔核、斜角带核垂直支及水平支的神经元音有丰富的雌激索受体和雄激素受体，故雌、雄激素可通过相应受体作用于神经元，进而影响学习记忆过程。 目的：定性和定量分析雄激素替代治疗对成年去势雄性大鼠内侧隔核、斜角带核垂直支及水平支的一氧化氮合酶、巢蛋白阳性神经元的影响。 设计：随机对照动物实验。 单位：中山大学中山医学院人体解剖学教研室和脑研究室。 材料：实验于2001-06／2002-06在中山大学中山医学院人体解剖学教研室和脑研究室完成。选取成年健康雄性SD大鼠28只，随机分为4组（n=7）：去势24h后雄激素替代治疗4周组（ART1）；去势2周后雄激素替代治疗2周组（ART2）；去势24h后载体替代治疗4周组（VRT）；假手术组。 干预：①ART1组：切除双侧睾丸去势后24h开始皮下注射丙酸睾丸酮（25mg／kg，溶于100μL无菌芝麻油），隔日1次，注射时间固定于上午10：30-11：00，注射14次（4周）。②ART2组：去势后2周开始皮注射丙酸睾丸酮，剂量和方法同ART1组，注射7次（2周）。③VRT组：去势后24h开始皮下注射无菌芝麻油1000μL，注射时间和次数同ART1组。④假手术组：假手术组处理，不伤及睾丸，电不进行任何替代治疗，存活4周。 主要观察指标：各组大鼠于相应时间点处死，免疫组织化学法观察内侧隔核、斜角带核垂直支及水平支中的一氧化氮合酶和巢蛋白阳性神经元的形态和数量变化。 结果：28只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠各部位的一氧化氮合酶和巢蛋白阳性神经元的形态特征均无明显改变。②一氧化氨合酶和巢蛋白阳性神经元数：在内侧隔核和斜角带核垂直支VRT组大鼠明显高于假手术组（P〈0．05或0．01），VRT1和VRT2组明最低于VRT组（P〈0．05或0．01）。并接近假手术组水平（P〉0．05）。 结论：雄激素替代治疗对去势成年雄性大鼠基底前脑一氧化氮合酶和巢蛋白阳性神经元的形态无明显影响；但能选择性地使基底前脑不同亚区的阳性神经元数明显降低，这可能与雄性激素通过其受体介导的机制低调其表达密切相关，并有可能通过此机制影响学习记忆过程。     

雌激素对去卵巢大鼠基底前脑NOS及Nestin阳性神经元的影响

目的 观察雌激素替代对去卵巢大鼠基底前脑一氧化氮合酶(NOS)及巢蛋白(Nestin)阳性神经元的影响。方法 将28只健康成年雄性SD大鼠随机分为4个处理组:去势24 h雌激素替代组、去势2周雌激素替代组、去势植物油替代组及假手术组。用组织化学及免疫组织化学染色方法观察基底前脑的内侧隔核(MS)、斜角带垂直支(vDB)及水平支(hDB)的NOS和Nestin阳性神经元数的变化。结果 去势行植物油替代可使MS、vDB的NOS阳性神经元数明显下降(P<0.01);去势24 h或2周行雌激素替代均可使以上亚区的NOS阳性神经元数明显升高至正常水平(P<0.01)。去势行植物油替代或雌激素替代对hDB的:Nestin阳性神经元数的影响趋势与NOS阳性神经元的相似(P<0.01),但对MS及vDB的Nestin阳性神经元数影响不大(P>0.05)。结论 去卵巢行雌激素替代可选择性地使基底前脑不同亚区NOS、Nestin阳性神经元数升高,这可能与雌激素高调了NOS和Nestin的表达有关。