肠杆菌目细菌产耐碳青霉烯酶的基因分型检测方法进展

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌（CRE）已成为全球性的公共卫生问题。有文献报道由CRE引起的感染，尤其是血流感染，会导致患者死亡率较高，为临床治疗带来了极大的挑战。肠杆菌科细菌耐碳青霉烯类药物的主要机制是细菌产生了不同型别的耐碳青霉烯类水解酶。目前只有少数几种新型抗菌药物可以用于CRE的治疗如头孢他啶/阿维巴坦，但头孢他啶/阿维巴坦对持有金属β内酰胺酶的CRE没有活性，所以快速、准确地检测CRE菌株所产碳青霉烯酶种类，对临床合理选择抗菌药物至关重要。本文就目前检测肠杆菌科细菌耐碳青霉烯类药物的基因分型实验方法的优缺点进行总结分析。     

腹腔感染细菌流行病学调查

目的监测2006年10月至2007年10月我国不同地区14家教学医院分离的腹腔感染病原菌的菌种分布及其体外药物敏感性。方法按设计方案收集来自腹腔感染的病原菌。菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定10类共29种抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）,数据输入WHONET5．4软件进行耐药性分析。结果此次监测收集的腹腔感染病例数为742例,分离出的病原菌为743株,其中革兰阴性菌占76．7％（570／743）,革兰阳性菌占23．3％（173／743）。病原菌中分离率位于前5位的分别为大肠埃希菌（38．8％）、肺炎克雷伯菌（10．2％）、铜绿假单胞菌（9．2％）、屎肠球菌（8-2％）和金黄色葡萄球菌（4．4％）。对于所有肠杆菌科菌,敏感率高于90％的抗菌药物包括美罗培南、亚胺培南、替加环素、阿米卡星和他唑西林-三唑巴坦。对产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的大肠埃希菌和克雷伯菌,敏感性大于90％的药物包括亚胺培南（100％）、美罗培南（100％）、替加环素（100％）和他唑西林-三唑巴坦（91．5％～91．7％）。铜绿假单胞菌中多重耐药菌株的检出率为14．7％,鲍曼不动杆菌为61．3％。金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林（MRSA）的发生率为69．7％,所有菌株对替加环素、万古霉素和替考拉宁均敏感。替加环素对所有粪肠球菌和屎肠球菌均保持了100％的敏感率。粪肠球菌中敏感性较高的抗菌药物还有万古霉素（100％）、替考拉宁（100％）和氨苄西林（81．5％）。屎肠球菌中敏感性较高的抗菌药物还有万古霉素和替考拉宁（96．7％）。结论引起腹腔感染的病原菌以革兰阴性菌特别是肠杆菌科菌为主。替加环素、碳青酶烯类、他唑西林-三唑巴坦和阿米卡星对腹腔感染肠杆菌科菌保持了较高的抗菌活性,非发酵的革兰阴性杆菌的耐药性令人担忧。替加环素、万     

2008年与2011年某综合医院外科ICU多药耐药菌主动监测培养结果分析

目的了解2008年和2011年上海中山医院外科ICU患者多药耐药菌(MDROs)的定植情况。方法患者进入ICU时(第1天)、第4天、每周和离开ICU时分别采集鼻拭和直肠拭子标本,使用生物梅里埃公司提供的耐药菌显色培养基,对鼻拭和直肠拭子标本分别进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌(ESBL+Eco/Klp)的筛查。结果 2008年和2011年鼻拭标本中MRSA检出率分别为5.0%和7.2%,直肠拭子中ESBL+Eco/Klp检出率分别为35.0%和42.0%;2008年入ICU时MRSA/ES-BL+Eco/Klp的定植率为39.7%,出ICU时为47.4%,2011年则分别上升至49.3%和58.9%,2008年入住ICU第3～4天,MRSA获得的定植率为9.7%,入住5～7 d后上升为22.7%;2011年分别为16.3%和22.2%,2008年在相应时间段获得ESBL+Eco/Klp定植率分别是13.0%和40.0%;2011年则为7.7%和40.0%。结论 2011年ICU的MRSA/ESBL+Eco/Klp的检出率和定植率比2008年明显上升;定植率随着入住ICU时间的延长显著增加。     

2007年和2009年医院内获得性血流感染病原菌分布及其耐药性分析

目的监测2007年和2009年我国不同地区13家教学医院内获得性血流感染中主要病原菌的分布并对其耐药性进行分析。方法收集医院内获得性血流感染的病原菌,并对其进行药物敏感性检测,采用WHONET5.6软件对数据进行分析。结果本研究共收集到2015株医院内获得性血流感染病原菌,其中革兰阴性杆菌1332株(占66.1%),革兰阳性球菌683株(占33.9%)。分离率排名前五位的病原菌分别为:大肠埃希菌(27.9%),肺炎克雷伯菌(11.3%),金黄色葡萄球菌(10.9%),铜绿假单胞菌(7.0%),鲍曼不动杆菌(6.0%)。对血流感染中常见革兰阴性杆菌体外药物敏感率较高的抗菌药物依次为:替加环素(98.2%,不包括铜绿假单胞菌),多黏菌素(98.1%,非发酵菌),头孢他啶/克拉维酸(90.4%);对常见革兰阳性球菌体外药物敏感率较高的抗菌药物有:替加环素和利奈唑胺(敏感率均为100%),万古霉素和替考拉宁(敏感率均为99.4%)。2007年度和2009年度数据显示:苯唑西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的发生率分别为42.3%和42.2%,产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科细菌(ESBLs)的发生率分别为54.7%和53.4%,多重耐药铜绿假单胞菌(MDRP)的发生率分别为11.9%和15.9%,多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRA)的发生率分别为49.0%和64.8%,屎肠球菌和粪肠球菌对高水平庆大霉素耐药(HLGR)的发生率分别为62.6%和66.7%,对碳青霉烯类不敏感的发生率分别为2.1%和4.6%。高水平庆大霉素耐药(HLGR)肠球菌的发生率分别为62.6%和66.7%,碳青霉烯类不敏感肠杆菌的发生率分别为2.1%和4.6%。结论医院获得性血流感染病原菌主要为革兰阴性杆菌(以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主),替加环素和碳青霉烯类药物对其敏感率较高;革兰阳性球菌中分离率最高的为金黄色葡萄球菌、其次为屎肠球菌,替加环素、利奈唑胺、万古霉素和替考拉宁对其敏感率较高。多重耐药菌中MDRA、HLGR、MDRP以及碳青霉烯类不敏感肠杆菌科细菌的发生率分别升高了:15.8%、4.1%、4.0%和2.5%,应引起临床的关注。     

通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱系统直接快速鉴定阳性血培养北大核心CSCD

目的基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)在临床微生物实验室的应用,为阳性血培养中微生物鉴定提供了革命性的新方法,我们报告一种改良的利用MALDI-TOF质谱直接鉴定阳性血培养的方法。方法 2011年10月-2012年10月共收集312瓶阳性培养物,细菌分别属于12个不同属和32个种,MALDI-TOF质谱鉴定的细菌同时进行了常规生化法鉴定,其中不符合的部分通过序列分型明确。结果 200株革兰阳性菌中,161株(80.5%)准确鉴定到属以上水平,121株(60.5%)准确鉴定到种;112株革兰阴性菌中,101株(90.2%)准确鉴定到属以上水平,81株(72.3%)准确鉴定到种水平;MALDI-TOF质谱鉴定革兰阴性菌,在属以上水平和种水平上,准确率均高于革兰阳性菌。结论通过这种方法能在1h内快速、鉴定阳性血培养中的常见细菌,如果将此项技术常规应用于临床,将显著增加菌血症患者在24h内得到最佳抗菌药物治疗的比例。     

重症监护病房下呼吸道嗜麦芽寡氧单胞菌感染的临床和药敏分析

目的 了解重症监护病房(ICU)下呼吸道嗜麦芽寡氧单胞菌(SM)感染的临床特点和药敏情况，为临床防治提供依据。方法 回顾性总结1996年1月至2000年12月间ICU 68例SM下呼吸道感染的临床资料及药敏结果。结果 全部病人均使用过广谱抗菌药物，全部有严重基础疾患史，83．1％病人免疫功能受损，78．6％病人曾经或正接受气管插管操作。药敏结果显示SM对一、二代头孢菌素大多耐药，对亚胺培南高度耐药，对替卡西林钠／克拉维酸钾、环丙沙星、头孢他啶有较高的体外敏感性，分别为77．2％、64．7％和60．7％。结论 严重基础疾病，长期应用广谱抗菌药物是SM下呼吸道感染的主要危险因素。SM对多种抗菌药物耐药，替卡西林钠／克拉维酸钾、环丙沙星、头孢他啶对SM体外呈现较好的抗菌活性，可作为临床治疗SM下呼吸道感染的有效抗菌药物。     

第76例 发热—干咳—右膝关节肿痛—双侧胸腔积液伴左侧液气胸—类鼻疽伯克霍尔德菌感染

病历摘要患者男,52岁,因发热、干咳10d,右膝关节疼痛8d,于2003年入院。患者2003年11月21日因头痛、发热、干咳1d就诊于当地医院,当时体温38.7℃,无胸闷、气急及呼吸困难,无盗汗。血常规:白细胞18×109/L,中性粒细胞0.82。X线胸片:两下肺炎性阴影。B超:左侧少量胸腔积液。予阿奇霉素、头孢他啶、左氧氟沙星等抗感染治疗后,体温仍波动于39℃左右。为进一步治疗转来本院。既往有高血压病史3年。入院体格检查:体温39.3℃,脉搏90次/min,呼吸20次/min,血压110/80mmHg(1mmHg=0.133kPa)。神志清,皮肤巩膜无黄染,无紫绀,浅表淋巴结未及肿大。两肺…     

3MTM物体表面消毒液对ICU环境微生物消毒效果与评价

目的 比较3MTM物体表面消毒液(以下简称3M消毒液)与含氯消毒剂对医院重症监护病房(ICU)环境的消毒效果.方法 选取了6个ICU,分别对地面、仪器面板、患者床头桌、电脑键盘、电话按键用两种消毒剂进行消毒,并于消毒前、消毒后15 min、4 h分别进行采样,比较两者的杀菌率.结果 试验共采集了96对样本,床头桌26处(48.15%)、仪器面板、电脑键盘和电话按键22处(26.83%),均超过了卫生部规定的标准(<5 CFU/cm2);两种消毒剂的杀菌率大多达到85.00%,差异均无统计学意义.结论 与含氯消毒剂相比,3M消毒液对环境微生物具有同样的杀菌效果.鉴于其低毒和低腐蚀性等特点,3M消毒液对于目前消毒医院环境尤其是人群密集和耐药菌较多的ICU,是一个较理想的选择.     

基质辅助激光解析离子-飞行时间质谱仪在快速鉴定凝固酶阴性葡萄球菌中的应用

目的 评价基质辅助激光解析离子-飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS,MS)在临床分离凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)快速鉴定中的应用.方法 收集复旦大学附属中山医院2012年7月-2013年1月分离自血液的194株CNS;分别使用MS和全自动细菌鉴定系统(细菌鉴定仪)鉴定到种,当两种方法结果不一致时使用16S rRNA测序方法进行确认,比较两种鉴定方法的符合率及准确性,评价MS使用价值.结果 194株CNS中148株两种方法鉴定结果一致,符合率76.3％,以16S rRNA方法为金标准,MS和细菌鉴定仪与16S rRNA的结果假定符合率分别为98.9％和76.3％,两种方法准确性差异有统计学意义(P＜0.001).结论 MS用于鉴定CNS比传统方法快速、准确和价廉.     

2011—2020年上海地区肠球菌属细菌耐药性变迁

目的 了解2011—2020年上海地区临床分离肠球菌属细菌对各类抗菌药物的耐药性变迁.方法 按照上海市细菌真菌耐药监测网统一方案进行肠球菌属细菌的抗菌药物敏感性试验.结果 2011—2020年共分离到非重复肠球菌属细菌113391株,主要为粪肠球菌与屎肠球菌,分别占54.5％和40.1％.菌株主要分离自尿液标本.10年...