不同C反应蛋白检测仪器性能比较

目的选取不同C反应蛋白(CRP)检测仪器,并对其性能进行比较。方法对BC-5310 CRP全自动五分类血液细胞分析仪(简称BC-5310 CRP)的空白计数、重复性、携带污染率、线性、与BN ProSpec全自动蛋白分析仪(简称BN ProSpec)全程C反应蛋白(FR-CRP)的相关性、不同检测模式FR-CRP的相关性以及稳定性进行评估。结果 BC-5310 CRP空白计数、携带污染率、重复性均满足厂家要求,且重复性好,r值0.995 0具有良好的线性。BC-5310 CRP与BN ProSpec检测FR-CRP具有良好的相关性,无论是分段检测,还是整体检测,r值均0.990 0,准确性佳。静脉血样本室温保存24 h和低温保存24 h,末梢血样本室温保存8 h,FR-CRP结果均无明显变化,具有良好的稳定性。当HCT浓度为0.00%～62.41%时,相对偏差≤5.71%,有很好的准确性。结论 BC-5310 CRP可满足临床FR-CRP检测的需求,具有良好的性能,可用于静脉血和末梢血血常规及FR-CRP检测。     

微小RNA let-7基因表达在膀胱癌生物学行为中的作用

目的 探讨膀胱癌组织中微小RNA(miRNA)表达在膀胱癌发生发展中的作用. 方法 Trizol法抽提9例膀胱癌患者癌组织及癌旁正常膀胱组织标本总RNA,分离与富集miRNA,随机选取2组miRNA标本与miRNA表达谱芯片杂交,采用LuxScan 3.0和SAM 2.1软件对芯片结果 进行图像数据分析.在差异性表达的miRNA中筛选出感兴趣的let-7基因,采用印迹杂交技术对9组miRNA标本中let-7基因进行验证. 结果 膀胱癌组织和正常膀胱组织标本中差异性表达有显著性意义的miRNA 71个,其中表达上调33个,表达下调38个;差异性表达有极显著性意义的miRNA(上调或下调≥4倍)26个,其中显著上调12个,显著下调14个.let-7基因验证结果 与芯片表达结果 一致,癌组织let-7基因表达吸光度值为479.6±228.2,正常膀胱组织为694.6±152.9,组间差异有统计学意义(P<0.05). 结论 膀胱癌组织和正常膀胱组织中存在差异表达的miRNA,let-7基因在膀胱癌的发生中可能起着抑癌基因的作用.     

靶向抑制高表达HRR蛋白增强肿瘤细胞对放化疗的敏感性

同源重组修复(HRR)主要通过修复哺乳动物细胞中外源或内源性的DNA双链断裂,维持正常细胞基因组的完整性与稳定性,从而阻止细胞癌变。有研究发现高表达HRR蛋白的肿瘤细胞具有较强的损伤修复活力,通过修复放化疗诱导的DNA损伤,抑制凋亡途径以及活化细胞增殖信号通路,使其对放化疗产生耐受性,肿瘤细胞得以存活。这类HRR蛋白在肿瘤细胞中起到了癌基因的功效,维持了肿瘤细胞基因组的稳定性,促进了肿瘤的发生、发展,因而肿瘤细胞中高表达的HRR蛋白成为了肿瘤精准化治疗的潜在靶点。通过药物诱导HRR蛋白过度表达不仅能促进肿瘤细胞的凋亡,而且可以进一步提高肿瘤细胞对放化疗的敏感性。     

抗EB病毒衣壳抗原IgG抗体亲合力诊断儿童传染性单核细胞增多症的价值及患儿免疫状态的变化

目的探讨抗EB病毒衣壳抗原(EBV-CA)IgG抗体亲合力对EB病毒(EBV)感染传染性单核细胞增多症(IM)的诊断价值及患儿免疫状态的变化。方法选取行抗EBV-CA IgG抗体亲合力及抗EBV-CA IgM抗体检测的儿童5 882例,其中IM 500例、非IM 5 382例,检测抗EBV-CA IgG抗体亲合力、抗EBV-CA IgM抗体、EBV DNA载量、外周血异型淋巴细胞(简称异淋)比例和外周血淋巴细胞亚群。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价抗EBV-CA IgG抗体亲合力、抗EBV-CA IgM抗体、异淋比例和EBV DNA单项及联合检测诊断IM的效能,并观察IM患儿的免疫状态。另选取临床诊断为IM并检测EBV DNA和淋巴细胞亚群的患儿502例,探讨EBV DNA阳性及阴性IM患儿的细胞免疫状况。结果在5 882例儿童中,抗EBV-CA IgG抗体亲合力、抗EBV-CA IgM抗体、EBV DNA和异淋比例4项指标任意1项阳性的患儿为1 031例(17.53%),其中IM的发生率最高(38.1%)。ROC曲线分析结果显示,抗EBV-CA IgG抗体亲合力、抗EBV-CA IgM抗体、异淋比例和EBV DNA诊断IM的曲线下面积(AUC)分别为0.883、0.729、0.788和0.664,4项指标联合检测的AUC为0.847。依据年龄将1 031例患儿分为婴儿组(1岁)、幼儿组(1～3岁)、学龄前期组(4～6岁)和学龄期组(7～17岁)。除婴儿组外,其他3组中的IM患儿CD3-CD16~+CD56~+自然杀伤(NK)细胞比例、CD3-CD19~+B细胞比例、CD3~+CD4~+T细胞比例及CD4~+/CD8~+比值显著低于非IM患儿(P0.01),CD3~+T细胞比例、CD3~+CD8~+T细胞比例显著高于非IM患儿(P0.01)。婴儿组中的IM患儿CD3-CD19~+B细胞比例显著低于非IM患儿(P0.01),CD3~+T细胞、CD3~+CD8~+T细胞比例显著高于非IM患儿(P0.01),而CD3-CD16~+CD56~+自然杀伤(NK)细胞比例、CD3~+CD4~+T细胞比例、CD4~+/CD8~+比值IM患儿与非IM患儿之间差异无统计学意义(P0.05)。EBV DNA阳性IM患儿与阴性IM患儿比较,上述变化更明显。结论抗EBV-CA IgG抗体亲合力对IM的诊断价值优于异淋比例、抗EBV-CA IgM抗体和EBV DNA。IM患儿细胞免疫功能明显紊乱,EBV DNA阳性的IM患儿紊乱程度更严重。     

Wip1联合Bmi1参与人椎间盘髓核细胞放射性损伤DNA修复

目的探讨野生型p53诱导的蛋白磷酸酶1(Wip1)在人椎间盘髓核细胞放射性损伤DNA修复中的可能作用,为椎间盘退行性变的临床诊治提供参考。方法取人椎间盘髓核细胞体外培养,小干扰(siRNA)技术干扰细胞Wip1表达,放射性照射(4、10、15、25Gy)髓核细胞,采用彗尾实验观察DNA损伤及损伤修复反应(DNAdamagerepair,DDR)情况,并与未干扰Wip1髓核细胞作对照;采用免疫共沉淀(Co-IP)技术检测Wip1潜在结合蛋白;根据筛选结果采用实时定量RT-PCR技术检测病变椎间盘组织Wip1及潜在结合蛋白的表达情况。结果彗尾实验表明:干扰Wip1表达后,25Gy剂量射线导致髓核细胞DNA损伤的修复并不受影响,但DDR持续激活,对照组在照射后24h已经检测不到DNA损伤修复的标识分子,但siRNA干扰Wip1表达组细胞照射后48h仍可检测到标识分子。Co-IP实验表明:放射性照射正常对照细胞后,Wip1与Bmi1在细胞核内分布重合,而且聚集在DNA损伤位点,而siRNA抑制Wip1表达后,这种结合随即消失。实时定量RT-PCR结果表明:与正常椎间盘组织相比,椎间盘退变组织Wip1、Bmi1基因表达下降,且两者呈正相关(P<0.05)。结论 Wip1通过调控DDR时限参与了人椎间盘髓核细胞放射性损伤DNA修复,Bmi1可能参与此过程。     

基因Wip1低表达与椎间盘退行性病变的关系

目的探讨基因Wipl异常表达与椎间盘退行性疾病（intervertebraldiscdegeneration,IDD）的关系。方法选取62例患者退行性病变的椎间盘组织,通过实时定量PCR测定w印l基因表达量;siRNA干扰人髓核（nucleuspulposus,NP）细胞Wipl的表达后,通过SA-β-gal染色检测细胞衰老情况;通过MTT检测NP细胞的增殖能力;通过实时定量PCR检测NP细胞衰老分子标记的表达水平;吖射线照射siRNA转染后的NPP3细胞,分别于不同时间点行SA-β-gal染色检查。结果62例病变椎间盘组织中,18例Wipl基因的表达明显下降（P〈0．01）;siRNA干扰人NP细胞Wipl表达后,衰老细胞数量明显增加;MTT结果表明,干扰Wipl的表达能够显著抑制人NP细胞的增殖;P3细胞培养8d,实时定量PCR检测发现,Col2al、Agc、Ver的表达水平显著下调,MMP3的表达水平明显增高。Y射线照射NP细胞后,SA-β-gal染色显示,Wipl表达组出现明显的衰老现象。结论Wipl的低表达与椎间盘退行性病变的发生相关,干扰Wipl的表达能够促进NP细胞衰老,而过表达Wipl可以有效抑制细胞衰老的发生。     

LncRNA AK051397在BMP-2诱导的C2C12成骨分化中的作用

目的研究骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic protein-2,BMP-2）诱导后表达上调的LncRNA AK051397在C2C12成骨分化过程中的作用。方法 BMP-2诱导C2C12成骨分化过程,实时定量PCR技术与碱性磷酸酶（ALP）染色检测成骨相关指标。对C2C12细胞在BMP-2诱导下,成骨分化过程中的LncRNAs表达变化进行芯片分析（ArrayStar LncRNA Array）,筛选出表达明显上调的LncRNAs,最后采用siRNA干扰的方法下调LncRNAs表达后分析其对成骨分化过程的影响。结果 BMP-2诱导C2C12成骨分化过程中,成骨指标ALP、SPT增高,成肌指标MYOG降低。芯片结果表明,LncRNA AK051397在BMP2诱导后表达明显上调,处理组与未处理组相比升高4.9倍（P〈0.05）。干扰AK051397后成骨分化指标ALP、SP7表达下降,MYOG表达上升。结论 LncRNA AK051397在C2C12细胞中具有促进成骨分化的作用,同时也具有抑制细胞成肌分化的作用。     

血清淀粉样蛋白A对儿童流感辅助诊断及疗效监测的评价

目的探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)对儿童流行性感冒(简称流感)辅助诊断及疗效监测的价值。方法选取2018年8月至2019年7月于该院就诊的1654例流感的患儿为研究对象,其中甲型流感患儿1313例(甲型流感组),乙型流感患儿323例(乙型流感组),同时患甲、乙型流感的患儿18例(混合组),选取同期190例健康儿童作为对照组。回顾性分析并比较4组的血清淀粉样蛋白A(SAA)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)检测结果的差异。结果儿童1~<11岁为感染主要年龄段,4~<7岁感染率最高。2018年8月至2019年3月以甲型流感为主,2019年4-7月以乙型流感为主。在3组流感患儿中,SAA、CRP水平及SAA/CRP均高于对照组(P<0.05),甲型流感患儿SAA、CRP水平及SAA/CRP均高于乙型流感患儿(P<0.05)。流感患儿中SAA的阳性率高于CRP和WBC的阳性率(P<0.05)。32例SAA阳性的患儿流感第一次抗原检测呈阴性,复诊时抗原检测呈阳性。流感患儿治疗后SAA水平低于治疗前(P<0.05)。结论检测SAA水平对提示流感抗原检测假阴性及疗效监测有重要意义。     

中医消除运动性肌肉疲劳临床实验研究之一——外用、内服中药对人体骨骼肌两周离心运动肌肉酸痛和形态学影响

30名志愿受试者分别以最大等长收缩力的 6 0 % (第 1周 )和 80 % (第 2周 )完成连续 2周上臂屈肌离心收缩训练 ,随机分成中药内服、外用和对照组进行治疗和处理 ,对肌肉酸痛部位和等级、肘关节屈曲角度、肘关节伸直角度、上臂臂围、上臂屈肌硬度、血清CK以及肱二头肌回声的平均光密度和肌肉厚度超声检测进行观测。结果显示 ,强度增加后的第 2周 ,肌肉酸痛程度、肘关节伸直角度和血清CK值在实验结束时均已恢复正常 ;肘关节屈曲角度、上臂臂围和肌肉硬度等与延迟性肌肉酸痛 (DOMS)后期肌肉增粗有关的指标 ,在第 2周训练强度增加后呈恢复趋势 ,无继续加重现象 ;大强度离心训练后肌肉厚度增加 ,训练后第 3天出现肌肉回声增强的改变。实验表明 ,内服和外用中药对DOMS的消除均有一定的作用 ,尤其是外用药对本实验指标的改善更明显一些