美国临床实验室标准化委员会2004年版有关药敏试验标准化更新要点

美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)，下属机构中有一抗生素敏感性测定分会，它由来自临床、政府、药厂的3方面专家组成。由他们制成的药敏测定指南年年都依实际情况加以更新和补充，以反映抗生素及临床微生物的发展和适应临床需要。以下系介绍2004年NCCLS出版的药敏试验指南M100-S14手册(简称M100)中更新要点，也会涉及2003年版的纸片法M2-A8(简称M2)、2003年的稀释法M7-A6(简称M7)两个文件。     

药敏试验中定性和定量都很重要

药敏试验中定性和定量都很重要陈民钧在临床治疗中，许多医生已学会了判读纸片扩散法的药敏试验报告结果：（１）先读哪几个药是属于敏感的；（２）然后在敏感的抗生素中，注意其中几类；（３）读哪一个离敏感判读值最大、最敏感，选同一类抗生素中如β－内酰胺类中抑菌环...     

抗菌药耐药性监测的前景

建立耐药监测的目的 是了解所在医院甚至全国、全球耐药发生、发展,控制感染暴发流行,积极帮助临床用药,深挖耐药机制.本文简要介绍了作者所在医院从1983年至今抗菌药耐药监测的开始及效果,强调人类与微生物的抗争是长期的、困难的,耐药监测是第一步;介绍了要监测的主要目标菌、目标耐药性及耐药机制;区分社区获得的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)及医院获得的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)、耐万古霉素的金黄色葡萄球菌(VRSA)、万古霉素不敏感的金黄色葡萄球菌(VISA)及异质性万古不敏感的金黄色葡萄球菌(hVISA),以及超广谱β内酰胺酶(ESBLs)、产AmpC及碳氢霉烯酶的必要性和可能性;应该发展药效学/药代学(PK/PD)折点来替代陈旧的折点;强调下呼吸道疾病中的苛氧菌检出率不高,影响了耐药监测;要注意肺炎链球菌的耐药发展趋势及血清型与耐药关系;要重视新药,如利奈唑酮、替吉环素、达托霉素及头孢拜普等的耐药性监测.重视氟喹诺酮类的耐药性发展.建议大家多宣传介绍当前国内外耐药情况,多研究PK/PD折点的可改良性,将高尖端技术,如数据挖掘人工智能信息系统、地理定位信息系统、新出现的多重实时PCR技术加上先进的PCR产物识别技术引进到常规细荫鉴定和耐药监测中来.     

嗜麦芽窄食单胞菌体外药物敏感性研究

目的比较10种抗菌药物（莫西沙星、加替沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、头孢哌酮-舒巴坦、替卡西林-克拉维酸、哌拉西林-三唑巴坦、头孢吡肟、头孢他啶、复方磺胺甲嗯唑）对临床分离嗜麦芽窄食单胞菌的体外抗菌活性。方法琼脂稀释法测定10种抗菌药物对来自北京3所医院的200株嗜麦芽窄食单胞菌的MIC值，用WHONET5．3软件进行药敏数据统计分析。结果200株菌对药物的敏感率排序为莫西沙星（84．5％）、加替沙星（79．5％）、左氧氟沙星（76％）、复方磺胺甲嗯唑（72．5％）、头孢哌酮-舒巴坦（41．5％）、替卡西林-克拉维酸（34％）、头孢他啶（23％）、环丙沙星（15％）、头孢吡肟（7％）和哌拉西林-三唑巴坦（4．5％）。结论新一代氟喹诺酮类药物如莫西沙星对嗜麦芽窄食单胞菌有较高的体外抗菌活性，是临床治疗嗜麦芽窄食单胞菌感染的较好选择。     

介绍一种同时存在AmpC酶和超广谱β内酰胺酶的检测方法

目的：研究自血培养分离的阴沟肠杆菌的耐药特点，以指导临床用药。方法：收集1997-2000年期间我院住院患血液中分离到的10株阴沟肠杆菌，用纸片扩散法对13种抗菌药物进行了检测，用改良的酶提取物三维试验方法进行持续高产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的双重检测。结果：10株阴沟肠杆菌中1株持续高产AmpC酶，1株既有持续主产AmpC酶，又产ESBLs；3株只产ESBLs，其余5株未发现持续高产AmpC酶和ESBLs。2株持续高产AmpC酶和3株产ESBLs均对第三代头孢菌素和β内酰胺酶抑制剂的复方制剂等多种抗菌药显示高度耐药。结论：使用改良的酶提取物三维试验可同时检测高产AmpC酶（包括染色体型和质粒型）和ESBLs的菌株。根据阴沟杆菌产生不同的β内酰胺酶选择性用药，治疗高产AmpC酶多耐药菌，使用第三代头孢菌素和酶抑制复方制剂通常导致临床治疗失败，应选用第四代头孢菌素或碳青霉烯类，或两与氨基糖苷类或氟喹诺酮类联合治疗。碳青霉烯类抗生素是惟一对AmpC酶和ESBLs均稳定的β内酰胺类抗生素，可用于治疗产ESBLs菌引起的重症感染。     

改进药敏折点标准指导临床合理选择抗菌药物

2004年在临床实验室标准化研究所/美国临床实验室标准化委员会(CLSI/NCCLS,CLSI)出版的抗生素敏感试验实施标准M100S14手册的最后一章总结及答疑[1,2]中写道:“超广谱β内酰胺酶(ESBLs)确证试验阳性时,产ESBLs菌要报告含头孢吡肟在内的所有青霉素类、头孢菌素类及氨曲南耐药。M100S14手册还强调当前仍然坚持3细菌,即大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌适用于ESBL确证试验规则,不能扩大到3细菌之外。但正在讨论重新评估肠杆菌科菌对β内酰胺药的折点,例如:正考虑头孢噻肟的敏感折点由≤8μg/ml降为≤1或≤2μg/ml,但目前数…     

2005年我国多中心苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌分子流行病学研究

目的多中心研究我国2005年苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）分子流行病学特征。方法收集2005年1—12月14个城市17家教学医院连续分离的非重复MRSA595株，通过多重PCR对MRSA进行葡萄球菌染色体mec（SCCmec）分型，脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行同源性分析。根据药敏结果、PFGE、SCCmec型别和分布地区选出53株进行多位点序列分型（MLST）。采用PCR检测毒素基因。结果595株MRSA中，SCCmecm型243株、占61．5％，不能分型菌株96株、占24．3％，Ⅱ型56株、占14．2％；沈阳SCCmecⅡ型占60．7％（17／28），远高于其他地区（0～42．9％）。PFGE共有24种分型，42种亚型，其中A型占50．1％，为12个城市13家医院所共有，R型占23．5％，存在于8个城市9家医院。MIST共有6种分型，其中序列分型（sT）239占75．5％，ST5占17．0％。595株MRSA中，pvl基因检出率为2．5％。结论我国MRSA主要获得Ⅱ型、Ⅲ型SCCmec基因，SCCmec的分布有地区差异。一些地区发生MRSA的暴发，并且地区间发生流行克隆的传播。有些流行克隆可能来源于某些世界流行克隆株的传播。     

O157:H7型大肠埃希菌的流行和病原学诊断

Ｏ１５７Ｈ７型大肠埃希菌的流行和病原学诊断任冰王金良陈民钧１９９６年夏天，日本发生由Ｏ１５７Ｈ７型大肠埃希菌污染萝卜苗及牛肉而导致的集体食物中毒事件，波及东京、大阪、京都等４０多个都府县，患者累计达９０００余人，７人死亡。现已证明，Ｏ１５７Ｈ７型大肠...     

大肠埃希菌中质粒AmpC型β内酰胺酶基因型的检测

目的 :研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中AmpC型 β内酰胺酶的基因型。 方法 :收集对头孢西丁不敏感的 4 2株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 ,用酶提取物三维试验检测AmpC酶 ;用等电聚焦电泳、接合试验、聚合酶链反应 (PCR)确定AmpC型酶的表型和基因型。结果 :16株菌高产AmpC酶 ,其中 11株同时产超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs) ;这 16株菌对亚胺培南敏感 ,5株只产AmpC酶的菌对头孢吡肟敏感 ;等电聚焦电泳发现这 16株菌产生 2～ 5种酶 ,且都有一个能为氯唑西林抑制的、等电点>7.8的酶带 ;1株大肠埃希菌通过接合试验可将头孢西丁耐药性传递给受体菌 ;PCR扩增和测序证实其为质粒介导的ACT 1型AmpC酶。 结论 :2 0 0 0年我院分离的对头孢西丁不敏感的 4 2株革兰阴性杆菌中证实有 15株大肠埃希菌和 1株肺炎克雷伯菌产AmpC酶 ,并在国内首次发现 1株大肠埃希菌产ACT 1型质粒AmpC酶。     

2005年我国五家教学医院革兰阳性球菌耐药监测研究

目的调查2005年我国革兰阳性球菌的耐药现状与监测方法收集2005年8月至12月五家教学医院连续分离的非重复的460株革兰阳性球菌。采用琼脂稀释法测定药物的最低抑菌浓度（MICs）。结果80株肺炎链球菌中，青霉素中介（PISP）和青霉素耐药（PRSP）株的发生率分别为25．0％、21．2％。PRSP和PISP的发生率最高的是杭州（分别为55．6％、11．1％），其次是上海（16．7％、27．8％），再次为北京（5．6％、27．8％）、武汉（5％、20％）。替考拉宁和万古霉素对这80株菌的活性最高（100％敏感），其次是莫西沙星（96．2％）、左氧氟沙星（91．2％）和阿莫西彬克拉维酸（85％），红霉素、克林霉素、四环素、甲氧苄啶／磺胺甲嚼唑敏感性低于26．2％。苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）和苯唑西林耐药的凝固酶阴性葡萄球菌（MRSCoN）的发生率分别为51．3％和77．4％。MRSA的发生率最高的是上海（78．4％）、杭州（60．0％），其次为沈阳（45．9％）、北京（40．0％）和武汉（33．3％）。对于MRSA，活性较高的药物为氯霉素（69．4％）、利福平（68．4％）和甲氧苄碇／磺胺甲嚼唑（63．3％）。粪肠球菌对青霉素、氨苄西林的敏感性（85％以上）高于屎肠球菌（20％）；53％的粪肠球菌和25．5％的屎肠球菌对庆大霉素高水平耐药。所有金葡菌、CoNS、肠球菌属对万古霉素、替考拉宁敏感。结论不同地区革兰阳性球菌的耐药性有所差异。替考拉宁和万古霉素对革兰阳性球菌的活性非常高。