CXCL10对βTC6细胞TLR4表达及细胞凋亡的影响

目的探讨CXC趋化因子配体10(CXCL10)对βTC6细胞Toll样受体4(TLR4)表达及细胞凋亡的影响。方法体外培养βTC6细胞,0.1~10.0ng/mL CXCL10分别干预βTC6细胞12,24,48h后,应用Westernblot检测TLR4表达情况,流式细胞术和DNA Ladder检测细胞凋亡情况。结果与对照组比较,CXCL10干预12h,10.0ng/mL干预组开始出现TLR4蛋白的表达水平上调(0.840±0.049,P<0.05);干预24h,1.0和10.0ng/mL干预组TLR4的表达水平上调[分别为(0.851±0.052)和(0.893±0.030),P<0.05];干预48h,1.0和10.0ng/mL干预组TLR4的表达进一步上调[分别为(0.876±0.046)和(0.923±0.027),P<0.05],且各干预浓度两两比较,差别均有统计学意义(P<0.05)。CXCL10干预βTC6细胞24h,仅10.0ng/mL干预组细胞出现DNA梯状条带;干预时间延长至48h,1.0和10.0ng/mL干预组均出现DNA梯状条带。流式细胞术显示,CXCL10诱导细胞凋亡呈浓度依赖性。结论长时间高浓度的CXCL10作用将导致TLR4表达显著上调,并诱导β细胞凋亡。     

儿童龋病与唾液CCL28 和sIgA 抗体的相关性

目的：探讨儿童唾液中趋化性细胞因子CCL28含量和sIgA 抗体分泌与儿童患龋状况之间的联系。方法： 抽取长沙市两所幼儿园3~5岁108名幼儿进行龋齿检查,根据检查结果分为无龋组[龋失补指数(dynamical mean-field theory,DMFT)=0];低龋组(DMFT=1~4);高龋组(DMFT≥5),收集非刺激性全唾液样本,用酶联免疫吸附试验 (ELISA) 定量检测唾液中 CCL28及sIgA的含量,并对结果进行统计学分析。结果：108名儿童唾液中CCL28的浓度为 (121.22±32.63) pg/mL,sIgA 的浓度为(16.49±8.02) μg/mL,两者之间存在线性正相关关系(r=0.734),且儿童唾液样本中 CCL28和sIgA含量随儿童患龋程度而增加(P<0.05)。结论：儿童龋患能够促进CCL28和sIgA分泌,且CCL28和sIgA的分 泌量与龋患程度呈正相关;CCL28对唾液中sIgA 的分泌起促进作用。     

CXCR4抑制剂对大鼠肺型氧中毒肺损伤的干预作用

目的：研究趋化因子受体4（chemokine receptor 4,CXCR4）特异性拮抗剂AMD3100在大鼠肺型氧中毒（ pulmonary oxygen intoxication）肺组织损伤中的干预作用。方法40只雄性SD大鼠随机分为常压空气PBS组、常压空气抑制剂组、纯氧暴露PBS组及纯氧暴露抑制剂组,每组10只。纯氧暴露PBS组及纯氧暴露抑制剂组利用0．23 MPa纯氧加压暴露,出舱后通过HE染色切片观察大鼠肺组织病理改变,ELISA法测定炎症因子TNF-α及IL-1β含量变化,应用Western印迹方法研究大鼠肺组织caspase-3含量变化。结果纯氧暴露抑制剂组大鼠肺组织淤血、水肿、出血与纯氧暴露PBS组相比程度较轻。纯氧暴露抑制剂组TNF-α、IL-1β及活化的caspase-3含量均低于纯氧暴露PBS组。结论应用AMD3100阻断CXCR4来减轻肺型氧中毒肺损伤是有效的。     

小鼠恶性黑色素瘤MCP-1趋化型肿瘤疫苗的研究

目的构建MCP-1的真核表达载体,并转染小鼠恶性黑色素瘤细胞株B16,从而构建含有趋化因子MCP-1的小鼠恶性黑色素瘤疫苗,研究该疫苗在体外对淋巴细胞的趋化作用。方法通过对目的基因的提取来构建重组质粒p EGFP-N1-MCP-1并转染裸鼠恶性黑色素瘤细胞株B16,观察其对单个核细胞体外趋化的活性。结果趋化型肿瘤细胞疫苗B16-MCP-1组细胞侵袭数目明显高于空白培养基阴性对照组及野生型B16疫苗组,而野生型B16疫苗组趋化的单个核细胞数目与阴性对照组相似。结论成功构建MCP-1真核表达载体p EGFP-N1-MCP-1及小鼠趋化型肿瘤疫苗B16-MCP-1,该疫苗在体外具有趋化小鼠单个核细胞的功能。     

趋化因子诱饵受体D6在心肌梗死后心肌重塑中的作用及机制研究

目的:研究急性心肌梗死(AMI)后患者体内趋化因子诱饵受体D6的水平变化过程以及D6在心肌梗死后影响心肌重塑的可能机制。方法:将35例AMI患者根据心肌梗死后72 h血清趋化因子CCL2的检测水平分为h CCL2high组(n=18)和h CCL2low组(n=17),流式细胞术分析外周血中CD14++CD16-炎症单核细胞比例,Q-PCR测定外周血单核细胞趋化因子诱饵受体D6 mRNA的表达,3周后超声心动图测定心脏功能。将30只AMI雄性BLAB/C小白鼠根据血清CCL2的检测水平分为m CCL2high组(n=17)和m CCL2low组(n=13),流式细胞术分析小鼠外周血中CD11b+单核细胞比例;梗死心肌冰冻切片后免疫荧光染色D6阳性细胞,Q-PCR测定心肌梗死后3 d时间梗死区D6 mRNA的表达。3周后通过小动物超声检测小鼠心脏功能。结果:h CCL2high组患者外周血中CD14++CD16-炎症单核细胞比例显著高于h CCL2low组(P<0.001),其单核细胞D6受体的表达明显低于h CCL2low组(P<0.001),但单核细胞D6的表达与患者LVEF%未见明显相关性(P=0.16)。急性心肌梗死小鼠m CCL2high组外周血中CD11b+单核细胞细胞比例显著高于m CCL2low组(P<0.001),梗死心肌组织D6 mRNA表达显著低于m CCL2low组(P<0.001),小鼠梗死心肌免疫荧光可见D6表达于CD11b阳性单核细胞和CD31阳性内皮细胞。3周后小鼠心脏超声示LVEF%与梗死区D6的表达呈正相关(P=0.01)。结论:急性心肌梗死后梗死区组织可表达趋化因子诱饵受体D6,梗死区D6的高表达可抑制心肌梗死后的炎症浸润。梗死区趋化因子诱饵受体D6通过特异性结合CCL2减少心肌梗死后心肌局部的炎症浸润进而减轻心肌梗死后的心肌重塑。     

柚皮素对人支气管上皮细胞趋化因子生成的影响及机制研究

目的观察柚皮素对人支气管上皮细胞趋化因子生成的影响,并研究其可能的机制。方法培养人支气管上皮细胞,分为对照组、瘤坏死因子α(TNF-α)组、柚皮素低剂量组、柚皮素中剂量组和柚皮素高剂量组。柚皮素干预组分别与2.5、5和10μmol/L的柚皮素共孵育2 h后,与TNF-α组一起加入TNF-α进行刺激。24 h后用ELISA方法检测各组细胞上清液中Eotaxin及RANTES的表达,Western blot法检测细胞中IκBα含量;另外在反应30 min时,用EMSA法检测核转录因子κB(NF-κB)的DNA结合活性。结果 TNF-α组的趋化因子水平较对照组明显增高。随着柚皮素干预剂量的增大,趋化因子水平明显降低。柚皮素能抑制IκBα降解,并能降低NF-κB的DNA结合活性。结论柚皮素可能通过抑制NF-κB的活性来影响人支气管上皮炎性趋化因子的生成。     

Fractalkine对人外周血单个核细胞IL-8表达的影响及缬沙坦的干预作用

[摘要]　目的　观察趋化因子Fractalkine（FKN）对人血单个核细胞IL-8表达的影响,蛋白激酶C（PKC）在其中的作用,以及缬沙坦的干预效应。　方法　利用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞（PBMC）;将提取的单个核细胞分5组,分别为：空白对照组、FKN组、Ro31-8220（PKC阻断剂）组、 FKN + Ro31-8220组、FKN+缬沙坦组;各组PBMC分别在加药培养12 h和24 h后,用酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测各组细胞培养液中的IL-8表达。　结果　（1）细胞培养12 h或24 h后,与空白对照组相比,Ro31-8220组IL-8表达无明显差异（P>0.05）;（2）FKN组较空白对照组IL-8表达明显减少（P<0.05）,FKN +Ro31-8220较FKN组IL-8表达明显增加（P<0.05）,FKN+缬沙坦组较FKN组IL-8表达明显减少（P<0.05）。（3）细胞培养24 h后,各组IL-8表达均较12 h明显减少（P<0.05）。　结论　FKN通过PKC途径抑制IL-8的表达,缬沙坦可加强这一抑制作用。     

miRNA在自身免疫病中对趋化作用调控的研究进展

miRNA是一类分子长度为20～24个核苷酸的微小RNA,通常在转录后水平调控靶基因的降解或抑制翻译。趋化因子是具有趋化吸引性的蛋白质,而免疫细胞可以表达不同的趋化因子受体,因此趋化因子能够吸引免疫细胞到达炎症部位,参与自身免疫病的发生和发展。越来越多的证据显示miRNA在自身免疫病中发挥重要作用,文章将对目前已知的miRNA在自身免疫病中对趋化作用的调控的研究进展作一综述。     

趋化因子受体7与血管内皮生长因子-C异常高表达与鼻咽癌患者淋巴结转移及预后的关系

目的探讨趋化因子受体7(CCR7)与血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的高表达与患者淋巴结转移与预后的关系。方法选取2014年3月至2015年9月间陕西核工业417医院收治的72例鼻咽癌患者的鼻咽癌组织为研究组,另选70例鼻咽黏膜组织正常者为对照组,比较两组组织CCR7和VEGF-C的表达情况,分析CCR7和VEGF-C指标与鼻咽癌患者临床特征及预后的关系。结果研究组患者鼻咽癌组织中CCR7和VEGF-C指标与对照组人员鼻咽黏膜组织比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。研究组患者CCR7和VEGF-C指标表达与淋巴结转移有相关性(P <0. 05)。CCR7与VEGF-C呈正相关(r=0. 89,P <0. 05)。CCR7低表达者3年存活率为80. 0%(24/30),高于高表达者的26. 2%(11/42); VEGF-C低表达者3年存活率为82. 1%(23/28),高于高表达者的15. 9%(7/44),差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论 CCR7和VEGF-C指标高表达与鼻咽癌患者淋巴结转移及预后有关,可作为判断鼻咽癌患者淋巴结转移与预后的重要指标。     

黄芪桂枝五物汤对神经病理性疼痛大鼠脊髓CX3CR1表达的影响

目的研究黄芪桂枝五物汤对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及对脊髓背角和背根节中脊髓小胶质细胞趋化因子受体1(CX3CR1)表达的影响。方法将50只SD大鼠随机分为模型组、黄芪桂枝五物汤高剂量组、黄芪桂枝五物汤中剂量组、黄芪桂枝五物汤低剂量组、塞来昔布组,每组10只。所有大鼠均建立坐骨神经慢性缩窄性损伤神经病理性疼痛模型,术后模型组给予生理盐水10 mL/kg灌胃,黄芪桂枝五物汤高、中、低剂量组分别给予黄芪桂枝五物汤0.2 mL/kg、0.1 mL/kg、0.05 mL/kg灌胃,塞来昔布组给予塞来昔布30 mg/kg灌胃,均1次/d,连续14 d。分别在造模前及术后3,5,7,14 d采用热刺痛仪测定各组大鼠的热缩足反射潜伏期,用免疫组化法检测各组大鼠脊髓背角和背根节中CX3CR1表达情况,用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测脊髓背角和背根节中CX3CR1 mRNA和蛋白的相对表达量。结果术后3 d各组大鼠热缩足反射潜伏期均较术前1 d明显缩短(P均<0.05),但模型组和塞来昔布组术后各时间段比较差异无统计学意义(P均>0.05);黄芪桂枝五物汤低、中剂量组从术后7 d开始、黄芪桂枝五物汤高剂量组从术后3 d开始热缩足反射潜伏期均明显长于模型组(P均<0.05)。免疫组化显示黄芪桂枝五物汤各剂量组脊髓背角和背根节中CX3CR1阳性细胞均显著少于模型组和塞来昔布组(P均<0.05),且黄芪桂枝五物汤高剂量组均明显少于黄芪桂枝五物汤低、中剂量组(P均<0.05),黄芪桂枝五物汤低、中剂量组间比较差异无统计学意义(P均>0.05)。模型组和塞来昔布组脊髓背角和背根节中CX3CR1 mRNA和蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P均>0.05);黄芪桂枝五物汤各剂量组脊髓背角和背根节中CX3CR1 mRNA和蛋白相对表达量均显著低于模型组和塞来昔布组(P均<0.05),且黄芪桂枝五物汤高剂量组均明显低于黄芪桂枝五物汤低、中剂量组(P均<0.05),黄芪桂枝五物汤低、中剂量组间比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论黄芪桂枝五物汤对神经病理性疼痛模型大鼠具有显著镇痛作用,其可能通过调控脊髓背角和背根节CX3CR1的表达发挥作用,且呈一定剂量依赖性。