白细胞趋化因子2型肾淀粉样变性病1例

SUMMARY Here we report a case of leukocyte chemotactic factor 2 ( LECT2 )-associated renal amyloi-dosis ( ALect2) in our hospital.A 68-year-old male presented with massive proteinuria, hematuria, and h...     

联合应用基质细胞衍生因子1、辛伐他汀及骨胶原支架进行体内异位成骨

目的：探讨使用小鼠基质细胞衍生因子1（murine stromal cell-derived factor 1, mSDF-1）结合辛伐他汀（simvastatin,SIM）以及骨胶原支架（Bio-Oss^®）构建无外加种子细胞的组织工程化骨的可行性,并检验其体内异位成骨的效果。方法：将32只ICR小鼠随机分为4组,每组8只,于小鼠颅部做皮肤切口,各组小鼠分别植入：(1)1 ∶50（体积比）的二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide,DMSO）/磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline,PBS）混合液+骨胶原支架（空白对照组）;(2)10^-3 mol/L SIM溶液+骨胶原支架（SIM组）;(3)200 mg/L mSDF-1溶液+骨胶原支架（mSDF-1组）;(4)10^-3 mol/L SIM+200 mg/L mSDF-1溶液+骨胶原支架（SIM+mSDF-1组）。植入1周后,连续2 d,每天分别在支架局部注射上述各组相应的溶液50 μL。饲养6周后,取出支架及其周围组织,通过软X射线投射成像及灰度测定、HE染色、免疫组织化学染色的方法,定性及定量观察其成骨效果。结果：SIM+mSDF-1组软X射线灰度值［（421 836.5±65 425.7）像素］明显高于空白对照组［（153 345.6±45 222.2）像素,P<0.01］、SIM组［（158 119.2±100 284.2）像素,P<0.01］以及mSDF-1组［（255 529.5±152 142.4）像素,P<0.05］;在SIM+mSDF-1组内可见明显的骨桥蛋白和骨钙素的表达;SIM+mSDF-1组血管丛密度［（46±8）条/mm²］明显高于空白对照组［（23±7）条/mm², P<0.01］和SIM组［（24±6）条/mm², P<0.01］。结论：使用mSDF-1结合SIM以及骨胶原支架构建的无外加种子细胞的组织工程化骨可于小鼠颅部皮下异位成骨。     

CCL2表达与同时性结直肠癌肝转移的相关性分析

目的观察结直肠癌原发瘤CCL2表达与同时性结直肠癌肝转移的相关性。 方法检索1999年1月至2003年12月中国医学科学院肿瘤医院临床病理资料完整的结直肠癌病例,最终197例纳入研究。其中对照组104例,同时性肝转移组93例。对照病例定义为结直肠癌术后随访5年以上没有复发转移者。采用免疫组织化学法检测结直肠癌原发瘤CCL2表达,单因素和多因素分析CCL2和临床病理因素与结直肠癌肝转移的相关性。 结果多因素分析显示,肿瘤大小、淋巴结分期、CEA和CCL2表达是预示结直肠癌肝转移的独立危险因素(P<0.05),CCL2高表达者肝转移风险是低表达者的5.828倍(95% CI：2.212～15.355)。CCL2与其他临床病理因素的相关性分析表明,CCL2表达仅与肝转移相关(P<0.05),与肿瘤浸润深度、淋巴结分期和CEA均未见统计学差异(P>0.05)。 结论同时性结直肠癌肝转移与肿瘤大小、淋巴结分期、CEA和CCL2表达密切相关。结直肠癌肝转移中CCL2的作用机制可能与常见临床病理因素不同。     

实验性自身免疫性葡萄膜炎眼球中自然杀伤细胞的致炎作用及其机制

背景 实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)是葡萄膜炎常见的动物模型,自然杀伤(NK)细胞是一种强烈的致炎细胞,但其在EAU中的作用及其机制仍有待研究. 目的 探讨EAU模型大鼠不同发病阶段视网膜组织中NK细胞的定位和分布及其机制.方法 将36只SPF级Lewis大鼠应用随机数字表法随机分成对照组和造模后第6、9、12、16、21天组,每组各6只.造模后第6、9、12、16、21天组大鼠采用光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)联合5 mg/ml结核杆菌和完全福氏佐剂(CFA)乳化液双后足垫皮下注射,然后腹腔内注射400 ng百日咳毒素免疫大鼠建立EAU大鼠模型.对照组大鼠双后足垫皮下注射生理盐水与等容量CFA乳化液,然后腹腔内注射400 ng百日咳毒素.造模后每天用裂隙灯显微镜观察大鼠眼前段炎症反应过程,根据Caspi方法进行眼部炎症症状评分.分别于造模后第6、9、12、16、21天摘取各组大鼠眼球,采用苏木精-伊红染色法检测各组大鼠视网膜炎症反应和组织结构形态学改变;采用免疫荧光双标法检测大鼠视网膜中NK细胞的分布及浸润情况.另取25只Lewis大鼠应用随机数字表法随机分为造模后第0、3、6、9和12天组,每组5只大鼠,电动匀浆机破裂组织并匀浆为眼内液,采用实时荧光定量PCR法检测大鼠眼内液中NK细胞趋化因子CXCL10 mRNA和CXCL12 mRNA的表达. 结果 对照组大鼠眼前节未发现炎症反应.造模后第6天组大鼠虹膜血管扩张,随着造模后时间延长虹膜血管扩张明显,前房逐渐出现渗出或积脓,造模后第12天炎症反应达峰.视网膜组织病理学检查显示,对照组大鼠视网膜组织结构排列整齐,各EAU模型组大鼠造模后随时间延长均出现不同程度的视网膜结构排列紊乱,外核层细胞分离,层间组织松散,视细胞水肿且有炎性细胞浸润,以造模后第12天组最为严重.免疫荧光双标记显示对照组仅见蓝色标记的细胞核,视网膜各层细胞排列规则;造模后第6天组开始可见大鼠视网膜内层大量NK细胞浸润,呈红色荧光,随时间延长逐渐增加,造模后第9天组NK细胞浸润达峰.造模后第9天组大鼠视网膜中CXCL10 mRNA相对表达量为34.298±16.689,明显高于造模后第3、6、12天组的1.390±0.660、3.359±2.581和4.711±1.387,差异均有统计学意义(均P＜0.01);各组大鼠视网膜中CXCL12 mRNA相对表达量的总体比较差异无统计学意义(F=2.851,P＞0.05). 结论 EAU大鼠发病早期视网膜中NK细胞浸润,其严重程度和视网膜中CXCL10的表达动态与EAU炎症发展过程相吻合,提示NK细胞在EAU的早期炎症过程中发挥重要作用,CXCL10是NK细胞的主要趋化因子.     

普拉洛芬在干眼中对Th1细胞趋化因子受体CXCR3和CCR5表达的影响

目的：观察普拉洛芬对Th1 细胞CXC趋化因子受体3（CXCR3）和CC趋化因子受体5（CCR5）表达的影响,并探讨其抑制干眼炎症免疫反应的机制。方法：随机对照试验。纳入干眼患者170例（170眼）,均选取右眼为观察眼。采用随机数字表法分为试验组和对照组,各85 例（85 眼）。试验组予普拉洛芬联合玻璃酸钠点眼,均每日4次,每次1滴;对照组仅玻璃酸钠点眼,每日4次,每次1滴。于治疗前和治疗后30 d时进行随访,检测并比较2 组泪液分泌量（SIt）、泪膜破裂时间（BUT）、角膜荧光素染色（CFS）评分,CXCR3和CCR5 表达率,及两者与BUT和CFS关系。采用Pearson直线相关分析以及t 检验对数据进行分析。结果：治疗后2 组BUT均较治疗前延长（t =-13.27、-13.53,均P ＜0.05）,且试验组长于对照组（t =10.11,P ＜0.05）;治疗后2组CFS评分均低于治疗前（t =7.34、5.27,均P ＜0.05）,且试验组低于对照组（t =5.15,P ＜0.05）;治疗后试验组CXCR3、CCR5的表达率低于治疗前（t =6.74、9.27,均P ＜0.05）,且试验组低于对照组（t =3.29、2.83,均P ＜0.05）;试验组CXCR3、CCR5表达率与BUT呈负相关（r =-0.22、-0.22,均P ＜0.05）,与CFS评分呈正相关（r =0.28、0.23,均P ＜0.05）。结论：普拉洛芬可通过下调眼表Th1细胞CXCR3和CCR5的表达来发挥对干眼的治疗作用。     

CXCL10与CXCR3在ARDS中的研究进展

CXC趋化因子配体10 (CXCL10)又称γ干扰素诱导蛋白10 (IP-10),属于CXC类非ELR亚族趋化因子之一,是γ干扰素诱导产生的可以趋化多种炎症细胞如T淋巴细胞,单核细胞和自然杀伤细胞的一类蛋白质.CXCL10通过与特异性CXC趋化因子受体3(CXCR3)结合调节炎症反应,促进ARDS的病理过程.本文旨在阐述CXCL10与CXCR3在ARDS中的作用,为ARDS的治疗提供新思路.     

CXCR4/CXCL12信号途径在食管鳞癌浸润转移中的作用机制

目的研究趋化因子受体4(CXCR4)/趋化因子12(CXCL12)信号途径在食管鳞癌浸润转移中的作用机制,为探讨CXCR4成为食管癌治疗新的靶点提供理论依据。 方法取对数生长期的食管鳞癌EC9706细胞,添加趋化因子CXCL12,通过侵袭转移实验、黏附实验分别检测食管鳞癌EC9706细胞株的细胞侵袭、移动和黏附能力。采用RT-PCR和Western Blot技术检测表皮生长因子受体(EGFR)mRNA及蛋白的表达水平。 结果添加不同浓度趋化因子CXCL12(终浓度为5、10 μg/ml),食管鳞癌EC9706细胞株的细胞侵袭、移动和黏附能力均较空白对照组高,并且存在剂量依存关系,即CXCL12浓度越高,细胞的侵袭、移动、黏附能力越强,差异均有统计学意义(P<0.01)。添加不同浓度趋化因子CXCL12,食管鳞癌细胞的EGFR mRNA和蛋白表达水平均较对照组高,并且存在剂量依存关系,即CXCL12浓度越高,EGFR mRNA和蛋白表达水平越高,差异均有统计学意义(P<0.01)。 结论CXCR4/CXCL12信号途径与食管鳞癌细胞的侵袭、转移相关,并且存在剂量依存关系,有可能通过调控EGFR的表达参与食管鳞癌的浸润转移。     

CXCR4及NDRG1蛋白在前列腺癌中的表达及其与侵袭转移的相关性分析

目的 探讨趋化因子受体4(chemokine receptor 4, CXCR4)及N-myc下游调节基因1(N-myc downstream regulated gene 1, NDRG1)在前列腺癌组织及细胞系中的表达情况,明确其与前列腺癌恶性程度及转移的关系。 方法 应用免疫组织化学方法检测CXCR4蛋白在前列腺癌(46例)、良性前列腺增生(15例)及正常前列腺组织(10例)中的表达,分析其与前列腺癌病理分级及转移的关系。免疫印迹(Western blotting)法检测不同前列腺癌细胞系中CXCR4及磷酸化NDRG1(pNDRG1)表达差异。结果 免疫组织化学检测发现CXCR4蛋白在前列腺癌组织(30例)中过度表达,表达率为65.2%,其表达水平与前列腺癌病理分级及Gleason评分无显著相关性(P=0.081),而CXCR4蛋白表达与肿瘤转移密切相关,前列腺癌转移患者表达率明显高于无转移患者,差异有统计学意义(P=0.002)。Western blotting法检测在正常前列腺上皮细胞和不同前列腺癌细胞系中CXCR4及NDRG1蛋白表达不同,高转移潜能的去势抵抗前列腺癌细胞(PC3和DU145)中CXCR4表达较高,而作为转移抑制因子的pNDRG1表达则明显降低。结论 趋化因子受体CXCR4及转移抑制因子NDRG1可能参与调控前列腺癌的进展和转移,对前列腺癌的临床诊断和治疗有重要价值。     

趋化因子配体19在类风湿关节炎患者血清中的表达及临床意义

目的：探讨趋化因子配体19（C-C chemokine ligand 19,CCL19）在类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者血清中的表达水平及临床意义。方法：采用酶联免疫吸附测定检测RA患者和健康对照血清CCL19的表达水平,收集患者临床及实验室资料,利用流式细胞术检测患者外周血B细胞及记忆B细胞亚群的比例。对比不同临床特征的RA患者血清CCL19表达差异,分析血清CCL19水平与临床及实验室指标、B细胞及记忆B细胞亚群间的相关性。数据分析采用独立样本t检验、配对t检验、Pearson和Spearman相关分析。结果：RA患者血清中高表达CCL19（P<0.001）,治疗后的RA患者CCL19表达显著降低（P<0.001）。CCL19与红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate,ESR）、C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、28个关节的疾病活动度评分（disease activity score in 28 joints,DAS28）无相关性（P>0.05）,但与类风湿因子（rheumatoid factor,RF）、抗环瓜氨酸多肽（cyclic citrullinated peptide,CCP）抗体水平显著相关（r=0.42,P=0.002;r=0.33,P=0.013）;CCL19水平在抗CCP抗体阳性组显著高于抗CCP抗体阴性组,RF阳性组显著高于RF阴性组,高、低疾病活动组间以及早期和非早期RA组间差异均无统计学意义;CCL19与外周血CD19+、CD27+、D27-、CD27+IgD+、CD27+IgD-、CD27-IgD+、CD27-IgD- B细胞的比例均未见显著相关性（P>0.05）。相较于健康对照,RA患者外周血CD27+IgD+、CD27+IgD-、CD27+ B细胞比例均显著减少。结论：血清CCL19水平可以反映RA患者的免疫活动状态,可预判RA患者B细胞抗体分泌的功能状态,从而可能指导RA临床治疗策略的选择。     

富氢液通过自噬途径下调中波紫外线诱导的HaCaT细胞炎症因子的表达

目的 探讨氢气是否能通过自噬途径调节中波紫外线（UVB）诱导的HaCaT细胞炎症因子的表达。 方法 将培养的HaCaT细胞分为空白对照组（不做任何处理）,氢气组（仅用富氢培养液培养）,1、10、50 mJ/cm2 UVB组,1、10、50 mJ/cm2 UVB + 氢气组,50 mJ/cm2 UVB + 3甲基腺嘌呤（3MA）组,50 mJ/cm2 UVB + 雷帕霉素组,50 mJ/cm2 UVB + 3MA + 氢气组,50 mJ/cm2 UVB + 雷帕霉素 + 氢气组。细胞经过不同处理培养12 h后,噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖,LDH试剂盒检测乳酸脱氢酶（LDH）,细胞提取蛋白检测自噬蛋白LC3和Beclin1的表达,上清液用ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子（TNF）α、白细胞介素（IL）-1β、HMGB1和IL-6的水平。 结果 与空白对照组相比,UVB诱导的HaCaT细胞LDH释放增多,细胞活力下降,自噬蛋白LC3和Beclin1表达增加,炎症因子TNF-α、IL-1β、HMGB1和IL-6释放增加（均P < 0.05）。与UVB组相比,氢气可减少LDH释放,提高细胞活力,自噬蛋白LC3和Beclin1表达进一步增加,炎症因子TNF-α、IL-1β、HMGB1和IL-6表达减少（均P < 0.05）。与50 mJ/cm2 UVB组相比,50 mJ/cm2 UVB + 3MA组炎症因子TNF-α、IL-1β、HMGB1和IL-6表达进一步增加（P < 0.05）,而50 mJ/cm2 UVB + 雷帕霉素组炎症因子TNF-α、IL-1β、HMGB1和IL-6表达减少（P < 0.05）。与50 mJ/cm2 UVB + 氢气组相比,50 mJ/cm2 UVB + 氢气 + 3MA组炎症因子TNF-α、IL-1β、HMGB1和IL-6表达增加（P < 0.05）。 结论 UVB照射可以诱发自噬蛋白表达增加 ;富氢液可以下调UVB诱导的HaCaT细胞炎症因子的表达,而这一过程是通过激活自噬途径实现的。