釉原蛋白、釉蛋白及成釉蛋白在小鼠牙胚组织发育过程中的表达

目的:比较小鼠釉原蛋白(amelogenin,AMELX)、成釉蛋白(ameloblastin,AMBN)和釉蛋白(enamelin,ENAM)在牙胚组织发育过程中表达的差异,从而揭示其不同的功能。方法:选择牙胚发育期分别位于钟状期、钟状晚期、釉质成熟期的昆明小鼠头颅切片,使用抗鼠AMELX、AMBN和ENAM多克隆抗体(由美国德州大学健康科学中心Dr.Sim-mer赠送),行免疫组织化学EnVision二步法染色,观察三种蛋白在处于三个不同发育阶段小鼠头颅切片中的表达情况。结果:免疫组化结果显示,三种蛋白在三种小鼠牙胚的成釉细胞、釉质、牙本质中的表达存在时空顺序差异,随着牙胚发育和釉质成熟,AMELX呈递减表达,而AMBN和ENAM则较恒定表达。AMELX在周围发育中的编织状骨组织中也有微弱表达。结论:AMELX、AMBN和ENAM为主要的釉质基质蛋白,在牙胚发育的不同阶段有不同的调节矿化的作用,AMELX在釉质矿化早期促进晶体生长,而其在骨中的表达则进一步表明其在骨修复中可能的作用;AMBN促进釉质基质矿化,并维持晶体形状、大小;ENAM促进和维持晶体生长,并与再矿化有关。     

氟抑制小鼠切牙成釉细胞内骨形成蛋白-2表达

目的观察慢性氟中毒对小鼠切牙成釉细胞骨形成蛋白-2(BMP-2)表达的影响，探讨氟斑牙的致病机制。方法建立小鼠慢性氟中毒氟斑牙模型，SABC免疫组化法检测下切牙成釉器细胞内BMP-2的表达分布。结果BMP-2在分泌期成釉细胞、成牙本质细胞表达最强，在中间层细胞，星网状细胞中均有表达，并且随着氟浓度的升高，表达减弱。结论氟抑制BMP-2在成釉细胞中的表达，影响釉基质分泌。     

釉原蛋白在大鼠胚发育过程中的表达

目的 研究大鼠切牙牙胚形态分化的不同阶段,釉原蛋白（Amelogenin Am）的表达,探讨釉器细胞的形态分化与功能状态的关系,为探明牙釉质与牙本质在发育、矿化过程中的相互诱导关系及牙釉质蛋白硬组织诱导能力的有无提供实验依据。方法 将标本进行GMA树脂包埋,制作半薄切片后,进行免疫组织化学染色。结果 大鼠牙胚基底部釉器无Am的表达,分化末期内釉上皮细胞呈弱阳性染色,釉基质形成期成釉细胞及釉基质内呈强阳性染色。达到釉基质移行期后阳性反应逐渐减弱,直到釉质成熟期后期阳性反应消失。同时在对应的牙本质和牙本质小管内可以见到釉原蛋白的阳性染色。结论 在釉质形成过程中,成釉细胞分泌的釉原蛋白大部分存留在釉基质内形成釉质,也有一部分向牙本质内扩散到牙本质、牙本质小管、以及成牙本质细胞层内。釉原蛋白向牙本质层扩散和渗透功能上的意义,可以是起到促进成牙本质细胞的分化和诱导牙本质钙化的作用。     

氯离子通道CLC-7在小鼠牙胚中的表达

目的:研究氯离子通道CLC-7在小鼠牙胚发育过程中的表达及分布,探讨其在牙齿发育过程中的作用.方法:提取小鼠牙胚中的总RNA并制备不同发育阶段的小鼠牙胚标本,应用RT-PCR和免疫荧光染色方法检测CLC-7在小鼠牙胚中的表达及分布.结果:RT-PCR检测发现新生小鼠牙胚有Clcn7 mRNA的表达.免疫荧光染色发现E18小鼠牙胚开始有CLC-7的表达,CLC-7存在于牙胚多种细胞,如内釉上皮层细胞、中间层细胞、星网状层细胞、牙乳头细胞、成釉细胞、成牙本质细胞.结论:CLC-7在小鼠牙胚中呈特异性空间分布,可能参与牙胚发育过程的调节.     

成釉细胞受体介导的内吞功能的研究

目的:相对定量地研究成釉细胞的内吞功能,并在细胞水平上动态观察成釉细胞的内吞过程,以期为成釉细胞内吞功能研究提供2种新的可行的方法。方法:用视磺酸和地塞米粉(RA/DEX)诱导分泌期成釉细胞LS8细胞成熟,对照组细胞不经诱导处理。分别用激光共聚焦显微镜和活细胞工作站观察细胞内吞荧光标记的FITC-白蛋白的过程。结果:2种方法均显示RA/DEX诱导组细胞内吞活动较对照组强。结论:激光共聚焦显微镜和活细胞工作站都是研究成釉细胞内吞功能的有效方法。     

上颌成釉细胞癌1例及文献复习

成釉细胞癌(ameloblastic carcinoma,AC)是一种极其罕见的恶性肿瘤,目前文献报告例数极少,且大多数的AC发生在下颌骨。该病的治疗方式以及预后仍不完善,故本文报告1例AC患者采用扩大切除病灶及病灶周围颌骨、软组织的方式治疗,术后随访2个月,记录患者预后。     

Runx2介导TGF-β1调控成釉细胞MMP20基因表达的研究

首先利用双荧光素酶基因报告系统分析TGF-β1对MMP20基因启动子转录活性的影响;然后利用染色体免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)方法观察Runx2与MMP20特异性结合位点之间的相互作用,并利用基因定点突变和双荧光素酶基因报告系统分析Runx2对MMP20基因启动子转录活性的影响;最后运用小RNA干扰技术使Runx2基因沉默,实时定量RT-PCR技术观察TGF-β1诱导MMP20基因表达的改变。结果:TGF-β1刺激成釉细胞后,MMP20启动子在-87～+23区域转录活性无明显变化外,其他各区域转录活性均增强。     

高氟对成釉细胞内氯离子浓度及pH值影响的研究

目的：检测高氟对成釉细胞内氯离子浓度以及pH值的影响。方法：2mmol／LNaF处理成釉细胞样细胞系LS8 30min,采用新型氯离子荧光探针MQAE以及LysoSensorTMDND-167分别显示细胞内氯离子浓度和pH值的变化;利用活细胞工作站实时监测加氟30min后细胞内氯离子浓度和pH值的变化。结果：MQAE呈现绿色荧光,其辉度值与细胞内的氯离子呈反比;加氟细胞30min后,实验组细胞平均绿色荧光强度较对照组增高;活细胞检测显示,对照组蓝色荧光和绿色荧光均少许下降,而实验组细胞双染后两种荧光均有所增强。结论：氟离子能影响细胞内氯离子浓度从而引起细胞内DH佰的降低而导致细胞的酸化。     

氟对大鼠成釉细胞GRP-78和caspase-12表达的影响

目的研究GRP-78和caspase-12在氟致大鼠成釉细胞内质网应激和细胞凋亡中的作用,探讨氟所介导的内质网应激是否导致细胞凋亡。方法应用CCK8和流式细胞术观察不同浓度的氟对成釉细胞活性及凋亡数量的影响,以实时定量PCR和Western印迹法检测氟对内质网伴侣分子GRP-78和caspase-12基因和蛋白表达的影响,应用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果随着氟浓度的不断增加,大鼠成釉细胞活性呈逐渐下降趋势,流式细胞术同样显示发生凋亡的细胞数量逐渐上升;实时定量RT-PCR和Western印迹结果显示,GRP-78和caspase-12的表达量随着氟浓度增加而增加。结论过量氟介导了大鼠成釉细胞内质网应激,并且通过内质网应激,引起细胞凋亡。     

成釉细胞癌的临床及病理特点：2例报告及文献复习

目的: 分析总结成釉细胞癌的临床及病理特点。方法：分析2例成釉细胞癌患者的临床资料,并检索和回顾分析相关中、英文文献。结果：收集临床资料完整的文献30篇, 包括成组病例分析3篇, 个案报道27篇, 共计61例。结论：成釉细胞癌是一种罕见的牙源性上皮性恶性肿瘤,无明显性别差异,缺乏特异性临床表现,明确诊断需依据病理和免疫组化。其侵袭性强,首选手术治疗,预后一般,需长期随访。