刚地弓形虫活化蛋白激酶C受体1基因的克隆和原核表达及纯化和抗原性分析

目的 克隆刚地弓形虫活化蛋白激酶C受体1(TgRACK1)基因,原核表达、纯化TgRACK1,并分析其抗原性.方法 制备弓形虫RH株速殖子总RNA,根据TgRACK1基因全长编码序列(GenBank登录号:AY547291)的开放阅读框设计引物并进行逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增,扩增产物经双酶切后连接入pGEX-6p-1载体,重组质粒转化大肠埃希菌DH5α,阳性菌落经菌液PCR、双酶切及DNA测序进行鉴定.将重组质粒pGEX-6p-1-TgRACK1转化至大肠埃希菌BL21(DE3)并加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结合考马斯亮蓝染色检测表达产物;分别以抗GST标签抗体和兔抗弓形虫血清为一抗,免疫印迹(Western blotting)分析鉴定重组蛋白及其抗原性.重组融合蛋白经GST琼脂糖凝胶亲和纯化,纯化蛋白经SDS-PAGE分离,考马斯亮蓝染色结合凝胶成像系统分析其纯度.结果 RT-PCR扩增产物约为970 bp,重组质粒pGEX-6p-1-TgRACK1构建成功.经IPTG诱导获得相对分子质量约63 kDa的可溶性重组蛋白.诱导表达的蛋白质为带GST标签的重组融合蛋白,且能被兔抗弓形虫血清识别.亲和纯化后获得纯度大于95％的重组TgRACK1蛋白质.结论 克隆得到弓形虫活化蛋白激酶C受体1基因,原核表达并纯化出该基因编码的蛋白质,且该重组蛋白具有抗原性.     

色谱质谱联用技术检测杀鼠剂前处理方法综述

杀鼠剂是食物中毒事件中常见的化学性致毒因子,采用色谱质谱联用技术确证食物中毒样品中杀鼠剂成分一直是公共卫生应急检测领域研究的重点.针对不同基质的样品采用适合的前处理方法是能否准确检出可疑杀鼠剂成分的关键环节.本文对色谱质谱联用技术检测杀鼠剂常用的提取净化方法研究进展进行了综述,主要包括液液萃取、固相萃取、QuEChER...     

Hunt综合征合并喉返神经损伤1例报告

Ramsay Hunt综合征是水痘-带状疱疹病毒(Varicella-zoster virus,VZV)引起的以侵犯面神经为主的疾病,临床主要表现为耳部疱疹、疼痛和/或面瘫,还可以出现耳鸣、听力减退、眩晕、恶心、呕吐等症状.病毒可以侵犯Ⅴ～Ⅷ颅神经而引起多发性神经炎,因此少数患者可出现其它颅神经症状[1].现将一例合并声音嘶哑的Hunt综合征报告如下.     

前庭自旋转试验和冷热试验在突发性聋预后评估中的应用比较

目的 在突发性聋患者诊治过程中运用前庭自旋转试验(vestibular autorotation test,VAT)和冷热试验(caloric test,CT)技术进行半规管功能检测,探讨两种方法在突发性耳聋预后评估中作用的差异性.方法 对23例突发性聋患者进行前庭功能检查(VAT,CT)及听力学检查(纯音测听、声导抗测试、听性脑干反应);用Stata 4.0统计软件做统计分析,分别按痊愈、显效、有效、无效,听力曲线类型及是否伴眩晕进行分组,用R×C联表对各计数因素行卡方检验.结果 统计结果表明两种方法差异无统计学意义(P>0.05).结论 前庭自旋转试验和冷热试验在突发性聋预后评估中的作用无差异.有无眩晕仅在前庭功能异常时对突聋的预后有较大的影响.突聋伴发的眩晕不一定是前庭损害的结果.     

多学科呼吸管理小组在A型主动脉夹层患者中促肺康复的效果研究

目的 探讨基于医护联合的多学科呼吸管理小组在A型主动脉夹层患者中促肺康复的效果。方法 选择本院2022年1月至2023年1月收治的A型主动脉夹层患者80例,随机分为对照组和观察组,每组40例。对照组患者给予常规护理,观察组在对照组的基础上实施基于医护联合的多学科呼吸管理小组护理方式。比较2组患者的肺功能指标[氧合指数(OI)、呼吸指数(RI)、动态肺顺序性(Cdyn)、静态肺顺应性(Cst)]、临床指标、对护理工作的满意度。结果 T1时2组OI值、RI值、Cdyn水平及Cst水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),T2、T3、T4时观察组OI值、Cdyn水平及Cst水平均高于对照组,RI值均低于对照组,观察组CICU时间、机械通气时间、使用高流量氧疗时间及住院总时间均短于对照组,LUS评分低于对照组,对护理工作的满意度高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 基于医护联合的多学科呼吸管理小组可明显改善A型主动脉夹层患者术后的肺功能,缩短机械通气时间,提高对护理工作的满意度,值得在临床进一步进行推广。     

雄激素不敏感综合征6例临床分析

<正>雄激素不敏感综合征(androgen-insensitivity syndrome,AIS)是一种罕见的性发育异常,是雄激素受体缺陷导致的一种X-连锁隐性遗传病。2003年1月至2011年9月我院共收治此类患者6例,现报道如下。1资料与方法     

便携式急救药盒的设计与应用

冠心病是目前严重危害人们健康的常见病、多发病之一,近年来在中老年人群的发病率有逐年增高的趋势。医生常嘱咐冠心病患者要随身携带急救药盒,以便出现意外情况时能够紧急自救。急救药盒是根据冠心病患者容易发生心绞痛、心律失常等病症专门配备的,可应急取用药物,且迅速奏效,不失为一项自我保健的良好措施。     

酒中氨基甲酸乙酯的测定分析

目的建立酒中氨基甲酸乙酯含量的测定方法。方法以氘代同位素为内标,采用硅藻土固相萃取柱进行萃取,乙醚洗脱,气相色谱-质谱选择离子法测定。结果氨基甲酸乙酯的检出限为2.0μg/L,回收率为91.0%~102.0%,RSD为1.8%。采用本方法测定了河南市场上13种葡萄酒、25种白酒、12种黄酒、5种调料酒中氨基甲酸乙酯含量,结果为:葡萄酒3.5~246.4μg/kg、白酒6.9~485.5μg/kg、黄酒10.4~332.9μg/kg、调料酒24.9~49.1μg/kg。结论本方法精密度和准确度高,且简便快捷,适用于酒中氨基甲酸乙酯的测定。     

柴胡疏肝汤治疗缺血性脑卒中后抑郁临床观察

目的 观察柴胡疏肝汤治疗缺血性脑卒中后抑郁的临床效果.方法 从医院2018年1月-2019年1月收治的缺血性脑卒中后抑郁患者中随机抽取80例作为研究对象.患者分为观察组和对照组,各40例.对照组接受西药常规治理,观察组接受柴胡疏肝汤治疗,所有患者均治疗2个月.对两组患者治疗后焦虑抑郁程度、血清神经递质水平、患者运动功能...     

高位折叠缝扎注射术治疗直肠黏膜内脱垂型便秘的临床研究

目的:观察高位折叠缝扎注射术治疗直肠黏膜内脱垂型便秘的临床疗效。方法:采用随机对照单盲法将80例患者随机分为两组,每组40例。治疗组采用高位折叠缝扎注射术治疗,对照组采用直肠缝扎注射术治疗。观察比较两组患者临床症状、体征及排粪造影的变化,统计好转治愈率。结果:两组疗效比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:高位折叠缝扎注射术对直肠黏膜内脱垂型便秘的疗效优于直肠缝扎注射术,且安全。