慢病毒介导C-1-1基因维持“自组装”工程化软骨永久性表型的研究

目的 观察慢病毒介导C-1-1基因对维持“自组装”工程化软骨永久性表型的影响.方法 构建携带C-1-1基因的重组慢病毒表达载体并转染成人骨髓间充质干细胞(hMSCs),用嘌呤霉素筛选获得阳性细胞.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western blot)观察C-1-1基因的表达效果.用含有生长分化因子-5(GDF-5)的成软骨培养基诱导培养3周,3周后重悬细胞,以5×109个/L的细胞终质量浓度接种于2％琼脂糖包被的24孔板,行自组装培养3周后取材.通过Ⅱ型、X型胶原免疫组织化学,甲苯胺蓝染色鉴定分化结果,并与空载体转染组和未转染组比较.结果 测序证实成功构建携带C-1-1基因的重组慢病毒表达载体,转染hMSCs后,C-1-1基因在转录水平和翻译水平都有明显表达.自组装培养3周后,3组标本经甲苯胺蓝染色均可见广泛蓝染并带有异染型着色.C-1-1基因转染组的Ⅱ型胶原平均吸光度(A)值为(0.3754±0.0255),与空载体转染组和未转染组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);X型胶原平均A值为(0.0115±0.0062),显著低于空载体转染组和未转染组(P＜0.01).结论 慢病毒介导C-1-1基因转染后,可增强“自组装”工程化软骨表型的稳定性,抑制其成熟肥大.     

盐酸川丁特罗中间体3-氯-4-氨基-5-三氟甲基苯乙酮的合成

目的 :合成盐酸川丁特罗的重要中间体3-氯-4-氨基-5-三氟甲基苯乙酮。方法: 以邻-三氟甲基苯胺为起始原料,经碘代、酰化、氰基取代、水解、取代、氯代和烃化7步反应得到盐酸川丁特罗的重要中间体。结果与讨论: 目标化合物的结构经1H-NMR和MS确证,总收率为8.9 %。该合成工艺操作简便,适合工业化生产。     

GDF-5在小鼠肢体骨骼发育中表达规律的研究(英文)

目的研究GDF-5在小鼠肢体骨骼发育中的表达规律,探讨肢体发育的相关机制。方法采用RT-PCR和Western blotting分别检测GDF-5在小鼠胚胎发育过程中肢芽组织mRNA和蛋白表达的变化。结果小鼠肢体骨骼发育的早期阶段GDF-5mRNA持续表达,E11.5天肢芽组织刚刚形成时有少量表达,E12.5和13.5天呈高表达,继而表达减弱,E12.5和13.5天GDF-GDF-5mRNA的相对含量与其余3天相比有极显著性差异(P<0.01),GDF-5蛋白表达规律与mRNA变化趋势相一致。结论GDF-5在小鼠肢体骨髂发育和关节形成中有很重要的作用。     

新型冠状病毒感染者脊柱外科急诊手术的围手术期管理专家共识

自2019年12月以来,已有200余个国家和地区相继报道了新型冠状病毒感染病例,世界卫生组织（WHO）于2020年3月12日宣布新型冠状病毒全球大流行,截至6月18日,全球已累计有824万余人感染,44万余人死亡,对全世界医疗、政治和经济领域影响巨大^［1-2］。WHO将其命名为“2019冠状病毒感染性疾病”（COVID-19）,病原体被命名为重症急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）^［3-6］。按照《中华人民共和国传染病防治法》,COVID-19被纳入乙类传染病,采取甲类传染病的预防控制措施^［7］。     

黑龙江省消化系统癌症高危人群预防主动行为测评量表常模的构建

背景　消化系统癌症的防控形势严峻,但其高危人群的预防意识、预防行为水平等参差不齐。医护人员对消化系统癌症高危人群预防能力的评估缺乏参考标准,构建消化系统癌症高危人群预防主动行为量表（DSC-PPBS）地区常模尤为重要。目的　建立黑龙江省DSC-PPBS常模,为评估消化系统癌症高危人群预防行为水平提供参考。方法　于2019年5月-2020年1月,选取黑龙江省6家三级甲等医院、3家二级甲等医院、3家社区卫生服务中心的消化系统癌症高危人群为研究对象,以DSC-PPBS为调查工具,在分析消化系统癌症高危人群DSC-PPBS评分特点的基础上建立均数常模、百分位常模和划界常模。结果　共发放调查问卷1 400份,回收有效问卷1 236份,问卷有效回收率为88.29%。按性别和年龄组（40~45、46~65、≥66岁）建立消化系统癌症高危人群DSC-PPBS的均数常模。百分位常模以5%为间隔,建立5分位至95分位消化系统癌症高危人群DSC-PPBS的百分位常模。划界常模以4个界点（-s、-0.5s、+0.5s、+s）将消化系统癌症高危人群的预防行为划分为5类：预防行为差、预防行为较差、预防行为一般、预防行为良好、预防行为优秀,划界值接近百分位常模的第15、30、70、85百分位。结论　本课题组近期构建的黑龙江省消化系统癌症高危人群DSC-PPBS常模具有良好的代表性,为该量表进一步推广奠定了基础,可作为临床及社区医护人员对消化系统癌症高危人群预防行为的干预提供效果评价的参考依据。     

BMP2、VEGF165双基因共表达质粒在小鼠骨髓基质干细胞的表达

目的观察转染BMP2和VEGF165双基因共表达质粒在小鼠骨髓基质干细胞的表达情况。方法脂质体介导下将双基因真核表达质粒pIRES-BMP2-VEGF165导入小鼠骨髓基质干细胞,用RT-PCR和免疫组织化学方法观察BMP2和VEGF165双基因在小鼠骨髓基质干细胞内的表达。结果转染BMP2、VEGF165的小鼠骨髓基质干细胞有明显的BMP2和VEGF165 mRNA及其蛋白表达。结论转染BMP2和VEGF165双基因的小鼠骨,髓基质干细胞能同时表达以上两种基因。     

欧盟国家公立医院及非营利性私立医院的资金筹措和计划

近年来，欧洲更多地关注医疗卫生机构的财务问题，可讨论的焦点只是集中于收入，而关于欧洲医疗卫生系统的资金筹措方面的研究却是寥寥无几。但是，几个国家的医疗卫生制度都正在经历重大的变革。尤为瞩目的是．欧洲出现了一种新的PPP模式，即公共资金与私有资金的合作模式(public-private partnerships)。同时，人们越来越多地意识到，医疗卫生制度由于其传承下来的组织构造而无法适应新的变化。对此，我们对欧盟各成员国的关键人群进行了调查。本文将公布调查结果，并探究各国关于公立医院及非营利性私立医院的资金筹措和计划的现行措施和未来构想。本文还将阐述私有资金参与合股的四种现有的基本模式：私有资金直接贷款给医院；私有资金贷款给地方的医疗卫生机构；私有成分参与建立、设计、行使非医疗职能的PPP模式；私有成分参与整个医院的运行管理包括享有医疗职能的PPP模式。目前，要断定这些新的医院运作模式将比那些将被代替的模式更为成功还为时尚早。     

生长分化因子-5诱导小鼠骨髓基质干细胞向软骨分化过程中对缝隙连接蛋白43表达的影响

目的探讨生长分化因子-5(GDF-5)在小鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)向软骨分化过程中对缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法体外培养小鼠BMSCs,贴壁细胞传代,取第3代细胞,加入地塞米松、VitC、胰岛素和GDF-5诱导培养,72 h后免疫细胞化学和阿尔辛蓝染色分别检测软骨细胞特异性Ⅱ型胶原和蛋白多糖的表达；在诱导24、48和72 h后进行如下检测：MTT法测定GDF-5对小鼠BMSCs增殖的影响；RT-PCR、Western blotting和免疫细胞化学法检测GDF-5对Cx43蛋白表达的影响。结果MTT结果显示不同时间GDF-5对小鼠BMSCs的增殖无影响；RT-PCR、Western blotting和免疫细胞化学结果表明诱导后不同时间均有Cx43 mRNA和蛋白的表达；诱导72 h免疫细胞化学显示有Ⅱ型胶原蛋白的表达,阿尔辛蓝染色阳性,有蛋白多糖基质的分泌。结论GDF-5可以通过上调缝隙连接蛋白Cx43的表达来促进小鼠BM- SCs向软骨方向的分化。     

后外侧入路手术治疗儿童胸腰段不稳定性椎体骨折伴不完全性脊髓损伤

不稳定性脊柱骨折最常采用前侧入路手术,这种方法适用于颈、胸和腰椎骨折的病人,而胸腰段椎体正好位于胸腹腔的交界处,该区域的暴露相当困难。前外侧入路途径虽然能够很好地显露胸腰椎,但是操作复杂且对组织的损伤较大。该研究探讨后外侧入路手术(PLA)在治疗儿童胸腰段不稳定性椎体骨折中的价值、适应证和临床效果。自1990年至2000年采用PLA对14例儿童胸腰段不稳定性椎体骨折进行手术,术中采用单侧或双侧椎管减压和C-D器械内固定。将病人分为四组:第1组4例(Frankel E级),均无神经损害的表现,其中2例T_(12)骨折,1例L_1骨折,1例L_1和L_2骨     

软骨分化形成蛋白-2体外诱导小鼠骨髓基质干细胞向软骨分化

目的 研究软骨分化形成蛋白-2(CDMP-2)对小鼠骨髓基质干细胞软骨分化的作用.方法 体外培养小鼠骨髓基质干细胞(MSCs),贴壁细胞传代,取第3代细胞,以不同浓度(0、10、20、50、100 ng/ml)CDMP-2因子干预培养14d后,倒置相差显微镜观察细胞形态,RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学法检测不同浓度CDMP-2对Ⅱ型胶原表达的影响,阿尔辛蓝(Alcian)染色蛋白多糖.结果 RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学显示经CDMP-2因子干预后,MSCs有Ⅱ型胶原mRNA和蛋白的表达,呈剂量依赖性;Alcian染色结果显示CDMP-2诱导细胞分泌蛋白多糖基质,高浓度组可见细胞小结区域呈明显的异染性.结论 CDMP-2能够在体外定向诱导小鼠骨髓基质于细胞向软骨方向分化,50～100 ng/ml为最佳剂量,为进一步探讨其在软骨发育机制中的作用提供了实验基础.