人Mcl-1基因启动子区结合蛋白的生物信息学分析

目的:对人Mcl-1基因启动子区结合蛋白进行生物信息学分析。方法:从Gene Bank数据库中获取人Mcl-1基因5'调控区,使用在线软件JASPAR对该序列可能存在的转录因子结合位点进行预测。结果:Relative profile score threshold在85%、90%、95%和100%时,该序列存在1700、1147、368和32个可能的转录因子结合位点,包含Arid3a,Atoh1,ETV6,Gata1,GATA3,KLF5,LMX1A,LMX1B,MZF1,Prrx2,SPI1,TBX4,USF1,YY1,ZEB1等。结论:人Mcl-1基因5'调控区存在多种转录因子的结合位点,这些转录因子大多与肿瘤发生,红细胞生成及神经发育等有关。     

比索洛尔辅治老年心力衰竭的疗效及对血浆中NT-proBNP和hs-CRP水平的影响

目的探讨比索洛尔治疗老年心力衰竭患者的临床疗效及对血浆中N端脑钠肽前体(NT-pro BNP)和高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平的影响。方法选取2013年6月至2014年6月在鞍山市灵山医院诊治的116例老年慢性心力衰竭患者为研究对象,根据随机抽签法分为观察组和对照组,各58例。两组均采取卧床休息、吸氧、醛固酮拮抗剂、血管紧张素转换酶抑制剂/血管紧张素受体阻断剂、利尿剂、强心剂等常规性治疗。观察组在常规治疗的基础上采用比索洛尔递增剂量治疗,达到维持剂量,共治疗3个月。比较治疗前、治疗3个月后两组患者血浆中NT-pro BNP和hs-CRP的水平以及治疗后心脏功能的疗效。结果治疗3个月后,观察组心率、NT-pro BNP和hs-CRP低于对照组[(64±5)次/min比(74±5)次/min,(240±124)ng/L比(421±105)ng/L,(4.2±1.3)mg/L比(7.8±1.7)mg/L],差异有统计学意义(P<0.05)。观察组总有效率高于对照组[94.8%(55/58)比79.3%(46/58)],差异有统计学意义(P<0.05)。结论比索洛尔辅治老年心力衰竭的临床疗效有优势,而且能有效降低血浆中NT-pro BNP和hs-CRP的水平,适合临床积极采用。     

N-乙酰半胱氨酸雾化吸入对婴幼儿支气管肺炎患儿免疫功能及预后的影响

目的探讨N-乙酰半胱氨酸雾化吸入对婴幼儿支气管肺炎患儿免疫功能及预后的影响。方法选取2010年3月至2013年3月府谷县人民医院儿科收治的180例婴幼儿支气管肺炎患儿,按照随机数字表法分为观察组和对照组,各90例。两组均给予常规抗感染、平喘、退热治疗,并实施雾化吸入。观察组加用N-乙酰半胱氨酸300 mg雾化吸入,每日2次。对照组患儿加用盐酸氨溴索300 mg雾化吸入,每日2次。疗程均为7 d。比较两组患儿免疫功能变化及临床预后。结果两组患儿治疗后Ig A、Ig G、补体C3水平均较治疗前显著升高,观察组Ig A、Ig G显著高于对照组[(9.2±2.6)g/L比(8.0±1.9)g/L、(1.2±0.5)g/L比(1.0±0.4)g/L,P<0.01]。两组患儿治疗后CD3、CD4、CD4/CD8水平均显著高于治疗前,CD4显著低于治疗前,治疗后观察组CD3、CD4、CD4/CD8显著高于对照组[(65±6)%比(63±6)%,(39±4)%比(36±4)%,1.60±0.31比1.31±0.35,P<0.05或P<0.01],CD8显著低于对照组[(25±3)%比(26±3)%,P<0.05]。观察组发热、咳嗽、湿啰音、气喘、肺部X线阴影等症状消失时间均显著短于对照组[(2.1±0.5)d比(2.6±0.4)d,(4.2±0.3)d比(5.5±0.3)d,(5.5±0.3)d比(6.9±0.5)d,(3.7±0.6)d比(5.2±0.5)d,(5.7±0.4)d比(6.1±0.5)d,P<0.01]。观察组总有效率为95.6%(86/90),对照组为83.3%(75/90),观察组总有效率显著高于对照组(P<0.01)。结论常规治疗基础上加用N-乙酰半胱氨酸雾化吸入能有效调节支气管肺炎患儿细胞免疫与体液免疫紊乱状态,及时改善其临床症状,对患儿预后及生长发育均具有积极意义,值得推广应用。     

心钠素水平检测对慢性肺源性心脏病患者的临床意义

目的探讨检测心钠素水平(atrial natriuretic peptide,ANP)在慢性肺源性心脏病(chronic pulmonary heart disease,CPHD)诊治中的临床意义。方法选择2012年5月至2014年5月在我院接受治疗的CPHD患者50例,为观察组。选择同期的健康体检者50例为对照组,并对观察组进行为期15天的常规治疗。检测并记录观察组在急性加重期和缓解期内以及对照组的ANP、N-脑钠肽前体(N-brain natriuretic peptide precursor,NT-pro BNP)、肺动脉收缩压(pulmonary arterial systolic pressure,SPAP)、动脉血氧分压(arterial partial pressure of oxygen,Pa O2)、最大呼气中段流量(maximal midexpiratrary flow curve,MMEF)、一秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second,FEV1)各水平,并进行统计学分析。结果观察组患者ANP水平明显高于对照组,且差异有统计学意义(P0.05);观察组在急性加重期的ANP水平明显高于缓解期,且差异有统计学意义(P0.05);观察组中,ANP水平与NT-pro BNP和SPAP个水平均呈正相关,ANP水平与Pa O2、MMEF以及FEV1各水平呈负相关,且差异具有统计学意义(P0.05)。结论 ANP是CPHD诊断治疗的灵敏标志物,测定ANP对CPHD的诊断有诊断价值,对患者预后具有一定意义。     

N-乙酰半胱氨酸治疗COPD合并肺结核临床观察

目的：评价N-乙酰半胱氨酸（NAC）对慢性阻塞性肺疾病（COPD）合并肺结核患者肺功能、细胞免疫功能和生活质量的影响。方法：93例患者随机分为对照组47例和观察组46例，对照组予常规治疗，观察组加服NAC，6个月为一个疗程。比较抗结核作用、肺功能、细胞免疫功能和生活质量，记录不良反应。结果：治疗后，与对照组相比，观察组肺功能指标FEV₁/FVC和PEF，CD4+T、CD4+Foxp3+调节性T细胞亚群比例明显升高，CD4+/CD8+和SGRQ问卷中症状、活动、影响维度评分明显降低，组间均有显著性差异（P<0.05）。其余指标组间无差异。结论：NAC可明显改善COPD合并肺结核患者的肺功能、细胞免疫功能和生活质量，值得临床推广。     

N-乙酰-5-羟色胺对视网膜缺血-再灌注损伤大鼠视网膜 Fas、FasL 蛋白表达的影响

目的　探讨N-乙酰-5-羟色胺（N-acetylserotonin，NAS）对视网膜缺血-再灌注损伤（retina ischemia-reperfusion injury，RIRI）大鼠视网膜Fas、FasL蛋白表达的影响。方法　取健康成年Sprague Dawley大鼠54只，将大鼠随机分为正常组（6只）、RIRI组（24只）与NAS组（24只）；采用高眼压法建立大鼠RIRI模型，依据造模后不同时间点将RIRI组与NAS组大鼠又分为6 h、12 h、24 h及72 h四个亚组。NAS组于造模前30 min腹腔注射NAS（5 mg·kg^-1），RIRI组腹腔注射等剂量的生理盐水。通过HE染色在光学显微镜下观察各组大鼠视网膜形态学变化，并记录各组大鼠视网膜厚度及视网膜神经节细胞数，采用免疫组织化学染色法检测NAS对RIRI大鼠视网膜Fas、FasL蛋白表达的影响。结果　HE染色显示，正常组大鼠视网膜各层细胞分界清晰，形态正常，神经细胞排列整齐；RIRI组大鼠再灌注后6 h视网膜各层出现水肿，以神经节细胞层及内核层较显著，神经节细胞数较正常组减少；随后视网膜水肿进一步加重，神经节细胞继续减少；NAS组大鼠在再灌注后6 h、12 h、24 h 视网膜水肿程度较 RIRI组轻，NAS组在再灌注后72 h视网膜厚度较 RIRI组厚，NAS组各时间点神经节细胞数均较 RIRI组多，差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。免疫组织化学染色显示，正常组几乎未见 Fas⁺细胞。再灌注后6 h，RIRI组视网膜神经节细胞及内核层开始出现少量 Fas⁺细胞；再灌注后12 h，RIRI组视网膜 Fas⁺细胞表达逐渐增多；再灌注后24 h视网膜Fas⁺细胞数达到高峰，棕色阳性染色细胞分布在视网膜神经节细胞层、内丛状层、内核层及神经纤维层；再灌注后 72 h 视网膜 Fas⁺细胞较再灌注后 24 h 减少。NAS组在再灌注后6 h、12 h、24 h、72 h 视网膜 Fas⁺细胞数均较 RIRI组各时间点减少，再灌注后24 h，Fas⁺细胞数达较高水平，随后下降，差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。正常组视网膜可见 FasL 全层低表达。RIRI组再灌注后 6 h，视网膜神经节细胞层和神经纤维层存在少量 FasL⁺细胞；再灌注后12 h FasL蛋白表达逐渐增多；再灌注后24 h FasL⁺细胞数达高峰，可见深棕色的细胞膜及细胞质染色细胞分布在视网膜神经节细胞层、内丛状层、内核层及神经纤维层；再灌注后72 h FasL蛋白的阳性表达逐渐减少。NAS组再灌注后6 h、12 h、24 h、72 h 视网膜FasL⁺细胞数均少于 RIRI组各时间点阳性细胞数，差异均有统计学意义（均为P＜0.05）。结论　NAS可通过抑制RIRI大鼠视网膜细胞Fas、FasL蛋白的表达，减轻缺血再灌注对大鼠视网膜细胞造成的损伤。     

某院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌耐药基因分析

目的研究某院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)在细菌耐药方面的分子流行病学特征,为CRE的防控提供依据。方法收集某院2013—2017年细菌室保存的CRE,对其进行多位点序列分型(MLST)、药敏试验、全基因序列测定,选取部分CRE中携带的碳青霉烯耐药基因进行基因环境分析。结果共收集62株CRE,成功复活51株;其中耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)30株,耐碳青霉烯类大肠埃希菌(CREC)9株,耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌(CRECL)6株,耐碳青霉烯类其他肠杆菌6株。CRKP MLST主要包括3株ST147、2株ST11;CREC MLST主要包括3株ST167;CRECL MLST主要包括3株ST93、2株ST88。51株CRE对氨苄西林、头孢噻肟的耐药率最高,均为100%。耐碳青霉烯类耐药基因分布:1株携带blaKPC-2,14株携带blaIMP-4,18株携带blaNDM-1,22株携带blaNDM-5,2株携带blaNDM-9,10株携带blaOXA-1,10株携带blaOXA-10,2株携带blaOXA-23,2株携带blaOXA-66。分析blaNDM-1、blaNDM-5、blaNDM-9、blaIMP-4不同菌种的基因环境,发现几种耐药基因各自的基因环境都与已报道的基因环境相似,无明显的菌种间差异性。结论耐药基因通过水平传播能稳定存在于不同的CRE菌株中,对医院感染防控造成一定的威胁。     

醛糖还原酶和晚期糖基化终末产物受体对糖尿病视网膜病变神经元凋亡的影响

目的　探究醛糖还原酶和晚期糖基化终末产物受体对糖尿病视网膜病变神经元凋亡的影响。方法　Wistar大鼠36只，随机分为对照组、模型组、转染组，后两组建立糖尿病大鼠模型。模型建立成功后，构建含有晚期糖基化终末产物受体siRNA的质粒并利用慢病毒转染入转染组大鼠体内。造模后4周、8周、12周，记录各组大鼠体质量及空腹血糖。造模后9周，禁食6 h，测定口服葡萄糖耐量。造模后12周，处死全部大鼠后，TUNEL法检测各组大鼠视网膜神经元凋亡情况，荧光分光光度计测定醛糖还原酶活性，Western blotting法测定晚期糖基化终末产物受体的表达，RT-PCR检测视网膜中Bcl-2和Bax mRNA相对表达量。结果　造模后4周、8周、12周，转染组和模型组的大鼠体质量均低于对照组（均为P<0.05）；造模后12周，转染组大鼠体质量高于模型组（P<0.05）。造模后4周、8周、12周，各组内大鼠空腹血糖水平均无明显变化（均为P>0.05），转染组和模型组大鼠的空腹血糖水平均高于对照组（均为P<0.05）。模型组和转染组大鼠在口服葡萄糖后30 min时，血糖水平均高于对照组（均为P<0.05）；在120 min时分别下降至最低，但仍高于对照组（均为P<0.05）。模型组和转染组的视网膜神经元凋亡指数、醛糖还原酶活性、晚期糖基化终末产物受体和Bax mRNA相对表达量均高于对照组（均为P<0.05），且转染组均高于模型组（均为P<0.05）。模型组和转染组的Bcl-2 mRNA相对表达量均低于对照组（均为P<0.05），转染组低于模型组（P<0.05）。结论　晚期糖基化终末产物结合受体后产生大量的氧自由基损伤，可能是导致糖尿病视网膜神经元凋亡，进而导致糖尿病视网膜病变发生的机制之一。     

长期负性情绪应激对D-gal大鼠认知功能及海马NR2B基因甲基化表达的影响

目的探讨长期负性情绪应激对大鼠脑老化进程的影响机制。方法将雌雄各半的70只Wistar大鼠分别采用随机方法,分为空白对照组、D-gal脑老化模型组、应激脑老化组,每组14只且雌雄各半,其余大鼠做为攻击鼠参与负性情绪应激的诱导;采用颈后部皮下多点注射D-gal 0.1g/(kg·d)制备脑老化大鼠模型;采用不可预知性刺激,诱导应激脑老化组大鼠长期负性情绪应激;采用Morri′s水迷宫实验记录大鼠水下寻台时间(SPL),评价大鼠学习记忆功能;采用ELISA测定大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(CORT)含量;采集大鼠海马样本制备匀浆,采用甲基化特异性PCR法(MSP)检测海马N-甲基-D-天门冬氨酸受体-2B亚型(NR2B)基因调控区胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤位点(CpG)甲基化程度,采用ELISA法测定甲基化转移酶1(DNMT1)活性。结果与D-gal脑老化模型组比较,应激脑老化组大鼠的SPL明显延长,NR2B基因启动子区CpG甲基化程度及DNA DNMT1活性显著增高(P0.05),血浆CORT、ACTH水平显著升高(P0.05)。结论长期情绪调节不良能够加速机体大脑老化进程,其机制可能与慢性情绪应激引发机体特定基因甲基化程度增高有关。