醛糖还原酶和晚期糖基化终末产物受体对糖尿病视网膜病变神经元凋亡的影响

目的　探究醛糖还原酶和晚期糖基化终末产物受体对糖尿病视网膜病变神经元凋亡的影响。方法　Wistar大鼠36只，随机分为对照组、模型组、转染组，后两组建立糖尿病大鼠模型。模型建立成功后，构建含有晚期糖基化终末产物受体siRNA的质粒并利用慢病毒转染入转染组大鼠体内。造模后4周、8周、12周，记录各组大鼠体质量及空腹血糖。造模后9周，禁食6 h，测定口服葡萄糖耐量。造模后12周，处死全部大鼠后，TUNEL法检测各组大鼠视网膜神经元凋亡情况，荧光分光光度计测定醛糖还原酶活性，Western blotting法测定晚期糖基化终末产物受体的表达，RT-PCR检测视网膜中Bcl-2和Bax mRNA相对表达量。结果　造模后4周、8周、12周，转染组和模型组的大鼠体质量均低于对照组（均为P<0.05）；造模后12周，转染组大鼠体质量高于模型组（P<0.05）。造模后4周、8周、12周，各组内大鼠空腹血糖水平均无明显变化（均为P>0.05），转染组和模型组大鼠的空腹血糖水平均高于对照组（均为P<0.05）。模型组和转染组大鼠在口服葡萄糖后30 min时，血糖水平均高于对照组（均为P<0.05）；在120 min时分别下降至最低，但仍高于对照组（均为P<0.05）。模型组和转染组的视网膜神经元凋亡指数、醛糖还原酶活性、晚期糖基化终末产物受体和Bax mRNA相对表达量均高于对照组（均为P<0.05），且转染组均高于模型组（均为P<0.05）。模型组和转染组的Bcl-2 mRNA相对表达量均低于对照组（均为P<0.05），转染组低于模型组（P<0.05）。结论　晚期糖基化终末产物结合受体后产生大量的氧自由基损伤，可能是导致糖尿病视网膜神经元凋亡，进而导致糖尿病视网膜病变发生的机制之一。     

长链非编码RNA 母系表达基因3调控miR-34a对糖尿病视网膜病变Müller细胞活化及炎症因子分泌的影响

目的　探讨母系表达基因3（maternally expressed gene 3,MEG3）对糖尿病视网膜病变（DR）Müller细胞的活化及炎症因子分泌的影响及机制。方法　高脂饮食联合链脲佐菌素腹腔注射构建小鼠DR体内模型。高糖刺激人视网膜Müller细胞株MIO-M1构建DR体外模型。免疫荧光化学染色及Western blot检测小鼠视网膜及Müller细胞中胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。Western blot及酶联免疫吸附实验（ELISA）检测小鼠视网膜及细胞培养基上清中血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达。ELISA检测小鼠视网膜及细胞培养基上清中IL-1β蛋白的表达。分别或同时向Müller细胞中转染pcDNA-MEG3及miR-34a mimic对其表达进行干预。qRT-PCR检测MEG3 mRNA及miR-34a表达。结果　与正常对照组小鼠比较,DR组小鼠视网膜中GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达均增多（均为P<0.05）,MEG3 mRNA表达降低(P<0.01)。与对照组比较,高糖组Müller细胞中MEG3 mRNA表达降低(P<0.01),而GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达均升高（均为P<0.05）。与高糖组比较,高糖+pcDNA-MEG3组中GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达均降低（均为P<0.05）。与正常对照组比较,DR组小鼠视网膜及高糖刺激的Müller细胞中miR-34a表达均升高(均为P<0.05)。与pcDNA组比较,pcDNA-MEG3组中miR-34a表达减少(P<0.01)。与pcDNA+NC mimic组比较,pcDNA+miR-34a mimic组中GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达均升高（均为P<0.05）,而pcDNA-MEG3+NC mimic组中GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达均减少（均为P<0.05）。与pcDNA-MEG3+miR-34a mimic组比较,GFAP、VEGF及IL-1β蛋白表达水平均升高（均为P<0.05）。结论　MEG3在DR小鼠视网膜及高糖刺激的Müller细胞中表达均降低,其可通过负向调控miR-34a抑制Müller细胞活化及炎症因子的分泌。过表达MEG3可能成为DR治疗的新靶点。     

锰离子滴眼液局部应用对眼前节组织的毒性作用

背景 锰离子滴眼液用于活体视觉传导通路的示踪观察方法已有研究,但锰离子局部点眼对眼前节组织的毒性作用尚无深入研究. 目的 研究不同质量浓度锰离子滴眼液对兔眼眼前节组织的毒性作用.方法 选取32只清洁级新西兰白兔,按照随机数字表法随机分为1.00 mol/L MnCl2组、0.50 mol/LMnCl2组、0.25 mol/L MnCl2组以及对照组,每组8只.采用抽签法随机选择动物一侧眼为实验眼,按照分组情况分别用1.00、0.50、0.25 mol/L锰离子滴眼液及生理盐水各1滴点于结膜囊中,分别于点眼后2h及1、3、7、14、21和28 d时在裂隙灯显微镜下观察眼局部刺激反应;用角膜荧光素染色法观察角膜上皮损伤情况并进行评分;采用角膜内皮镜观察角膜内皮细胞密度(ECD)和角膜厚度,并于点眼后3、7、14、28 d行苏木精-伊红染色,检查结膜、角膜、小梁网及睫状体的组织病理学变化.结果 1.00 mol/L MnCl2组和0.50 mol/L MnCl2组兔眼均出现睑结膜充血、水肿及大量分泌物等刺激症状,1.00 mol/L MnCl2组兔眼于点眼后1d刺激反应最强,点眼后7d反应消失;0.50 mol/L MnCl2组兔眼眼表刺激反应程度轻于1.00 mol/L MnCl2组,持续到点眼后3 d;0.25 mol/L MnCl2组兔眼点眼后未见明显的眼表刺激反应.点眼后2h、1d、3d及7d,各组兔眼角膜上皮荧光素染色评分总体比较差异均有统计学意义(x2=17.350、19.200、12.200、10.140,均P＜0.05).各组兔眼点眼后不同时间点ECD总体比较差异无统计学意义(F分组=0.38,P＞0.05;F时间=1.79,P＞0.05).各组兔眼点眼后不同时间点角膜厚度总体比较差异有统计学意义(F分组=18.22,P＜0.05;F时间=116.75,P＜0.05)点眼后2h～3d,1.00 mol/L MnCl2组兔眼角膜厚度值明显增加,但点眼后7～28 d,各组兔眼角膜厚度值接近,点眼后2h～14d角膜厚度值均明显高于点眼后28 d,0.50 mol/L MnCl2组兔点眼后2h～1d角膜厚度值明显高于点眼后28 d,差异均有统计学意义(均P＜0.05).组织病理学检查结果显示,1.00 mol/L MnCl2组兔眼于点眼后3d和7d可见结膜、小梁网和睫状体的炎性细胞浸润及角膜基质水肿,0.50 mol/L MnCl2组于点眼后3d可见结膜炎性细胞浸润,但角膜、小梁网和睫状体组织未见明显异常,而0.25 mol/L MnCl2组兔眼点眼后结膜、角膜、小梁网和睫状体均未见明显异常.结论 1.00 mol/L锰离子滴眼液对兔眼眼前节有明显毒性作用,0.50 mol/L锰离子滴眼液的毒性则明显降低,0.25 mol/L锰离子滴眼液对兔眼眼前节无明显的毒性作用.     

视力良好患者磁性眼内异物摘出方法的探讨

目的 探讨术前视力良好者不同方式经玻璃体磁性眼内异物摘出的效果.方法 46例（46只眼）磁性眼内异物者为研究对象,患眼屈光间质透明,术前矫正视力≥0.6,检眼镜下可见异物位于玻璃体腔或附着于视网膜,于伤后第2～6天手术.A组：12只眼,行导光纤维下单纯眼内异物摘出;B组：15只眼,行局限性玻璃体切除及眼内异物摘出;C组：19只眼,行玻璃体全切除及眼内异物摘出.术中进行局部视网膜光凝.结果 46例异物均顺利摘出.术后3个月：A组矫正视力均≥0.6,无视网膜脱离等并发症发生;B组13例视网膜平伏,矫正视力≥0.6,2例发生视网膜脱离;C组15例视网膜平伏,矫正视力≥0.6,4例发生视网膜脱离.结论 对于术前视力良好的磁性眼内异物,进行异物摘出时可选择导光纤维下单纯眼内异物摘出术.     

雷珠单抗联合光动力疗法对年龄相关性黄斑变性CNV的治疗效果

目的:探讨雷珠单抗联合光动力疗法治疗年龄相关性黄斑变性对脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)渗漏及视力的影响.方法:选取2012-01/2015-12在我院接受治疗的78例86眼年龄相关性黄斑变性患者作为研究对象,采用随机数字表分为联合组(雷珠单抗联合光动力疗法)39例42眼、对照组(单用雷珠单抗治疗)39例44眼,对比两组患者治疗前后的视力、CNV渗漏情况变化.结果:治疗后第6、12wk,联合组患者的最佳矫正视力(best corrected visual acuity,BCVA)测定值均大于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);联合组患者的黄斑中心凹视网膜厚度(central macular retinal thick,CRT)测定值均小于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗12wk后,联合组的CNV渗漏治疗总有效率(90%)与对照组(82%)比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:雷珠单抗联合光动力疗法治疗年龄相关性黄斑变性对CNV渗漏、视力及CRT均具有较好的改善作用.     

泪腺窝微骨孔固定泪腺治疗泪腺脱垂临床探讨

目的 探讨采用眶骨造孔法将泪腺经泪腺窝微骨孔原位固定治疗泪腺脱垂的临床疗效.方法 回顾性分析24例48只眼泪腺脱垂患者,经重睑皮肤切口,采用颞上方眶骨缘造孔法,将泪腺组织经微骨孔固定于泪腺窝,分析影像学及眼部外观改变,评价泪腺的复位情况,分析术前术后泪液分泌试验、泪膜破裂时间,观察泪腺功能的改变.术后随访6～24个月(平均12个月).结果 术后影像学显示所有24例48只眼的泪腺解剖复位率100％,随访期间均无泪腺脱垂复发,上睑外侧臃肿消失,重睑形成良好,眼部外观满意.术前术后Schirmer试验、泪膜破裂时间(BUT)差异无统计学意义(P＞0.05),所有24例48只眼均无干眼症状.结论 经重睑皮肤切口行泪腺窝眶骨造孔固定泪腺治疗泪腺脱垂,泪腺解剖复位良好,不易复发,重睑形成自然,对泪腺功能损伤小,值得临床推广.     

MMP-9、GA、HbA1c和脂肪因子水平与DR的相关性分析

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、糖化白蛋白(GA)、糖化血红蛋白(HbA1c)和脂肪因子(包括内脂素、抵抗素和瘦素)与糖尿病视网膜病变(DR)的相关性.方法:选取2015-03/2017-03在我院治疗的DR患者74例148眼,其中非增生性糖尿病视网膜病变患者(NPDR)40例80眼,增生性糖尿病视网膜病变患者(PDR)34例68眼,同时选取非DR单纯糖尿病患者(NDR)40例80眼以及健康志愿者40例80眼作为对照,检测各组MMP-9、GA、HbA1 c、内脂素、抵抗素和瘦素水平.结果:PDR组内脂素为4.41±0.82ng/mL,明显低于NPDR组、NDR和对照组(P<0.05),而抵抗素、瘦素和MMP-9分别为9.01±1.04 ng/mL、17.96±2.03μg/L和740.06±84.43μg/L,GA和HbA1c分别为26.14%±4.57%、17.60%±1.91%,明显高于NPDR组、NDR组和对照组(P<0.05);NPDR组内脂素为6.44±0.79ng/mL,明显低于NDR和对照组(P<0.05),而抵抗素、瘦素和MMP-9分别为7.80±0.87 ng/mL、15.68±1.98μg/L、634.12±80.22μg/L,GA和HbA1c分别为22.06%±4.38%、12.46%±1.69%,明显高于NDR组和对照组(P<0.05);MMP-9、GA、HbA1c与DR水平呈正相关(rs=0.523、0.461、0.414,P<0.05);内脂素与DR呈负相关(rs=-0.433,P<0.05),抵抗素和瘦素与DR水平呈正相关(rs=0.401、0.460,P<0.05).结论:MMP-9、GA、HbA1 c和脂肪因子可能在DR发生发展中有一定作用,其中MMP-9和脂肪因子有相关性,两者与GA、HbA1 c水平无明显关系.     

可吸收性巩膜外垫压材料的实验研究

目的 探讨聚己内酯作为可吸收性巩膜外垫压材料的可行性.方法 将24只青紫兰兔随机分为4组,左眼为实验眼,将聚己内酯固定于巩膜壁行常规巩膜外垫压术；右眼为对照眼植入硅胶海绵.A、B、C、D4组分别于术后4周、8周、12周、16周行眼部B超检查,测量巩膜嵴高度；行大体标本和组织切片检查,观察植入后炎症反应情况.采用重量、分子量指标观察聚己内酯植入后4周、8周、12周、16周的降解情况.结果 术后无一例发生植入物感染或脱出现象.聚己内酯外垫压材料在实验阶段内维持足够的巩膜嵴高度,平均约2.2 mm.植入物周围炎症反应与硅胶海绵相近,且炎症反应不因聚己内酯降解而加剧.聚己内酯在实验阶段内仅分子量下降,而重量无明显改变.结论 聚己内酯作为可吸收性巩膜外垫压材料效果确切、安全可靠,有可能成为一种新型的的可吸收性材料应用于临床.     

高度近视对糖尿病豚鼠视网膜血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子表达的影响

背景 研究发现糖尿病合并高度近视患者较少发生糖尿病视网膜病变（DR）,高度近视对DR的发生和发展可能具有保护作用.DR的主要病理基础是新生血管的形成,而血管内皮生长因子（VEGF）和色素上皮衍生因子（PEDF）在DR的发生和发展过程中具有重要作用. 目的 观察高度近视合并糖尿病豚鼠视网膜中VEGF和PEDF表达的变化,探讨高度近视对DR的影响.方法 将出生3d的豚鼠48只采用随机数字表法随机分为正常对照组、高度近视组、糖尿病组和糖尿病合并高度近视组,每组12只.高度近视组豚鼠用半透明眼罩行右眼遮盖,构建高度近视动物模型;采用60 mg/kg的链脲佐菌素（STZ）腹腔内注射4次,每3天1次,制作糖尿病豚鼠模型;糖尿病合并高度近视组豚鼠采用半透明眼罩联合STZ制作糖尿病合并高度近视模型.造模成功后行常规苏木精-伊红染色观察视网膜结构,免疫组织化学染色检测视网膜中VEGF和PEDF的表达情况,应用Biosens数字成像分析系统分析阳性反应部位的平均吸光度（A）值. 结果 正常对照组、高度近视组、糖尿病组和糖尿病合并高度近视组的屈光度分别为（＋0.25±177;0.07）、（-7.50±177;0.04）、（＋0.25±177;0.03）和（-7.50±177;0.02）D;空腹血糖分别为（5.3±177;0.1）、（5.1±177;0.2）、（19.7±177;0.4）和（18.5±177;0.3）mmol/L.各组豚鼠均造模成功.与正常对照组相比,高度近视组视网膜组织变薄,神经节细胞数目减少;糖尿病组视网膜组织结构疏松、肿胀;糖尿病合并高度近视组视网膜组织变薄,结构肿胀.正常对照组、高度近视组、糖尿病组和糖尿病合并高度近视组VEGF阳性反应部位平均A值分别为128.61 ±177;5.57、118.24±177;2.59、155.60±177;9.70和135.15±177;5.22,各组间总体比较差异有统计学意义（F=17.365,P=0.032）,其中糖尿病合并高度近视组豚鼠视网膜中VEGF表达水平（A值）明显低于糖尿病组,差异有统计学意义（t=5.210,P＜0.05）;PEDF阳性反应部位平均A值分别为145.57±177;8.35、149.54±177;6.20、127.71 ±177;2.45和1 37.53±177;7.38,各组间总体比较差异有统计学意义（F=19.210,P=0.019）,其中糖尿病合并高度近视组豚鼠视网膜中PEDF水平明显高于糖尿病组,差异有统计学意义（t=4.521,P＜0.05）.结论 高度近视合并糖尿病的豚鼠视网膜中VEGF表达量下调,而PEDF表达上调,这可能是高度近视眼不易发生DR的主要机制.     

磁共振扩散张量成像在眼科的应用

磁共振扩散张量成像是一种基于分子水平上定量的功能磁共振成像技术,它能够在活体神经组织显示白质纤维束的走行、方向、排列、紧密度、髓鞘化等信息.目前磁共振扩散张量成像在眼科主要应用于视神经病变(缺血、外伤、视神经炎等)、青光眼视路病变、弱视及视觉发育等方面的研究.本文就磁共振扩散张量成像的原理及其在眼科应用及研究现状作一综述.