大蒜油静脉注射乳剂指纹图谱及指标成分含量测定方法研究

目的:建立大蒜油静脉注射乳剂指纹图谱及指标成分含量测定的方法。方法:采用气相色谱(GC)法测定大蒜油静脉注射乳剂指纹图谱及制剂中大蒜素含量。色谱柱为HP-5(30m×320μm×0.25μm),进样口温度为250℃,柱温为60～220℃,程序升温,载气为N2,流速为1.0mL·min-1,FID检测器,检测室温度为300℃,以四氢呋喃为内标。结果:大蒜素检测浓度在0.05～2.4mg·mL-1范围内同其与内标峰面积比呈良好线性关系(r=0.9998);平均回收率为102.5%(RSD=0.41%,n=9)。大蒜油静脉注射乳剂指纹图谱确定共有峰17个,日内相对保留时间和相对峰面积的RSD分别小于0.05%和8%,室温放置48h后相对保留时间和相对峰面积的RSD分别小于0.08%和15%,重复性试验相对保留时间和相对峰面积的RSD分别小于0.04%和8%。结论:大蒜油静脉注射乳剂指纹图谱及含量测定方法准确可靠、简便可行,能有效控制大蒜油静脉注射乳剂的质量。     

Modulation of tnf-α-induced icam-1 expression,no and h<Subscript>2</Subscript>0<Subscript>2</Subscript> production by alginate,allicin and ascorbic acid in human endothelial cells

Plant nutrients are believed to provide protection against various diseases including inflammation. Since interactions of the cell adhesion molecules are known to play important roles in mediating inflammation, inhibiting adhesion protein upregulation is a possible therapeutic target. In this study, the interacellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) was induced in human umbilical endothelial cells (HUVECs) after stimulation with TNF-alpha. In addition, alginate, ascorbic acid and allicin were demonstrated to inhibit the TNF-alpha induced expression of ICAM-1 on the HUVECs in a dose-dependent manner. These compounds also inhibited the production of NO and H2O2 induced by TNF-alpha, which suggests that the inhibition of ICAM-1 expression by the three compounds may be due to the modulated production of the reactive oxygen/nitrogen components. Overall, these results indicate that these dietary components have a therapeutic potential in the treatment of various inflammatory disorders associated with an increase in endothelial leukocyte adhesion molecules.     

大蒜素对小鼠S180的抑制作用及NK细胞活性的影响

以小鼠Ｓ１８０为动物模型，观察大蒜素对其抑制作用。大蒜素腹腔注射，连续５天，当大蒜素分别给予２５ｍｇ，ｋｇ＾－１，ｄ和５０ｍｇ，ｋｇ＾－１，ｄ时，则抑瘤率分别为３２．１８％（Ｐ〈０．０５）和５８．５２％，（Ｐ〈０．０１），进一步测定小鼠ＮＫ细胞活性，大蒜素组为５１．３２％，对照组为４４．２２％，两组比较差别不显著（Ｐ〉０．０５）。本文提示：大蒜素能有效的抑制小鼠Ｓ１８０的生长，但对小鼠ＮＫ细胞活性     

大蒜素对大鼠缺血再灌注肝脏损伤的保护作用

目的观察大蒜素对大鼠缺血再灌注肝脏损伤的保护作用。方法雄性SD大鼠,随机分为假手术组、缺血再灌注组(I/R组)和I/R加大蒜素处理组。肝脏缺血再灌注后,分别观察血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及乳酸脱氢酶(LDH)含量的变化,同时分析肝组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果肝脏缺血再灌注后,与假手术组比较,血清中ALT、AST、LDH及肝组织中MDA含量均显著增加,而SOD活性显著的降低(P<0.01);经大蒜素处理后,与缺血再灌注组相比较,血清中ALT、AST、LDH及肝组织中MDA含量均降低,而SOD活性增高(P<0.05)。结论大蒜素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有一定的保护作用。     

大蒜素对糖尿病高半胱氨酸血症大鼠脑干听觉诱发电位的影响

目的〓〖HTK〗观察大蒜素对糖尿病高半胱氨酸(Hcy)血症大鼠脑干听觉诱发电位的影响。〖HTW〗方法〓〖HTK〗从60只Wistar大鼠中随机抽取10只作为正常对照组，余下50只腹腔注射链脲佐菌素（STZ）造成糖尿病模型，取其中40只随机分为空白对照组、模型对照组、叶酸-VitB6组、大蒜素治疗组，每组10只。模型对照组、叶酸-VitB6组、大蒜素治疗组均给予高蛋氨酸饲料，制备糖尿病高Hcy血症模型；大蒜素治疗组每日给大蒜素8mg/kg腹腔注射；叶酸-VitB6组给予叶酸、维生素B6、维生素B12灌胃；喂养6周检测脑干听觉诱发电位(BAEP)后处死动物，采静脉血测血糖、Hcy水平。〖HTW〗结果〓〖HTK〗大蒜素治疗组的血糖、Hcy水平低于模型对照组（P均<0.01），且Hcy水平与正常对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）；大蒜素治疗组大鼠的BAEP各波峰潜伏期（PL）与正常对照组接近，且Ⅰ～Ⅲ波峰间潜伏期(IPL)和Ⅰ～Ⅴ IPL较空白对照组、模型对照组明显缩短差异具有统计学意义（P均<0.05）。〖HTW〗结论〓〖HTK〗大蒜素能有效治疗糖尿病高Hcy血症，改善糖尿病脑神经损害。     

大蒜素诱导LM-8细胞凋亡及相关基因表达的实验研究

目的:探讨大蒜素对C3H小鼠骨肉瘤细胞株LM-8细胞增殖的影响及与bcl-2、bax凋亡基因表达的关系,以初步探索其诱导凋亡的机制。方法:用水溶性四唑盐WST-8比色法检测大蒜素对LM-8细胞株生长的影响;倒置显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞调亡率的变化;免疫细胞组化技术检测bcl-2和bax基因表达。结果:大蒜素能明显抑制LM-8细胞的生长,与大蒜素的浓度和时间有关,在72h其药物半数抑制率浓度是11.09μg/ml;5μg/ml、10μg/ml和15μg/ml浓度的大蒜素作用72h后可诱导LM-8细胞凋亡(P<0.05);大蒜素可以降低bcl-2表达,增强bax表达,经15μg/ml大蒜素作用72h,bcl-2和bax基因表达阳性率及bcl-2/bax分别为(7.24±1.18)%(、47.56±7.43)%和0.15±0.02,对照组分别为(24.40±9.96)%、(11.28±1.31)%和2.18±0.93,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:大蒜素可以诱导LM-8细胞凋亡,其机制涉及到bcl-2表达上调及bax表达下调。     

大蒜素降血脂作用及其机理研究

目的：探讨大蒜素的降血脂作用及其机理。方法：将50只昆明种小鼠随机分成5组，对照组、高脂饲料组（模型组）、大蒜素小、中、大剂量＋高脂饲料组。测定大蒜素对血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）以及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的影响。测定大蒜素对血清卵磷脂胆固醇脂酰基转移酶（LCAT）、心肌脂蛋白脂酶（LPL）、肝脂酶（HL）活性的影响以及体外对肝脏3-羟基-3-甲基戊二酰CoA（HMG-CoA）还原酶活性的影响。离体胆固醇微胶粒形成实验。结果：大蒜素明显降低喂以高脂饲料小鼠血清TC，TG及LDL-C水平，提高HDL-C含量，且作用与大蒜素剂量呈正相关。大蒜素在不同程度上可升高血清LCAT，心LPL和HL的活性，并在一定程度上降低肝脏HMG-CoA还原酶活性。大蒜素体外实验可抑制胆固醇微胶粒的形成。结论：大蒜素有显著的降血脂效应，其机理一方面可能是促进了脂蛋白之间的代谢与转化，另外可能是因为抑制了肠道胆固醇的吸收、减少了肝脏胆固醇的合成、促进了血清和肝脏甘油三酯的分解。     

大蒜素协同抗癌药对肿瘤细胞杀伤作用的研究

目的:探讨大蒜素对人胃癌细胞系MGC-803和SGC-7901细胞周期的影响及其与周期特异性药物联合使用,增强抗癌药物对肿瘤细胞的杀伤作用.方法:苔盼蓝拒染法检测细胞增殖抑制率以观察大蒜素对胃癌细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪及瑞士-姬姆萨染色光镜观察检测细胞周期的改变;3μg/ml大蒜素与周期特异性抗癌药物博莱霉素A5和长春新碱联合使用,观察药物细胞毒活性的改变.结果:大蒜素可抑制MGC-803细胞生长,24h IC50为6.4μg/ml,也可抑制SGC-7901细胞的生长,24h IC50为7.3μg/ml;以3μg/ml、6μg/ml、9μg/ml终浓度大蒜素分别作用两种胃癌细胞系24h后,与对照组比较,G0/G1细胞周期百分率明显减少,而G2/M期明显增加(P＜0.01);6μg/ml大蒜素作用培养细胞24h后,与对照组比较细胞分裂指数明显增加.提示两种细胞系经大蒜素处理后,细胞周期阻滞于M期;大蒜素与两种抗癌药物联合使用,作用于MGC-803细胞,BLM A5和VCR的24h IC50值分别由单独应用的1.210μg/ml和0.125μg/ml下降到0.370μg/ml和0.031μg/ml,作用于SGC-7901细胞,BLM A5和VCR的24h IC50值分别由单独应用的1.760μg/ml和0.287μg/ml下降到0.680μg/ml和0.074μg/ml,显示低剂量大蒜素增强了抗癌药物对肿瘤细胞的杀伤作用.结论:大蒜素可使MGC-803及SGC-7901两种细胞周期阻滞于M期;大蒜素与M期特异作用抗癌药物联合使用,具有协同抗肿瘤作用.     

大蒜素、氟康唑对医院感染酵母菌的体外抗菌活性研究

目的研究大蒜素、氟康唑对临床分离酵母菌的体外抗菌活性,比较中西药对酵母菌的耐药现状.方法286株酵母菌由住院患者各类感染标本中分离,菌种采用全自动微生物鉴定仪VITEK YBC卡鉴定,用琼脂稀释法测定大蒜素和氟康唑对酵母菌的最低抑菌浓度(MIC),比较大蒜素和氟康唑对酵母菌的MIC50、MIC90.结果经鉴定临床分离的酵母菌中,白色假丝酵母菌最常见,占67.6%,其次为热带假丝酵母菌17.5%、光滑假丝酵母菌8.4%、近平滑假丝酵母菌3.5%等;大蒜素对各类酵母菌均有抑菌作用;氟康唑对白色假丝酵母菌、热带假丝酵母菌及近平滑假丝酵母菌的敏感率较高.结论医院深部酵母真菌感染及耐药性呈上升趋势,提示临床在不明确何种酵母菌感染的情况下,中西药联合使用,可能得到好的疗效.     

维生素C降低大蒜素联合美罗培南对耐碳青霉烯类抗生素的鲍曼不动杆菌的杀菌作用

目的 体外探讨维生素C对大蒜素与美罗培南联合对碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌杀菌作用的影响.方法 采用EDTA-Na2纸片复合法和改良三维实验对6株多耐药鲍曼不动杆菌产生碳青霉烯酶进行鉴定.采用MH肉汤法,确定大蒜素、美罗培南的最小抑菌浓度(MIC)值,计算两药联用的联合抑菌分数(FIC).应用微孔板生物检测法检测不同浓度大蒜素、美罗培南及大蒜素+美罗培南、大蒜素+维生素C(0.25 g/L)的抑菌率.检测大蒜素(32、64、128 mg/L)、大蒜素(128 mg/L)+维生素C(0.25 g/L)作用后细菌谷胱甘肽、抗超氧阴离子自由基和总巯基的变化.结果 6株多耐药鲍曼不动杆菌均产生碳青霉烯酶.大蒜素对6株耐碳青霉烯抗生素鲍曼不动杆菌的MIC值均为512 mg/L、美罗培南为128 mg/L、大蒜素+美罗培南两种药物联用FIC值为0.25.不同浓度大蒜素+美罗培南联用比同浓度的两种药物单独使用时抑菌率明显提高.0.25 g/L维生素C与不同浓度大蒜素联用时的抑菌率较单独使用同浓度的大蒜素显著下降(均P＜0.05).各浓度大蒜素(32、64、128 mg/L)细菌谷胱甘肽、抗超氧阴离子自由基、总巯基水平均低于对照组(均P＜0.05),不同浓度的大蒜素作用后,细菌谷胱甘肽、抗超氧阴离子自由基、总巯基水平也随其浓度的升高而逐渐降低(均P＜0.05);128 mg/L大蒜素作用后谷胱甘肽、抗超氧阴离子自由基、总巯基的含量分别为(4.52±0.71) mgGSH/gport、(115.21±4.24) U/L、(0.11±0.04) mmol/gprot,均低于128 mg/L大蒜素+0.25 g/L维生素C组的(5.64±0.40) mgGSH/gport、(145.84±2.30)U/L、(0.18±0.03) mmol/gprot(均P＜0.05).结论 大蒜素和美罗培南联用可显著提高对耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌抑菌杀菌作用.维生素C则可减低大蒜素通过氧化应激对耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌产生的抑制、杀伤作用.