大蒜素逆转人乳腺癌MCF-7细胞顺铂耐药性的研究

[目的]探索大蒜素对人乳腺癌MCF-7细胞顺铂耐药性的逆转作用及调控机制。[方法]以对数生长期人乳腺癌耐顺铂MCF-7/DDP细胞为受试细胞,设空白对照组(DMSO)、大蒜素(20μg/mL)单药组、顺铂(6μg/mL)单药组、联合组(大蒜素20μg/mL+顺铂6μg/mL)。药物干预48 h后,噻唑蓝(MTT)染色法检测MCF-7/DDP细胞增殖抑制率,应用Annexin V-FITC染色、碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡和分析细胞周期分布,Western blot法检测细胞凋亡相关调控蛋白[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]和细胞周期相关调控蛋白[特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1),周期蛋白依赖激酶2、4、6(CDK2、CDK4、CDK6)]的表达。[结果]与顺铂单药组比较,联合组MCF-7/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率升高,G0/G1期MCF-7/DDP细胞比例升高,Bax表达量升高而Bcl-2表达量降低、Bax/bcl-2值升高,Cyclin D1、CDK2、CDK4、CDK6表达量降低,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与空白对照组比较,大蒜素单药组MCF-7/DDP细胞G0/G1期比例升高,Bax表达量升高且Bcl-2表达量降低、Bax/bcl-2值升高,Cyclin D1、CDK2、CDK4、CDK6表达量降低,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。[结论]大蒜素具有逆转人乳腺癌MCF-7细胞顺铂耐药性的药理学作用,可能与调节细胞凋亡、周期相关蛋白表达进而诱导MCF-7/DDP细胞凋亡、阻滞其细胞周期进程有关。     

大蒜素对人胃癌MGC803细胞体外作用的研究

目的探讨大蒜素对人胃癌MGC803细胞的作用。方法MTT法检测MGC803细胞生长抑制率;流式细胞仪检测细胞周期改变和免疫组化SP法检测Bcl-2和Bax蛋白表达的变化。结果2μg/ml大蒜素作用24h、72h后细胞的生长抑制率为14.01%±2.36%和50.57%±7.01%;浓度8μg/ml时抑制率升为35.42%±5.55%和89.66%±19.92%。2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml的大蒜素作用于MGC803细胞24h后G0/G1期细胞比率明显下降,而G2/M期比率明显上升。经2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml的大蒜素处理后MGC803细胞的bcl-2蛋白表达明显下调,bax蛋白的表达明显上调。结论大蒜素能通过诱导癌细胞周期阻滞于G2/M期来抑制癌细胞的生长增殖。其机制可能与下调bcl-2和上调bax蛋白表达诱导癌细胞调亡有关。     

大蒜素对脂多糖致急性肺损伤小鼠防治作用的实验研究

目的探讨大蒜素对脂多糖（LPS）致急性肺损伤（ALI）小鼠的防治作用。方法复制LPS致ALI小鼠模型。实验动物随机分为生理盐水对照组，ALI组，大蒜素预防组，大蒜素治疗组，大蒜素组。测定各组2、6h肺湿重／干重比值（W／D）。用酶联免疫吸附法（ELISA）测定各组2、6h血清和肺组织匀浆上清中肿瘤坏死因子-α（TNF—α）及白细胞介素-1β（IL—1β）浓度。观察各组肺组织病理改变。结果ALI组，2h肺W／D较对照组无明显变化，6h肺W／D显著高于对照组（P〈0．05）。而大蒜素预防组可使肺W／D显著降低（P〈0．05），但在大蒜素治疗组肺W／D无明显改善。大蒜素组较生理盐水对照组无明显变化。肺组织病理显示，在ALI组12h时可见肺间质充血、水肿，大量炎性细胞浸润，大蒜素预防组可明显改善肺组织病理变化，大蒜素治疗组无明显变化。ALI组，2h血清及肺组织中TNF—α及IL—1β含量均明显升高（P〈0．01），6h有所降低，但仍高于对照组（P〈0．01）；大蒜素预防组可明显降低血清及肺组织中TNF—α及IL—1β的含量，但大蒜素治疗组无明显效果。结论预先给予大蒜素可明显减轻LPS诱导的ALI小鼠肺组织炎症反应及肺水肿程度，对血清及肺组织中TNF—α及IL—1β的生成具有抑制作用。     

大蒜素和复合抗氧化剂对运动员血液生化指标和心血管调节肽的影响

目的 探讨服用大蒜素和复合抗氧化剂对高水平运动员血液生化指标和心血管系统调节肽的影响.方法 33名中国十运会参赛运动员随机分为安慰剂对照组、抗氧化剂组和大蒜素组,全自动生化分析仪测定血浆中BUN、CK、CK-MB含量,放射免疫法测定血浆中NPY、AngⅡ和CGRP含量.结果 在3组中,血浆BUN含量无显著差异,CK和CK-MB的含量差异显著(P<0.05);血浆NPY、AngⅡ和CGRP含量差异显著.与实验前比较,3组血浆CK和CK-MB含量在训练后第3周显著升高;对照组的NPY、AngⅡ和CGRP含量极显著升高,抗氧化剂组和大蒜素组显著升高.结论 大蒜素和抗氧化剂能调节机体适应高强度运动训练,是高水平运动员训练有效的营养补剂.     

Allicin ameliorates cognitive deficits ageing-induced learning and memory deficits through enhancing of Nrf2 antioxidant signaling pathways

Numerous studies have demonstrated that learning and memory abilities in the course of normal aging cognitive abilities tend to decline and Nrf2 expression appears to decline with aging. So, Nrf2 pathway has been identified as a promising therapeutic target for neurodegenerative diseases. The organosulfur compounds, allicin can activate Nrf2, because it has an electrophilic center, which can serve as an attack site for nucleophiles, such as specific protein sulfhydryl groups present on Keap1. However, the influence of allicin on aging-induced cognitive deficits has not been examined. In this study, we assess the effects of allicin on endogenous antioxidant defenses in hippocampus of cognitively impaired aged mouse. Our results indicate that treatment of allicin significantly ameliorated ageing-induced cognitive dysfunction through enhancing of Nrf2 antioxidant signaling pathways. Therefore, allicin could be recommended as a possible candidate for the prevention and therapy of cognitive deficits in aging and Alzheimer's disease.     

大蒜素联合美罗培南对耐碳青霉烯类抗生素的鲍曼不动杆菌的体外杀菌研究

目的 探讨体外大蒜素与美罗培南联合对耐碳青霉烯类抗生素的鲍曼不动杆菌的杀菌作用.方法 (1)采用EDTA-Na2纸片复合法和改良三维实验对6株多耐药鲍曼不动杆菌产生β-内酰胺金属酶进行鉴定.(2)采用M-H肉汤法,确定大蒜素、美罗培南、大蒜素+美罗培南的MIC值,计算两药联用的FIC指数,K-B纸片法鉴定大蒜素对美罗培南抑菌作用的影响,微孔板生物检测法检测大蒜素、美罗培南及两药联用的抑菌率.(3)M-H肉汤法检测还原型谷胱甘肽对大蒜素抑菌作用的影响;检测不同浓度大蒜素作用后,细菌谷胱甘肽、抗超氧阴离子自由基和总巯基的变化.(4)改良三维实验和M-H肉汤法检测大蒜素对β-内酰胺金属酶分解碳青霉烯类抗生素作用的影响.结果 (1)经EDTA-Na2纸片复合法和改良三维实验对6株多耐药鲍曼不动杆菌产生β-内酰胺金属酶进行鉴定,均产生β-内酰胺金属酶.(2)大蒜素对6株耐碳青霉烯抗生素鲍曼不动杆菌的MIC值均为512 μg/ml,美罗培南为128 μg/ml.两种药物联用FIC值为0.25,大蒜素+美罗培南较两种药物单独使用,抑菌率明显提高.(3)0.3 mg/ml还原型谷胱甘肽与不同浓度大蒜素联用后,抑菌率显著下降.大蒜素作用组较无大蒜素作用组及高浓度大蒜素作用组较低浓度大蒜素作用组细菌谷胱甘肽、抗超氧阴离子自由基、总巯基水平显著下降.(4)美罗培南+大蒜素+酶提取物组抑菌率较美罗培南+酶提取物组显著提高.结论 大蒜素对耐碳青霉烯类抗生素的鲍曼不动杆菌抑制作用与其引起细菌体内氧化失衡有关;大蒜素与美罗培南联用对该细菌有协同作用,机制可能与大蒜素抑制β-内酰胺金属酶对美罗培南的分解作用有关.     

B7.1转基因肿瘤疫苗与大蒜素联合治疗膀胱癌的初步研究

目的初步估计大蒜素与B7.1转基因肿瘤疫苗对膀胱肿瘤的联合抗肿瘤效果.方法采用脂质体将B7.1基因导入鼠膀胱肿瘤(MBT-2)细胞.B7.1分子的表达经免疫荧光染色而测得.利用混合淋巴细胞培养MTT法,观察MBT-2-B7.1细胞刺激脾淋巴细胞的增殖作用.用MTT法测定了大蒜素对肿瘤细胞体外生长的影响.通过动物实验测定该肿瘤疫苗与大蒜素对膀胱肿瘤的联合治疗效果.结果转染了B7.1基因的肿瘤细胞能有效地刺激脾淋巴细胞增殖.当与大蒜素联合应用时,明显延迟了肿瘤的发生,并有效抑制了肿瘤的生长.结论大蒜素与转基因肿瘤疫苗治疗相结合能显著增强抗肿瘤效果.     

大蒜素对皮下移植肝癌细胞生长抑制和诱导凋亡的实验研究

目的　评价大蒜素在实验裸小鼠体内抗肝癌的有效性,为临床应用大蒜素对肝癌进行介入治疗提供理论依据。　方法　建立人肝癌细胞BEL 7402裸小鼠皮下移植瘤模型,模拟介入治疗用药方法,对6组移植瘤模型分别注射生理盐水吐温溶液,1、2、5 mg/ml大蒜素,0 .2 mg/ml阿霉素,1 mg/ml大蒜素+0 .2 mg/ml阿霉素,每次注射 0. 1 ml,隔日 1 次,连续 7 次,测量肿瘤体积变化,计算各组抑瘤率,对移植瘤组织作HE染色观察,电镜观察形态改变, TUNEL法检测组织凋亡率,RT PCR技术分析处理前后BEL 7402细胞FasL mRNA表达。　结果　移植瘤生长符合指数曲线规律,各组抑瘤率分别为: 62 .8%、72 .8%、94 .5%、76. 0%和 87 .0%;各组凋亡指数分别为(2. 2±1 .1)%、(17 .2±2. 8)%、(19 .4±2 .1)%、(28. 3±3.0)%、(22. 4±2 .5)%和(37 .6±3 .9)%;大蒜素或阿霉素组FasL mRNA表达均增加,大蒜素+阿霉素组表达上调尤其明显;大蒜素或(和)阿霉素治疗后,移植瘤组织内坏死细胞增加,出现典型凋亡形态细胞。　结论　大蒜素可以有效抑制人肝癌细胞裸小鼠移植瘤生长,且呈剂量效应关系;大蒜素可通过上调FasL mRNA的表达诱导人肝癌细胞凋亡。     

Effects of garlic (Allium sativum) and its chief compound, allicin, on acute lethality of cyanide in rats

Cyanide, known as a potent suicidal, homicidal and chemical warfare agent, is widely found in plants and used in industry. Cytochrome oxidase, the main enzyme in cell respiration, is inhibited by cyanide resulting to acute or chronic toxicity. The effects of garlic (Allium sativum) and its chief compound, allicin, on the acute lethality of cyanide were studied in rats. Three groups of rats were fed a diet containing 10%, 20% and 30% garlic powder for 48 h and then were challenged with 10 mg/kg cyanide. The lethality of cyanide intoxication was markedly reduced in rats which received garlic by diet and the rate of protection was dose-dependent. The effect of 1,000 ppm of allicin on cyanide lethality was equal to 20% of garlic in diet. These results suggest that sulfur compounds of garlic may have a protective effect against cyanide intoxication.     

大蒜素对甲状腺未分化癌细胞的抑制作用及相关机制探讨

目的 通过体内外研究探讨大蒜素对甲状腺未分化癌细胞的抑制作用及潜在的分子机制。方法 采用MTT法检测不同浓度大蒜素（0、20、40、80 μg·mL^-1）作用于人甲状腺未分化癌细胞株FRO 24 h、48 h、72 h的增殖抑制率;细胞划痕及Transwell实验分别检测经大蒜素处理后FRO细胞的迁移及侵袭能力;Annexin V-FITC/PI双染色法分析大蒜素对FRO细胞凋亡的影响;Western blotting比较不同浓度大蒜素作用后,FRO细胞中p-AKT、Bcl-2、Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP、MMP-2、MMP-9的表达水平;建立人甲状腺未分化癌裸鼠移植瘤模型,观察并计算大蒜素对荷瘤裸鼠肿瘤体积、瘤重、抑瘤率的影响。结果 大蒜素能够抑制FRO细胞的增殖、迁移及侵袭,并促进细胞凋亡。大蒜素组FRO细胞中p-AKT、Bcl-2、MMP-2、MMP-9表达下调,Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP表达上调。体内研究表明大蒜素组裸鼠肿瘤体积和质量显著低于对照组,且抑瘤率呈剂量依赖性,随大蒜素浓度增加而升高。结论 大蒜素可能通过调控PI3K/AKT信号通路抑制FRO细胞的增殖、迁移和侵袭,并诱导其凋亡。大蒜素可显著抑制裸鼠甲状腺未分化癌移植瘤的生长。