大蒜素与细胞周期特异性化疗药联合应用抗肿瘤的实验研究

目的:探讨大蒜素对人胃癌细胞株BGC-823、SGC7901生长的影响及其与细胞周期特异性化疗药联合应用抗肿瘤作用.方法:M丌法测定细胞增殖抑制率并测定药物半数抑制率(IC50);流式细胞仪检测细胞周期的改变,大蒜素与NVB、5-FU、MMC、PDD四种化疗药联合应用,观察细胞毒活性的改变.结果:大蒜素对BGC-823和SGC-7901两种细胞的生长均有明显的抑制作用,72h IC50分别为:30μg/ml和20μg/ml.以72h IC50浓度大蒜素分别作用于两种胃癌细胞株24h、48h后,流式细胞仪检测与对照组比G0/G1期细胞减少,G2/M期细胞明显增加,提示两种胃癌细胞株经大蒜素处理后,细胞周期阻滞于G2/M期.大蒜素与四种化疗药联合应用,结果发现作用于BGC823细胞,NVB72h的IC50值由原来单独应用时的9.0μg/ml降至2.25μg/ml.作用于SGC-7901细胞,NVB72h的IC50值由原来单独应用时的43.0μg/ml降至12.5μg/ml,显示大蒜素与作用于G2/M期的细胞周期特异性化疗药NVB联合应用时可增强其对肿瘤细胞的杀伤作用.结论:大蒜素可使BGC-823和SGC-7901两种细胞的增殖受到抑制,细胞周期被阻滞在G2/M期.大蒜素与G2/M期特异性化疗药联合应用,可能具有协同抗肿瘤作用.     

Allicin, a major component of garlic, inhibits apoptosis of macrophage in a depleted nutritional state

OBJECTIVE: Allicin is believed to be the main component responsible for the biological activity of garlic. The regulation of cell death might have therapeutic potential in many diseases, and previous studies have demonstrated that allicin stimulates the functional activity of macrophages. Therefore, this study examined the effects of allicin on the apoptosis of macrophages induced by serum- and amino acid-free culture. METHODS: The apoptosis of peritoneal macrophages was examined after pretreating them with allicin and incubating them in a depleted nutritional state. The rate of apoptosis was determined using propidium iodide staining analysis using flow cytometry, DNA fragmentation, and a caspase-3 assay. Western blot analysis was used to examine the changes in the pro- or antiapoptotic protein expression levels. RESULTS: DNA fragmentation and propidium iodide staining analyses revealed that allicin decreased the malnutrition-induced apoptosis of macrophages. The level of Bax expression, the amount of cytochrome-c released from the mitochondria, and the caspase-3 activity were also lower in the allicin-treated macrophages than in the untreated macrophages in a depleted nutritional state. Moreover, the MEK (mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase-kinase) inhibitor suppressed the allicin-induced inhibition of apoptosis in a depleted nutritional state and allicin increased the level of ERK1/2 phosphorylation. CONCLUSION: Allicin inhibits the apoptosis of macrophages in a depleted nutritional state through the MEK/extracellular signal-regulated kinase pathway.     

大蒜素治疗大鼠肺孢子虫肺炎的实验研究

目的观察大蒜素对大鼠肺孢子虫肺炎(PCP)的治疗效果。方法采用皮下注射醋酸泼泥松龙的方法建立PCP大鼠模型。将受试大鼠随机分为正常对照组(A)、未治疗对照组(B)、TMP-SMZ治疗对照组(C)、大蒜素治疗组(D)和青蒿素治疗组(E)。各组从第7周开始灌服相应药物5d,停药后观察1周,用肺重/体重比和肺虫荷量考核疗效。结果PCP大鼠6周内的病死率为16.7%,满6周时抽样进行病原、病理检查,证实均已成功诱导PCP。5组受试大鼠的平均肺重/体重比分别为0.75±0.090、1.05±0.174、0.77±0.091、0.79±0.114和0.85±0.188。B~E组受试大鼠肺虫荷量分别为1490、74、296和219个包囊/mg肺。统计学分析显示,经大蒜素治疗的大鼠平均肺重/体重比、肺虫荷量均显著低于未治疗对照组(P<0.05),与TMP-SMZ治疗对照组和青蒿素治疗组比较差异无显著性(P>0.05)。结论大蒜素对大鼠PCP有显著疗效,效果与TMP-SMZ和青蒿素接近。     

大蒜素对肝癌细胞QGY-7701增殖和凋亡的影响

大蒜素是大蒜中主要生物活性成分的总称,其抗癌、防癌作用已成为人们关注的热点[1].本研究通过体外实验系统地研究了大蒜素对肝癌细胞QGY-7701增殖和凋亡的影响,为大蒜素在人类癌症预防中更广泛地应用提供理论依据.     

大蒜素通过TLR4/NF-κB途径对慢性腹泻大鼠肠黏膜修复及炎性因子的调节

目的探讨大蒜素是否通过TLR4/NF-κB途径对慢性腹泻大鼠肠黏膜修复及炎症因子有调节作用。方法将Wistar大鼠分为:对照组(C组)、模型组(M组)、大蒜素低剂量组(A-L组)、大蒜素高剂量组(A-H组);记录各组大鼠体质量变化、排便量和湿粪率;ELISA检测各组大鼠血浆中内毒素表达水平和血清中炎性因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10)表达水平;HE染色观察各组大鼠结肠组织病理变化;qRT-PCR检测各组大鼠粪便中微生物菌群(双歧杆菌、乳酸杆菌和大肠杆菌)的含量;Western blot检测大鼠结肠组织中p-TLR4、p-NF-κB p65蛋白表达水平。结果大蒜素可以增加大鼠体质量、减少排便量和湿粪率(均P<0.05);与M组相比,大蒜素可以使大鼠血浆中内毒素水平、血清中TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平下调(均P<0.05),血清中IL-10表达水平上调(P<0.05);大蒜素可使受损的大鼠结肠组织的上皮和黏膜修复;大蒜素也能使大鼠粪便中双歧杆菌、乳酸杆菌数量增加(均P<0.05),大肠杆菌数量减少(P<0.05);与M组比较,大蒜素可以使p-TLR4、p-NF-κB p65蛋白水平下调(均P<0.05)。结论大蒜素可减轻慢性腹泻大鼠腹泻情况、调节炎性因子的表达、改善大鼠受损的肠黏膜屏障,其可能与TLR4/NF-κB途径有关。     

大蒜素对卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV-3/DDP增殖的影响及机制

目的探讨大蒜素对卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV-3/DDP凋亡的影响及机制。方法将SKOV-3/DDP细胞随机分为四组,大蒜素组加入40μg/mL的大蒜素,顺铂组加入40μg/mL的顺铂,联合组加入大蒜素和顺铂各40μg/mL,对照组不干预。各组分别培养24、48 h。采用MTT法检测各组细胞增殖抑制率;RT-PCR法测定Bax、Bcl-2mRNA表达;Western blot法测定Bax、Bcl-2蛋白表达。结果顺铂组、大蒜素组、联合组各时点(24 h、48 h)增殖抑制率明显高于对照组,联合组明显高于大蒜素组、顺铂组,P均<0.05。顺铂组、大蒜素组、联合组各时点Bax mR-NA和蛋白水平明显高于对照组,大蒜素组、联合组Bcl-2 mRNA和蛋白水平明显低于对照组,P均<0.05;顺铂组48 h Bcl-2蛋白明显高于对照组,P<0.05;联合组各时点Bax mRNA和蛋白水平明显高于、Bcl-2 mRNA和蛋白水平明显低于对照组,P均<0.05。结论大蒜素诱导SKOV-3/DDP凋亡作用优于顺铂,两者联合具有协同作用,其机制可能为上调Bax表达和下调Bcl-2表达有关。     

大蒜素亚慢性染毒对大鼠脾体系数的影响

[目的]观察大蒜素亚慢性染毒对大鼠脾体系数的影响以及停止染毒后的恢复状况,并对脏/脑系数的毒理学意义进行初步探讨。[方法]分别以3.3、10.0、30.0 mg/kg(以大蒜素计)灌胃方式给予动物,每日1次,连续90 d。分离脾脏、肝、肾、脑等组织称重。剩余动物停止灌胃后,继续观测45 d,处理方式同前。[结果]连续染毒90 d后,雄性实验组动物脾脏重量增大,呈现剂量-反应关系,中、高剂量动物脾脏重量、脾体系数与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或<0.01)。动物停止染毒45 d后,雄性中、高剂量组动物脾脏重量、脾体系数仍较对照组高(P<0.05)。在观察期内,各实验组动物脑重基本一致,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结合采用脾脏/脑系数可以补充脾体系数的不足,减小了大蒜素导致体重明显降低对脾体系数的影响,更能真实反映脾脏本身的变化。[结论]大蒜素亚慢性染毒可导致大鼠脾脏和脾体系数增大。     

大蒜油漱口液对牙菌斑抑制效果的临床研究

目的探讨大蒜油漱口液作为机械除菌的辅助措施,对牙菌斑生长的抑制效果。方法 选取17名青年志愿者,依据随机双盲、自身对照的原则,每位受试者分别随机先后含漱大蒜油漱口液（大蒜油组）、复方氯已定（口泰）漱口液（口泰组）、安慰剂（安慰剂组）。测试前彻底全口洁治,每种漱口液测试周期为3d,期间停止一切口腔清洁措施。3d后,采用Turesky改良的Q-H菌斑指数标准来记录菌斑指数值。中间间隔1周,再使用另一种漱口液,直至3种漱口液测试完。最后比较3组菌斑指数。结果 大蒜油组和口泰组菌斑指数均低于安慰剂组,差异有统计学意义（P〈0.01）;且大蒜油组的菌斑指数高于口泰组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 大蒜油作为天然药物,对牙菌斑抑制有显著作用。     

大蒜素对慢性气道炎症大鼠上皮细胞中NRF2与γ-GCS表达的影响

目的研究大蒜素对慢性气道炎症大鼠上皮细胞中NRF2与γ-GCS表达的影响。方法将30只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和大蒜素治疗组,每组10只。模型组及大蒜素治疗组用两次气管内滴入脂多糖和每日熏香烟法制成大鼠慢性气道炎症模型,大蒜素治疗组在模型制作成功后腹腔注射大蒜素注射液。通过肺组织HE观察气道炎症改变,支气管肺泡灌洗（BALF）细胞记数并分类,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测NRF2mRNA及γ-GCSmRNA表达,检测肺组织GSH、ROS、T-AOC含量。结果大蒜素治疗组气道炎症浸润较模型组明显减轻,大蒜素治疗组BALF中中性粒细胞数目较模型组降低（P〈0.05）;模型组的γ-GCSmRNA及NRF2mRNA表达高于大蒜素治疗组（P〈0.01）;大蒜素治疗组中GSH含量较模型组减少,ROS含量降低,T-AOC上升（P〈0.01）。结论大蒜素可抑制被动吸烟大鼠肺部炎症。     

中西医结合治疗膀胱肿瘤的基础研究

目的：探讨转基因肿瘤疫苗与大蒜素联合治疗膀胱肿瘤的效果与机理.方法：脂质体转染法将B7.1基因导入鼠膀胱肿瘤（MBT-2）细胞.免疫荧光染色测定B7.1分子的表达.混合淋巴细胞培养MTT法和LDH释放法观察对免疫系统的影响.MTT法测定大蒜素对肿瘤细胞生长的影响.动物实验测定联合治疗效果.结果：B7.1转基因肿瘤疫苗能有效刺激淋巴细胞增殖.与大蒜素能产生协同抗癌效果.这种协同抗癌效果与淋巴细胞的特异性杀伤活性有关.结论：转基因肿瘤疫苗与大蒜素合用有更好的抗肿瘤效果.