血浆 miRNA-155和 miRNA-625用于非小细胞肺癌诊断的临床评价

目的:探讨测定患者血浆miRNA-155和miRNA-625表达水平用于非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)临床诊断的可行性。方法:应用荧光定量RT-PCR法检测49例NSCLC患者及55例肺部良性疾病患者血浆中miRNA-155和miRNA-625的表达水平。构建受试者工作特征(ROC)曲线,根据这两个miRNAs的ROC曲线下面积判断其诊断NSCLC的效能,并与血清癌胚抗原比较,评价它们在NSCLC诊断中的临床价值。结果:NSCLC患者血浆中miRNA-155的表达水平明显高于肺良性疾病患者(P=0.000),miRNA-625的表达水平则明显低于肺良性疾病患者(P=0.000)。NSCLC患者血浆miRNA-155和miRNA-625的表达水平与肿瘤的临床分期明显相关(P=0.008,0.025),miRNA-625亦与患者性别相关(P=0.024),而与其他临床特征无明显相关性。根据ROC曲线取miRNA-155和miRNA-625用于诊断NSCLC的临界值分别为2.736和0.699,获得诊断的敏感性分别为75.5%和73.4%,特异性分别为74.5%和70.9%。血清癌胚抗原含量诊断NSCLC的敏感性低于血浆miRNA-155和miRNA-625(P=0.004,0.007),特异性相似。结论:血浆miRNA-155和miRNA-625可作为分子标志物用于临床诊断NSCLC。     

血小板对胃癌间质干细胞生物学特性的影响

目的观察血小板对胃癌间质干细胞(gastric cancer mesenchymal stem cells,GC-MSCs)的生物学特性以及对GC-MSCs促进肿瘤细胞迁移能力的影响。方法从健康志愿者静脉血标本中分离血小板;体外分离培养人GC-MSCs并分为对照组和GC-MSCs+血小板组,用流式细胞术检测GC-MSCs的细胞表型;成脂、成骨实验检测GC-MSCs的成脂、成骨能力;细胞计数法和Transwell实验检测GC-MSCs的增殖和迁移能力;将GC-MSCs与血小板或肿瘤细胞上清处理后的血小板共培养,western blot检测α-SMA蛋白的表达水平;将SGC-7901与GC-MSCs的细胞培养上清和血小板处理后的GC-MSCs上清共培养,Transwell实验检测SGC-7901的迁移能力。结果 GC-MSCs+血小板组的成脂、成骨能力增强,且增殖能力(24 h,t=3.88,P0.05; 48 h,t=5.93,P0.05; 72 h,t=4.35,P0.05)和迁移能力(t=4.03,P0.05)也明显加强; SGC-7901上清处理血小板组与单独血小板组的α-SMA蛋白表达水平高于对照组; SGC-7901与GC-MSCs上清或血小板处理后的GC-MSCs上清共培养后,其迁移能力增强(F=42.92,P0.05)。结论血小板可促进GC-MSCs增殖、迁移及成脂、成骨分化能力,并且可增强GC-MSCs促进肿瘤细胞迁移的能力。     

CG、TBA联合AFP和PIVKA-Ⅱ检测在HBV感染相关肝脏疾病诊断中的应用价值

目的 探讨CG、TBA联合AFP和PIVKA-Ⅱ检测在HBV感染相关肝脏疾病诊断中的意义.方法 应用回顾性研究模型,选取2019年1月至2020年10月于徐州医科大学第二附属医院住院的肝病患者为研究对象,其中乙肝患者60例(肝炎组)、肝硬化患者60例[肝硬化组(肝硬化代偿组36例)、(肝硬化失代偿组24例)]、原发性肝癌患者60例(肝癌组),选取同期健康体检者60例为健康对照组.所有入组者均进行血清甘胆酸(CG)、总胆汁酸(TBA)、甲胎蛋白(AFP)、维生素K缺乏Ⅱ诱导蛋白(PIVKA-Ⅱ)等肝病生物学指标水平测定,比较各指标水平在肝脏疾病中的差异,绘制受试者工作特征曲线(ROC),并比较各指标单独检测和联合检测对肝脏疾病的诊断中效能.结果 肝癌组的AFP、PIVKA-II、CG和TBA水平均高于肝硬化组、肝炎组和健康对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05).肝硬化代偿组的AFP、PIVKA-II、CG和TBA水平均低于肝硬化失代偿组,差异均有统计学意义(均P<0.05).CG诊断早期肝硬化的AUC最大;AFP鉴别肝硬化代偿期与肝硬化非代偿期及肝炎的AUC最大;PIVKA-II鉴别肝硬化失代偿期和肝癌的AUC最大.四项指标联合诊断早期肝硬化的AUC最高为0.974,灵敏度(98.3％)和特异性(91.7％)高于其他单一指标;四项指标联合鉴别肝硬化代偿期与肝硬化非代偿期的特异性最高为88.9％;AFP+PIVKA-II联合鉴别肝硬化失代偿期和肝癌的灵敏度最高为100％;AFP+CG联合检测鉴别肝硬化代偿期和肝炎的特异性最高为95.0％.结论 CG、TBA、AFP和PIVKA-Ⅱ检测在HBV感染相关肝脏疾病诊断中均具有一定的诊断价值,联合检测对HBV感染相关肝脏疾病的鉴别诊断及评估肝脏受损程度具有重要的临床意义.     

外周血血细胞参数在急性主动脉夹层与急性心肌梗死鉴别中的价值

目的　探讨外周血血细胞参数在急性主动脉夹层（ acute aortic dissection, AAD）与急性心肌梗死（ acute myocardial infarction ,AMI）鉴别诊断中的价值。方法　回顾性分析 2019年 1~9月就诊于徐州医科大学附属医院急诊科并于入院后完善相关检查确诊为 AAD的患者 30例,AMI患者 30例,及同期健康体检者 20例外周血血细胞参数水平变化,利用 ROC曲线评估相关参数的诊断鉴别价值。结果　与 AMI组相比较, AAD组单核细胞（ monocyte,MON）和血小板平均体积 /血小板比值（ MPP）水平较高,血小板（ platelet,PLT）、血小板平均体积（ mean platelet volume, MPV）水平较低,差异均有统计学意义（ t=-2.363~3.890, 均 P<0.05）;与健康对照组相比, AAD组白细胞（ white blood cell,WBC）、中性粒细胞（ neutrophils,NEU）、MON,中性粒细胞 /淋巴细胞比值（ NLR）、血小板分布宽度（ Platelet distribution width,PDW）和 MPP均升高,淋巴细胞（ lymphocyte,LYM）、PLT和 MPV均降低,差异有统计学意义（t=-5.283~5.565,均 P<0.05）。MON,PLT,MPV和 MPP对 AAD和 AMI鉴别诊断的 ROC曲线下面积（ Area under curve, AUC）分别为 0.662,0.753,0.652和 0.664,联合 MON和 MPP的 AUC为 0.749,联合 MON,PLT和 MPV的 AUC为 0.872,四项联合检测的 AUC为 0.874;与单项指标检测相比四项联合检测 AUC最大,敏感度为 80.00%,特异度为 86.67%。结论　应用 MON+PLT+MPV+MPP四项联合检测鉴别诊断 AAD与 AMI优于单项指标检测,有望在临床推广应用。     

移动差值控制图评估临床实验室肌钙蛋白不确定度

目的运用控制图评估肌钙蛋白I(cTnI)测量不确定度。方法采用日本东曹AIA-1800全自动荧光磁微粒酶免分析仪测定cTnI控制品,1次/天,共30d;用Anderson-Darling法检验数据的正态分布性和独立性;建立单值-移动差值及指数加权移动平均值控制图及评估不确定度。结果 Anderson-Darling检验cTnI质控数据为正态分布性且具有独立性,结果测量不确定为(0.218±0.016)μg/L,(k=2)。结论移动极差控制图法可用来评估cTnI结果不确定度,本研究为临床实验室评价不确定度提供了新的思路。     

血清肌钙蛋白I质控物的研究

目的评价自制血清肌钙蛋白I(cTnI)质控物均匀性和稳定性。方法按实验设计收集混合血清,分装-20℃贮存。参照CNAS-GL03《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》,对质控物的均匀性进行评价;运用恒温加速试验研究稳定性。结果质控物均匀性差异无统计学意义(P0.05)。恒温加速试验显示,血清cTnI降解随时间变化符合化学动力学一级反应,根据Arrhenius方程推测4℃贮存7d,-20℃贮存有效期为19个月;监测质控物9个月,与恒温加速试验结果一致。结论自制血清cTnI质控物均匀性、稳定性良好,可用于临床室内质量控制。     

GITRL对肺癌移植瘤小鼠髓源性抑制细胞免疫抑制功能的调控及其分子机制

目的: 研究糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体相关配体（glucocorticoid induced TNF receptor ligand, GITRL）对Lewis肺癌移植瘤小鼠来源的髓源性抑制细胞（myeloid-derived suppressor cells, MDSCs）免疫抑制功能的调控作用,并探究其分子机制。方法: 采用C57BL/6小鼠构建Lewis肺癌移植瘤模型,分选荷瘤小鼠脾脏中MDSCs,采用流式细胞术检测其表面GITR的表达;GITRL（5 μg/mL）处理MDSCs 48 h后,流式细胞术检测MDSCs对羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记的CD4⁺ T细胞增殖的影响,比色法检测MDSCs胞内精氨酸酶1（arginase-1, Arg-1）的活性,Griess偶联法检测效应分子一氧化氮的释放量,并通过蛋白质印迹法检测MDSCs胞内信号分子的表达变化。结果： Lewis肺癌移植瘤小鼠脾脏中MDSCs表达GITR分子;与对照组相比,GITRL处理的MDSCs对CD4⁺ T细胞增殖的抑制能力下降,Arg-1活性降低（P<0.05）,一氧化氮释放量减少（P<0.01）;GITRL蛋白下调了MDSCs胞内JAK2和STAT3 （P<0.05或P<0.01）信号的磷酸化蛋白水平。结论： GITRL蛋白通过抑制MDSCs胞内JAK2/STAT3信号通路,下调MDSCs的免疫抑制功能。     

系统性红斑狼疮患者外周血Th17细胞与调节性T细胞的变化

目的 探讨外周血辅助性T细胞17(Th17)与调节性T细胞在系统性红斑狼疮(SLE)发生、发展中的变化.方法 选取32例SLE活动期患者作为SLE活动组、30例SLE稳定期患者作为SLE稳定组及25名健康者作为对照组,采用流式细胞术及定量聚合酶链反应(PCR)的方法,分别从蛋白质水平与mRNA水平检测其外周血CD4+T细胞IL-17及FoxP3的表达.采用单因素方差分析进行统计学处理.结果 SLE活动组外周血CD4+T细胞IL-17蛋白质(1.01±0.22)％及mRNA(2.04±0.63)表达水平显著高于SLE稳定组(0.48±0.16)％、(1.12±0.34)及健康对照组(0.41±0.12)％、1(P＜0.01),但SLE稳定组与健康者对照组差异无统计学意义(P＞0.05).SLE活动组外周血CD4+T细胞FoxP3蛋白质(2.36±0.54)％及mRNA(0.42±0.16)表达水平显著低于SLE稳定组(4.34±0.95)％、(0.87±0.28)及健康对照组(5.09±1.17)％、 1(P＜0.01),SLE稳定组又低于健康对照组(P＜0.05).结论 SLE患者外周血中可能存在Th17/调节性T细胞的失衡,且失衡程度可能与病情活动性相关.     

颅脑术后继发颅内多重耐药鲍曼不动杆菌感染的危险因素

目的 探讨颅脑术后继发颅内多重耐药（MDR）鲍曼不动杆菌（AB）感染的危险因素。方法 回顾性分析2015年1月至2020年6月收治的1 586例颅脑术后颅内感染的临床资料。根据脑脊液培养结果确定颅内感染病原体。结果 脑脊液培养显示AB感染124例,其中MDR-AB共99例。颅内AB感染的发生率为7.82%（124/1586）,颅内MDR-AB感染的发生率为6.24%（99/1586）,占颅内AB感染的79.84%。多因素logistic回归分析显示,入住ICU、肺部MDR-AB感染、开颅手术>1次是颅内MDR-AB感染的独立危险因素（P<0.05）。结论 颅内MDR-AB感染是临床治疗的难题,预防MDR-AB感染对改善颅脑手术病人的预后具有重要意义。缩短ICU入住时间、改善ICU条件对预防颅内MDR-AB感染具有重要意义。