移动差值控制图评估临床实验室肌钙蛋白不确定度

目的运用控制图评估肌钙蛋白I(cTnI)测量不确定度。方法采用日本东曹AIA-1800全自动荧光磁微粒酶免分析仪测定cTnI控制品,1次/天,共30d;用Anderson-Darling法检验数据的正态分布性和独立性;建立单值-移动差值及指数加权移动平均值控制图及评估不确定度。结果 Anderson-Darling检验cTnI质控数据为正态分布性且具有独立性,结果测量不确定为(0.218±0.016)μg/L,(k=2)。结论移动极差控制图法可用来评估cTnI结果不确定度,本研究为临床实验室评价不确定度提供了新的思路。     

血清肌钙蛋白I质控物的研究

目的评价自制血清肌钙蛋白I(cTnI)质控物均匀性和稳定性。方法按实验设计收集混合血清,分装-20℃贮存。参照CNAS-GL03《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》,对质控物的均匀性进行评价;运用恒温加速试验研究稳定性。结果质控物均匀性差异无统计学意义(P0.05)。恒温加速试验显示,血清cTnI降解随时间变化符合化学动力学一级反应,根据Arrhenius方程推测4℃贮存7d,-20℃贮存有效期为19个月;监测质控物9个月,与恒温加速试验结果一致。结论自制血清cTnI质控物均匀性、稳定性良好,可用于临床室内质量控制。     

长链非编码RNA ZFAS1在胃癌患者血清中的表达及临床意义

目的：建立基于实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测血清长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)zinc finger antisense 1(ZFAS1)的方法,应用该技术检测胃癌(gastric cancer, GC)患者、胃良性病变患者及健康体检者血清ZFAS1相对表达水平,探讨血清ZFAS1对GC辅助诊断的应用价值。方法：随机采集南通大学附属医院经病理确诊的94例GC患者(其中包括初诊患者54例,术后患者35例和复发/转移5例)、20例胃良性病变患者的血清标本,同期匹配47例年龄相仿的健康体检者血清标本进行对比分析。通过qRT-PCR检测血清ZFAS1的相对表达水平,并评价其线性、重复性及特异性;分析血清ZFAS1表达与GC患者临床病理参数的相关性;受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve, ROC曲线)评价血清ZFAS1、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)及糖类抗原19-9(carbohydrate antigen19-9, CA19-9)单独及联合检测对GC的诊断价值。结果：检测血清ZFAS1含量的qRT-PCR方法线性良好,重复性较好,特异性较高,熔解曲线单峰特异。GC初诊患者血清ZFAS1的表达水平显著高于良性病变组、正常对照组(P<0.001);GC患者术后血清ZFAS1显著低于术前(P<0.01);GC初诊患者血清ZFAS1含量与患者肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移相关(P<0.05);ROC曲线分析显示,ZFAS1、CEA、CA19-9单独作为诊断指标时,ROC曲线下面积分别为0.816 4、0.658 8、0.556 3,三者联合诊断可提高诊断灵敏度。结论：血清ZFAS1在GC辅助诊断及术后病程监测中发挥作用。     

SYBR green Ⅰ结合熔解曲线分析快速检测GSTM1基因多态性

目的 建立一种快速检测人类谷胱甘肽S转移酶（GST）基因多态性的方法并初步应用。方法 反应体系中加入新型荧光染料SYBR greenⅠ,应用多重PCR同时扩增GSTM1基因及内参照CYP1A1基因。PCR反应结束后,以0．1℃／s的速度从65℃到95℃检测并记录反应管荧光的变化,根据得到的熔解曲线分析GSTM1基因型。结果 GSTM1基因携带型（GSTM1^＋）熔解曲线出现两个峰带,GSTM1基因空白型（GSTM^-）只出现一个峰带,两峰峰尖所对应的温度值与预期值相同,琼脂糖凝胶电泳显示PCR产物分子量与预期分子量一致。DNA抽提后整个检测在LightCycler扩增仪上1h内完成。结论 SYBR greenⅠ结合熔解曲线分析是一种简单、快速、准确的分析GSTM1基因多态性的方法。     

基因芯片检测血清标本的丙型肝炎病毒基因型

目的：探讨丙型肝炎病毒(HCV)基因分型检测芯片在临床的初步应用及意义。方法：基因芯片检测150例血清标本中HCV基因型，并与HCVRNA定性及测序结果进行比较。结果：HCV基因分型检测芯片检出的阳性结果与HCV—RNA定性及测序结果的相对符合率为100．0％。结论：HCV基因分型检测芯片是一种准确性好、灵敏度高、特异性强、操作简便快速的基因检测方法，可以为临床诊断、治疗提供有力保证。     

奇异变形杆菌的同一性试验

奇异变形杆菌常引起食物中毒、婴儿腹泻及医源性感染等,由该菌引起的感染是否具有流行病学的意义,应有一种简单快速的方法来确认。我们从变形杆菌众多的同一性试验方法中,选取了Dienes试验、交叉定量凝集试验2种方法,对20株临床分离菌株进行了系统的实验研究,以用于该菌感染的流行病学调查。     

急性冠脉综合症患者血浆cf-DNA含量和完整性检测及其临床应用价值*

的：探讨血浆cf-DNA的含量、完整性与ACS患者的关系及其对ACS的诊断价值。方法：提取62例ACS患者和39例正常对照者血浆cf-DNA，采用基于ALU序列的SYBR Green I实时荧光定量聚合酶链反应方法检测cf-DNA长、短片段（247bp、115bp）含量，并以ALU115作为cf-DNA总水平、以ALU247/115指数作为cf-DNA完整性指标，应用ROC曲线评估cf-DNA和cTnI对ACS的诊断价值，并分析cf-DNA与肌钙蛋白I（cTnI）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌红蛋白（Mb）的相关性。结果：ACS患者血浆cf-DNA含量[532.0（257.4～986.0）ng/mL] 显著高于正常对照者[55.0（12.6~128.4）ng/mL]，差异有统计学意义（P<0.05）。血浆cf-DNA含量与cTnI（r=-0.32）、CK-MB（r=-0.20）、Mb（r=-0.34）无相关性。ACS患者ALU247/115指数 [0.68（0.48～0.95）]显著高于正常对照者[0.36（0.26～0.53）]，差异有统计学意义（P<0.05）。cf-DNA含量、完整性曲线下面积（0.880、0.820）高于cTnI（0.736），差异有统计学意义（P<0.05）。结论：血浆cf-DNA含量、完整性与ACS相关。qPCR方法检测血浆cf-DNA的含量及其完整性对ACS的辅助诊断具有一定的价值。     

BNP、NT-proBNP在心力衰竭患者中的应用价值再评估

目的探讨血浆脑钠肽(BNP)、N-末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)在心力衰竭患者中的应用价值。方法选择住院心脏病患者99例,采用美国纽约心脏学会(NYHA)标NT-proBNP、心肌肌钙蛋白(cTnI)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的浓度,并用SPSS20.0统计软件对结果进行分析,评估其在心力衰竭中的应用价值。结果 BNP、NT-proBNP的表达水平与心功能分级成正相关;BNP、NT-proBNP联合检测的灵敏度和特异度优于单独检测,分别为92.0%和81.3%;cTnI和血脂4项指标与心功能分级无相关性。结论 BNP、NT-proBNP联合检测,可用于心力衰竭患者的诊断和分级,对临床治疗具有重要的指导意义。     

南通地区慢性丙型肝炎患者的HCV基因分型

目的 :了解南通地区慢性丙型肝炎患者的HCV基因型分布情况。方法 :将 5 3例抗HCV阳性的血清标本用RT -PCR法检测HCV -RNA ,然后采用膜显色结果判读的基因芯片对 3 2例HCV -RNA阳性者进行基因分型研究。结果 :南通地区HCV感染检出 1b、1a、2a、1b + 1a、1b + 1a + 2a共 5种单一基因型和混合基因型 ,其中以 1b型为主 ,占 5 3 .1%。结论 :南通地区 1b型为优势株 ,2a和 1b + 1a型居次 ;1b + 1a型高于全国其他地区。     

HCV基因分型检测芯片的临床应用及意义

目的评价HCV基因分型检测芯片在HCV基因分型中的初步应用及意义。方法对117例抗HCV阳性和33例抗HCV阴性的血清标本同时进行基因芯片分型检测,并与测序结果进行比较。结果HCV基因分型芯片共检测出阳性92例,其中1b型71例(77.2％),2a型8例(8.7％),其它1a型3例(3.2％),3b型6例(6.5％),6型1例(1.1％),1a 1b型2例(2.2％),1b 2a型1例(1.1％)。结论HCV基因分型检测芯片可以用于血清HCVRNA的检测并进行基因分型,拥有较高的灵敏度和特异性,可以为临床诊断、治疗提供有效帮助。