用全染色体涂抹探针进行卵母细胞第一极体荧光原位杂交

 【目的】建立用全染色体涂抹探针（WCP）对卵子第一极体进行荧光原位杂交（FISH）检测染色体的方法。【方法】收集单精子卵胞浆内注射（ICSI）中不成熟卵母细胞经体外培养成熟和常规试管婴儿（IVF）中未能成功受精的成熟卵母细胞，活检第一极体，固定后行13、14号染色体的全染色体涂抹探针荧光原位杂交。活检后，一部分卵母细胞固定行FISH以分析卵子自身的13、14号染色体，其余行ICSI受精，观察受精和卵裂情况。【结果】共获得成熟母细胞93个，成功活检85个，成功固定78个，共29个第一极体处于分裂中期，均有FISH结果。卵母细胞体外培养成熟后立即取极体进行固定，90．5％（19／21）的极体处于分裂中期，而取卵后30-48h和72h后活检的第一极体处于分裂中期的比例分别为27．3％（6／22）和11．4％（4／35），3组相比有统计学差异（P〈0．01）。11个卵母细胞同时获得了极体和相对应卵细胞的FISH结果，其中10个极体和相对应的卵细胞分别有1条13，14号染色体，剩余1个卵母细胞的极体有2条14号染色体和1条13号染色体，相对应的卵细胞仅有1条13号染色体，二者互补。活检后行ICSI受精的卵母细胞受精率为78．6％（11／14），优质胚胎率45．5％（5／11）。【结论】全染色体涂抹探针对卵子第一极体进行遗传分析可以有效、准确地推测相对应卵母细胞的染色体构成，从而应用于女性染色体易位患者的植入前遗传诊断。     

DinB基因的超表达短期内可显著降低大肠杆菌的死亡率

 [目的]探讨大肠杆菌dinB基因在进化上的选择优势.[方法]应用竞争共培养和超表达的策略,测定共培养后含dinB基因的目的菌株和对照菌株的生长优势.第1组为含质粒pUC-dinB-rrnb的E.coli AB1157＋含质粒pUC-dinBR-rrnb的E.coli YG7207;第2组为含质粒pUC-dinB-rrnb的E..coli AB1157＋含质粒pUC-phoE-rrnb的E.coli YG7207;第3组为含质粒pUC-phoE-rrnb的E.coli AB1157＋含质粒pUC-dinBR-rrnb的E.coli YG7207;第4组为卡那霉素抗性（K^＋）菌株YG7207与无卡那霉素抗性菌株AB1157.[结果]第4组中,卡那霉素抗性菌株YG7207与无卡那霉素抗性菌株AB1157在培养物中的比例保持着良好的稳定.第1组和第2组混合培养中,K^＋抗性的菌株在培养物中的比例急剧下降,并很快接近或等于0;第3组培养物中,K^＋菌株（YG7207）的比例呈明显上升.[结论]超表达dinB基因的大肠杆菌菌株的生长优势不是由于对数期的生长速率提高所造成,对数后期细胞死亡率降低应该是超表达dinB基因的大肠杆菌菌株的生长优势的主要原因.     

椎体成形术中注射聚甲基丙烯酸酯和锶羟磷灰石的比较

【目的】比较采用两种填充物聚甲基丙烯酸酯(polymethylmethacrylate,PMMA)和锶羟磷灰石(strontium-contained hydroxyapatitecement,SrHAC)行经皮椎体成形术(percutaneous vertebroplasty,PVP)的临床应用结果。【方法】选择单椎体骨折患者49例,其中男19例,女30例,随机分成2组,PMMA组26例,SrHAC组23例,对填充物注入量、术中患者血压、心率、血氧饱和度及术后填充物渗漏、疼痛改善、临床效果、影像学征象等指标进行评价分析。【结果】PMMA组平均注入量为(2.82±0.39)mL,SrHAC组平均注入量为(3.75±0.52)mL,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。SrHAC组注入填充物时血压、心率、血氧饱和度稳定。PMMA组视觉模拟量表(visual analogue pain scale,VAS)评分由术前平均的(7.0±0.8)分下降至末次随访时的(1.7±0.4)分;SrHAC组术前平均为(7.2±1.0)分,末次随访降为(1.8±0.5)分。两组组内比较手术前后差异均有统计学意义(P<0.01)。术后临床效果SC法评价,优良率:PMMA组为84.6%、SrHAC组为82.6%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。末次随访时椎体均无继续塌陷征象。随访达1年以上的SrHAC组见填充物开始降解。【结论】应用两种填充剂行PVP均为治疗骨质疏松性椎体压缩性骨折的有效办法。     

直接测序法与克隆测序法在单核苷酸多态性检测中的比较

目的:了解PCR产物直接测序法与克隆测序法在单核苷酸多态性(SNP)检测上的差别.方法:对2型糖尿病患者的载脂蛋白J外显子2基因及旁侧进行聚合酶链反应(PCR)扩增,分别对其产物进行直接测序和克隆测序.结果:在样本的检测中, PCR产物直接测序法所测序列与43～60 bp以后克隆测序相同;检出一个突变位点并与GenBank( DQ012938)发表序列一致.结论:PCR 产物直接测序法和克隆测序法都是检测SNP的有效方法,但前者不仅特异性强,敏感度高,而且比克隆测序方法更为快速简便,节省材料.     

4129例专家门诊问卷调研的启示和思考

专家门诊在各医院开设已十多年,为了解专家门诊的现况、需求,进一步做好专家门诊的管理,我们对上海交大医学院附属10所医院进行了专家门诊问卷调查,从而得到了启示和思考,为更好地做好专家门诊各方面工作提供了新的思路。     

“劳倦过度,房室不节”肾阳虚模型小鼠舌象研究

目的:观察“劳倦过度,房室不节”诱发的肾阳虚模型小鼠舌象变化。方法:选健康雄性昆明种小白鼠45只,随机分为对照组、模型组和治疗组3组,各15只。用强迫小鼠游泳法造成劳倦过度;以Colldege效应诱导雄性小鼠房室不节,建立肾阳虚小鼠模型。用金匮肾气丸作为治疗药物,6周时,观察各组小鼠舌象,做石蜡切片,HE染色,显微镜观察拍片。结果:模型组呈淡白舌,齿痕明显;治疗组基本为淡白舌,齿痕不明显。模型组舌乳头密度、舌分裂相频数较对照组明显下降(P<0.01),上皮层厚度、角质层厚度较对照组显著增加(P<0.05);治疗组较模型组乳头密度显著增加,上皮层厚度显著减小(P<0.05),舌分裂相频数增加,角质层厚度下降,但无统计学意义。结论:肾阳虚模型小鼠舌黏膜病理改变以上皮增殖减慢、代谢降低、萎缩和退变为主要特征。     

雌激素减少与代谢综合征关系的实验研究

目的：探讨雌激素减少与代谢综合征的相关性。方法:在基因库中搜索已知的对脂肪组织有影响的10个基因，筛选其启动子中可能存在的雌激素调控因子的基因。以不同月龄、不同基因型的卵泡刺激素受体敲除 (FORKO)雌鼠为动物模型，测量其腹内白色脂肪组织（WAT）重量、体重，计算腹内WAT与体重的比率；口服葡萄糖（2?g/kg），测快速血糖（0, 30, 60, 120?min）行葡萄糖耐量实验；用组织学方法观察脂肪细胞、肝脏细胞的形态；用放射免疫法测定血清瘦素。结果: ①在7个肥胖相关基因中找到了可能的雌激素调控位点；②FORKO雌鼠于3月龄时出现肥胖，腹内WAT的重量明显高于野生型（P＜0.05）；③FORKO雌鼠随月龄的增长葡萄糖耐量逐渐减低（P＜0.05）；④FORKO雌鼠腹内WAT细胞在3月龄时体积较小，表现为增生（P＜0.05），而在8个月时表现为肥大(P＜0.05)；⑤FORKO雌鼠于8月龄时WAT细胞、棕色脂肪（BAT）细胞及肝细胞内均有大量脂酯颗粒堆积；⑥月龄3～5个月的FORKO雌鼠空腹的血清瘦素水平均明显高于野生雌鼠(P＜0.05)。结论:FORKO雌鼠因雌激素减少而表现出腹型肥胖、高血糖、高瘦素和胰岛素抵抗等代谢紊乱，提示雌激素减少可导致代谢综合征。     

妊娠期乳腺癌的诊断与治疗(附3例临床病例分析)

目的 探讨妊娠期乳腺癌的诊断、治疗和预后。方法回顾性分析北京大学人民医院1994年～2004年收治的3例妊娠期乳腺癌患者的临床资料。结果妊娠期乳腺癌的发生率是0．02％，平均年龄为30岁。主要临床表现为乳腺肿物，经针吸细胞学或手术活检病理确诊，其中2例患者从出现症状到临床确诊的时间超过9个月。2例患者为Ⅱ期，1例Ⅳ期。Ⅱ期患者放弃胎儿行流产后，衍乳腺癌改良根治术，并辅以化疗，分别随访8年6个月和10年8个月；Ⅳ期患者妊娠已足月，行剖宫产后仪切除乳腺肿物，虽辅以化疗，仅生存15个月。结论妊娠期乳腺癌的临床表现和诊断方法与非妊娠期相同，但常延迟诊断。治疗依据肿瘤的临床期别、妊娠周数及患者对胎儿的需求程度。妊娠对乳腺癌的预后无明显影响。     

第3代小儿死亡危险评分和小儿危重病例评分的应用

第3代小儿死亡危险评分(pediatric risk of mortalityⅢ,PRISMⅢscore)和小儿危重病例评分(pediatric critical illnessscore,PCIS)均为生理学危重评分法。前者发表于1996年,由原PRISM评分发展而来,有17个生理参数,26个生理参数范围,是世界上应用最广泛的儿科评估病情和预后的工具。后者公布于1995年,有10项生理指标,其简便、有效、适合国情,是国内应用最广泛、有效的儿科危重评分法。二者均经过大规模临床应用验证。除评估病情和预后,还可评估ICU工作质量和效益,对比不同ICU患者状况、资源利用和管理,进行危重症临床研究。本研究对PRISMⅢ的应用及其与PCIS的进行对比研究。     

体内和体外变应原测定在过敏性哮喘诊断中的联合应用

目的分析变应原皮肤点刺试验(SPT)和血清吸入性变应原筛查(Phadiatop)及特异性IgE测定联合应用在过敏性哮喘变应原诊断中优势。方法对57例诊断哮喘患儿进行吸入性变应原SPT测定和Phadiatop测定。对其中33例进行血清户尘螨特异性IgE测定。分析本组哮喘患儿SPT结果分布,SPT与Phadiatop结果符合率,户尘螨SPT与其特异性IgE结果符合率。结果儿童哮喘吸入性致敏原分布最常见的为尘螨、真菌、宠物等室内变应原。本组SPT和Phadiatop阳性检出率分别为86%、79%,SPT与Phadiatop符合率86%。5例Phadiatop阴性患儿经SPT和真菌特异性IgE测定证实存在真菌过敏。户尘螨SPT和特异性IgE结果符合率为97%。结论在儿童哮喘相关吸入性变应原诊断中,联合应用体内和体外变应原测定方法可互为补充,有助于提高变应原诊断的敏感性和特异性。