SARS患者粪便、痰标本病毒RNA阳性检出率与病程变化的关系

目的 探讨严重急性呼吸综合征(SARS)患者粪便、痰标本中病毒RNA阳性检出率与病程变化的关系。方法 采取一步法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对不同病程的临床标本进行SARS冠状病毒(SARS-associated coronavirus,SARS-CoV)RNA的扩增和序列测定,并采用趋势X~2检验探讨标本阳性检出率与不同发病时间的关系。结果 被检样品中扩增出的特异性片段,经测序验证为SARS-CoV序列(同源性100％)。在检测的临床标本中,粪便标本阳性检出率最高(21.55％)。趋势X~2检验显示SARS患者粪便和痰标本中病毒阳性检出率均随着发病时间的增长而下降,X~2=12 55和16.408,P=0.0004和P=0.000 05。结论 一步法RT-PCR可以有效检测SARS患者临床标本存在的SARS-CoV;SARS患者粪便、痰标本RT-PCR阳性率随着发病时间的增长而下降。     

mxA基因多态性与SARS病毒易感性的病例对照研究

目的探讨黏病毒抗性蛋白1（MxA）基因多态性与人群严重急性呼吸综合征（SARS）发病间的关系。方法采用病例对照研究，用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析检测mxA基因启动子-88位G／T多态性位点，对SARS传播的相关因素进行问卷调查，并用SPSS软件进行单因素和多因素分析。结果选取了66例SARS病例和64名对照进行研究。与GG基因型相比，含等位基因T的基因型（GT＋TT）在病例中的构成比（81．3％）显著高于对照组（62．5％），0R值（95％CJ）为2．700（1．208～6．037）。多因素logistic回归分析结果表明，在调整了与SARS病例接触时戴口罩，穿防护服，戴眼罩等相关因素后，与GG基因型相比，含等位基因T的基因型（GT＋TT）仍与SARS发病有显著性关联，调整OR值（95％CI）为2．911（1．027～8．250）。结论mxA基因启动子-88位G／T多态性可能与中国汉族人群SARS发病的基因易感性有关。     

大兴安岭地区人群埃立克体感染的调查

目的：了解我国大兴安岭地区可疑人群是否存在人埃立克体感染。方法：用16SrRNA基因特异引物进行半巢式多聚酶链反应及基因序列分析技术,检测大兴安岭地区的一些人血标本中查菲埃立克体（Ehrlichia chaffeensis,EC）和人粒细胞埃立克体（human granulocytic ehrlichia）的16S rRNA基因,并进行序列分析,将测出的序列与CenBank中注册的基因序列进行最大同源性比较。结果：从蜱咬后出现发热等疾病的35例病人和近一年内有蜱咬史的林场工人血中检测到这两种埃立克体的16SrRNA基因片段;对1份可疑埃立克体病人血标本进行了人粒细胞埃立克体16SrRNA全基因扩增,测出的序列与美国1株人粒细胞埃立克体的该基因仅差1个碱基。结论：初步认为我国大兴安岭地区存在人埃立克体感染人群。     

半套式PCR检测蜱中查菲埃立克体的评价

我们采用将查菲埃立克体 16ＳｒＲＮＡ基因的重组质粒进行稀释的方法 ,对半套式ＰＣＲ法检测蜱中查菲埃立克体 (Ｅｈｒｌｉｃｈｉａｃｈａｆｆｅｅｎｓｉｓ ,ＥＣ)的特异性和敏感性及其在流行病学调查中的应用价值进行了评价 ,报告如下。1　材料与方法　 　按照ＱＩＡｐｒｅｇ试剂盒说明书的要求提取ＥＣ质粒 (美国霍普金斯大学Ｄｕｍｌｅｒ博士提供 )ＤＮＡ ,测定光密度值后 ,根据《分子克隆》中所提供的计算方法 ,将质粒ＤＡＮ定量。采用煮沸法制备不含病原的草原革蜱ＤＮＡ提取液 ,作为ＥＣ质粒的稀释液。将提取的质粒稀释成 1× 10 6 、…     

福建省宁化县斑点热群立克次体的研究

「目的」对已知的宁化县斑点热群立克次体疫源地进行全面系统ＳＦＧＲ感染情况调研。「方法」采用微量室温补体结合法（ｍＣＦ）和间接免疫荧光（ＩＦＡ）法;鸡胚卵巢黄囊感染法并用ｍＣＦ、ＰＣＲ／ＲＦＬＰ分子生物学技术进行鉴定。「结果」人群血清阳性率为１２．７％（１２１／９５２）。宿主动物ＳＦＧＥ感染,抗体阳性率０～５５．６％不等。鉴定分类各种蜱５６００余只,共６属１３种。从野兔、麂体表寄生的越原血蜱中分离出     

我国部分林区鼠中莱姆病螺旋体的分子流行病学调查研究

目的了解我国部分林区鼠中莱姆病螺旋体感染及其基因分型情况。方法应用巢式PCR扩增鼠中莱姆病螺旋体5S-23S rRNA间隔区片段,对阳性产物进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析。结果共检测鼠8属19种455只,感染莱姆病螺旋体的有4属8种26只,感染率为5.71%。内蒙古、黑龙江、浙江、贵州林区鼠的感染率分别为3.45%、4.84%、8.00%、7.14%;其中东北林区(包括内蒙古和黑龙江)棕背鼠平的感染率为9.09%;浙江林区社鼠的感染率为9.26%;未发现新疆林区鼠感染莱姆病螺旋体。RFLP分析结果显示内蒙古、黑龙江林区鼠中莱姆病螺旋体均为B.garinii基因型,而浙江、贵州林区鼠感染的莱姆病螺旋体包括B.garinii和B.valaisiana两种基因型。结论东北林区及浙江林区以B.garinii基因型为主,棕背鼠平、社鼠可能分别是两地林区莱姆病螺旋体的主要储存宿主。     

用半套式PCR检测蜱和啮齿动物中查菲埃立克体

目的　了解福建西北部林区查菲埃立克体 (Ehrlichiachaffeensis)的存在情况。方法　用 16SrRNA基因特异引物进行半套式PCR ,检测从福建武夷山和宁化采集的蜱类及野生动物中的查菲埃立克体DNA ,然后对有代表性的标本的扩增产物进行克隆和序列测定 ,并与GenBank中注册的核苷酸序列进行同源性比较。结果　从该地区的越原血蜱 ,野鼠(褐家鼠、黄毛鼠、黄胸鼠、社鼠、小家鼠 )和野兔的脾脏和 /或血块中均扩增出了查菲埃立克体的特异片段。越原血蜱成蜱 2 40组 (6 16只 ) ,31组阳性 ,最小阳性率 5 0 %。野鼠脾脏标本 39份 ,2 2份阳性。野鼠和野兔血块标本共 35份 ,14份阳性。 390bp的PCR产物经克隆、测序后分析发现其DNA序列与美国查菲埃立克体分离株对应位置一致。结论　福建西北部林区可能存在人单核细胞埃立克体病的自然疫源地。     

致倦库蚊经口感染登革2型病毒的实验观察

<正> 登革热的传播媒介主要为埃及伊蚊和白纹伊蚊,其他已证实的媒介也都是伊蚊。国外有人曾提出致倦库蚊有可能传播登革热。国内陈文洲等(1982年)在海南岛曾从病家捕获的致倦库蚊中分得登革3型病毒。为了进一步证明致倦库蚊能否成为登革热的传播媒介,本文进行了人工感染试验,结果如下。     

实验感染登革热病毒的蚊虫涎腺荧光抗体染色检查

本文通过对接种感染和经口感染登革热病毒的白纹伊蚊的头压片和涎腺荧光抗体染色的结果比较,选定以涎腺阳性率作为比较不同蚊种和蚊株媒介效能的一个指标。其优点为阳性率高,荧光亮度强,结果清晰易判断,无非特异荧光。采用冻麻状态解剖后,1人1小时可解剖20～30只蚊虫的涎腺,成功率在95％以上。     

间接免疫荧光抗体试验在传染性非典型肺炎诊断中的应用

目的：评价应用间接免疫荧光抗体试验(IFA)在传染性非典型肺炎[严重急性呼吸综合征(SARS)]诊断中的可靠性，探讨SARS患者发病后血清抗体在体内的产生规律。方法：采用IFA方法检测不同发病时间的临床确诊SARS病例、疑似病例和其他人群的血清SARS病毒抗体，同时对每一个研究对象采用调查表进行一般情况调查。结果：在发病10天内，SARS患者血清IgG阳性率为55.1％，IgM阳性率为16．3％；发病10天后SARS患者IgG阳性率达89．8％，IgM阳性率达65．3％；发病25天以后SARS患者IgG、IgM阳性率均为90．9％。对发病时间与抗体阳性率采用趋势x^2检验，结果：显示SARS患者血清IgG、IgM抗体阳性率随着发病时间而上升(IgG趋势检验x^2＝16．376，P＝0．00005；IgM趋势检验x^2＝28．736，P＝0．000 00)。IFA法用于检测SARS患者发病10天后血清抗体，结果：显示灵敏度、特异度及与临床诊断的符合率均在90％以上。结论：IFA法适于SARS发病10天后作为实验室辅助诊断方法。