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伯氏疏螺旋体鞭毛蛋白特异性区段的基因克隆和表达 总被引:1,自引:1,他引:0
目的表达伯氏疏螺旋体鞭毛蛋白特异性区段,探讨其作为诊断抗原的可行性。方法用PCR方法获取与其它种属螺旋体编码鞭毛蛋白的基因序列同源性较低的第409-786bp区段,经DNA序列测定证实后,经克隆、转化,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,并做Western-bolt分析。结果重组蛋白在宿主菌内表达高效、稳定,Western-blot示与抗鞭毛蛋白的单克隆抗体有较好的免疫反应性。结论以重组鞭毛蛋白的特异性区段作为诊断抗原具有可行性。 相似文献
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目的:了解我国北方部分地区宿主动物感染土拉弗菌状况和基因型别.方法:鼠夹诱捕鼠,从鼠脾组织提取DNA,应用巢式PCR检测土拉弗菌,计算并比较各地区及各鼠种阳性率.阳性标本用型特异性引物及短串联重复序列(SSTR9、SSTR16)引物扩增两区域并测序,用ClustalX(5.0)和DNA Club软件对序列进行比较分析.结果:共捕获鼠421只,分属14种鼠种,其中7个鼠种20份标本PCR检测阳性,总阳性率为4.75%.吉林、新疆、黑龙江、内蒙古和浙江的阳性率分别为11.65%,10.00%,6.54%,1.76%和0%.地区间阳性率差异显著(χ^2 = 20.90,P = 0.0003);不同鼠种间阳性率未见差异(χ^2 =11.82,P = 0.066).对20份扩增阳性标本进行型特异性扩增及SSTR9、SSTR16序列测定并对比分析,结果显示均为土拉弗菌B亚型,但型内差别较大,标本及菌株相互比较均显示基因多态性程度高且地区间有交叉.结论:我国北方部分地区可能依然存在B亚型土拉弗菌型感染(宿主动物)情况,且其基因型内差异较大. 相似文献
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我国莱姆病病原研究和诊断方法的进展中国军事医学科学院(北京100071)张泮河(综述)张启恩(审阅)莱姆病是由伯氏疏螺旋体引起的一种经蜱传播的多系统受累的疾病。我国1986年首次在黑龙江省海林地区发现莱姆病[1],1987年分离到病原体,并对其宿主动... 相似文献
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目的 了解汉坦病毒(HV)优势宿主褐家鼠感染HV的相关危险因素。方法 采集北京不同地区、生境捕获的褐家鼠,用统一的调查表记录宿主动物及环境特征,采用针对HVM基因片段的巢式RTPCR法检测其带病毒情况,运用SPSS软件多因素非条件logistic回归分析。结果 在所调查的10种相关因索中,6种与褐家鼠HV感染相关。多因素非条件logistic回归分析结果显示:成年鼠、处于繁殖期、体表皮肤有伤痕是褐家鼠HV感染的危险因素。雄性睾丸位于阴囊内与雄性HV感染有非常高的危险度(OR=30.92)。发情期雄性个体的体表疤痕率高于非发情期个体(P=0.049),两者的交互作用与HV感染相关有统计学意义(P〈0.001)。结论 从现场多途径观察研究证实:HV在褐家鼠中存在平行传播,雄性的侵犯行为促进HV的传播。 相似文献
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一株西尼罗病毒株的生物学特征研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的对引进的西尼罗病毒(WNV)毒株的形态学、致病性、细胞敏感性、免疫原性等生物学性状进行探讨,为进一步开展WNV的相关研究奠定基础。方法选择Vero-E6与C6/36细胞观察WNV的细胞病变效应(CPE),并制作电镜负染标本和组织切片标本进行病毒形态学鉴定;通过乳鼠脑内接种WNV确认其致病性;以灭活的感染乳鼠脑悬液免疫BALB/c小鼠,以间接免疫荧光试验(IFA)测定其血清WNV IgG抗体;用RT-PCR检测病毒核酸,扩增的核苷酸序列通过BLAST作同源性比较。结果WNV所致Vero-E6与C6/36细胞的CPE分别以细胞圆缩和融合为主要特征;电镜下所见病毒体为有包膜、直径约30~50nm的球形颗粒;脑内接种WNV可致全部乳鼠死亡;灭活病毒可诱导小鼠产生WNV抗体;经RT-PCR扩增,在WNV培养液及感染乳鼠脑组织中均检测到目的基因片段,且仅与WNV有较高的同源性(94%~100%)。结论本研究使用的WNV毒株可供进一步开展WNV的相关研究。 相似文献
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为了验证我国中东部发热伴血小板减少综合征流行地区—信阳和济南的蜱中有斑点热群立克次体存在,且有复合感染新型布尼亚病毒的情况,用布旗法和动物体表检查法在河南省信阳市和山东省济南市捕获蜱,采用PCR和RT-RCR进行病原体感染筛查.信阳市捕获长角血蜱215只,其中游离蜱164只,寄生蜱51只.37只蜱斑点热群立克次体检测阳性,阳性率17.2%;38只蜱新型布尼亚病毒检测阳性,阳性率为17.7%;4只蜱斑点热群立克次体与新型布尼亚病毒复合感染,复合感染率为1.9%.山东省捕捉到166只寄生蜱,均为长角血蜱,4只蜱斑点热群立克次体检测阳性,阳性率为2.4%.6只蜱新型布尼亚病毒检测阳性,阳性率为3.6%:2只蜱为斑点热立克次体与新型布尼亚病毒复合感染,复合感染率为1.2%.结果证实我国中东部地区存在斑点热立克次体与新型布尼亚病毒复合感染. 相似文献
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我国一些常见蜱种莱姆病螺旋体的分离与鉴定 总被引:5,自引:1,他引:4
本文对我国不同地区 8种蜱感染莱姆病螺旋体的情况进行了分离培养 ,从内蒙获得 2个分离株 ,对分离株的 16srDNA基因序列进行分析比较 ,发现新分离的两株莱姆病螺旋体同我国报道的CHY13p株具有高度同源性 ,CHY13p与CHNM4有 2个碱基差异 ,CHY13与CHNM5只有 1个碱基差异 ,而CHNM4和CHNM5两株螺旋体有 2个碱基差异。可初步认定新分离莱姆病螺旋体系Borreliagarinii。 相似文献
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目的探讨黏病毒抗性蛋白1(MxA)基因多态性与人群严重急性呼吸综合征(SARS)发病间的关系。方法采用病例对照研究,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析检测mxA基因启动子-88位G/T多态性位点,对SARS传播的相关因素进行问卷调查,并用SPSS软件进行单因素和多因素分析。结果选取了66例SARS病例和64名对照进行研究。与GG基因型相比,含等位基因T的基因型(GT+TT)在病例中的构成比(81.3%)显著高于对照组(62.5%),0R值(95%CJ)为2.700(1.208~6.037)。多因素logistic回归分析结果表明,在调整了与SARS病例接触时戴口罩,穿防护服,戴眼罩等相关因素后,与GG基因型相比,含等位基因T的基因型(GT+TT)仍与SARS发病有显著性关联,调整OR值(95%CI)为2.911(1.027~8.250)。结论mxA基因启动子-88位G/T多态性可能与中国汉族人群SARS发病的基因易感性有关。 相似文献