福建省宁化县斑点热疫源地的调查研究

斑点热 (ｓｐｏｔｔｅｄｆｅｖｅｒ,ＳＦ)是由一组斑点热群立克次体(ｓｐｏｔｔｅｄｆｅｖｅｒｇｒｏｕｐｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ,ＳＦＧＲ)引起的一种人兽共患蜱媒自然疫源性疾病。其主要通过森林中蜱、螨的吸血活动在人和动物间传播。福建省宁化林区斑点热的存在已被我们以往工作所证实[1,2 ] 。为进一步查明福建省宁化林区斑点热群立克次体在人群及宿主动物、媒介蜱类中感染情况及疫源地类型 ,1993年至今我们采用现场调查、血清学检测、病原分离和分子生物学技术等进行研究。现将结果报告如下一、材料与方法1.材料来源 :(1)血清样本 :人血…     

中国内蒙古、新疆部分地区鼠类自然感染恙虫病东方体的调查

目的了解中国内蒙古、新疆自治区部分地区鼠类自然感染恙虫病东方体（Ot）的情况.方法采用鼠夹捕鼠,从鼠脾中提取DNA,应用巢式PCR（nPCR）检测Ot-Sta56基因;对部分阳性标本测序,用Clustal Ⅹ（5.0）和DNA Club软件对序列进行比较分析.结果内蒙古地区捕获各种鼠类共计90只,其中6只nPCR检测阳性,总阳性率为6.67%,不同鼠种间阳性率有差别,但无统计学意义（x^2=8.898,P=0.148）;新疆地区捕获各种鼠类共计20只,其中1只nPCR检测阳性,阳性率为5.00%.不同地区间阳性率比较虽略有差别,但无统计学意义（x^2=0.076,P=0.782）.内蒙古、新疆部分地区从农田中捕获的鼠类标本为9只,占8.18%,无阳性标本;从草原捕获的鼠类标本为101只,占91.82%,其中阳性标本为7只,草原鼠标本Ot感染率为6.93%.序列分析结果：N59（内蒙古莫氏田鼠）、N69（内蒙古黑线仓鼠）、X33（新疆普通仓鼠）3份标本nPCR产物碱基序列与Karp株相应DNA片段的碱基序列同源性最高,均为99%,应属于Karp型;N65（内蒙古黑线仓鼠）及N88标本（内蒙古黑线姬鼠）nPCR产物碱基序列与中国台湾Taitung-2株和TW461株相应DNA片段的碱基序列同源性最高,均为94%;N90（内蒙古黑线姬鼠）与日本Oishi株相应DNA片段的碱基序列同源性最高,为96%.系统发育分析表明,N59、N69、X33位于Karp株所在的分支,而N65、N88、N90与Taitung-2株、TW461株、Yonchon株、Sxh951株、Oishi株、Kanda株属同一支系.结论研究证实内蒙古、新疆部分地区鼠类存在Ot自然感染,其基因型较为复杂.这为进一步深入进行恙虫病疫源地的调查奠定了基础.     

部队人群肺结核发病因素的病例对照研究

目的研究部队人员肺结核发病的危险因素。方法采用病例对照研究设计,通过问卷调查获得相关环境因素的信息,采用SPSS软件进行非条件单因素Logistic回归分析,计算OR值及95%CI。结果共152名病例和259名对照纳入分析,单因素分析发现卡介苗接种史及与结核病人密切接触史在病例和对照组中的分布有显著性差异,前者是肺结核发病的保护因素,OR值(95%CI)为0·44(0·29~0·68),后者是肺结核发病的危险因素,OR值(95%CI)为2·12(1·04~4·32)。而抽烟、饮酒情况、肉类摄入量、蔬菜摄入量、健身状况等其他因素在两组中分布差异无显著性。结论卡介苗接种对部队人员结核病发生有显著保护作用,而肺结核病例接触史是一个潜在的危险因素。     

甘露糖结合凝集素基因多态性与肺结核易感性的研究

目的 探讨甘露糖结合凝集素（MBL）基因多态性与中国汉族人群肺结核发病间的关联。方法 采用以医院为基础的病例对照研究设计，对结核病相关危险因素进行问卷调查，联合应用引物序列特异性PCR（PCR-SSP）和序列特异性寡核苷酸探针杂交（PCR-SSOP）等方法对MBL基因H/L、X/Y、P/Q和A/B四个多态性位点进行基因型分析及单倍体型分析。将各位点的基因型或单倍体型在病例组和对照组的分布进行比较，并将有显著作用的环境危险因素纳入进行多因素非条件logistic回归分析。结果 133名肺结核病例和177名对照纳入本研究，多因素分析调整结核病暴露史和疫苗接种史两个因素后，MBL基因的HL和LL基因型与疾病的保护作用显著相关，调整OR值（95％CI）分别为0．54（0．30-0．95）和0．50（0．26-0．96）。MBL基因XB组单倍体型与中国汉族人群肺结核发生的易感性显著相关，调整OR值（95％CI）为1．60（1．07-2．41）。而其余多态性位点，包括X/Y、P/Q和A/B位点与肺结核的发生均无显著性关联。结论 中国汉族人群MBL基因多态性可能与汉族人群肺结核发生的易感性显著相关。     

东北林区鼠类粒细胞埃立克体感染的调查

目的了解东北林区啮齿动物感染粒细胞埃立克体病原体的情况。方法运用聚合酶链反应方法对吉林、黑龙江、内蒙古林区采集的啮齿动物标本粒细胞埃立克体的16S rRNA和gltA基因片段进行检测并测序,将所测序列与GenBank中注册的基因序列进行比较分析。结果共检测鼠标本276份,其中吉林长白山林区102份,黑龙江小兴安岭林区61份,内蒙古大兴安岭林区113份,阳性率分别为8.82%、1.64%及0.00%。体表有寄生蜱的鼠感染危险性是体表无寄生蜱鼠的11.30倍(P=0.002)。吉林、黑龙江林区鼠标本及其寄生蜱标本16S rRNA基因序列完全相同,与美国、瑞典、日本等国家检出的粒细胞埃立克体对应序列的同源性为97%-99%。gltA基因核苷酸序列与GenBank注册的相应片段比较相似性为87%-97%,推导的氨基酸序列相似性为84%-99%。结论吉林及黑龙江林区存在粒细胞埃立克体宿主动物感染。     

严重急性呼吸综合征康复病例血清中和抗体三年追踪观察

目的了解严重急性呼吸综合征（SARS）康复病例病后3年血清中和抗体水平及其变化规律,为SARS疫苗的研制和使用决策提供理论依据。方法对SARS康复病例进行随访,分别采集病后第5个月、第20个月和第35个月的血清,每份血清标本均采用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）和微量中和试验二种方法进行血清SARS-CoV特异性抗体的检测。中和抗体效价采用Reed-Muench方法计算。3个时间点中和抗体效价的趋势分析采用对数转换后的数据进行重复测量方差分析。结果分别采集到病后第5个月、第20个月和第35个月的血清标本13份、17份和13份,采用ELISA法检测的抗体阳性率分别为100%、82．4%和84．6%,而采用中和试验法检测的中和抗体阳性率均为100%,中和抗体效价依次为1：43（1：16～1：203）、1：36（1：17～1：59）和1：21（1：10～1：39）,其差异具有统计学意义（F=60．419,P＜0．001）。病后第35个月时有30．8%（4/13）的病例血清中和抗体效价高于1：36,但另有30．8%（4/13）的病例血清中和抗体效价等于或略高于1：10（临界水平1：8）。结论SARS病例血清中和抗体至少可持续3年,但中和抗体效价随康复时间延长呈逐渐下降趋势;血清中和抗体效价个体差异较大,病后第35个月时部分病例的血清中和抗体效价已降至较低水平,何时完全消失尚需进一步追踪观察。     

应用AFLP方法对我国土拉弗菌基因分型的研究

土拉菌病又称“野兔热”，是由土拉弗菌经患病野生动物、吸血昆虫或遭受污染的水或食物传播的一种自然疫源性疾病，呈世界性分布。其致病菌是革兰阴性胞内寄生菌，包括4种基因型。由于不同基因型在地理分布、毒性等方面存在较大差异，基因分型研究一直是该领域的研究热点，而近年来随着16S rRNA的序列分析、随机引物扩增多态性（RAPD）、限制性片段长度多态性（RFLP）、     

北京海淀城郊鼠类携带汉坦病毒的相关危险因素研究

目的　了解北京市海淀区城郊宿主动物携带肾综合征出血热病毒状况 ,分析宿主动物带毒相关危险因素。　方法　夜夹法捕鼠 ,计算鼠密度 ,确定鼠种构成。应用RT -PCR扩增M片段部分序列检测宿主带病毒率 ,根据检测结果应用Logistic回归分析通过SPSS( 9 0 )软件分析宿主动物感染的可能危险因素。　结果　共捕获宿主动物 2 3 8只 ,褐家鼠为优势鼠种 ,占 70 5 9%。其次为小家鼠 ,占 2 5 2 1%。RT -PCR检测宿主带病毒率 ,褐家鼠为 14 2 9% ,小家鼠为 0。就褐家鼠而言 ,尽管成鼠阳性率高于幼鼠 ,雄鼠阳性率高于雌鼠 ,但成鼠和幼鼠间、雌鼠和雄鼠间带毒率差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,但扩增阳性鼠和扩增阴性鼠体重的差异有非常显著性 (P <0 0 0 1)。多因素分析显示宿主感染危险因素最重要的鼠个体因素尤其是体重。　结论　北京市海淀区城郊汉坦病毒感染的主要宿主动物是褐家鼠 ,采样点的鼠密度与带毒率非正相关 ,但二者可能存在更复杂的关系。     

用聚合酶链方法对北京林区莱姆病疫源地及莱姆病病原体基因型的探索性研究

目的：进一步明确北京林区是否存在莱姆病的自然疫源地及其分布，方法基于莱姆病螺旋体外膜蛋白A基因建立半巢式聚合酶链式反应(polymerase chain reactio,PCR)方法，对从北京6个林区采集的蜱和鼠进行检测和基因分型，选择阳性标准本进行克隆和序列测定，与已知序进行同源性比较，间接免疫荧光法检测抗莱姆病螺旋体IgG抗体，从长角血蜱中分离莱姆病螺旋体。结果：从门头沟区东灵山采集的标本中检测到莱姆病螺旋体DNA片段，3只游离全沟硬蜱1只检测阳性，57只寄全沟硬蜱若蜱中1只检测阳性；119只野鼠中9只检测阳性，其中8只，B.garinii阳性，1只B.afzelii阳性。50份野鼠血清有5份莱姆病螺旋体IgG抗体阳性，采集采的160只长角血蜱（20只／组）。未分离到莱姆病螺旋体菌株。结论：北京门头沟区东灵山可能存在莱姆病的自然疫源地，包括两个基因型，全沟硬蜱可能是莱姆病的传播媒体，野鼠可能是贮存宿主。     

双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫反应的动态观察

为动态观察沙鼠肾原代细胞双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫动物后的免疫反应 ,采用人用剂量的 1/ 2 0肌内注射免疫小鼠 ,局部麻醉下采集尾血 ,分离血清 ,用间接酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定血清抗体水平 ;处死动物时分离腹股沟淋巴结和脾脏淋巴细胞进行分类计数。结果显示 :双价肾综合征出血热疫苗在初次免疫后第 2针血清抗体有较大提高 ,并维持在高水平。流式细胞分类计数 ,疫苗注射组腹股沟淋巴结CD+ 4 细胞的免疫荧光强度显著高于对照组 (P<0 0 5 ) ,但脾脏的B细胞荧光强度却显著低于对照组 (P<0 0 5 ) ,提示接种该疫苗后细胞免疫亢进。表明沙鼠肾原代细胞双价肾综合征出血热灭活疫苗随接种时间的推移 ,产生良好的免疫反应。这种反应在免疫 2针后能够维持较高水平。该疫苗的免疫机理可能是通过局部淋巴结对抗原呈递来实现的。同时提示 ,疫苗可能造成细胞免疫功能亢进