替米沙坦对糖尿病大鼠认知功能的保护作用

目的 观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂替米沙坦对糖尿病大鼠认知功能的保护作用.方法 将40只大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组、糖尿病 替米沙坦组.建立链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)糖尿病大鼠模型,替米沙坦干预12周,Morris水迷宫测试其学习记忆能力,透射电镜观察海马CA1区突触超微结构.结果 替米沙坦组与糖尿病组比较,Morris水迷宫测试中潜伏期明显缩短(P＜0.05),中心区停留时间百分比和通过原平台位置次数增加(P＜0.05),电镜下海马突触结构明显改善.结论 替米沙坦对糖尿病大鼠认知功能有保护作用.     

替米沙坦对糖尿病大鼠认知功能及大脑皮质Ghrelin受体表达的影响

目的 观察替米沙坦对糖尿病大鼠认知功能和大脑皮质Ghrelin受体GHSR的表达影响.方法 将40只大鼠分为正常对照组、糖尿病组、替米沙坦组.建立STZ糖尿病大鼠模型,替米沙坦干预12周,Morris水迷宫测试其认知能力.RT-PCR检测大脑皮质GHSR mRNA水平表达变化,免疫组化观察大鼠大脑皮质GHSR蛋白的表达.结果 替米沙坦组与糖尿病组比较,Morris水迷宫测试中潜伏期明显缩短(P<0.05),中心区停留时间百分比和通过原平台位置次数增加(P<0.05),免疫组化显示GHSR蛋白表达增加(P<0.05),RT-PCR显示GHSR在mRNA水平表达增加(P<0.05).结论 糖尿病引起大鼠认知功能下降和GHSR表达下降,GHSR下降可能与认知障碍有关.早期替米沙坦治疗可使糖尿病大鼠认知功能和海马GHSR表达接近正常.     

血管紧张素Ⅳ对糖尿病大鼠认识功能及其受体表达变化的影响

目的:观察血管紧张素Ⅳ(AngⅣ)对糖尿病大鼠认知功能、AT4受体表达的影响.方法:40只SD雄性大鼠随机分成正常对照组、糖尿病组、糖尿病+AngⅣ组,建立链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠模型,成模后第12周,Morris水迷宫测试其学习记忆能力,测试结束后糖尿病+AngⅣ进行侧脑室注射,糖尿病组和正常对照组注射等体积生理盐水,持续1周,再进行Morris水迷宫测试,免疫组化观察AT4受体的表达,RT-PCR检测AT4受体mRNA表达水平变化.结果:糖尿病+AngⅣ组和糖尿病组比较,Morris水迷宫测试中潜伏期明显缩短(P<0.05),通过平台位置次数增加(P<0.05),AT4受体蛋白及其mRNA表达下降(P<0.05).结论:AngⅣ对糖尿病大鼠认知功能有改善作用,AT4受体表达下调可能是作用途径之一.     

低甲状腺素血症对发育期大鼠行为及海马synaptotagmin 1表达的影响

目的 研究低甲状腺素血症对发育期大鼠行为及海马内突触结合蛋白1(synaptotagmin 1,syt1)表达量的影响.方法 双侧甲状腺切除1日龄(P1)SD新生大鼠建立低甲状腺素血症模型,SD大鼠数字表法分成两组:假手术对照(control,C)组(n=36)和低甲状腺素血症(hypothyroxinemia,HT)组(n=36).观察大鼠体重变化,P32行高架十字迷宫实验,P34～ 39行Morris水迷宫实验.检测P10、21、40大鼠甲状腺功能及海马syt1的表达量.结果 与C组比较,HT组大鼠体重增长缓慢(P＜0.01);HT组大鼠高架十字迷宫进入臂总次数和开臂次数增多(P＜0.05),闭臂时间减少(P＜0.01);Morris水迷宫实验逃避潜伏期明显延长(P＜0.05);HT组P10、21大鼠海马syt1表达量显著增加(P＜0.01),P40大鼠海马syt1表达量减少(P＜0.05).结论 发育期低甲状腺素血症导致大鼠情感及学习能力改变,并影响其海马syt1的表达量.     

血管紧张素Ⅳ对糖尿病大鼠海马神经元凋亡及其认知功能的影响

目的:观察血管紧张素Ⅳ(Angiotensin Ⅳ,AngⅣ)对糖尿病大鼠海马神经元凋亡及其认知功能的影响.方法:38只SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组和糖尿病+AngⅣ组,建立STZ糖尿病大鼠模型,Morris水迷宫测试大鼠学习和记忆能力,免疫组化观察大鼠海马凋亡调节因子Bcl-xl的表达,同时用原位末端标记法检测海马神经元凋亡.结果:糖尿病+AngⅣ组大鼠学习和记忆成绩明显优于糖尿病组(P<0.05),其海马Bcl-xl表达也明显增高(P<0.05),而且其海马神经元凋亡明显减少.结论:AngⅣ对糖尿病大鼠认知功能有改善作用,机制可能与上调Bcl-xl的表达保护海马神经元凋亡有关.     

海马细胞胞浆RARα表达对大鼠学习记忆功能的影响

目的 探讨海马细胞胞浆视黄酸受体(retinoic acid receptor,RAR)α蛋白表达对大鼠空间学习记忆功能的影响.方法 SD大鼠采用完全随机化分组方法分为Morrs水迷宫(Morris watermaze,MWM)训练组(n=6)和未训练组(n=6),检测海马组织RARα和GluR1表达水平.分别将AAV-control shRNA和AAV-RARα shRNAs海马定位注射SD大鼠后,检测其学习记忆功能及海马组织RARα和GluR1表达水平变化.体外利用神经生长因子(neuron growth factor,NGF)诱导PC12细胞成熟分化,检测RARα和GluR1表达水平、胞内钙活性及静息膜电位.结果 水迷宫训练组大鼠海马组织RARα和GluR1总蛋白和胞浆蛋白表达水平均较未训练组显著增加(P＜0.01).海马定位注射2周后,Morris水迷宫检测发现AAV-RARαshRNAs组大鼠学习记忆功能较对照组明显减弱(P＜0.05),同时海马RARα和GluR1总蛋白和胞浆蛋白表达水平也明显下降(P＜0.01).经NGF诱导后的PC12细胞静息膜电位更接近于神经元静息膜电位(P＜0.01),RARα和GluR1总蛋白和胞浆蛋白表达水平较对照组明显增高(P＜0.01),胞内钙活性明显增强(P＜0.05).结论 海马细胞胞浆RARα蛋白表达与学习记忆能力呈正相关,在调节突触可塑性中发挥重要作用.     

饥饿胁迫24h对小鼠认知功能及海马区前脑啡肽原表达的影响

目的 观察饥饿胁迫对小鼠认知功能和大脑海马区前脑啡肽原表达的影响.方法 将40只小鼠随机分为对照组和饥饿24h组(下称饥饿组),Morris水迷宫和八臂迷宫测试小鼠的认知功能.RT-PCR检测大脑海马区前脑啡肽原mRNA表达变化情况.结果 饥饿组与对照组比较,①在Morris水迷宫测试中,饥饿组潜伏期明显缩短(P＜0.05),通过原平台位置次数和穿越目标停留时间百分增加比(P＜0.05);②在八臂迷宫测试中,饥饿组参考记忆错误和工作记忆错误减少(P＜0.05);③在RT-PCR实验检测前脑啡肽原实验中,饥饿组小鼠大脑海马区前脑啡肽原表达明显降低(P＜0.05).结论 ①饥饿胁迫可增强小鼠的认知功能;②饥饿胁迫通过降低小鼠大脑海马区前脑啡肽原来增强认知功能;③脑肠肽水平的调整可能是“脾藏意主思”功能实现的途径之一.     

电迷宫训练对全脑缺血大鼠学习记忆能力的影响

目的:探讨Y型电迷宫训练对全脑缺血大鼠学习记忆能力和海马组织CA1区突触素表达的影响.方法:90只SD大鼠随机等分为假手术组、对照组和训练组.对照组和训练组均采用改良Pulsinelli's 4血管闭塞法建立全脑缺血大鼠模型,假手术组除不电凝双侧椎动脉、不夹闭双侧颈总动脉外,其余操作与对照组和训练组相同.术后7 d以Y型电迷宫训练大鼠,分别在训练的7 d、14 d、21 d应用Y型电迷宫检测大鼠的学习记忆能力;HE染色观察3组大鼠海马组织CA1区神经元形态学变化并计数正常神经元;免疫组织化学方法染色观察海马组织CA1区突触素的表达.结果:训练后7 d、14 d、21 d,对照组大鼠错误反应次数、全天总反应时间、潜伏期与假手术组比较,差异有统计学意义(P均＜0.05);训练组大鼠与对照组比较,3个指标间差异亦有统计学意义(P均＜0.05).训练组、对照组各时点大鼠海马组织CA1区正常神经元数目均低于假手术组(P均＜0.05),且训练组21 d高于对照组(P<0.05).对照组大鼠各时点海马组织CA1区突触素表达与假手术组比较,差异有统计学意义(P均＜0.05);且训练组大鼠14 d、21 d海马组织CA1区突触素的表达较对照组增多(P均＜0.05).结论:Y型电迷宫训练可以改善全脑缺血大鼠的学习记忆能力,其机制可能与促进海马组织CA1区突触素的表达有关.     

阿司匹林对糖尿病脑病大鼠认知功能及海马IGF-1R/p-IGF-1R表达的影响

目的 观察阿司匹林对糖尿病脑病大鼠认知功能、海马组织胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)及磷酸化胰岛素样生长因子1受体(p-IGF-1R)表达的影响,探讨阿司匹林可能的大脑保护作用机制.方法 大鼠随机分为正常对照组(Con)、阿司匹林对照组(Con+Asp)、糖尿病脑病组(DM)和阿司匹林治疗组(DM+ Asp),每组10只,后2组大鼠采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)建立糖尿病脑病大鼠模型,建模成功1周后,Con+ Asp组和DM+ Asp组给予阿司匹林[10mg/(kg· d)]灌胃,Con组给以同等剂量生理盐水灌胃,持续14周.第14周时Morris水迷宫观察大鼠认知功能变化,蛋白质印迹法观察大鼠海马组织IGF-1R及p-IGF-1R表达的变化.结果 经阿司匹林治疗后,糖尿病大鼠认知功能得到改善:Morris水迷宫实验DM+Asp组逃避潜伏期短于DM组(P＜0.01);DM+ Asp组平台穿越次数、目的象限时间均多于DM组(P＜0.01或P＜0.05).H-E染色结果显示:DM+ Asp组海马神经元数量较DM组增多.与Con组相比,DM组海马区p-IGF-1R表达减少(P＜0.01),经阿司匹林治疗后糖尿病大鼠海马区p-IGF-1R表达增多(P＜0.01),但各组大鼠海马总IGF-1R蛋白水平差异无统计学意义.结论 阿司匹林可能通过调控IGF-1R信号通路对糖尿病脑病大鼠发挥脑保护作用.     

丝切蛋白棒状结构致慢性脑低灌注大鼠海马突触丢失

【摘要】 目的 观察丝切蛋白棒状结构在慢性脑低灌注大鼠海马区的表达,探讨其在慢性脑低灌注大鼠突触可塑性中的作用。方法 运用随机数字表法将25只SD健康成年雄性大鼠分成慢性脑低灌注组（15只）和假手术组（10只）。双侧颈总动脉永久性结扎方法制备慢性脑低灌注模型组。假手术组方法同前,但是只分离双侧颈总动脉而不结扎。两组大鼠于造模后第4周做水迷宫测试。水迷宫测试完后第2天处死大鼠并取其海马组织制成冰冻切片。运用免疫荧光双重标记大鼠海马区丝切蛋白和突触素。结果 慢性低灌注组大鼠学习记忆能力较假手术组明显受损（P＜0.05）。慢性低灌注组大鼠海马区丝切蛋白棒状结构形成。慢性低灌注组突触素较假手术组显著减少(P＜0.05)。结论 慢性脑低灌注大鼠海马丝切蛋白棒状结构导致突触丢失,这可能是慢性脑低灌注所致学习记忆受损的主要因素。     

白松片对慢性应激抑郁模型大鼠海马突触蛋白SYT和SYN的影响

目的：观察白松片（Baisong tablet，BST）对慢性应激模型大鼠海马神经元囊泡纤夫蛋白（synaptotagmin，SYT）、突触融素（synaptophysin，SYN）的影响。方法：成年Sprague—Dawley雄性大鼠28只按体质量分层随机分为空白对照组、慢性应激抑郁模型对照组、氟西汀对照组及白松片试验组，每组7只。除空白对照组外，其余各组均给予慢性轻度不可预见性刺激。采用原位杂交及免疫印迹方法观察各组大鼠脑内SYT和SYN在海马区域的分布以及表达量的差异。结果：原位杂交及免疫印迹结果显示模型组大鼠海马SYT mRNA，SYN mRNA及蛋白表达量明显下降，与空白对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；氟西汀组、白松片组大鼠海马SYT mRNA，SYN mRNA及蛋白表达量显著增加．与模型组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：抑郁模型大鼠海马神经元内的突触可塑性下降。白松片能上调SYT，SYN蛋白及其mRNA的表达水平。     

间充质干细胞海马移植对糖尿病大鼠PSA-NCAM的影响

目的:探讨间充质干细胞在糖尿病大鼠海马的移植对多唾液酸-神经细胞粘附分子(Polysialylated acid-nural cell adhesion molecule,PSA-NCAM)的影响.方法:将30只SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组、干细胞移植组.建立STZ糖尿病大鼠模型.原代培养大鼠骨髓间质干细胞,分离纯化鉴定后移植入糖尿病大鼠海马部位,杀鼠取海马,用PSA-NCAM单克隆抗体及采用RT-PCR的方法检测海马中PSA-NCAM的水平,并与糖尿病对照组及正常组加以比较.结果:移植组与糖尿病组比较,PSA-NCAM蛋白和mRNA(P=0.0137)表达均增加,但显著低于正常组(P＝0.15).结论:间充质干细胞海马移植增加海马中PSA-NCAM的表达.     

早期丰富环境干预对缺氧缺血性脑损伤新生鼠海马GAP-43表达的影响

目的 探讨早期丰富环境干预对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain injury, HIBI)新生大鼠海马生长相关蛋白(Growth-associated protein-43, GAP-43)表达的影响.方法 按Rice法制备SD大鼠HIBI模型,随机分为干预组和非干预组,假手术大鼠作为对照组.干预组大鼠于HIBI后第2天开始丰富环境干预,分别于术后第3、7、14、21、28天取各组大鼠脑组织进行免疫组织化学染色和RT-PCR检测,观察不同时间点各组大鼠海马GAP-43及其mRNA表达的差异.结果 非干预组大鼠海马GAP-43及其mRNA表达强于对照组(P＜0.01),干预组海马GAP-43表达于术后第14、21、28天强于非干预组,差异显著(P＜0.05),GAP-43mRNA表达于术后第7、14、21、28天强于非干预组,差异显著(P＜0.05). 结论 早期丰富环境干预可以增强HIBI新生大鼠海马GAP-43及其mRNA的表达,提示GAP-43表达的增多可能参与了丰富环境影响HIBI新生大鼠损伤修复的机制.     

LPL基因mRNA在精神分裂症模型大鼠脑组织中的表达

目的: 探讨脂蛋白酯酶(LPL)基因mRNA在精神分裂症模型大鼠前脑皮层、杏仁核、尾壳核和海马4个脑区中的表达,阐明其在精神分裂症发病中的作用机制。 方法: 选择围产期Wistar大鼠,模型组24只,对照组21只,建立苯环已哌啶(PCP)处理的大鼠精神分裂症动物模型,通过Morris水迷宫实验验证动物模型是否建立成功,并检测其认知改变,采用实时荧光定量PCR法检测LPL基因mRNA在精神分裂症模型大鼠前脑皮层、杏仁核、尾壳核和海马4个脑区中的表达。 结果: Morris水迷宫实验,与对照组比较,模型组大鼠找到平台的时间明显延长,为对照组的4.25倍(P<0.01);与对照组比较,模型组大鼠脑组织中前脑皮层和海马区LPL mRNA表达水平降低,分别下降了61.7%和89.0%(P<0.05)。 结论: LPL基因在大鼠前脑皮层和海马表达水平降低可能与精神分裂症有关联,并且可能与认知障碍存在一定的联系。     

苯那普利对糖尿病大鼠肾组织RAGE表达的影响

目的通过研究苯那普利对糖尿病大鼠肾脏组织糖化终末产物受体(RAGE)表达的影响,探讨其肾保护机制。方法30只SD大鼠随机分为正常对照组(n=10)、糖尿病对照组(n=10)和糖尿病苯那普利处理组(n=10)。实验第12周末,分别计算各组大鼠肾质量/体质量比值;检测血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)和血脂水平,并行24 h尿蛋白定量;运用RT-PCR法测定大鼠肾组织RAGE mRNA表达。结果与正常对照组比较,糖尿病对照组和糖尿病苯那普利处理组大鼠的血糖、HbA1c、甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇均明显升高(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇明显降低(P<0.05),而糖尿病对照组与糖尿病苯那普利处理组之间上述指标比较无显著差异(P>0.05)。糖尿病苯那普利处理组大鼠的肾质量/体质量比值、24 h尿蛋白定量和肾组织RAGE mRNA表达明显高于正常对照组大鼠(P<0.05),但显著低于糖尿病对照组大鼠(P<0.05)。结论苯那普利可抑制糖尿病大鼠肾脏肥大并降低尿蛋白排泄率,其作用机制可能与抑制RAGE表达有关。     

氯胺酮对新生大鼠认知功能和海马突触素表达的影响

目的:观察氯胺酮对新生大鼠认知功能的影响及其机制以及对海马突触素的影响。方法:1周龄Wistar大鼠30只,随机分为3组,每组10只。对照组给予与氯胺酮组相同体积的等渗盐水;氯胺酮100 mg组和50 mg组麻醉诱导时分别腹腔注射氯胺酮100和50mg/kg,以后每小时追加首次剂量的1/2,维持麻醉6h。麻醉后21d进行旷场实验和Morris水迷宫实验,后取海马标本行突触素免疫组化染色,共聚焦显微镜观察并采集图像,用Image J图像处理软件分析荧光半定量A值。结果:氯胺酮可导致大鼠的认知功能的降低,海马突触素表达增加(P<0.05),氯胺酮100 mg组和50 mg组之间海马突触素表达无统计学意义(P>0.05)。结论:氯胺酮可降低新生大鼠的认知功能,并上调海马突触素表达。     

辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏TGF-β系统的影响

目的：探讨辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子β1（TGF-β1）和转化生长因子βⅡ型受体（TβⅡR）表达的影响及其肾脏的保护机制。方法：SD大鼠单次腹腔注射55mg/kg链脲佐菌素(STZ )制备糖尿病大鼠模型。糖尿病大鼠随机分成糖尿病组、辛伐他汀治疗组［4mg/(kg·d)］和正常对照组。用免疫组织化学，RT-PCR和Western印迹法检测16周大鼠肾脏TGF-β1和TβⅡR表达的变化。结果：与正常对照组比较，糖尿病组和辛伐他汀治疗组TGF-β1和TβⅡR表达均增加（P<0.05）。治疗组TGF-β1和TβⅡR表达显著低于糖尿病组（P<0.05）。结论：辛伐他汀可以通过下调TGF-β1和TβⅡR的表达，抑制TGF-β系统信号通路的过度激活，减少糖尿病大鼠尿蛋白，延缓肾脏病变的进展。     

补阳还五汤对血管性痴呆大鼠海马NR2B蛋白及其mRNA表达的影响

目的 观察补阳还五汤对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠海马N-甲基-D-门冬氨酸受体亚单位2B(N-Methyl-D-asparate receptor subunit 2B,NR2B)蛋白及其mRNA表达的影响,探讨补阳还五汤治疗VD的机制.方法 四血管阻断(four vessel occlusion,4VO)法制备VD大鼠模型.设立假手术组、VD模型组、尼莫地平组(20mg·kg-1·d-1,灌胃30d)和补阳还五汤治疗组(50g生药·kg-1·d-1,灌胃30d).Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力的改变,免疫组化和Western-Blot技术检测大鼠海马神经元NR2B蛋白的变化,实时荧光定量PCR技术检测大鼠海马NR2B mRNA表达的变化.结果 与假手术组大鼠逃避潜伏期[(24.18±7.90)s]和平均探索次数[(7.99±1.32)次/min]相比,VD模型组大鼠逃避潜伏期[(51.25±18.28)s]延长和平均探索次数[(5.26±0.74)次/min]减少(P<0.05);补阳还五汤组[(25.91±9.56)s和(7.52±1.27)次/min]明显改善了模型大鼠学习、记忆成绩(P<0.05);假手术组、尼莫地平组与补阳还五汤治疗组之间差异无显著性(P>0.05).VD模型组大鼠的NR2B蛋白(0.33±0.06)及其mRNA(593±53)表达水平较假手术组(0.71 ±0.13)、(5887±501)明显降低(P<0.05);补阳还五汤治疗组大鼠海马的NR2B蛋白(0.66±0.11)及其mRNA(5692±482)表达水平较模型组的表达明显升高(P<0.05);假手术组、尼莫地平组组与补阳还五汤治疗组之间差异无显著性(P>0.05).结论 补阳还五汤可以改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与减轻脑缺血再灌注对海马CAI区神经元的损伤及促进海马组织NR2B蛋白及其mRNA的表达有关.