沙樱桃脂类对人MGC-803细胞抑制作用的实验研究

目的 探讨沙樱桃脂类对人胃癌MGC-803细胞的毒性作用及其机制.方法 采用台盼蓝法检测细胞数、流式细胞仪检测细胞凋亡.将人MGC-803细胞分别与不同浓度的沙樱桃脂类(沙樱桃脂组)、5-FU(5-FU组)及PBS溶液(对照组)共同培养,观察沙樱桃脂类对人胃癌MGC-803细胞增殖的抑制作用.结果 对人MGC-803细胞分别给予0.5、1.0、3.0 mg/L沙樱桃脂类及10 mg/L 5-FU,培养6h、12h、18 h、24h和48 h,活细胞数随沙樱桃脂类浓度的增加和作用时间的延长而减少,与5-FU组相似(P＞0.05),而与对照组比,差异有统计学意义(P＜0.01);分析存活细胞率,表明人MGC-803细胞增殖被阻滞于G0G1期.在给予沙樱桃脂类0.5、1.0、3.0 mg/L和5-FU培养48 h后,人MGC-803细胞的凋亡率分别为13.8％、19.6％、26.2％和21.1％.结论 沙樱桃脂类对人胃癌MGC-803细胞具有显著毒性作用,其机制可能与沙樱桃脂类可抑制MGC-803细胞分裂,并诱导其凋亡有关.     

顺铂对人宫颈癌Hela细胞超弱发光影响的观察

目的：探讨人宫颈癌Hela细胞株经顺铂（DDP）作用后其超弱发光与细胞增殖活性变化的关系．方法：选择DDP诱导人宫颈癌Hela细胞株,比较人宫颈癌Hela,Hela＋DDP细胞株形态变化．MTT比色法、流式细胞仪检测细胞生长周期变化及凋亡情况;用IFFM-D型流动式化学发光仪检测Hela,Hela＋DDP细胞的超弱发光强度变化．结果：DDP对Hela细胞有生长抑制作用,并呈时间和浓度依赖性,其48h的Ic5。值为3mg,／L,当DDP浓度在3mg／L以下时,对Hela细胞无明显毒性作用,超过此浓度时,其毒性呈剂量效应关系（P〈0．01）．流式细胞仪结果表明,与Hela细胞相比较,Hela＋DDP细胞G2期细胞数增多,而G1,S期的细胞数明显减少（P〈0．01）;细胞凋亡率在24,48,72h分别为（11．4±5．8）％,（21．8±7．9）％,32．5±11．6）％．在1×10^-4mol／L鲁米诺及3mL／L双氧水（H2O2）条件下超弱发光强度随着时间的变化,Hela＋DDP细胞明显降低（P〈0．01）．结论：在DDP非毒性剂量作用后,Hela＋DDP细胞超弱发光强度降低,提示超弱发光检测可能作为筛选敏感化疗药物的一项指标．     

紫杉醇对大鼠平滑肌细胞凋亡的影响

目的观察术后抗再狭窄药物紫杉醇对平滑肌细胞凋亡的影响及量效、时效关系。方法培养大鼠主动脉平滑肌细胞，培养至4到9代。根据紫杉醇作用时间不同将细胞分成24小时组和72小时组，每一时间组根据加入不同浓度紫杉醇分四组：0μmol／L，0．1μmol／L，1μmol／L，10μmol／L组。用流式细胞仪检测紫杉醇是否引起细胞凋亡，并观察此作用与药物浓度和时间的关系。结果紫杉醇作用VSMC24小时后0μmol／L组及低、中、高浓度紫杉醇组细胞凋亡率分别为2．2％、3．6％、6．8％、22．6％；72小时后细胞凋亡率分别为6．1％、10．4％、15．4％、42．7％。结论紫杉醇能促进平滑肌细胞的凋亡，随着药物浓度提高，作用时间延长，细胞凋亡率也相应升高。故促进平滑肌细胞调亡可能是紫杉醇抑制平滑肌细胞过度增殖的重要机制。     

转染野生型p53基因对肝癌细胞生长的影响

目的：通过转染野生型p53基因致肝癌细胞株BEL-7404，研究其对肝癌细胞的生长及凋亡作用。方法：野生型p53基因通过脂质体Lipofectamine介导转染人肝癌细胞株BEL-7404。用四甲基偶氮唑（MTT）法测定细胞生长曲线，用流式细胞仪进行细胞凋亡分析。结果：肝癌细胞BEK-7404转染野生型p53基因后，其生长作用明显受到抑制．细胞生长抑制率在第4天可达50．8％。流式细胞仪分析细胞凋亡结果：阴性对照组为1．7％，转染pUHD10-3组为3．2％．转染pUHD10-3-p53组为40．7％。结论：野生型p53基因可诱导肝癌细胞BEL-7404的生长抑制及发生凋亡。     

复方苦参方剂对大肠癌LoVo细胞体外增殖凋亡的影响

目的：探讨复方苦参方剂对大肠癌LoVo细胞体外增殖及凋亡的影响．方法：台盼蓝染色法和MTT法测定中药对LoVo细胞抑制作用与时间和剂量的关系,用荧光显微镜、流式细胞仪对细胞凋亡进行检测．结果：复方苦参方剂可抑制Lovo细胞的生长,实验范围内其抑制作用呈时间与剂量依赖关系．经中药作用48h后,LoVo细胞可检测细胞凋亡峰．中药组凋亡率为（7．3±1．5）％,与对照组（2．1±0．5）％相比有明显升高（P〈0．05）．结论：复方苦参方剂具有一定的抑制肿瘤细胞增殖、诱导凋亡的作用．     

过量氟引起成骨细胞内质网应激信号通路的基因差异表达

目的：观察人成骨细胞在过量氟作用下未折叠蛋白反应（UPR）信号通路的差异基因表达,探索在氟中毒条件下成骨细胞内质网应激的作用。方法体外培养人成骨细胞染氟模型,用不同浓度的氟干预24 h后M T S法检测细胞存活率和流式细胞仪检测细胞凋亡百分率,用UPR信号通路PCR Array芯片检测通路中相关基因表达的情况,并用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测蛋白表达。结果在氟化钠浓度为0、5、10、20、40、80 mg/L 时,细胞存活率分别为（100．6785±2．8303）％、（105．3934±2．5384）％、（106．1257±2．0483）％、（77．9773±2．5443）％（与对照组比较 P＜0．05）、（30．2377±0．6327）％（与对照组比较 P＜0．05）。流式细胞仪检测,凋亡率分别为5mg/L组4．8％,10mg/L组13．8％,20mg/L组37．0％,40mg/L组58．9％,80 mg/L组63．2％（P＜0．05）。PCR芯片检测发现1个基因表达下调,14个基因表达上调。Western blot结果显示, BIP、ATF4、CHOP、IRE1均呈现出不同程度的随氟剂量增加蛋白表达逐渐上调。XBP1在NaF 5～20 mg/L表达逐渐增强,在40与80 mg/L时表达减弱。结论氟化钠可以通过PERK和IRE1途径引起成骨细胞内质网应激,并且可以引起成骨细胞凋亡。     

铁磁流体联合交变磁场对人肝癌细胞HepG2的影响

目的探讨一定的交变磁场不同浓度Fe3O4磁流体热疗对人肝癌细胞HepG2的影响。方法在肝细胞的培养液中分别加入不同浓度的Fe3O4磁流体，暴露在交变磁场中30min后，采用MTT法、细胞计数、光镜、荧光显微镜、流式细胞仪等观察经过上述药物处理后，肝癌细胞活细胞数的光密度值、杀伤率、生长曲线、细胞形态变化、细胞周期及凋亡情况。结果随着磁流体中Fe3O4纳米粒浓度的增加，①细胞培养液的温度分别上升到38．9～47．2℃；Fe3O4浓度≥4．5mg／mL时，温度〉41℃；②细胞增殖抑制增强，肝癌细胞活细胞数的光密度值下降，杀伤率（cytotoxity index，CI）增加；当Fe3O4浓度24．5mg／mL时，CI／〉50％，CI最高达85．91％，呈明显的量效关系（P〈0．001）；③细胞核染色质凝聚、浓缩，有的成半月形或梅花辩状改变，尤以Fe3O4浓度〉／4．5mg／mL时变化明显；④细胞周期停滞于S期，S期细胞增加，凋亡率增加；Fe3O4浓度从4．5mg／mL增加到6．0mg／mL时，凋亡率分别由27．06％增加到66．05％；Fe3O4浓度为3．0mg／mL时，温度为39．8℃〈40℃，凋亡率为14．22％（P〈0．001）。结论交变磁场作用下，随Fe3O4浓度增加，温度升高，磁流体对人肝癌细胞HepG2毒性增强，细胞凋亡增加；磁流体中Fe3O4浓度与其成明显的量效依赖关系。     

氧化苏木素诱导肺癌 A549细胞凋亡及对内质网应激通路的影响

目的：探讨氧化苏木素对人肺癌A549细胞的凋亡作用及其对内质网应激通路的影响。方法采用噻唑蓝（MTT）细胞毒实验检测氧化苏木素对肺癌A549细胞的毒性作用;流式细胞仪检测细胞凋亡的发生;Western blot检测葡萄糖调节蛋白78（GRP78）和细胞质细胞色素C（cyto‐c）表达的变化。结果氧化苏木素对人肺癌A549细胞的IC50值为（5．36±0．62）μmol／L。0、5、10、20μmol／L的氧化苏木素作用肺癌A549细胞48 h后,细胞凋亡率分别为（1．15±0．32）％、（19．61±4．52）％、（30．18±6．35）％和（39．48±7．44）％,各组间差异有统计学意义（P＜0．05）。与对照组比较,5、10和20μmol／L 氧化苏木素作用肺癌A549细胞48 h后,GRP78出现显著的升高,细胞质中的cyto‐c也显著增加。结论氧化苏木素通过内质网应激途径诱导了人肺癌A549细胞凋亡。     

染料木黄酮诱导人卵巢癌HO-8910细胞凋亡的实验研究

目的研究染料木黄酮对人HO-8910卵巢癌细胞的抑制效应和诱导凋亡作用,探讨其机制。方法将不同浓度的染料木黄酮作用于人HO-8910卵巢癌细胞,利用MTT法检测其有效作用浓度,分别采用瑞氏染色、TUNEL、流式细胞仪观察和检测HO-8910细胞凋亡情况。结果MTT法测得其IC50值为28.63 mg/L,浓度为8~128 mg/L的染料木黄酮具有诱导人HO-8910卵巢癌细胞凋亡的作用,且随药物作用时间延长凋亡率逐渐增加。结论染料木黄酮具有抗卵巢癌作用,其重要作用机制之一是诱导人HO-8910卵巢癌细胞凋亡。     

野生型p53基因诱导人肝癌细胞系HuH-7凋亡的研究

目的 通过转染野生型p53基因作用于肝癌细胞株HUH-7,来研究其诱导肿瘤细胞的凋亡作用。方法 野生型p53基因通过脂质体Lipofectamine介导转染人肝癌细胞系HUH-7,96h后,用流式细胞仪进行细胞凋亡分析。结果 流式细胞仪分析细胞凋亡结果：阴性对照组为2．8％、转染pUHD 10-3组为4．1％、转染pUHD 10-3-p53组为39．6％。结论 野生型p53基因可诱导人肝癌细胞系HuH-7发生凋亡。     

氧化苏木素抑制ABCB1介导肿瘤多药耐药活性的研究

目的探讨氧化苏木素对ABCBl介导的肿瘤多药耐药活性的影响抑制。方法MTT试验检测氧化苏木素对人白血病K562及其耐药K562／ADR（ABCBl高表达）细胞的细胞毒作用;AnnexinV／PI双染,流式细胞仪检测细胞凋亡的发生。结果氧化苏木素对耐药的K562／ADR细胞具有高效的细胞毒作用,氧化苏木素对K562和K562／ADR细胞的IC50值分别为（5．45±0．36）和（5．62±0．43）μmol／L,二者无显著性差异。流式细胞仪检测凋亡的结果显示：0、5、10、20Ixmol／L的氧化苏木素分别处理K62和K562／ADR细胞后。K562细胞的凋亡率从（3．41±0．55）％依次升高到（24．67±2．08）％、（40．33±3．51）％和（66．67±3．64）％,K562／ADR细胞的凋亡率从（2．82±0．57）％依次升高到（23．01±3．60）％、（38．23±4．06）％和（65．77±5．51）％。结论氢化苏木素克服了ABCBl介导的肿瘤多药耐药活性．诱导耐药细胞凋亡是茸作用的机制．     

温热与冬凌草液对人膀胱癌BIU-87细胞体外凋亡的影响

目的：探讨温热和冬凌草液对体外培养的人膀胱癌BIU-87细胞体外凋亡的影响。方法：通过对体外培养的BIU-87细胞进行加温（37℃、41．5℃、43．5℃）和冬凌草液（0g／L、0．15g／L、0．3g／L、0.6g／L、1.2g／L、2.4g／L）处理,采用形态学和流式细胞术观察温热和冬凌草液诱导的细胞凋亡效应,采用MTT法检测冬凌草作用后细胞的生长抑制率。结果：冬凌草液对BIU-87细胞具有明显的抑制生长作用。形态学观察到实验组中大量具有凋亡特征的细胞。流式细胞仪定量分析显示,随着冬凌草液浓度的增加和温度的升高,BIU-87细胞凋亡率亦呈升高趋势（P〈0．05）。结论：温热和冬凌草液具有协同诱导人膀胱癌BIU-87细胞凋亡的作用。     

FB1诱导肝癌细胞凋亡FasL表达的变化

目的：了解不同浓度富马毒素（FB1）诱导肝癌细胞产生凋亡时FasLmRNA表达的变化方法：采用流式细胞术检测细胞的凋亡;荧光定量RT-PCR测定细胞FasLmRNA表达的水平。结果：5—40μmol／LFB1实验组均诱导肝癌细胞出现凋亡,经流式细胞仪检测凋亡率与对照组相比差异有显著性（P〈0．05）。荧光定量PCR检测结果显示,各实验组FasLmRNA与对照组相比表达均有一定程度降低,差异有显著性（P〈0．05）。结论：一定浓度的FB1可诱导肝癌细胞凋亡;各实验组FasLmRNA均无表达的增加并且降低。     

藤黄酸诱导膀胱癌细胞凋亡和细胞周期阻滞作用

目的：藤黄酸能抑制包括乳腺癌、肝癌、血液系肿瘤以及乳腺癌在内的多种肿瘤细胞的生长,但是目前对于藤黄酸在泌尿系肿瘤作用的报道尚少。文中旨在研究藤黄酸诱导膀胱癌细胞凋亡和细胞周期阻滞作用可能的机制。方法实验分为4组,藤黄酸1．0μmol／L组、2．0μmol／L组、3．0μmol／L组及阴性对照组（加入等渗盐水）。体外培养人膀胱癌细胞株BIU-87,将不同浓度藤黄酸加入处于对数生长期的人膀胱癌BIU-87细胞共培养,免疫组化法检测瘤组织Caspase-3蛋白的表达,使用流式细胞仪检测分析藤黄酸诱导人膀胱癌细胞的凋亡作用和细胞周期变化。结果藤黄酸1．0μmol／L组、2．0μmol／L组、3．0μmol／L组免疫组化评分分别为（4．28±1．86、5．03±0．78和6．47±1．31）,较对照组（2．13±1．27）明显升高,差异均有统计学意义（ P＜0．05）。流式细胞术结果显示：细胞周期 G0／G1期细胞逐渐减少,G2／M 期细胞逐渐增多,S期细胞变化不明显。结论藤黄酸可通过增加 Caspase-3蛋白的表达来促进膀胱癌细胞凋亡,可阻滞膀胱肿瘤细胞周期,抑制膀胱肿瘤细胞的增殖。     

白芍总苷对HepG2细胞增殖的抑制作用

目的 探讨白芍总苷（TGP）对人肝癌细胞株HepG2的增殖抑制作用。方法 采用Mtt法检测TGP对HepG2细胞增殖的影响;应用荧光显微镜观察药物作用后的细胞形态;用流式细胞术检测TGP对细胞凋亡及细胞周期的影响。结果 TGP（1．0～5．0g／L）能抑制HepG2细胞生长,且呈浓度依赖性;TGP（1．5、2．5g／L）分别作用72h后,HepG2细胞出现体积缩小,荧光染色增强,胞核或胞质中可见致密浓染的块状或颗粒状黄绿色荧光染色;TGP（1．0、1．5g／L）药物作用72h后,流式细胞仪可检测到细胞凋亡现象并发现显著的S期阻滞。结论 TGP在体外能够抑制人肝癌细胞HepG2的增殖,并能诱导细胞凋亡。     

姜黄素诱导人肝癌HepG2细胞发生凋亡及对细胞生长周期的影响

目的研究中药姜黄素在体外诱导人肝癌HepG2细胞发生凋亡的机制及对细胞生长周期的影响。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,用不同浓度的姜黄素（0.5、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0μmol/L）刺激人肝癌HepG2细胞24、36和48h,MTT法及台盼蓝拒染法检测姜黄素对人肝癌HepG2细胞生长增值的影响并绘制生长曲线图,流式细胞术（FCM）检测其对细胞生长周期的影响。结果MTT法结果表明姜黄素对人肝癌细胞HepG2的生长具有抑制作用,2.0μmol/L浓度组在24h与对照组比较便具有统计学意义（P〈0.05）,16μmol/L浓度组与HepG2细胞作用48h后对HepG2细胞的生长抑制作用最强（54.78±2.35）%,台盼蓝拒染法发现细胞存活率与姜黄素浓度间具有剂量和时间效应;流式细胞仪检测结果表明8.0μmol/L姜黄素诱导了人肝癌HepG2细胞发生凋亡,并对细胞生长的S期有明显的阻滞作用。结论姜黄素在体外能阻滞HepG2细胞的生长增值,诱导了人肝癌HepG2细胞发生凋亡。     

蜂毒素对肝癌细胞系BEL-7402细胞凋亡的影响

目的 :了解蜂毒素诱导肝癌细胞凋亡的作用。方法 :肝癌细胞BEL 74 0 2经不同浓度的蜂毒素处理后 ,采用台盼蓝排染法测定细胞增殖的抑制率 ,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡及Fas蛋白的表达。结果 :16 μg/ml蜂毒素作用肝癌细胞系BEL 74 0 2 ,12h抑制率为 (78.13±6 .15 ) % ,2 4h抑制率为 10 0 % ;4 ,8μg/ml蜂毒素对细胞的生长也有抑制作用 ,并且可诱导细胞凋亡的产生 ,能够增加细胞Fas蛋白的表达。结论 :蜂毒素高剂量有杀伤肿瘤细胞作用 ,低剂量可诱导细胞凋亡     

苦参碱诱导横纹肌肉瘤细胞凋亡的实验研究

目的探讨苦参碱对人RD横纹肌肉瘤细胞生长抑制和诱导凋亡作用。方法将不同浓度的苦参碱作用于培养的RD横纹肌肉瘤细胞，通过MTT比色法、流式细胞仪和DNA凝胶电泳、电子显微镜技术观察检测细胞凋亡，研究分析其对RD横纹肌肉瘤细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。结果苦参碱浓度为0．5、1．0、1．5g／L时，细胞生长抑制率分别为13．2％、23．7％、40．5％；流式细胞术测定RD横纹肌肉瘤细胞的凋亡率分别为10．1％、17、7％、26．3％；DNA电泳见DNA“梯形”图谱；电镜显示肿瘤细胞的凋亡形态。结论苦参碱能抑制RD横纹肌肉瘤细胞增殖，诱导其凋亡。     

端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸对HL-60细胞生长的作用

目的：观察端粒酶反义寡聚脱氧核着酸对急性髓细胞白血病细胞株HL-60的作用、方法：采用台盼蓝排斥法进行药物敏感试验,流式细胞仪测定凋亡细胞含量结果：端粒酶反义寡聚脱氧核着酸对HL-60细胞有生长抑制作用,作用具有序列特异性及剂量依赖性．流式细胞仪检测到凋亡峰,含量为28．8％．无关寡聚核着酸片段无此作用．结论：端粒酶对维持白血病细胞的生长可能起十分重要的作用,它有可能成为白血病治疗的新靶点．     

雷公藤甲素诱导大鼠肾上腺皮质细胞凋亡研究

目的：了解雷公藤甲素诱导大鼠肾上腺皮质细胞凋亡的发生。方法：体外分离培养大鼠肾上腺皮质细胞,以蛋白因子添加素V和碘化丙啶（PI）联合标记,流式细胞仪检测,观察雷公藤甲素诱导细胞凋亡的特征。结果：雷公藤甲素以时间和剂量依赖的方式诱导细胞凋亡,0、12．5、25、50、100和200μg／L雷公藤甲素处理细胞2h,凋亡率分别为1．67％、16．54％、32．53％、47．62％、57．12％72．77．45％;100μg／L雷公藤甲素染毒0、0．5、1、2、3和4h,细胞凋亡率分别为1．12％、14．37％、35．26％、4975％、62．65％及78．46％。结论：雷公藤甲素可诱导肾上腺皮质细胞凋亡。