实时定量PCR检测氟对软骨细胞COLⅨA3基因表达的影响

目的:探讨氟对体外培养软骨细胞中COLⅨA3基因mRNA的表达影响。方法:采用SYBR GreenⅠ嵌合荧光法进行实时定量PCR的方法,检测不同剂量氟对体外培养软骨细胞中COLⅨA3基因mRNA的表达影响,染氟剂量分别为0、5、10、20、40mg/L,染氟10d。结果:实时定量PCR检测显示各组均可检测到COLⅨA3mRNA,相对定量比由对照组到高剂量组约为:100:134:200:104:129,染氟实验组中5mg/L、10mg/L组表达量高于对照组和40mg/L组,且以10mg/L组表达量最高,是对照组的2倍。随着染氟剂量增加,软骨细胞COLⅨA3基因mRNA表达量降低。结论:不同剂量氟对软骨细胞中COLⅨA3基因mRNA表达的影响不同,低剂量氟可以促进COLⅨA3基因mRNA的表达,随剂量增加氟的促进作用减弱。     

氟对成骨细胞中微小染色体维系蛋白3表达的影响

目的探讨氟对体外培养成骨细胞中微小染色体维系蛋白3（minichromosome maintenance deficient3，MCM3）表达的影响。方法采用免疫组织化学技术、原位杂交技术以及SYBR GreenI嵌合荧光实时定量PCR（realtime RT-PCR）方法，检测不同剂量氟（0、5、10、20、40mg／L，处理10d）对体外培养成骨细胞中MCM3表达的影响。结果0、5、10、20、40mg／L各组细胞中均有MCM3蛋白及其mRNA表达，主要在细胞核中表达，与对照组比较，染氟实验组阳性表达强度高于对照组，阳性细胞数多于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），其中10mg／L组阳性表达高于其他实验组（P〈0．05），呈现双向作用。real time RT-PCR检测显示，各组均可检测到MCM3mRNA．相对定量比由对照组到高剂量组约为102：259：145：135：100：染氟实验组中5、10、20mg／L组表达量高于对照组和40mg／L组，以5mg／L组表达量最高，随着染氟剂量增加，基因表达量降低。结论不同剂量氟对成骨细胞中MCM3表达的影响不同，低剂量氟可以促进MCM3的表达，随剂量增加氟的促进作用减弱。     

不同价态形态砷与砷中毒患者病情关系的研究

目的:通过对砷中毒患者血样与尿样进行砷价态形态、肝肾功等指标的检测,初步探索砷不同价态形态与患者病情程度之间的关系。方法:采集150例新疆奎屯农七师、内蒙古呼和浩特市和山西省山阴县等地对照组及患者的血样与尿样,分别检测样品中总砷、As(Ⅲ)(三价无机砷)、DMA(二甲基砷酸盐)、MMA(一甲基砷酸盐)的浓度,以及患者皮肤损害、相关酶和肝肾功的变化;通过统计学分析,了解相互之间的关系。结果:对于重度砷中毒患者,iAsⅢ、MMA和DMA的浓度与GST01(谷胱甘肽硫转移酶)、PNP20(嘌呤核苷磷酸化酶)、PNP51的浓度密切相关;其中MMA与PNP51之间呈正相关,r值为0.72334,P<0.01;iAsⅢ和DMA与PNP51也呈正相关,r值分别为0.57496和0.56569,P<0.05;而iAsⅢ和DMA与GST01之间表现出负相关的关系,r分别为-0.42833和-0.47226,P<0.05;iAsⅢ和DMA与AS3MT(砷甲基转移酶)呈负相关,r分别为-0.50329和-0.65320,P<0.05。iAsⅢ、MMA和DMA含量则表现出与皮肤损害包括色素缺失、色素减少及皮肤角化的弱正相关关系,但相关性较弱,r为0.32389,P<0.05。Logistic有序回归分析结果显示:iAsⅢ、DMA、MMA的回归系数β在α=0.05水平上无统计学意义。结论:砷不同价态形态与患者病情程度相关,主要表现为影响酶的活性。     

慢性氟中毒伴糖尿病小鼠红细胞形态学变化的研究

目的探讨慢性氟中毒C57BL小鼠伴有糖尿病时红细胞的形态学变化。方法 C57BL小鼠40只,分为对照组(Ⅰ组)、高氟组(Ⅱ组)、高脂组(Ⅲ组)和高脂高氟组(Ⅳ组),Ⅰ组与Ⅲ组饮用蒸馏水;Ⅱ组与Ⅳ组给予氟化钠水溶液(100mg/L),3个月后,Ⅰ组与Ⅱ组饮食不变,继续喂养4w;Ⅲ组与Ⅳ组改用高脂肪饲料,继续喂养4w后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)。4组再继续喂养4w,分别在给药前和给药后72h、2w、3w测定血糖。处理动物后检测小鼠血常规及电镜观察红细胞的形态学变化,计算红细胞变形率并进行统计学分析。结果实验结束时,氟中毒伴糖尿病C57小鼠BL(Ⅳ组)血糖(20.35±3.40)mg/L与Ⅰ组小鼠(5.76±1.04)mg/L相比显著升高(P<0.05);白细胞计数(1.06×109/L)低于正常值[(4～10)×109/L];红细胞计数(8.43×109/L)高于正常值;红细胞平均体积(52.3/FL)低于正常值(80～100/FL)。电镜下可见,Ⅳ组小鼠溶血细胞数量增多,棘突状细胞数量增加;细胞变形率(20.6%)与Ⅰ组(3.7%)和Ⅲ组(3.3%)相比明显升高,与Ⅱ组(22.5%)相比较低。结论机体长期处于高氟环境时,血糖显著升高,红细胞形态学损伤较为明显,若伴有糖尿病,血糖升高更为明显,细胞变形率略有下降,但是仍高于正常。     

少数民族妇女稽留流产与抗心磷脂抗体的关系

稽留流产是一种常见的妊娠中终止现象 ,稽留流产反映育龄妇女生殖功能及健康的水平 ,又是反映社会经济、卫生状况及孕产妇保健工作的一项敏感指征。抗心磷脂抗体是一种自身抗体 ,常见于自身免疫性疾病及抗心磷脂综合征患者中。近年来有关稽留流产与抗心磷脂抗体关系的报道较多 ,但对少数民族的报道较少。为了解少数民族地区抗心磷脂抗体在稽留流产中的作用及重要性 ,我们对 41例稽留流产的少数民族妇女的血清抗心磷脂抗体用 EL ISA法进行检测 ,现报道如下。1　材料与方法1.1　检测对象　 41例稽留流产的少数民族妇女为 2 0 0 0年5月～ 2 0…     

组织胚胎屏障结构教学的经验和体会

正组织学与胚胎学是医学生较早接触的一门医学形态学专业课程,是研究机体微细结构、相关功能及人体发生发育的一门学科,是在组织、细胞、亚细胞和分子水平对人体进行的研究。由于其研究内容主要是在光镜和电镜下的微细结构,其中很大一部分时间要借助显微镜观察组织切片进行学习。这使得很多学生对所学知识感觉太抽象,知识点零散。加之现在总学时数较少,课程进度相对较快,很多学生反映难以理解和掌     

氟对体外培养的成骨细胞Ras蛋白表达的影响

目的:研究不同浓度的氟化物对体外培养的成骨细胞Ras蛋白表达的影响。方法:采用酶消化法分离乳鼠成骨细胞,经剂量分别为0、2.5、5.0、10.0和20.0mg/L的氟化钠(NaF)作用后,采用免疫组织化学法和Western blot法检测染氟后小鼠成骨细胞中Ras蛋白表达水平。结果:免疫组织化学法结果显示0、2.5及5.0mg/L实验组成骨细胞中Ras均有较强阳性表达,其余实验组的为弱阳性表达;各染氟组阳性表达细胞数与0mg/L比较差异有统计学意义(P<0.05)。小鼠细胞的Ras蛋白相对定量结果显示:2.5、5.0mg/L染氟组大于0mg/L,其它染氟组均小于0mg/L,染氟组的蛋白相对表达量有随着剂量增加而逐渐降低的趋势。结论:氟作用于成骨细胞后可以影响Ras蛋白的表达,表现为双向作用,即低剂量的氟促进Ras的蛋白表达,高剂量抑制Ras的蛋白表达。     

MCM3与细胞增殖

微小染色体维系蛋白3 (minichromosome maintenance 3,MCM3)作为MCMs家族中重要的一员,与生物体DNA复制过程密切相关.MCMs家族目前有7种,微小染色体指酵母中一系列核小体被包装后形成的结构,是酵母复制的结构基础.本文对MCM3与细胞增殖之间的相互关系作如下综述.     

DBL教学法在组织学实验教学中实践与思考

当今,老师面临如此繁多的教学方法,而学生同样面临各种学习方法的选择。在反复的教学和实践中,DBL教学方法目前已经应用于组织学的实验教学中。对于接受医学教育的学生来说,组织学正是衔接医学前期基础与医学临床课程的关键环节。所以,     

208对不孕夫妇部分不育因素探讨

人类生殖过程是一个时间较长、变化复杂的生理过程。男性在生育过程中的重要生理作用是提供质量与数量都正常的精子 ,精子在与卵子结合之前要经历从发生、发育、成熟到输送等诸多的生理环节 ,而每一个生理环节均需要有一个适宜的环境 ,才能得以顺利进行。近年来男性不育症发病率占不育症 5 0 %左右 [1 ] 。为了探讨不育的原因 ,本文对 416例(2 0 8对 )不育夫妇做了与生育相关的 10余种检查 ,现分析报道如下。1　资料与方法1.1　一般资料　收集自 1992年以来在昌吉州医院男性科及妇产科就诊不育夫妇 (2 0 8对 )。男性年龄最小 2 0岁 ,最大47…