LY294002联合顺铂对脑胶质瘤U87细胞株增殖的影响

目的体外观察磷酸肌醇-3激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002与顺铂(CDDP)联合对人脑胶质瘤U87细胞株增殖的抑制作用。方法采用细胞毒实验(MTT)法、流式细胞术(FCM)检测LY294002单独或联合CDDP对人脑胶质瘤U87细胞增殖的抑制作用,并观察细胞形态学变化。结果 LY294002与CDDP均能抑制U87细胞生长,呈剂量依赖性,两者联合有协同效应。当CDDP为0.625μg/mL和LY294002为5μmol/L时达到最大协同作用(Q=1.21),FCM检测细胞被阻滞在G1期,S期细胞比例减少,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 LY294002能有效提高神经胶质瘤U87细胞对CDDP的敏感性,本研究为两种化疗药物在临床上的联合应用提供了理论依据。     

丙戊酸钠联合吡柔比星对儿童急性淋巴细胞白血病细胞株的作用

目的：探讨小剂量丙戊酸钠（valproateacid,VPA）对吡柔比星（pimmbicin,THP）抑制儿童急性B淋巴细胞白血病fB-cellacutelymphoblasticleukemia,B-ALL）细胞株Raji细胞生长的增敏作用及其可能机制。方法：应用WST-1法检测不同浓度的VPA、THP单药及二者联合应用时对Raii细胞增殖的影响：将筛选出最佳联合作用浓度的THP与VPA联合作用于Raii细胞,显微镜下观察细胞的增殖情况．TUNEL法检测细胞凋亡,同时通过Real-timePCR、WestemBlot检测不同组合药物作用前后细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2mRNA和蛋白水平的表达变化。结果：不同浓度VPA（0．25、0．5、1、2、3、4、5mmol／L）、THP（0．1、1．0、2．5、5、10μmol／L）对Raji细胞均有一定的增殖抑制作用,呈时间和剂量依赖性;联合用药对细胞的增殖抑制率明显高于THP单药组．也呈时间和剂量依赖性（P〈0．05）。联合用药组细胞凋亡率明显高于VPA和THP单药组。Real-timePCR、WesternBlot结果显示联合用药组（0．25mmol／LVPA＋2．5μmol／LTHPlBaxmRNA和蛋白表达水平显著高于单药组．Bcl-2mRNA和蛋白表达量显著低于单药组．各组和对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：VPA及THP对Raji细胞增殖有抑制作用,且有浓度和时间依赖性。低浓度的VPA联合不同浓度THP对Raii细胞增殖抑制作用较单药应用显著增强。VPA联合THP一定程度上通过促进凋亡进而抑制了Raii细胞的增殖作用。     

谷胱甘肽与铂类药物联用对人胃癌细胞株的影响

目的 探讨谷胱甘肽(GSH)联合奥沙利铂(L OHP)和顺铂（CDDP）对胃腺癌细胞株SGC-7901细胞增殖与凋亡的影响。方法 按照不同给药方式,分为GSH、CDDP、L-OHP单药组,GSH＋CDDP、GSH＋L-OHP联用组。采用SRB法分别观察不同给药方式对SGC-7901细胞增殖的抑制作用;使用倒置显微镜、吖啶橙荧光染色观察细胞形态变化;应用流式细胞仪检测分析细胞周期的变化和细胞凋亡率。结果 GSH分别与CDDP、L-OHP联合可以明显抑制SGC 7901细胞的增殖,GSH和CDDP联用时,与CDDP单药组差异无统计学意义（P＞0.05）;GSH和L OHP联用时,与L-OHP单药组差异有统计学意义（P＜0.05）。经铂类单药及联合用药处理后,镜下可见癌细胞均出现凋亡的形态变化。流式细胞仪分析显示,L-OHP单药组、GSH+L-OHP联合用药组作用后,S期细胞数目减少,均出现明显的凋亡峰,两组相比,有明显差异（P＜0.05）。结论 GSH不改变CDDP对肿瘤细胞的生长抑制作用,但可降低L-OHP对SGC-7901细胞增殖的影响,并降低其诱导胃癌细胞的凋亡率。     

姜黄素对乳腺癌细胞顺铂敏感性的影响

目的 探讨姜黄素(curcumin)对乳腺癌细胞中顺铂(Cisplatin,CDDP)治疗敏感性的影响及其可能机制.方法 CCK-8检测、Hoechst染色观察CDDP、姜黄素单独及联合用药48 h对MCF7细胞增殖抑制和细胞凋亡的影响;Western blot分析MCF7细胞在CDDP(0、1.25、2.5、5、10、20 μg/mL)、姜黄素(0、1、5、20、30、50、100 μmol/L)单独及联合处理后FEN1(flap endonuclease 1)表达水平的变化;CCK-8检测沉默FEN1对MCF7细胞中CDDP敏感性的影响.结果 CDDP、姜黄素均可以剂量依赖方式抑制MCF7细胞增殖,其IC50分别为5、30 μmol/L;与单独2μg/mLCDDP处理组比较,2μg/mL CDDP联合20-μmol/L姜黄素、30 μmol/L姜黄素处理组对细胞增殖的抑制效应明显增强[分别为(84.1±0.8)％、(51.1±0.5)％、(29.4±0.3)％,P＜0.05];与单独20μmol/L姜黄素处理组比较,20 μmol/L姜黄素联合2μg/mL CDDP、5μg/mL CDDP处理组对细胞增殖的抑制效应也明显增强[分别为(76.9±0.7)％、(42.4±0.3)％、(31.6±0.4)％,P＜0.05];2μg/mL CDDP联合20 μmol/L姜黄素组的细胞凋亡明显增强(P＜0.05);与Control siRNA组比较,FEN1 siRNA+CDDP组可显著增强CDDP抑制MCF7细胞增殖的敏感性[(25.4±0.3)％vs(18.7±0.2)％,P＜0.05];CDDP增殖抑制无效浓度或低浓度时,FEN1蛋白的表达随CDDP的处理剂量依赖性上调,而姜黄素可剂量依赖性下调FEN1蛋白表达;与单独CDDP和姜黄素处理组比较,2μg/mL CDDP联合20 μmol/L姜黄素组可显著降低FEN1蛋白表达(P＜0.05).结论 姜黄素可增强CDDP对乳腺癌细胞的敏感性,其机制与降低细胞FEN1的表达有关.     

PI3K抑制剂LY294002联合吡柔比星对膀胱癌BIU-87细胞增殖作用的影响

目的:探讨PI3K抑制剂联合吡柔比星对人膀胱癌BIU-87细胞增殖作用的影响。方法:用不同浓度的PI3K抑制剂LY294002联合吡柔比星对BIU-87细胞作用0、12、24、36 h后,通过MTT方法检测抑瘤率;通过Western blotting检测Caspase-3、Bax、Bcl-2及P-gp蛋白的表达。结果:THP能明显抑制BIU-87细胞的增殖,并且具有明显的时间的依赖性(P<0.05)。THP联合应用不同浓度LY294002组与单独使用同剂量的THP组比较,BIU-87细胞的增殖随着药物浓度的增加和时间的延长进一步受到抑制,而且,联合应用LY294002的低浓度THP组对BIU-87细胞抑制作用明显强于高剂量THP组(P<0.05)。此外,PI3K抑制剂LY294002联合应用THP后,BIU-87细胞Bax与Caspase-3表达都明显上升(P<0.05),Bcl-2与P-gp表达量明显降低(P<0.05)。结论:PI3K抑制剂联合THP比单独应用THP对人膀胱癌BIU-87细胞抑制作用效果明显。     

顺铂与白藜芦醇联合应用对人胃癌MGC803细胞作用的研究

目的研究顺铂（CDDP）联合白藜芦醇（RES）对人胃癌MGC803细胞株的影响。方法采用MTT法检测两种药物单用和联合应用对细胞的作用，联合应用判断两药舍用效果，流式细胞仪检测MGC803细胞周期分布。结果CDDP可抑制MGC803细胞的生长，且呈荆量及时间依赖性（P〈0．05）；CDDP对人胚肺成纤维细胞（HPF）生长起促进作用，且呈剂量依赖性（P〈0．05）；CDDP与RES联合应用对MGC803细胞生长的抑制具有协同作用（P〈0．05）；CDDP对G0／G1期有阻滞作用，RES有明显的S期阻滞作用，两者可从不同环节抑制细胞增殖。结论CDDP对胃癌MGC803细胞有抑制作用，相同剂量对正常细胞无抑制作用。CDDP与RES对胃癌细胞的抑制具有协同作用，与单用RES相比，CDDP与RES联合应用可减少RES的用药剂量。     

奥沙利铂联合地塞米松对肺腺癌 A549细胞增殖的影响

目的：研究奥沙利铂联合地塞米松对肺腺癌A549／DDP 细胞及肺腺癌患者外周纯化Th17细胞的影响。方法：使用不同浓度的奥沙利铂（0．3125μg／mL、0．625μg／mL、1．25μg／mL、2．5μg／mL、5μg／mL、10μg／mL ）及地塞米松（1nmoL／L、10nmoL／L、100nmoL／L、200nmoL／L、500nmoL／L、1000nmoL／L）在不同时间点（24h、48h、72h）干预人肺腺癌A49／DDP 细胞及Th17细胞,通过细胞增殖抑制实验、细胞凋亡实验检测肺腺癌细胞生长抑制率及细胞凋亡情况,结果：在1nmoL／L～200nmoL／L时地塞米松对肺腺癌A549细胞增殖无抑制作用,500～1000 nmoL／L的浓度范围内,地塞米松以剂量依赖性方式抑制肺腺癌A549细胞增殖,并表现出明显的量效关系（ r＝0．282, P＜0．05）;且随着作用时间的延长,抑制率逐渐增加,呈现出浓度和时间依赖性。在0．3125～1．25μg／mL奥沙利铂肺腺癌A549细胞增殖无抑制作用,2．5～10μg／mL奥沙利铂以时间及剂量依赖性对肺腺癌A549细胞的增殖产生抑制作用,当5μg／mL及10μg／mL奥沙利铂作用于肺腺癌A549细胞细胞72h后,抑制率分别为61．12±0．98％、63．67±0．18％,抑制作用相当（ P＞0．05）。连续给药24h、48h、72h后发现干预24h后即对肺腺癌A549细胞增殖产生抑制作用,联合用药组OD值明显低于单用组,即联合用药其抑制率显著高于其他单用组,且趋势随着用药时间的延长而逐渐明显。结论：地塞米松联合奥沙利铂联合用药能产生协同作用,抑制A549细胞增殖。     

黄芪多糖对糖尿病足部溃疡部位成纤维细胞增殖功能的促进作用

目的 探讨黄芪多糖对糖尿病足部溃疡成纤维细胞增殖功能的影响.方法 选择糖尿病足部溃疡患者15例,取患者创面边缘全厚皮片,分离、培养、传代成纤维细胞.比较不同浓度黄芪多糖对成纤维细胞增殖功能的影响.结果 各组间吸光度A值比较差异有显著统计学意义（F=21.357,P＜0.01）,其中100μg/mL组和500μg/mL组显著高于对照组,而500μg/mL组又显著高于100μg/mL组（t=3.926、7.254、4.359,P均＜0.01）.结论 黄芪多糖能够促进糖尿病足部溃疡成纤维细胞的增殖,并且随着浓度的增加,促进作用越强.     

苦参碱抑制U937细胞增殖与诱导凋亡的体外实验研究

目的 探讨苦参碱对U937细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用.方法 U937细胞培养:在含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液中传代培养,细胞处于对数生长期时加药;通过细胞生长曲线、细胞形态、MTT实验、细胞周期测定、乳酸脱氢酶(LDH)活性测定方法观察苦参碱对U937细胞的诱导凋亡与增殖的影响.结果 与对照组相比,0.2～1.0 mg/mL的苦参碱均显著抑制U937细胞的生长(P＜0.01),且苦参碱对U937细胞的生长抑制作用呈时间和剂量依赖性,苦参碱作用U937细胞48 h的半数抑制浓度(IC50)为0.4 mg/mL;随细胞增殖LDH比活性相应上升,与对照组相比,0.2、0.3 mg/mL苦参碱组LDH比活性均明显降低(P均＜0.01),苦参碱作用浓度越高,LDH比活性降低越明显;0.2～1.0 mg/mL苦参碱可使U937细胞发生S期阻滞,且随苦参碱浓度增加,G0/G1期细胞减少和S期细胞增多越明显(P＜0.01).结论 0.2～1.0 mg/mL苦参碱对U937细胞具有诱导凋亡与增殖抑制作用,呈时间-剂量依赖关系.     

HepaCAM联合吡柔比星抑制膀胱癌BIU-87细胞的增殖

目的：研究肝细胞黏附分子（hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM）联合吡柔比星（pirarubicin,THP）对膀胱癌细胞BIU-87的增殖影响。方法：将BIU-87细胞分为空白处理组、hepaCAM过表达腺病毒（adenovirus-GFP-hepaCAM,Ad-GFP-hepaCAM）处理组、THP处理组、Ad-GFP-hepaCAM联合THP处理组。噻唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）检测细胞增殖,流式细胞仪（flow cytometry,FCM）检测细胞周期,real-time PCR检测细胞周期相关基因cyclinD1,CDK2的mRNA表达。将空白、空载腺病毒（adenovirus-GFP,Ad-GFP）、hepaCMA过表达腺病毒（Ad-GFP-hepaCAM）处理的BIU-87细胞分别注射于裸鼠皮下,观察裸鼠成瘤情况并记录瘤体体积,4周后处死裸鼠。切取各组瘤体组织,组织切片行HE染色和免疫组化检测hepaCAM蛋白的表达。结果：Ad-GFP-hepaCAM联合THP处理组,与THP处理组比较,BIU-87细胞增殖受到明显抑制（F=2.702,P=0.00）;细胞周期明显阻滞于G0/G1期（F=10.989,P=0.000）;cyclinD1、CDK2的mRNA 表达明显下调（F=5.4299,P=0.000）。Ad-GFP-hepaCAM处理组的BIU-87细胞成瘤体积明显低于空白处理组（F=12.587,P=0.000）。结论：hepaCAM基因能够增强吡柔比星对膀胱癌BIU-87细胞的增殖抑制作用。     

二氢青蒿素联合顺铂对胃癌细胞生长的影响

目的 探讨二氢青蒿素(DHA)联合顺铂(CDDP)对人胃癌SGC7901细胞生长的影响及作用机制.方法 体外培养人胃癌SGC7901细胞,分为对照组、DHA组、CDDP组和DHA+DDP联用组,MTT比色法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞周期分布情况及凋亡的百分比;RT-PCR和Western blotting分别测定Cyclin D1、P21、Caspase-3的mRNA和蛋白的表达水平.结果 DHA和CDDP都能明显抑制SGC7901细胞增殖,DHA+CDDP组抑制强度明显高于单一药物处理组,二者具有协同抑制作用;与对照组相比,DHA和CDDP均能使细胞周期阻滞于G1期,细胞凋亡率明显增加(P＜0.05),DHA+CDDP作用组停滞在G1期细胞比例及细胞凋亡率均显著高于单独DHA或CDDP处理组(P＜0.05);与对照组相比,DHA或CDDP处理组Cyclin D1 mRNA和蛋白表达下降、P21和Caspase-3 mRNA和蛋白表达上升(P＜0.05),DHA+CDDP组细胞Cyclin D1 mRNA和蛋白水平显著低于单用组(P ＜0.05);P21和Caspase-3 mRNA和蛋白水平显著高于单用组(P＜0.01).结论 DHA与CDDP联用对胃癌细胞的抑制具有协同作用,其作用机制可能与下调Cyclin D1和上调P21、Caspase-3基因表达,阻滞细胞周期进程和促进细胞凋亡有关.     

替莫唑胺联合氟桂利嗪对胶质瘤细胞体外作用机制

目的:探讨替莫唑胺(TMZ)联合氟桂利嗪(FZ)对人脑胶质瘤细胞体外清除作用及可能机制。方法:用伊格尔培养基培养胶质瘤U87、U251、CHG-5、SHG-44细胞株,用CCK-8试剂检测并评价TMZ、FZ两者单药及联合用药处理后的U87、U251、CHG-5、SHG-44细胞增殖抑制率及观察TMZ的半数抑制浓度(IC_(50));流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:FZ单独处理胶质瘤细胞株后能起到一定的抑制作用,而远远起不到治疗效果;在同类细胞中,TMZ单药作用细胞株后IC_(50)分别为(562.3±56.7)、(370.5±40.2)、(480.9±29.6)、(420.5±61.4)μg/mL。在不同浓度的FZ联合TMZ应用后TMZ IC_(50)均有不同程度下降(P0.05);与对照组、替莫唑胺、氟桂利嗪单药作用组比较,TMZ联合FZ用药诱导胶质瘤细胞凋亡率显著提高。结论:FZ可抑制胶质瘤U87、U251、CHG-5、SHG-4增殖,与TMZ联合应用后能提高化疗效果。     

奈达铂联合β-榄香烯对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨奈达铂（nedaplatin,NDP）联合β-榄香烯（β-elemene）对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响. 方法 体外培养宫颈癌HeLa细胞,分别将奈达铂（浓度为7.5,15,30,45,60 μg/ml）,β-榄香烯（浓度为25,50,100,150,200 μg/ml）,单独作用于HeLa细胞后24h、48h用MTT比色法检测细胞的增殖情况,并选取合适的药物浓度（奈达铂15μg/ml,β-榄香烯150 μg/ml）,进行联合用药,加药24 h、48 h后用MTT法检测细胞的增殖情况,用流式细胞术检测24 h细胞的凋亡率.结果 ①MTT法显示不同浓度β-榄香烯作用HeLa细胞24 h、48 h后,其增殖抑制率均明显高于正常对照组（P＜0.05）.奈达铂组除24h时7.5 μg/ml和15 μg/ml无显著差异外,其余各组增殖抑制率均明显高于相应正常对照组（P＜0.05）.②联合用药（奈达铂15 μg/ml,β-榄香烯150 μg/ml）时,对HeLa细胞的抑制作用显著高于单独用药（P＜0.01）. 结论 奈达铂、β-榄香烯单独或二者联合作用均能抑制HeLa细胞的增殖,且联合应用的作用显著高于单独用药,可协同促进HeLa细胞的凋亡.     

Extracellular adenosine triphosphate improves growth and invasion of U87 glioma cells

目的 观察细胞外三磷酸腺苷(adenosine Triphosphate,ATP)对体外培养的U87人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响.方法 采用MTT法检测不同浓度细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖的影响;以相同条件下不加ATP作为对照组,以加入100 μmol/L ATP作为处理组,采用Transwell细胞侵袭实验检测100 μmoL/L细胞外ATP对U87胶质瘤细胞侵袭能力的影响;用时间显微镜动态观察100 μmoL/L的ATP作用下U87胶质瘤细胞的迁移情况.结果 高浓度(5 000 μmol/L)细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖有显著抑制作用,较低浓度(50、100、500 μmol/L)细胞外ATP对U87胶质瘤细胞增殖无明显影响,5 000 μ mol/L ATP组与其他浓度组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);Transwell侵袭实验中,处理组细胞跨膜细胞数为( 163.83±17.81)明显多于对照组(89.83±13.27)(P＜0.01);迁移实验中,处理组细胞运动速度为(163.83±17.81) μm/h,对照组细胞运动速度为(89.83±13.27) μm/h,2组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 100 μmol/L的细胞外ATP对体外培养的U87胶质瘤细胞的侵袭和迁移具有明显促进作用.     

不同水平自噬对替莫唑胺抑制神经胶质瘤细胞增殖的影响

目的探讨不同水平自噬对替莫唑胺抑制神经胶质瘤细胞增殖的影响。方法使用0（对照）、10、25、50滋g/L的雷帕霉素（RAPA）预处理人胶质瘤细胞（U87细胞）0.5h;再加入200滋mol/L替莫唑胺作用24h,收集U87细胞。采用流式细胞术检测自噬标志物微管相关轻链蛋白3（LC3）-Ⅱ表达量,RT-PCR法检测自噬相关基因Beclin-1mRNA相对表达量,MTT法检测细胞增殖抑制率。结果对照组、10滋g/L组、25滋g/L组和50滋g/L组U87细胞LC3-Ⅱ表达量、Beclin-1mRNA相对表达量及细胞增殖抑制率比较,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;经两两比较发现,随着RAPA浓度的增加,LC3-Ⅱ表达量及Beclin-1mRNA相对表达量均逐渐升高（均P＜0.05）,而细胞增殖抑制率先下降后逐步升高（均P＜0.05）。结论不同水平自噬对替莫唑胺抑制神经胶质瘤细胞增殖产生不同的影响,随着自噬水平的提高,替莫唑胺对神经胶质瘤细胞的增殖抑制率先下降后逐渐升高。     

CpG ODN对急性单核细胞白血病细胞株U937化疗敏感性的影响及其机制研究

目的 观察CpG ODN对人急性单核细胞白血病细胞株U937化疗敏感性的影响，探讨增强急性白血病化疗效果的可能途径及其作用机制。〖HTH〗方法〖HTK〗 多柔比星（ADM）单药及联合应用CpG ODN与U937细胞共同孵育，采用CCK-8法检测U937细胞生长抑制率，Hoechst染色法和流式细胞仪Annexin V-PI双染法检测U937细胞的凋亡情况，RT-PCR检测分析凋亡相关基因Bcl-2和Bax的水平。 结果 ADM对U937细胞生长具有明显抑制作用，而且CpG ODN与其联合应用可进一步加强该作用。各浓度ADM+CpG ODN联合组对U937细胞的生长抑制率和诱导的早期凋亡率均显著高于ADM单药组（均P＜0.05）。ADM+CpG ODN联合组细胞内Bax基因的mRNA表达量较ADM单药组明显上升（P＜0.05），而Bcl-2 mRNA的表达无显著性差异（P＞0.05）。ADM+CpG ODN联合组较ADM单药组的Bcl-2/Bax值减小（P＜0.05）。 结论 CpG ODN可增强ADM对U937 细胞生长的抑制作用，加强ADM诱导白血病细胞凋亡的作用，从而增强U937对ADM的化疗敏感性。该作用可能是通过上调Bax基因的表达而实现。     

穿心莲内酯对胶质瘤U87细胞增殖的抑制作用及其机制

目的：观察穿心莲内酯（Andro）对胶质瘤U87细胞增殖的抑制作用,阐明其作用机制。方法：取对数生长期U87细胞,分为二甲基亚砜(DMSO)对照组、4H-穿心莲内酯(4H-Andro)对照组和Andro组, MTT法检测不同浓度(0、5、10、15、20和25 μmol•L^-1) DMSO 、4H-Andro 及Andro对U87细胞活力的影响,计算U87细胞半数抑制浓度（IC50）;Western blotting法检测各组U87细胞NF-κB蛋白表达强度。结果：通过浓度筛选,Andro平均IC50为8 μmol•L^-1。与DMSO和4H-Andro对照组比较,8 μmol•L^-1 Andro处理24 h后U87细胞增殖活性降低（P<0.01）,增殖抑制率达到50%;Andro处理96 h时,U87细胞增殖活性进一步降低（P<0.01）,增殖抑制率达到65%。与DMSO和4H-Andro对照组比较,8 μmol?L-1 Andro处理48 h后, U87细胞中NF-κB（即磷酸化p65）蛋白表达强度下降（P<0.01）。结论：Andro作为临床上常用的天然抗炎药物,具有抑制胶质瘤细胞增殖的功能,并且可通过靶向抑制NF-κB蛋白表达强度发挥作用。     

顺铂所致体外培养大鼠窦前卵泡损伤模型的建立

目的　探索建立顺铂(cisplatin，CDDP)所致大鼠窦前卵泡损伤的模型。方法以SD大鼠窦前卵泡为研究对象，将5组不同剂量（0、0.25、0.5、1、2μg/mL）的CDDP加入到体外培养的大鼠窦前卵泡培养液中。作用24h后，用光镜和Hoechst33342/PI荧光双染观察窦前卵泡的形态学变化，用化学发光法检测窦前卵泡培养液中的雌二醇(E2)水平。结果　CDDP浓度≥1μg/mL时，窦前卵泡的形态发生明显改变，培养液中E2浓度降低，与空白对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01)。结论　1μg/mL的CDDP作用24h后即可明显抑制大鼠窦前卵泡的生长，出现闭锁现象。该模型的窦前卵泡形态及E2水平出现明显变化，与人类CDDP导致的卵巢功能早衰的病变过程相似。     

细梗香草皂苷联合吉西他滨对胰腺癌细胞BxPC-3抑制作用的研究

目的观察细梗香草皂苷（LC）和吉西他滨(GEM）单药及联合用药对人胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响,探究LC抗胰腺癌的作用机制。方法培养人胰腺癌BxPC-3细胞时加入不同浓度梯度的LC与GEM,采用MTS法检测细胞增殖抑制率,计算两种药物的半抑制浓度（IC50）和联合作用指数（CI）。将细胞分为4组,A组（对照空白）、B组（GEM1滋mol/L）、C组（LC15滋g/ml）和D组（GEM1滋mol/L+LC15滋g/ml联合用药）,培养后采用AnnexinⅤ-FITC/PI法观察LC与GEM对BxPC-3细胞的诱导凋亡作用;Westernblot法检测抗多聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）、抗半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）的表达。结果8~64滋g/ml的LC及1.25~20滋mol/L的GEM均对BxPC-3细胞的增殖有抑制作用,且呈浓度依赖性,其IC50分别为16.55滋g/ml和1.27滋mol/L。15滋g/ml的LC与各个浓度的的GEM协同作用最强,CI值为0.53~0.65。B、C、D组的早、晚期凋亡率与A组比较差异均有统计学意义（均P＜0.01）,且D组与B、C组的早期凋亡率比较差异均有统计学意义（均P＜0.01）。C、D组与A组比较,PARP蛋白表达水平明显降低（均P＜0.05）;B、C、D组与A组比较,Caspase-3蛋白表达水平增加（均P＜0.05）。结论LC有抑制胰腺癌细胞生长的作用,与GEM联合作用效果更好;其作用机制可能是通过激活Caspase-3表达,分解PARP,从而诱导细胞凋亡。     

榄香烯体外和体内抑制人胃癌SGC―7901细胞株的增殖作用及机制

目的观察榄香烯对人胃癌SGC-7901细胞株体外和体内增殖、抑制及凋亡的作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用不同药物对培养后的人胃癌SGC-7901细胞株进行处理并分为4组：对照组、榄香烯组、细胞外信号调控的蛋白激酶1/2（ERK1/2）信号通路抑制剂PD98059组和榄香烯+PD98059联合组;再将20只雄性裸鼠随机分为4组：甲组（腹腔注射0.9%氯化钠注射液）、乙组（腹腔注射榄香烯最大耐受剂量200mg/kg）、丙组（腹腔注射PD98059最大耐受剂量1mg/kg）、丁组（腹腔注射最大耐受剂量榄香烯+PD98059）,均制作胃癌移植瘤模型,并腹腔注射不同药物进行治疗。观察榄香烯和PD98059对细胞株相关蛋白的表达情况及裸鼠胃癌移植瘤的大小及对裸鼠生长的影响。采用MTT法检测细胞增殖情况,Western-blot法检测ERK1/2、磷酸化细胞外信号调控的蛋白激酶1/2（p-ERK1/2）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38）、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38）的表达,real-timeRT-PCR检测Bcl-2mRNA及BaxmRNA的表达,TUNEL法检测胃癌细胞凋亡并计算凋亡指数。结果与对照组相比,榄香烯组随药物浓度的增加,p-ERK1/2表达增加（P＜0.05或0.01）,BaxmRNA的表达增加（均P＜0.01）,Bcl-2mRNA的表达降低[除榄香烯0.02mg/ml外,其他浓度均具有统计学差异（均P＜0.01）],而总ERK1/2的表达无明显变化（均P＞0.05）;榄香烯、PD98059及榄香烯+PD98059对胃癌细胞增殖均具有抑制作用（均P＜0.05）,且两药联合的抑制作用最好;榄香烯、PD98059及榄香烯+PD98059组细胞凋亡率均高于对照组（P＜0.05或0.01）,并具有浓度依赖性,且两药联合组的凋亡率明显高于单一用药组（均P＜0.05）;乙、丁两组移植瘤的瘤重均较甲组明显减小（P＜0.05或0.01）,且两药联合时抑瘤率达75.59%。结论榄香烯对肿瘤细胞具有抑制作用,且可能是通过上调p-ERK1/2和p-p38蛋白的表达促进胃癌细胞和移植瘤的凋亡,另榄香烯与PD98059联合使用时对肿瘤细胞及组织具有协同抑制效应。