塑化剂对慢性肾衰大鼠模型和腹膜透析患者腹膜纤维化调控因子TGF-β1/Smads表达的影响

目的 研究塑化剂对慢性肾衰大鼠模型和腹膜透析患者腹膜纤维化调控因子——转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad蛋白家族(Smads)表达的影响。 方法 紫外分光光度法测定腹膜透析液中邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)的含量。30只雄性SD大鼠随机平均分为正常对照组、模型对照组、低浓度DEHP组、中浓度DEHP组、高浓度DEHP组。模型对照组和DEHP组采用5/6肾切除法制备大鼠肾衰模型,建模成功后每日向大鼠腹腔注射含不同浓度DEHP的“腹透液”连续28 d。苏木精-伊红染色法(H-E)、蛋白质印迹法(Western-blot)及反转录PCR(RT-PCR)技术观察大鼠腹膜组织病理、TGF-β1/Smads通路关键因子及基因的表达,免疫荧光法检测大鼠腹膜组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。16例腹膜透析患者随机分为2组,分别给予聚氯乙烯(PVC)包装腹透液和非PVC包装腹透液,3月后测量2组腹膜平衡试验、尿素清除指数(KT/V)、肌酐清除率(Ccr)和腹透液中TGF-β1含量。 结果 DEHP组表现出腹膜纤维化趋势。与对照组比较,DEHP组TGF-β1/Smads关键因子及其mRNA的表达水平有明显上调(P<0.05); DEHP组间各蛋白及mRNA的表达比较,差别无统计学意义(P>0.05)。DEHP组Smad7 mRNA和蛋白表达水平较对照组下调(P<0.05),DEHP各组间比较,差别无统计学意义(P>0.05)。2组腹膜透析患者KT/V,Ccr及腹膜平衡试验结果比较,差别无统计学意义(P>0.05); 非PVC组腹透液中TGF-β1浓度较PVC组明显降低(P<0.05)。 结论 DEHP可引起慢性肾衰模型大鼠腹膜纤维化的发生,机制为致经典纤维化通路TGF-β1/Smads激活,激活程度与DEHP浓度无关。PVC包装腹膜透析液能上调腹膜TGF-β1的表达,可能导致腹膜纤维化进展。     

舒洛地特对腹膜透析大鼠腹膜结构和功能的作用

目的观察舒洛地特对慢性腹膜透析大鼠腹膜结构和功能的作用。方法 36只SD雄性大鼠随机分为4组:空白对照组(n=6)、模型组(n=10)、低剂量[10 mg/(kg.d)]舒洛地特组(n=10)、高剂量[20 mg/(kg.d)]舒洛地特组(n=10)。透析8周后行1 h腹膜平衡试验(PET);使用全自动生化分析仪测定1 h腹膜平衡试验透出液中尿素氮(Durea)、透出液中总蛋白(Dtp)、初始腹透液葡萄糖浓度(D0)、透出液葡萄糖浓度(D1)、血浆尿素氮(Purea)及血浆总蛋白(Ptp),并计算D/Purea(说明腹膜对尿素氮清除效率)、D/Ptp(评估腹膜透析液中总蛋白丢失情况)、D1/D0(表示腹透超滤的能力)。取壁层腹膜行H-E及Masson染色观察腹膜结构变化,半定量计算腹膜厚度、腹膜单位面积血管及炎症细胞数;计算腹透液中白细胞数;ELISA法检测腹透液MCP-1及TNF-α水平;免疫组化检测壁层腹膜TGF-β1表达情况。结果与对照组相比,长期腹透大鼠腹膜间皮细胞减少,间皮下基质增厚,炎症细胞增多,血管增生明显(P<0.05),腹膜超滤量和D1/D0减少,D/Purea及D/Ptp增加(P<0.05),腹透液中白细胞数、MCP-1及TNF-α水平上调(P<0.05),脏层腹膜TGF-β1表达上调;给予舒洛地特干预后腹膜结构改变减轻,腹膜组织炎症细胞浸润和血管增生减少,腹膜功能改善,腹透液MCP-1及TNF-α水平下调(P<0.05),脏层腹膜TGF-β1表达下调。结论舒洛地特可能通过抑制腹膜慢性炎症来达到抑制腹膜纤维化及改善腹膜功能的作用。     

腹膜透析患者腹透液中细胞因子水平的研究

目的　研究不卧床持续性腹膜透析 (CAPD)患者腹透液中转移生长因子 β1 (TGF β1 )水平及影响因素对腹膜小分子物质清除功能的影响。方法　测定CAPD患者血浆中和腹透液中TGF β1 、IL 6、TNF、CRP(C反应蛋白 )水平 ;同时统计CAPD患者腹透液葡萄糖含量、交换量、次数、留腹时间及腹膜炎次数 ;计算CAPD患者KpT V、Cpcr。结果　CAPD患者血浆中IL 6、TNF、CRP水平均明显高于正常健康人 ,P <0 .0 5～ 0 .0 1;透析第 12月 (KpT V +Cpcr) 2较第 3月下降超过 10 %的CAPD患者其腹透液中TGF β1、IL 6、TNF、CRP、葡萄糖浓度、腹膜炎次数均较对照组明显升高 ,P <0 .0 5～ 0 .0 1;腹透液中TGF β1 与IL 6、TNF、CRP、腹透液中葡萄糖浓度呈正相关 ,P <0 ..0 5～ 0 .0 1,与腹膜炎次数无关 ;腹透液中CRP与葡萄糖浓度、腹膜炎次数呈正相关 ,P <0 .0 5～ 0 .0 1,与腹膜交换量、次数、留腹时间无关。结论　CAPD患者体内确实存在慢性炎症状态 ,其炎症标志性因子CRP与腹透液葡萄糖浓度、腹膜炎次数有关 ,CAPD患者腹膜物质转运功能丧失与TGF β1 、IL 6、TNF、CRP升高有关。     

尿毒症腹膜透析患者同型半胱氨酸清除机制的临床研究

目的:探讨持续不卧床腹膜透析(CAPD)及残余肾功能(RRF)对尿毒症患者血同型半胱氨酸(Hcy)的清除的影响.方法:留取22例CAPD患者24 h的透出液及尿液,同日取血标本,用高压液相色谱技术(HPLC)测定血清、透出液的总同型半胱氨酸(tHcy)浓度;常规检测血、透出液和尿液的尿素氮、肌酐值;计算总尿素清除指数(Kt/V)、RRF、腹膜tHcy清除率和每日腹透液tHcy清除量.结果:CAPD患者的血tHcy平均浓度高于正常人[(15.95±3.77) vs (8.87±2.43) μmol/L,P＜0.05],平均每日tHcy清除量为(15.24±4.52) μmol.RRF与血tHcy浓度无关,与每日腹透液tHcy清除量呈负相关;Kt/V与每日腹透液tHcy清除量呈正相关,与血tHcy浓度无关.结论:CAPD患者血tHcy水平较正常人升高;RRF及Kt/V对CAPD患者血tHcy浓度的降低影响较小.     

醛固酮受体拮抗剂抑制腹膜纤维化及机制

目的探讨醛固酮受体拮抗剂对腹膜透析腹膜纤维化的作用及机制。方法30只Wister大鼠随机分成3组,一组为正常组,其余两组均采用4.25%含糖透析液 脂多糖致腹膜纤维化模型。再分为对照组,安体舒通给药组,30天后处死各组大鼠,留取腹膜组织做HE及Masson染色,留取血液和腹透液做ELISA法测TGF-β,腹透液计数腹水中细胞总数和巨噬细胞数,免疫组织化学法测定腹膜组织MCP-1,C-J。结果安体舒通组的壁层腹膜厚度比模型组薄,腹水细胞总数和巨噬细胞数减少(P<0.01),转化生长因子-β的浓度下降,MCP-1表达下调(P<0.01)。结论醛固酮受体拮抗剂安体舒通可明显抑制腹膜间皮细胞MCP-1表达,降低TGF-β活性,抑制腹膜炎症,从而减轻腹膜纤维化。     

腹膜透析患者透析液中SGLT1、TGF-β1、VEGF水平与腹膜纤维化的关系及应用价值

  目的  探讨腹透液中钠-葡萄糖转运体1(SGLT1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)水平与腹膜纤维化的关系及其应用价值。  方法  选取2012年6月—2021年6月温州市中西医结合医院收治的发生腹膜纤维化的腹膜透析患者25例为研究组,另选取未发生腹膜纤维化的腹膜透析患者35例为对照组,比较2组SGLT1、TGF-β1、VEGF水平,分析SGLT1、TGF-β1、VEGF在腹膜纤维化诊断中的应用价值。  结果  研究组与对照组比较,SGLT[(128.85±22.58)pg/mL vs.(85.42±15.68)pg/mL], TGF-β1[(432.32±54.18) pg/mL vs. (245.72±32.10) pg/mL], VEGF[(903.25±61.45) ng/mL vs.(612.85±32.10)ng/mL]差异有统计学意义(均P < 0.05)。经ROC曲线分析可知,腹透液中SGLT1、TGF-β1、VEGF联合诊断时可获得最大曲线下面积(AUC)为0.865(95% CI:0.708~0.952),敏感度、特异度为85.02%、82.14%。  结论  SGLT1、TGF-β1、VEGF水平异常升高与腹膜纤维化的发生有密切的关系,可有效预测腹膜纤维化发生情况。      

持续性非卧床腹膜透析患者血清及腹透液热休克蛋白47的表达及其与微炎症的关系

目的 探讨持续性非卧床腹膜透析(CAPD)患者的血清及腹膜透析流出液中热休克蛋白47(HSP47)的表达水平及其与微炎症的关系。方法 回顾性分析2018年6月至2020年2月在桂林医学院附属医院门诊规律随诊的50例CAPD患者(CAPD组)、13例血液透析(HD)患者(HD组)、12例慢性肾病(CKD)5期患者(CKD组)及10例健康体检者(健康组)临床资料，其中包括一般信息及超敏C反应蛋白(hs-CRP),检测空腹静脉血及夜间留腹腹透液标本中HSP47、转化生长因子β1蛋白(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等指标并进行分析与比较。结果 与健康组比较，CAPD组、HD组中血清HSP47的水平较高(P<0.05),HD组血清TNF-α的水平较高(P<0.05)。与透析≤1年患者比较，透析>1年的CAPD患者血清IL-6、腹透液IL-6及hs-CRP的水平较高(P<0.05)。CAPD患者血清HSP47与hs-CRP呈正相关(r=0.568,P<0.001),与腹透液HSP47呈正相关(r=0.584,P<0.00...     

残余肾功能对腹膜透析患者营养状况影响的临床研究

目的：前瞻性观察长期维持性非卧床腹膜透析（CAPD，简称腹透）患者的营养状况，探讨残余肾功能对营养状况的影响。方法：选择腹透时间大于3个月的慢性肾功能衰竭患者37例作为实验组，10例健康人作为正常对照组。实验组以残余肾肌酐清除率3ml/min为界，分A组[残余肾功能（RRF）＜3ml/min]，32例次；B组（RRF≥3ml/min）,21例次。采用常规处方透析，留取尿液、腹透液，并抽血检测生化、血脂及蛋白营养指标，计算RRF、KT／V值、肌酐清除率（Ccr）、单位透析剂量（PV／S）及蛋白质分解率（PCR），评估每日蛋白质摄入量（DPI）。结果：RRF与KT／V、Ccr及残余尿量呈正相关（r=0.56、0．83及0．80，P均＜0．05），与透析时间、透析超滤量呈负相关（r=-0.41、0．33，P均＜0．05），与PV／S不相关。A组Ccr、KT／V及血浆前白蛋白（PA）、视黄醇结合蛋白（RBP）、转铁蛋白（Tf）明显低于B组，但PCR高于B组。A、B两组间白蛋白、三酰甘油及胆固醇的差异无显著性（P＞0．05）。结论：RRF与腹膜透析的充分性密切相关，并影响腹透患者的营养状况，根据RRF下降程度及时调整透析剂量及方案，是预防CAPD患者营养不良最主要的措施。     

氟伐他汀在大鼠腹膜透析模型中对腹膜的保护作用

目的:探讨氟伐他汀(fluvastatin,Flu)对腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)大鼠腹膜组织形态影响的初步研究?方法:通过SD雄性大鼠(体重180~200 g)腹腔注射4.25%浓度的葡萄糖腹透液的方式模拟腹膜透析?随机分为5个组:①正常对照组;②4.25%腹透液组;③单纯Flu组;④生理盐水组;⑤Flu干预的4.25%腹透液组?4周后留取各组大鼠壁层腹膜组织,光镜观察各组大鼠壁层腹膜形态学的变化,同时采用RT-PCR法测定各组大鼠腹膜转化生长因子-β1(transforming growth factor,TGF-β1)及纤维连接蛋白(fibronectin,FN)mRNA的表达?结果:光镜下HE染色显示4.25%腹透液组大鼠腹膜较正常对照组显著增厚,Flu干预组的壁层腹膜厚度薄于未干预组,生理盐水组和单纯Flu组大鼠腹膜的形态较正常对照组未见明显改变?4.25%腹透液组大鼠腹膜TGF-β1及FN mRNA的表达量均高于正常对照组(均P < 0.05),Flu干预组两者mRNA的表达量均明显低于未干预组(均P < 0.05),生理盐水组和单纯Flu组大鼠腹膜两者的mRNA表达量较正常组无明显统计学意义?结论:长期使用高糖腹透液会改变腹膜的结构,氟伐他汀在一定程度上对腹膜有保护作用,但具体机制仍需进一步研究?     

不同透析液对腹膜透析患者残余肾功能与透析充分性的影响

目的探讨不同腹膜透析液对腹透患者残余肾功能与透析充分性的影响。方法回顾性分析2008年1月～2009年12月我院行腹膜透析治疗、分别使用进口和国产腹膜透析液的患者,随访两年期间能定期行透析充分性及腹膜平衡试验的患者,比较两组患者残余肾功能、透析充分性及腹膜转运类型变化等指标。结果两种腹膜透析液在患者残余尿量、肾小球滤过率、周尿素氮清除指数(KT/V)、周肌酐清除率(CCr)、4小时肌酐透出液与血浆比(D/P)值、腹透超滤量均无显著性差异(P>0.05)。结论该国产腹透析液对小分子溶质和水的清除,残余肾功能和腹膜转运功能的影响与进口腹透液是相当的,并没有引起血钠浓度的升高。     

脐血瘦素、脂联素及IGF-Ⅰ与胎儿生长发育的初步研究

目的旨在揭示脐血脂联素、瘦素及胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）与胎儿生长发育的关系,探讨其在胎儿生长发育方面的相互作用及临床意义。方法采用放射免疫法测定86例新生儿脐血脂联素、瘦素、IGF-Ⅰ水平,根据胎龄及出生体质量百分位数的关系分为：SGA组16例,AGA组41例及LGA组29例,同时测量新生儿的出生体质量、身长、头围、足长、胎盘重量并计算体重指数（BMI）。结果脐血瘦素、脂联素及IGF-Ⅰ水平均LGA组〉AGA组〉SGA组。脐血脂联素水平与出生体质量、胎盘重量、BMI水平均呈正相关（P均〈0．05）。脐血瘦素及IGF-Ⅰ水平分别与新生儿出生体质量、身长、头围、足长、BMI及胎盘重量呈显著正相关（P〈0．01）,脐血瘦素与脂联素、IGF-Ⅰ水平亦呈显著正相关（P〈0．01）。脐血瘦素、脂联素水平与新生儿性别及分娩方式间均差异无统计学意义（P〉0．05）;脐血IGF-Ⅰ水平与新生儿性别差异无统计学意义（P〉0．05）,与新生儿分娩方式差异有统计学意义（P〈O．05）。结论脐血瘦素、脂联素、IGF-Ⅰ在调节胎儿生长发育方面起着重要作用,参与胎儿的生长发育过程,可作为评价胎儿生长发育及营养状态的临床指标之一。脐血瘦素、IGF-Ⅰ水平异常可能是引起胎儿宫内生长迟缓和巨大儿发生的原因之一。     

IGF-I和TGF-β1在多囊卵巢综合征大鼠卵巢中的表达及意义

目的探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF—Ⅰ）和转化生长因子β1（TGF—β1）在多囊卵巢综合征（PCOS）发病机制中的作用。方法40只雌性Wistar大鼠随机分为PCOS组和对照组,每组各20只。PCOS组应用来曲唑{1-[双-（4-氰基苯基）甲基]-1,2,4-三氮唑}灌胃制备PCOS大鼠模型,对照组不作任何处理。阴道涂片观察大鼠动情周期变化;运用放免法测定大鼠血清黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、雌二醇（E2）、孕酮（P）和睾酮（T）水平;光镜观察卵巢、卵泡发育情况;免疫组化法观察卵巢组织中IGF—Ⅰ和TGF—β1的表达。结果PCOS组大鼠失去规律性动情周期变化。血清T、LH浓度高于对照组（P〈0．05）,血清E2、FSH、P浓度低于对照组（P〈0．05）。IGF-Ⅰ在PCOS组颗粒细胞的表达明显强于对照组（P〈0．05）,TGF—β1在PCOS组卵泡膜细胞和间质细胞的表达明显强于对照组（P〈0．05）。结论来曲唑诱导的大鼠动物模型是较好的PCOS模型。IGF—Ⅰ和TGF—β1与PCOS的发病密切关。     

低蛋白饮食加用复方α-酮酸片在持续性腹膜透析中的疗效观察

目的观察低蛋白饮食加用复方α-酮酸片在非卧床持续性腹膜透析(CAPD)中对肾功能及代谢的改善及其机制。方法将20例CAPD患者随机分为对照组和治疗组,前者采用腹膜透析低蛋白饮食治疗,后者在腹膜透析低蛋白饮食基础上加用α-酮酸片治疗,疗程为12个月,对比残余肾尿素清除指数、下降速度及血肌酐、血浆白蛋白和红细胞比容水平。结果治疗组残余肾功能(RRF)下降速度慢于对照组,两组治疗后的RRF差异有统计学意义(P<0.01);治疗组血钙、红细胞比容水平较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论低蛋白饮食加用复方α-酮酸片对于CAPD患者可以保护肾脏,减轻患者残余肾功能下降速度,同时可改善机体代谢状态。     

前癃通胶囊抑制良性前列腺增生基质细胞TGF-β1表达的体外实验研究

目的研究前癃通胶囊干预下,TGF-β1mRNA在良性前列腺增生基质细胞中的表达的变化。方法:采用MTT比色法检测前癃通胶囊对体外培养良性前列腺增生前列腺基质细胞增殖的抑制作用;应用逆转录-多酶链反应(RT-PCR)技术,观察前癃通胶囊干预下TGF-β1mRNA在良性前列腺增生基质细胞中的表达的变化。结果 3种浓度的前癃通胶囊能抑制前列腺基质细胞的增殖,且随着时间的延长抑制作用增强,高浓度组在不同时段对前列腺基质细胞增殖有明显的抑制作用,与中浓度组比,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);中浓度组在不同时段对前列腺基质细胞增殖有抑制作用,与低浓度组比,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。前列腺基质细胞中的TGF-β1mRNA表达随着前癃通胶囊(药液)浓度的增高呈现下降趋势。TGF-β1mRNA在高浓度组的表达最低,空白组的表达最高。高、中、低浓度组分别与空白组比较差异有统计学意义(P<0.01);高、中浓度组与低浓度组比较TGF-β1mRNA的表达明显减弱,差异有统计学意义(P<0.01)。结论前癃通胶囊对前列腺基质细胞的增殖有较强的抑制作用,能降低TGF-β1mR-NA在基质细胞中的表达。     

肠功能恢复汤透明质酸纳对腹腔粘连大鼠IL-1β，TGF-β1的影响

目的：观察肠功能恢复汤、透明质酸钠及两药合用预防大鼠腹膜粘连的效果及对粘连组织IL-1β,TGF—β1的影响．方法：选用SD大鼠85只,随机分为5组：空白对照组（n=5）、模型对照组（n=20）、透明质酸钠组（n=20）、肠功能恢复汤组（n=20）、透明质酸钠与肠功能恢复汤合用组（n=20）．除空白对照组外,其余组大鼠均按Ellis法制备成腹膜粘连模型,术后第1,3,5日取粘连或损伤处组织;于术后第7日取所有组的粘连或损伤处组织,免疫组化法测定IL-1β及TGF-β1表达水平,进行粘连程度肉眼分级并做病理检查．结果：模型对照组粘连分级明显高于其余各组（P〈0．05）．模型对照组的IL-1β,TGF-β1水平明显高于空白对照组（P均〈0．001）;与模型对照组相比,透明质酸钠组、肠功能恢复汤组及透明质酸钠与肠功能恢复汤合用组的IL-1β,TGF—β1含量均显著降低（P均〈0．05）．结论：透明质酸钠、肠功能恢复汤及透明质酸钠与肠功能恢复汤合用能降低腹膜粘连大鼠粘连组织中IL-1β,TGF—β1的含量,尤以两药合用效果最佳．细胞因子IL-1β,TGF—β1在腹膜粘连中成中发挥重要作用．     

急性冠状动脉综合征患者外周血Th3细胞的水平及意义

目的：研究急性冠状动脉综合征（ACS）患者Th3细胞与斑块不稳定和急性冠脉动脉综合征的关系.方法：将91例患者分为4组：急性心肌梗死（AMI）组26例,不稳定型心绞痛（UA）组25例,稳定型心绞痛SA组22例和胸部疼痛综合征（CPS）组18例.采用流式细胞仪分析Th3细胞占CD4＋T细胞的比例.应用酶联免疫吸附方法（ELISA）检测患者外周血血浆Th3相关细胞因子的表达.结果：与SA组和CPS组患者相比,ACS患者外周血Th3数量和TGF-1β1水平显著降低（P〈0.01）.AMI组患者（2.7±1.1）%及UA（2.5±0.9）%Th3细胞（CD4＋TGF-1β1＋/CD4＋T细胞）比例明显低于SA组（4.94±1.7）%和CPS组（4.5±1.8）%,（P〈0.01）,而SA组和CPS组无明显差异（P〉0.05）.AMI组（4.84±2.64μg/L）及UA组（4.39±2.38μg/L）的TGF-1β1的浓度均显著低于SA组（7.40±4.22μg/L）和CPS组（6.57±3.76μg/L）.结论：Th3细胞下调可能参与动脉粥样斑块不稳定和急性冠状动脉综合征的发病.     

肾康保护腹膜透析患者残余肾功能的临床研究

目的探讨肾康注射液对尿毒症腹膜透析患者残余肾功能的保护作用。方法选择尿毒症腹膜透析患者40例,随机分为对照组20例和治疗组20例,2组均进行持续不卧床腹膜透析（CAPD）。治疗组分别于第1、4月开始予肾康注射液60ml,静脉滴注1次／d,连续14d,分别于治疗前后测定患者的肌酐清除率（GFR）作为残余肾功能（RRF）评价疗效。结果治疗组治疗前后肌酐清除率无明显下降（P〉0．05）,而对照组治疗前后肌酐清除率下降明显（P〈0．05）,对照组与治疗组治疗后相比肾脏肌酐清除率明显下降（P〈0．05）。结论。肾康注射液对尿毒症腹膜透析患者的残余肾功能有保护作用。     

TGF-β1对人粘连成纤维细胞增殖与COL-Ⅰ合成的影响

目的考察TGF-β1对人粘连成纤维细胞（ATF）增殖与COL-Ⅰ合成的影响。方法通过人体腹膜粘连组织原代培养获取ATF,将不同剂量的TGF-β1与ATF共培养48h,MTT法测定细胞增殖活性,ELISA法测定培养基中COL-Ⅰ的含量。结果TGF-β1 0．5～40ng／mL剂量组的ATF增殖活性均高于0ng／mL剂量组,差异有统计学意义（P〈0．01）。TGF-β1 10、20ng／mL剂量组的COL-Ⅰ含量与0ng／mL剂量组差异有统计学意义（P〈0．01）。结论TGF-β1可明显提高人ATF的增殖活性与COL-Ⅰ合成水平。     

生长因子与腹膜纤维化

腹膜透析是治疗终末期肾脏病的有效措施之一。传统非生理性透析液常损伤腹膜的结构和功能,导致腹膜纤维化。多种生长因子相互作用,参与了腹膜纤维化发生、发展和维持,而转化生长因子β1是腹膜纤维化的中心介质,在其下游介质结缔组织生长因子的协同下,通过诱导上皮细胞向间充质细胞转化,促进细胞外基质生成及抑制细胞外基质的降解而导致腹膜纤维化。     

转化生长因子-β1诱导小鼠足细胞凋亡实验研究

目的探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）是否能诱导小鼠足细胞株凋亡以及诱导凋亡的途径。方法（1）体外培养小鼠足细胞株;（2）应用不同浓度（10^-1～104ng／L）TGF-β1诱导小鼠足细胞凋亡;（3）10^3ng／LTGF-β1诱导不同时间（12、24、48h）后观察足细胞凋亡情况;（4）采用流式细胞仪检测AnnexinV、Caspase3;（5）实时定量PCR及Western印迹法检测p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、Smad2、Smad3、Smad7mRNA及蛋白质的表达情况。结果（1）小鼠足细胞在不同浓度（10^-1～10^4ng／L）TGF-β1刺激下,细胞凋亡率明显高于正常对照组（均P〈0.05）;（2）随着TGF-β1浓度增加、凋亡时间增加,足细胞凋亡率增高（P〈0．05）;p38MAPK、Smad2、Smad3、Smad7mRNA表达增加;TGF-β1 103ng／L为最佳诱导小鼠足细胞凋亡浓度,24h为最佳诱导凋亡时间;（3）与正常对照组比较,10^3ng／LTGF-β1诱导后Caspase3阳性细胞比率显著增加（P〈001）．p38MAPK、Smad2、Smad3、Smad7蛋白质表达亦显著增加（P〈0．01）。结论TGF-β1能诱导小鼠足细胞凋亡,呈浓度及时间依赖性。TGF-β1通过Smad通路、p38MAPK通路以及线粒体通路诱导小鼠足细胞凋亡。