日本血吸虫再感染相关蛋白基因的克隆和原核表达

目的 从日本血吸虫(S．japonicum)尾蚴文库扩增S．japonicum再感染相关蛋白(RIRP)基因．进行克隆并原核表达出RIRP，为进一步的功能研究奠定基础。方法 根据已登陆的S．japonicum成虫期RIRP基因的序列设计两条特异引物，以S．japonicum尾蚴cDNA文库为模板扩增RIRP基因cDNA，将该基因的cDNA克隆入原核表达载体pGEX-4T-1和真核载体pcDNA3．1。转化的克隆通过氨苄青霉素的筛选、PCR扩增、双酶切和最后的测序鉴定。重组的pGEX-4T-1／RIRP在大肠埃希菌BL21(DE3)中进行表达。SDS-PAGE鉴定其在大肠埃希菌中的表达情况和分子质量。用抗-26 ku GST单抗作western杂交进一步鉴定融合蛋白的表达。结果 从S．japonicum尾蚴文库中扩增出一条长为462 bp的cDNA片段，经测序证实其为RIRP基因的全长cDNA。它编码含153个氨基酸的蛋白质-RIRP，预测其分子质量单位为17．545ku。RIRP cDNA已被成功克隆人pGEX-4T-1和pcDNA3．1载体，大肠埃希菌BL21(DE3)编码一个约17ku的蛋白质。结论 RIRP基因首次从S．japonicum尾蚴文库中扩增出来，并成功构建了原核和真核表达载体，而且，它首次由大肠埃希菌表达，表达蛋白的分子质量单位约17ku。     

我国居民中医药科普知识认知情况调查研究?

目的：了解我国居民对中医药科普知识的认知情况,为中医药科普工作提供合理化建议。方法在参考政府指南和有关研究的基础上,自行设计调查问卷并在全国随机发放1800份,回收1486份,共得有效问卷1050份。调查内容涉及性别、年龄等7项基本信息和中医学科属性、中医学科优势、人体生命规律等17项中医药科普知识。建立数据库,采用SPSS 20.0统计软件进行数据分析,分别统计各项中医药科普知识认知情况的均值和标准差值,进行正态分布和方差齐性检验,采用单因素方差分析(One-way ANOVA),组间两两比较,若方差齐者使用LSD检验,方差不齐则使用Tamhane’ T2法。结果我国居民对中医药科普知识总体认知水平比较有限,17项中医药科普知识的总认知程度均值为2.07,标准差值为0.53;认知程度均值最高的是服药注意事项2.47;认知程度均值最低的是五行学说为1.78。年龄组间分析显示,40~49岁组人群最低(33.04);教育程度对我国居民的中医药科普知识认知程度有显著影响,“未上过学”和“高中学历”2组,分别与相邻组间的认知水平差异最为显著;职业组间分析显示,学生组认知程度最高,与农民组的差异最为显著( P<0.001,均值差=6.125);家庭月均收入组间分析显示,5000~9999元/月组与1000~4999元/月组间差异最为显著( P<0.001,均值差=2.870);健康状况变化程度(1年内)组间分析显示,自述“好一些”组与“差多了”组间差异最为显著( P<0.001,均值差=7．058)。结论我国居民中医药科普知识认知水平较低,亟需改善中医药科普认知现状。中医药科普内容应当系统化,加强中医思想和基本理论的普及是重点。中医药科普工作需更加深入基层,充分发挥其改善公众健康总体水平的社会公益作用。中医药科普知识认知水平量化评价方法有待完善。     

抗甲状腺药物诱导的狼疮样综合征循证诊断与治疗的个案分析

狼疮样综合征和抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)阳性的血管炎合并甲亢在临床中十分罕见.为了找出这三种疾病之间的关系,作者借助循证医学的方法,根据患者病情,提出临床问题,从PubMed(1966～2003年)、中国生物医学文献数据库(CBM)(1978～2003年)、荷兰医学文摘数据库(EMBase)(1974～2003年)查找相关信息.结果发现抗甲状腺药物的副反应是对该病例的最好解释,并据此采取了相应治疗措施,使患者病情获得明显好转.     

介入栓塞治疗肾活检术后假性动脉瘤严重出血1例

出血是肾活检术后常见并发症之一,特别严重的出血甚至需要外科手术来解决。运用血管造影明确出血部位及进一步使用超选择性介入栓塞治疗在国内鲜有报道。这类报道多是由肾穿术后肾动静脉瘘所引起,而本文报告我院肾穿术后第三天出现的由于假性动脉瘤致严重出血及使用介入方法成功救治患者一例。1临床资料患者女,34岁。因反复血尿1个月,于2005-04-04入院。1个月前血尿最初为终末期肉眼血尿,鲜红色不伴血凝块,伴尿频、尿急、尿痛,无牵涉痛,当地诊为“尿路感染”,予左氧氟沙星治疗,尿路刺激症状缓解,但血尿呈全程无痛性洗肉水样,伴双侧腰部胀痛,…     

日本血吸虫再感染相关蛋白基因的克隆和原核表达

目的　从日本血吸虫 (S .japonicum )尾蚴文库扩增S .japonicum再感染相关蛋白 (RIRP)基因 ,进行克隆并原核表达出RIRP ,为进一步的功能研究奠定基础。　方法　根据已登陆的S .japonicum成虫期RIRP基因的序列设计两条特异引物 ,以S .japonicum尾蚴cDNA文库为模板扩增RIRP基因cDNA ,将该基因的cDNA克隆入原核表达载体 pGEX 4T 1和真核载体 pcD NA3 .1。转化的克隆通过氨苄青霉素的筛选、PCR扩增、双酶切和最后的测序鉴定。重组的 pGEX 4T 1/RIRP在大肠埃希菌BL2 1(DE3 )中进行表达。SDS PAGE鉴定其在大肠埃希菌中的表达情况和分子质量。用抗 2 6kuGST单抗作western杂交进一步鉴定融合蛋白的表达。　结果　从S .japonicum尾蚴文库中扩增出一条长为 462bp的cDNA片段 ,经测序证实其为RIRP基因的全长cDNA。它编码含 15 3个氨基酸的蛋白质—RIRP ,预测其分子质量单位为 17.5 45ku。RIRPcDNA已被成功克隆入 pGEX 4T 1和pcDNA3 .1载体 ,大肠埃希菌BL2 1(DE3 )编码一个约 17ku的蛋白质。　结论　RIRP基因首次从S .japonicum尾蚴文库中扩增出来 ,并成功构建了原核和真核表达载体 ,而且 ,它首次由大肠埃希菌表达 ,表达蛋白的分子质量单位约 17ku。     

我国城市贫困人口医疗救助现状及政策建议

医疗救助作为医疗保障体系的最后一道防线,对保障贫困线上人口的基本就医权利起到了不容忽视的作用。然而我国的医疗救助制度起步较晚,正在实行医疗救助的城市,其政策均各成体系,目前尚缺乏统一的、制度化的医疗救助体系。通过对我国6个城市(北京、上海、广州、青岛、西安、武汉)现行的医疗救助制度进行分析,为建立符合我国国情的医疗救助模式提供参考。     

自身免疫性溶血性贫血研究进展

自身免疫性溶血性贫血是由于各种原因是导致抗自身红细胞抗体的产生，红细胞破坏加速，寿命缩短而导致的一种贫血，为一类临床常见用极难根治的血液病。探究其病因，病机机制，自身抗体的型别，ＩｇＧ亚型及其临床意义及有效治疗方法，具有重大的临床价值。现就诸方面进展综述如下。     

凝固酶阴性葡萄球菌感染的腹膜透析相关性腹膜炎

<正>凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase-negative staphylococci, CoNs)是很多腹透中心引起腹膜透析相关性腹膜炎(peritoneal dialysis-associated peritonitis, PDAP)最常见的病原菌。英国及澳大利亚CoNs感染发生率占总体PDAP的16.85%和26.67%^[1,2],国内一项多中心研究报道其发生率占所有葡萄球菌相关腹膜炎的84%^[3]。     

日本血吸虫精氨酸酶新基因的鉴定及作为疫苗的保护性研究

目的 识别和鉴定日本血吸虫（Sj）精氨酸酶（ARG）新基因，并研究纯化的重组SjARG对Sj感染小鼠的保护性。　方法 通过巢式PCR，从日本血吸虫尾蚴cDNA文库特异扩增ARG基因cDNA序列的5′端，并用生物信息学进行鉴定；将ARG的完整编码序列（CDS）克隆到pET30a（+）载体，表达并纯化表达产物后，以鸟氨酸-茚三酮法鉴定酶活性；用蛋白质印迹法（Western blotting）比较重组ARG蛋白与Sj天然ARG蛋白的免疫学特性，间接免疫荧光法对ARG在Sj成虫中的分布进行组织定位；用纯化重组ARG蛋白免疫小鼠（PBS和SjGST作对照），Sj尾蚴攻击感染后，检测SjARG作为疫苗的免疫保护力。 结果 　扩增并鉴定SjARG基因的完整CDS长为1 095 bp；重组SjARG具有酶活性，并具有与Sj天然ARG蛋白相同的免疫学特性；ARG定位于Sj成虫的肠壁和生殖器官。重组SjARG蛋白免疫后的减虫率和减卵率分别为55.8%和48.8%。SjGST蛋白免疫后的减虫率和减卵率分别为28.6%和6.89%。 结论 获取并鉴定了SjARG新基因；SjARG比SjGST具有更高的疫苗保护性。