血红素氧合酶-1与心血管疾病研究

血红素氧合酶-1(HO-1)是血红素氧合酶的诱导型,能催化血红素分解生成CO、胆红素和铁.这三种代谢产物通过多种机制对心血管系统产生保护作用,包括抗氧化应激、抗炎症损伤、抗细胞增殖、抗凋亡、抑制血小板聚集、调节血管张力及参与细胞内信号传递等.HO-1在多种心血管疾病中均有适应性表达,并在防治这些心血管疾病方面发挥重要作用.     

姜黄素诱导血红素氧合酶-1表达抗大鼠主动脉平滑肌细胞增殖作用的研究

目的:探讨姜黄素诱导大鼠主动脉平滑肌细胞(RASMC)血红素氧合酶-1(HO-1)表达效果及其抗细胞增殖的作用.方法:RASMC株经复苏、传代培养后分组实验,分别加用不同浓度的姜黄素或姜黄素 ZnPPⅨ孵育,用Western blot法检测HO-1表达效果;用四唑氮法及3H-Td掺入法检测RASMC增殖情况;同时还观察了姜黄素的细胞毒性作用.结果:姜黄素能呈剂量依赖性诱导RASMC高表达HO-1蛋白并显著抑制血清刺激的RASMC增殖(P＜0.05或P＜0.01),加入ZnPPⅨ共同孵育能使姜黄素诱导HO-1表达明显降低并消除其对RASMC增殖的抑制作用(均P＜0.01),实验浓度的姜黄素无明显细胞毒性作用(P＞0.05).结论:姜黄素能显著诱导RASMC表达HO-1蛋白并以此有效抑制RASMC增殖.     

非洛地平对原发性高血压患者血浆一氧化氮和内皮素含量的影响

目的探讨原发性高血压(EH)患者血浆一氧化氮(NO)和内皮素(ET)含量的变化及非洛地平对其的影响。方法观察72例EH患者(EH组)非洛地平治疗前后血浆NO和ET水平的变化,并与30例正常人(对照组)进行对比分析。结果非洛地平治疗前EH组血浆NO明显低于对照组(P<0.01),血浆ET明显高于对照组(P<0.01)。非洛地平治疗6周后,EH组血压和血浆ET水平明显降低,NO水平明显增高(P<0.01)。结论非洛地平在有效降血压的同时,能使EH患者血浆NO水平升高,ET水平降低,因此对血管内皮功能具有保护作用。     

HO-1基因启动子（GT）n多态性对伴危险因素的冠心病的影响

目的探讨血红素氧合酶-1（HO-1）基因启动子（GT）。多态性对伴危险因素的冠心病发病的影响及其可能的机制。方法通过冠脉造影选择具有致冠心病危险因素的冠心病患者84例和冠脉正常者66例，取外周静脉血提取DNA，PCR法扩增含HO-1基因启动子（GT）。的片段，采用DNA测序加聚丙烯酰胺凝胶电泳法确定（GT）。的基因型，同时检测血浆胆红素及氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL）、丙二醛（MDA）、白介素6（IL-6）、高敏C反应蛋白（hsCRP）的水平。结果冠心病组短（GT）。基因型所占比例显著高于对照组，短（GT）。携带者较非短（GT）。携带者OX—LDL、MDA、IL-6、hsCRP水平均明显降低。结论HO-1基因启动子（GT）。多态性与伴危险因素的冠心病发病有关，短（GT）。基因型可能通过增强机体抗炎及抗氧化能力减少危险因素所致冠心病的发生。     

血红素氧合酶-1对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白表达对大鼠主动脉平滑肌细胞(RASMC)增殖的影响。方法大鼠主动脉平滑肌细胞株经复苏、传代培养后用于实验,设置空白对照组、HO-1诱导组、HO-1抑制组,后两组分别加用血晶素、锌原卟啉Ⅸ与细胞共同孵育,用Western blot法检测HO-1表达量,并检测HO-1活力;用MTT法检测RASMC增殖能力。同时,还观察了血晶素、锌原卟啉Ⅸ的细胞毒性作用。结果上调HO-1蛋白表达及升高HO-1活力能显著抑制血清刺激的RASMC增殖,反之,抑制HO-1蛋白表达及其活力则增强血清刺激的RASMC增殖。实验浓度的血晶素、锌原卟啉Ⅸ无明显细胞毒性作用。结论 HO-1蛋白高表达能有效抑制RASMC增殖。     

横川后殖吸虫与扇棘单睾吸虫双重PCR鉴别方法的建立

目的建立一种能快速鉴定横川后殖吸虫(Metagonimus yokogawai)和扇棘单睾吸虫(Haplorchis taichui)的双重PCR方法。方法从Gen Bank中获取横川后殖吸虫和扇棘单睾吸虫以及与其同源性较高的虫种的核糖体DNA第一内转录间隔区(ITS1)序列,应用Primer premier 5.0软件设计2对特异性引物,并优化PCR反应体系和反应条件,建立双重PCR法。将横川后殖吸虫和扇棘单睾吸虫与17个相关虫种一起进行PCR扩增,检测方法的特异性。横川后殖吸虫和扇棘单睾吸虫的ITS1扩增产物经p MD19-T载体进行TA克隆获得质粒,并将质粒进行梯度稀释,检测其敏感性。应用新建的双重PCR法鉴定从47副猫内脏和40副犬内脏中收集的吸虫,检测该方法的准确性和实用性。结果新建的双重PCR法能扩增出横川后殖吸虫和扇棘单睾吸虫的目的片段,大小分别为648 bp和279 bp,不与钩棘单睾吸虫、华支睾吸虫、心形咽口吸虫、次睾属吸虫囊蚴、外睾属吸虫囊蚴、藐小棘隙吸虫、抱茎棘隙吸虫、弗氏棘口吸虫、似锥低颈吸虫、全冠属吸虫、重盘属吸虫、异尖属线虫、东方次睾吸虫、卫氏并殖吸虫、瓦氏瓦生吸虫、背孔属吸虫和宫脂属线虫的DNA发生交叉扩增,具有较好的特异性。敏感性试验表明,应用该双重PCR法,2类吸虫DNA的最低检测值分别为1.49×10-1pg和1.14×10-1pg。对来自猫内脏和犬内脏的吸虫检测表明,该方法能够区分横川后殖吸虫和扇棘单睾吸虫,并且不与猫、狗中其他的吸虫DNA发生交叉扩增。结论本研究所建立的双重PCR法可用于快速鉴定横川后殖吸虫和扇棘单睾吸虫。     

广西褐家鼠感染路氏锥虫分子生物学鉴定及系统发育分析

目的对广西部分地区褐家鼠感染的路氏锥虫进行分子生物学鉴定,分析不同地理种群间的遗传分化。方法从广西靖西、百色、南宁、天峨4地感染路氏锥虫的褐家鼠脾脏或血凝块中提取DNA,设计ITS1保守引物进行PCR扩增,将PCR产物直接或克隆测序。用DNAstar7.1进行同源性比对,用Mega4.0进行差异分析与聚类、构建系统进化树。结果广西各地血涂片阳性鼠标本均扩增出特异性DNA条带,4地样品测序结果与GenBank上登录的路氏锥虫（T.lewisi）序列的同源性均高达96%以上。区内各地理种群之间遗传距离均在0.021以下,与其他3个近缘种T.otospermophili、T.grosi、T.kuseli间遗传距离为0.15～0.206。结论广西4地鼠感染的锥虫为路氏锥虫。ITS1可以作为路氏锥虫的种属分类和分子诊断的标记。     

姜黄素诱导HO-1表达对大鼠动脉粥样硬化的影响

目的探讨姜黄素能否诱导大鼠主动脉血红蛋白氧合酶-1(HO-1)高表达,以及诱导HO-1高表达能否有效发挥内源性抗动脉粥样硬化(AS)作用。方法以健康雄性Wistar大鼠38只,随机分为正常对照组(n=8只)、模型组(n=14只)、姜黄素组(n=8只)及抑制组(n=8只),模型组、姜黄素组、抑制组同法复制AS模型,姜黄素组加用姜黄素,抑制组加用姜黄素及锌原卟啉Ⅸ。于6、10及14周末分别随机处死模型组大鼠2只以了解AS形成程度。第14周末处死所有大鼠取降主动脉观察病理学变化,同时行主动脉内HO-1表达、分布情况及活力测定。结果 (1)姜黄素组HO-1表达及活力均显著高于模型组(P<0.05),AS程度明显轻于模型组。(2)抑制组HO-1表达及活力均明显低于姜黄素组(P<0.05),AS程度较姜黄素组加重。结论姜黄素可显著诱导HO-1表达并增加其活力进而发挥抗AS作用。     

冠心病患者胆红素浓度变化及其对低密度脂蛋白氧化修饰水平的影响

目的 探讨冠心病患者血清总胆红素浓度变化及其对血浆低密度脂蛋白(LDL)氧化修饰水平的影响。方法 选取65例冠心病患者及50例正常人,采清晨空腹静脉血测定血清总胆红素及血浆氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)、丙二醛(MDA)浓度。结果 与正常人相比,冠心病患者血清总胆红素明显降低(P<0.01),血浆OX-LDL、MDA则明显升高(均为P<0.001)。胆红素与OX-LDL及MDA间呈显著负相关,r分别等于-0.321(P<0.05)及-0.394(P<0.01)。结论 胆红素浓度降低致LDL氧化修饰水平显著升高,可能是冠心病发生的原因之一。     

氧化应激致动脉粥样硬化作用的研究进展

动脉粥样硬化至目前为止仍然与多种因素有关 ,发病机制尚不完全清楚 ,笔者就氧化应激在本病发病中的作用进行综述———血管壁中ROS种类及来源 ,ROS检测及氧化应激致动脉粥样硬化的动物实验及在人体的研究