应用激光扫描细胞仪分析GRP78在食管癌各级病变中的表达情况

目的 探索应用激光扫描细胞仪分析免疫组化结果的可行性、客观性及准确性,了解葡萄糖调节蛋白78(GRP78)蛋白在食管癌各级病变中的表达情况.方法 应用激光扫描细胞仪对食管癌组织芯片中GRP78免疫组化结果进行分析,对激光扫描细胞仪分析结果和传统光镜下评分结果的相关性进行分析.结果 激光扫描细胞仪扫描整张组织芯片后获得选定组织区域的虚拟图及阳性像素点百分比;正常食管组织、中一重度异型增生、原位癌、食管鳞癌的GRP78阳性率分别为0%(0/8),90.4%(19/21)、83.3%(5/6)和47.4%(18/38).GRP78在正常食管、中-重度异型增生加原位癌、食管鳞癌3组中表达的差异有显著性意义(P<0.01).激光扫描细胞仪分析结果与传统光镜下评分结果具有高度相关性(P<0.01)).结论 激光扫描细胞仪用于免疫组化结果的分析具有高通量、高度客观、准确的优点.GRP78在食管正常细胞向恶性细胞转化的过程中可能扮演了重要角色.     

食管癌和癌前病变组织中分化抑制因子-1蛋白的表达

目的:探讨食管癌和癌前病变组织中分化抑制因子(Id)-1蛋白的表达特征及其生物学意义.方法:65例食管癌及相应的癌旁组织均来自河南林州市及其周围地区食管癌患者手术切除标本,癌旁组织中34例为基底细胞增生(BCH),28例为不典型增生(DYS),13例为正常上皮组织,15例为原位癌(CIS).65例癌组织全部为鳞状细胞癌(SCC).采用免疫组织化学ABC法检测各标本Id-1蛋白的表达情况.结果:正常食管上皮组织中Id-1蛋白无表达,在BCH、DYS、CIS及SCC组织中的阳性表达率分别为29%、46%、60%和63%,依次升高(P＜0.05).Id-1蛋白的表达与SCC组织的分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关(P均＜0.05).结论:Id-1蛋白表达变化是食管癌和癌前病变组织中常见的分子事件,可能在食管鳞癌癌变过程中起一定作用.     

Survivin在不同分化状态的食管鳞癌组织及体外食管鳞癌细胞中的表达

目的:探讨survivin蛋白在不同分化状态下的食管鳞癌组织及体外细胞中的表达,同时观察其一致性。方法:应用免疫组化方法(SP法)检测了40例食管鳞癌组织、20例癌旁正常组织中survivin蛋白的表达情况;应用细胞的免疫化学方法分别检测食管正常上皮细胞,高分化食管鳞状上皮细胞(KYSE-70),低分化鳞状细胞上皮细胞(KYSE-450)中survivin的表达情况。结果:食管癌患者survivin蛋白的阳性表达水平分别为72.5%(29/40),明显区别于对照组(食管癌旁组织和正常组织)5.0%(P<0.01)。3系细胞中sur-vivin蛋白的阳性表达率分别为86%,69%和1%。结论:survivin蛋白的表达与食管鳞癌组织的分化程度有关,其在食管鳞癌组织与体外食管鳞癌细胞中的表达一致。     

食管癌发生发展过程中P33/ING1、Survivin蛋白的表达

目的探讨食管癌发生发展过程中P33/ING1、Survivin蛋白的表达及其与食管癌病理特征的关系.方法采用免疫组化SP法检测P33/ING1、Survivin蛋白在60例食管癌手术后大体标本中食管正常黏膜、单纯增生、不典型增生、原位癌及浸润癌组织的表达.结果P33/ING1蛋白从正常黏膜→单纯增生→不典型增生→原位癌→浸润癌呈渐进性低表达,而Survivin蛋白则呈渐进性高表达.正常黏膜与不典型增生、原位癌及浸润癌中P33/ING1、Survivin蛋白的表达差异有统计学意义(P＜0.05);P33/ING1蛋白表达情况与食管癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关(P＜0.05).食管浸润癌组织中P33/ING1蛋白的低表达与Survivin蛋白的高表达呈负相关(r=-0.480,P＜0.01).结论P33/ING1、Survivin 2种蛋白与食管癌的发生发展密切相关,可作为肿瘤诊断的标志物.     

食管黏膜上皮癌变过程中与细胞骨架蛋白tensin同源的磷酸酯酶基因的表达及意义

目的探讨与细胞骨架蛋白tensin同源的磷酸酯酶基因(PTEN)在食管黏膜上皮癌变过程中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法检测20例正常食管黏膜、20例食管上皮非典型增生、24例原位癌、44例食管鳞癌组织中PTEN表达情况,并探讨PTEN与食管鳞癌病理分级的关系。结果正常食管黏膜、非典型增生、原位癌及食管鳞癌组织中PTEN蛋白阳性表达率分别为100%、85.00%、70.83%和45.45%,原位癌、食管鳞癌组织中PTEN蛋白阳性率低于正常食管黏膜(P<0.05),食管鳞癌组织中PTEN蛋白阳性率低于原位癌和食管上皮非典型增生组织(P<0.05)。高分化、中分化及低分化食管鳞癌组织中在患者中PTEN蛋白阳性表达率分别为75.00%(15/20)、21.43%(3/14)、20.00%(2/10),高分化食管鳞癌组织中PTEN蛋白阳性表达率显著高于中分化和低分化食管鳞癌组织中(P<0.05),中分化和低分化食管鳞癌组织中PTEN蛋白阳性表达率无明显差异(P>0.05)。结论PTEN表达降低可能与食管鳞状上皮癌变有关,并可能在食管癌早期形成与发展中起有重要的作用。     

PI3K和Akt蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的 检测PI3K和Akt蛋白在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达,观察两者的相关性并探讨其在食管癌发生发展中的作用.方法 应用免疫组化法检测40例食管鳞癌组织、20 例癌旁组织中PI3K(SP法)和Akt(PV法)的表达情况,并分析蛋白表达与性别、年龄、分化、转移的关系和两蛋白表达的相关性.结果 ESCC中PI3K和Akt蛋白的阳性表达水平分别为77.5%(31/40)和65.0%(26/40),与对照组(食管癌旁组织和正常组织)比较差异有统计学意义(P<0.01).两者间表达呈正相关(r=0.358,P<0.05). 结论 PI3K和Akt蛋白在食管鳞癌组织中高表达,且与分化程度、转移情况相关,提示PI3K和Akt基因在食管癌发生发展过程中可能起一定的作用.     

DDR1蛋白在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨食管鳞癌组织中DDR1蛋白的表达及其与食管癌临床病理特征的关系.方法 应用免疫组化技术研究DDR1在40例食管鳞癌组织、40例癌旁不典型增生组织和40例的正常粘膜组织的表达.结果 食管癌组织、癌旁组织及正常粘膜组织的DDR1的表达率依次降低,分别为62.5%、35.0%、25.0%,DDR1的阳性表达与食管鳞癌的分化程度、浸润深度及是否发生淋巴结转移相关(P＜0.05),而与食管鳞癌肿瘤的长度、位置无关(P＞0.05).结论 DDR1可能参与了食管鳞癌的发生、发展和转移,检测DDR1的表达可作为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一.     

盘状结构域受体1在食管鳞癌组织中的表达

目的:研究食管鳞癌组织盘状结构域受体1蛋白表达情况.方法:采用Western blotting技术检测40例食管鳞状细胞癌肿瘤组织、癌旁组织、相应正常食管组织中DDR1蛋白的表达,并探讨与食管癌临床病理特征的关系.结果:DDR1蛋白在食管鳞癌组织中的表达水平(1.201±0.348)显著高于癌旁(0.640±0.323)及正常食管组织(0.551±0.413),并且其在食管鳞癌组织中的阳性表达率及表达水平与分化程度和淋巴结转移、侵润深度密切相关(P＜0.01).结论:DDR1和食管癌的发生与发展可能相关,食管癌出现转移时DDR1蛋白表达升高.     

食管鳞癌组织中核转录因子κB P50、P65蛋白的表达

目的探讨核转录因子κB(NF-κB)P50、P65蛋白表达与食管鳞癌发生发展的关系.方法用免疫组化SP法检测49例食管鳞癌及癌旁黏膜组织(32例正常食管上皮,33例单纯增生上皮,19例轻度不典型增生上皮,14例重度不典型增生上皮,12例原位癌)中NF-κB P50、P65蛋白的表达.结果P50蛋白在癌旁正常上皮、单纯增生上皮、轻度不典型增生上皮、重度不典型增生上皮、原位癌和浸润癌组织中的阳性表达率分别为0%(0/32)、36.36%(12/33)、57.89%(11/19)、64.29%(9/14)、50.00%(6/12)和71.43%,正常上皮组织与单纯增生上皮、轻度不典型增生上皮、重度不典型增生上皮、原位癌和浸润癌组织比较差异均有统计学意义(P均＜0.01).P65蛋白在癌旁正常上皮、单纯增生上皮、轻度不典型增生上皮、重度不典型增生上皮、原位癌和浸润癌组织中的阳性表达率分别为6.25%(2/32)、18.18%(6/33)、36.84%(7/19)、42.86%(6/14)、58.33%(7/12)和57.14%(28/49),正常上皮组织与轻度不典型增生上皮、重度不典型增生上皮、原位癌和浸润癌组织比较差异均有统计学意义(P均＜0.01).P50、P65蛋白表达与食管鳞癌的组织学分级、浸润深度和淋巴结转移无关(P＞0.05).食管鳞癌组织中P50、P65蛋白阳性率差异无统计学意义,也无相关关系(P＞0.05).结论NF-κB P50、P65蛋白表达与食管鳞癌的发生发展有关.     

食管鳞癌组织中葡萄糖转运蛋白1和胰岛素样生长因子-Ⅰ蛋白表达检测

目的:探讨葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)和胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)表达与食管癌发生、发展的关系.方法:应用免疫组化SP法检测60例食管鳞癌及其癌旁不典型增生组织、正常食管黏膜组织中GLUT和IGF-Ⅰ的表达.结果:上述3种组织中GLUT1的阳性表达率分别为91.67%、58.82%和20.00%,差异有统计学意义(P＜0.05).上述3种组织中IGF-Ⅰ的阳性表达率分别为75.00%、44.12%和0.00%,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:GLUT1和IGF-Ⅰ蛋白的过表达可能共同参与了食管鳞癌的发生、发展.     

Expression and clinical significance of transcription factor FoxO1 in human esophageal squamous carcinoma

目的 检测FoxO1在食管鳞状细胞癌组织中的表达水平,分析其与食管鳞状细胞癌各临床病理因素的关系.方法 应用实时荧光定量PCR SYBR Green荧光染料法,检测42例手术切除的食管鳞癌组织及配对的正常食管黏膜组织中FoxO1 mRNA的表达;免疫组化S-P法检测FoxO1蛋白的表达及组织学定位.结果 正常食管黏膜组织中FoxO1mRNA及蛋白均呈低表达,而食管鳞癌组织中FoxO1 mRNA及蛋白表达显著升高(P＜0.01).高分化食管鳞癌组织的相对表达量显著高于中低分化食管鳞癌组织(P＜0.01).食管鳞癌组织中FoxO1 mRNA及蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、TNM分期及有无淋巴结转移无明显相关性(P＞0.05).结论 FoxO1在正常食管黏膜组织和食管鳞癌组织中的表达存在明显差异,其表达水平与肿瘤分化程度密切相关.     

食管贲门双源癌组织中Rb 蛋白的表达

目的:探讨食管贲门双源癌组织中Rb蛋白表达的变化特征及其意义.方法:采用免疫组化ABC法和组织病理学方法,分析河南食管癌高发区林州市30例食管贲门双源癌患者Rb蛋白的表达状况.结果:在30例双源癌患者中,食管鳞癌和贲门腺癌组织中Rb阳性率分别为46.7%(14/30)和40%(12/30),差异无统计学意义(x2=0.272,P＞o.05).食管和贲门癌组织Rb一致阳性率为36.7%(26/30),一致阴性率为50%(15/30),食管鳞癌和贲门腺癌组织中Rb的表达相关(P＜0.05).结论:该地区食管癌和贲门癌存在较高的Rb一致性变化,提示二者可能具有相似的发病因素和分子机制.     

Galectin-3在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的 研究 Galectin-3 在食管鳞癌中的表达情况,初步探讨其与食管鳞癌临床病理特征的关系.方法 ①用 S-P免疫组化法检测 80 例食管鳞癌石蜡标本中 Galectin-3 蛋白的表达情况;②用 RT-PCR 法检测分析 Galectin-3 mRNA 在 36 例胃镜下切取的新鲜食管鳞癌组织中的表达情况.结果 ①Galectin-3 蛋白在食管癌组织、正常食管组织中的表达具有明显差异(P＜0.05);在分化程度低、浸润程度深及发生淋巴结转移的食管鳞癌组织中的表达明显高于分化程度高、浸润程度浅及未发生淋巴结转移的食管癌组织(P＜0.05).②Galectin-3 mRNA 阳性表达率在食管鳞癌组织中为 77.8%(28/36),在远癌正常组织中为 13.9%(5/36),结果具有显著性差异(P＜0.05);并且在分化程度低、浸润程度深及发生淋巴结转移的食管鳞癌组织中的表达明显高于分化程度高、浸润程度浅及未发生淋巴转移的组织,差异亦有显著性(P＜0.05).结论 Galectin-3 的差异表达,可能与食管鳞癌的发生、发展及转移有关.     

Omi/HtrA2和Caspase-9在食管癌中的表达及与凋亡的关系

目的探讨在食管鳞癌中Omi/HtrA2、Caspase-9蛋白的表达及其与癌细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化SP法对80例经病理确诊为食管鳞癌病例的正常组织、癌旁组织及癌组织进行Omi/HtrA2和Caspase-9蛋白免疫组化分析。采用TUNEL法检测细胞凋亡水平,并分析食管癌中Omi/HtrA2和Caspase-9的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系。结果 1 Omi/HtrA2、Caspase-9在食管鳞癌组织阳性表达率分别为76.25%、58.75%,在癌旁组织中的阳性表达率分别为27.50%、72.50%,在正常组织中的阳性表达率分别为22.50%、85.00%;Omi/HtrA2、Caspase-9在食管鳞癌组织中的阳性表达率与其在癌旁组织、正常组织中蛋白的阳性表达率分别进行比较,差异均有统计学意义(P0.05);癌旁组织与正常组织的Omi/HtrA2和Caspase-9蛋白阳性表达率进行比较,差异均无统计学意义(P0.05)。2 Omi/HtrA2蛋白表达阳性组癌细胞凋亡指数(18.186±1.331)‰,明显高于阴性组凋亡指数(5.108±1.783)‰(P0.01);Caspase-9蛋白表达阳性组细胞凋亡指数为(17.763±0.675)‰,明显高于阴性组细胞凋亡指数(11.619±0.712)‰(P0.05)。结论 Omi/HtrA2在食管癌中高表达,而Caspase-9在食管癌中低表达,两者在促进食管癌细胞凋亡中有相反的调节作用。     

食管鳞状细胞癌组织中EphA2和EphrinA1的表达

目的:观察食管鳞状细胞癌(食管鳞癌)组织中EphA2和EphrinA1蛋白及mRNA的表达水平,分析它们与食管癌患者预后的关系.方法:应用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测173例食管鳞癌组织和19例正常食管黏膜组织中EphA2和EphrinA1蛋白表达水平;用激光捕获显微切割(LCM)技术和RT-PCR检测食管鳞癌组织中EphA2和EphrinA1 mRNA的水平.结果:食管鳞癌组织中EphA2阳性表达率80.9%、EphrinA1阳性表达率为84.4%,均明显高于正常食管黏膜(P＜0.05);EphA2和EphrinA1蛋白表达同食管鳞癌患者的年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、组织学分级无关;EphA2蛋白的表达水平与食管鳞癌患者的性别、淋巴结转移有关(P＜0.05),EphrinA1蛋白的表达与食管鳞癌患者的临床分期有关(P＜0.05).生存分析显示:EphA2和EphrinA1蛋白的高表达与食管鳞癌患者的生存期有关.结论:EphA2和EphrinA1蛋白的高表达提示食管鳞癌患者预后不佳.     

食管癌癌细胞核CyclinD1和CyclinE表达的定量检测及分析

目的 观察CyclinD1、CyclinE在食管癌和癌周正常食管组织的表达,从量化角度阐明其在食管癌组织中表达的病理学意义.方法 常规石蜡包埋、HE切片确诊,用免疫组化MaxVision法检测CyclinD1,CyclinE在食管癌和癌周正常食管组织的表达,Image-pro plus图像分析软件对其表达强度进行定量分析,并用表达的阳性单位(positive unit,PU)反映其表达强度.结果 CyclinD1、CyclinE蛋白在食管癌和正常食管组织中的表达主要定位在细胞核;CyclinD1、CyclinE蛋白在食管鳞状细胞癌和腺鳞癌癌细胞棱中表达的PU值高于正常食管组织(P<0.001);CyclinD1、CyclinE蛋白表达的PU值与食管鳞状细胞癌分化程度有关(P<0.001);随着食管鳞状细胞癌分化程度的降低,CyclinD1蛋白表达量逐级增高;CyclinE蛋白在低分化鳞状细胞癌表达的PU值高于高分化及中分化鳞状细胞癌.CyclinD1与CyclinE在食管癌中表达具有相关性(r=0.652,P<0.01).结论 CyclinD1、CyclinE蛋白的表达与食管癌的发生、发展及食管鳞状细胞癌恶性程度有关,可能成为判断其指标之一.食管癌CyclinD1的表达与CyclinE的表达密切相关,CyclinD1和CyclinE可能在食管癌癌变过程中起协同作用.     

HPA蛋白的表达与食管鳞癌血管生成、浸润、转移的关系

目的 探讨HPA蛋白在食管鳞癌中的表达及其与食管鳞癌血管生成、浸润、转移的关系.方法 应用免疫组化法(Immunohistochmeistry,IHC)检测70例食管鳞癌组织和23例切缘正常组织中HPA、CD34蛋白的表达.结果 癌组织中HPA蛋白的表达(65.7%)显著高于切缘正常组织(0.0%)(P＜0.05).有淋巴结转移的食管鳞癌组织中HPA蛋白的阳性表达率90.9%(30/33)高于无淋巴结转移组43.2%(16/37)(P＜0.05);有纤维膜浸润的食管鳞癌组织中HPA蛋白的阳性表达率92.9%(39/42)高于无纤维膜浸润组25.0%(7/28)(P＜0.05).HPA蛋白阳性表达的食管鳞癌组织中的微血管密度(Mean Miciovessel Density,MVD)值(44.85±12.74)显著高于HPA蛋白阴性者的MVD值(33.05±7.32)(P＜0.05).结论 HPA蛋白阳性表达与食管鳞癌的发生、血管生成、浸润深度、淋巴结转移有关.     

人食管鳞癌组织中促血管生成素-2的表达

目的:探讨食管鳞癌及癌旁组织中促血管生成素-2(Ang-2)的表达.方法:采用免疫组织化学SP法检测56例食管鳞癌、13例原位癌、11例重度不典型增生和47例食管断端正常鳞状上皮组织中Ang-2的表达.结果:Ang-2的表达主要定位于肿瘤细胞的胞浆和胞膜.食管鳞癌、原位癌组织中Ang-2的表达高于食管正常鳞状上皮组织(P＜0.01)和癌旁重度不典型增生上皮组织(P＜0.05);重度不典型增生上皮组织中Ang-2的表达也高于食管正常鳞状上皮(P＜0.01),但食管鳞癌组织和原位癌组织中Ang-2的表达差异无统计学意义(P＞0.05).Ang-2的表达与食管鳞癌的分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移无关(P均＞0.05).结论:Ang-2的阳性表达是食管癌鳞癌发生的早期事件.     

食管鳞状细胞癌组织中肌动蛋白交联蛋白的表达和临床意义

摘要：目的探讨食管鳞状细胞癌组织及正常食管粘膜组织中肌动蛋白交联蛋白（FASCIN）的蛋白表达情况,并分析其与
食管鳞状细胞癌临床病理及患者5年生存率的关系。方法241例食管癌患者均来自河南林州市。利用组织微阵列技术,
采用免疫组化ABC法,分析241例食管鳞癌组织（观察组）和相应正常食管粘膜组织（对照组）中FASCIN蛋白的表达情
况。结果食管鳞癌组织中FASCIN蛋白表达阳性率明显高于正常食管粘膜组织中的表达阳性率（68.9% vs 15.5%,P<
0.05）;FASCIN蛋白高表达与淋巴结转移、TMN分期有关,而与年龄、性别、肿瘤细胞分化程度、和大体分型无关;FASCIN
蛋白高表达的食管鳞癌患者的5年生存率明显低于FASCIN蛋白未高表达的食管鳞癌患者。结论FASCIN蛋白的异常
表达可能与食管鳞状细胞癌的发生、发展相关,检测FASCIN可能为食管癌预后判断提供依据。     

p16及CyclinD1在食管癌前病变中的表达及其意义

目的 为探讨食管癌前病变组织中p16蛋白和细胞周期素蛋白D1(CyclinD1)表达的意义.方法 应用 S-P免疫组织化学的方法检测20例正常上皮、20例单纯增生、42例异型增生、12例鳞癌组织中p16蛋白和 CyclinD1的表达.结果 p16蛋白和CrclinD1在正常上皮、单纯增生、异型增生、鳞癌中阳性表达率依次为 95.00%、90.00%、64.28%、33.33%和0、10.00%、45.23%、91.67%.正常上皮(单纯增生)、异型增生与鳞癌之间差异有统计学意义(P<0.05).结论 p16蛋白与CyclinD1可作为判断食管异型增生上皮生物学行为有价值的指标.